基因工程和細(xì)胞工程測(cè)試題可打印有答案【實(shí)用文檔】doc文檔可直接使用可編輯，歡迎下載

基因工程和細(xì)胞工程測(cè)試題基因工程和細(xì)胞工程測(cè)試題可打印有答案【實(shí)用文檔】doc文檔可直接使用可編輯，歡迎下載姓名成績(jī)一、選擇題（每題5分，共50分)１。小鼠雜交瘤細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體用于人體試驗(yàn)時(shí)易引起過(guò)敏反應(yīng)，為了克服這個(gè)缺陷,可選擇性擴(kuò)增抗體的可變區(qū)基因（目的基因)后再重組表達(dá)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．設(shè)計(jì)擴(kuò)增目的基因的引物時(shí)不必考慮表達(dá)載體的序列B。用ＰCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)必須知道基因的全部序列C.ＰCＲ體系中一定要添加從受體細(xì)胞中提取的DNＡ聚合酶D．一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細(xì)胞2．從某海洋動(dòng)物中獲得一基因,其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1。目前在P１的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是()Ａ。合成編碼目的肽的ＤNA片段B．構(gòu)建含目的肽ＤNA片段的表達(dá)載體C．依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽D．篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽３.某種極具觀賞價(jià)值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植,可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗,下列技術(shù)中不能選用的是(）A.利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B．采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C．采集幼芽嫁接到合適的其他種類(lèi)植物體上D。采用幼葉、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)４。如圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是()Ａ．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)Ｔ淋巴細(xì)胞B.②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C．③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D.④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群５．某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽".下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（)A．消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害B。在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞C．出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控D。生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含α－萘乙酸等生長(zhǎng)素類(lèi)調(diào)節(jié)劑6.將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)，下列條件中不需要的是A．具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞B．一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物激素C．離體狀態(tài)Ｄ．導(dǎo)入外源基因７.芥酸會(huì)降低菜籽的品質(zhì)。油菜有兩對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因(H和h,G和ｇ)控制菜籽的芥酸含量，下圖是獲得低芥酸油菜新品種（HHGG）的技術(shù)路線.已知油菜單個(gè)花藥由花藥壁(２ｎ)及大量花粉（ｎ）等組分組成，這些組分的細(xì)胞都具有全能性。據(jù)圖分析,下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.①、②兩過(guò)程均需要植物激素來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化B．與④過(guò)程相比，③過(guò)程可能會(huì)產(chǎn)生二倍體再生植株C．圖中三種途徑中，利用花粉培養(yǎng)篩選低芥酸植株（HＨＧG)的效率最高D．F1減數(shù)分裂時(shí)，H基因所在染色體會(huì)與G基因所在染色體發(fā)生聯(lián)會(huì)８．天然的玫瑰沒(méi)有藍(lán)色花，這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B，而開(kāi)藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰。下列操作正確的是（）Ａ．提取矮牽牛藍(lán)色花的ｍＲNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的DNA,再擴(kuò)增基因BB。利用限制性核酸內(nèi)切酶從開(kāi)藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫(kù)中獲取基因BC。利用DNA聚合酶將基因Ｂ與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞D．將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞9．下圖示植物組織培養(yǎng)過(guò)程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是（）A．⑤植株根尖細(xì)胞的全能性比①植株根尖細(xì)胞的強(qiáng)B。②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,不含有有機(jī)物C．③試管中的細(xì)胞能進(jìn)行減數(shù)分裂D.調(diào)節(jié)④培養(yǎng)基中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官１0。下列是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟,其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（)①?gòu)幕脊撬枇龅男∈篌w內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞②將Ｘ抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞③將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)④篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞⑤利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞⑥從小鼠腹水中提取抗體⑦利用促細(xì)胞融合因子促使細(xì)胞融合A．實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)該是①②⑦⑤④③⑥B．③過(guò)程產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程稱(chēng)為克隆C。⑦過(guò)程獲得的細(xì)胞均可無(wú)限增殖D．利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體的過(guò)程中通常要經(jīng)過(guò)兩次篩選二、非選擇題（共5０分）1１．絞股藍(lán)細(xì)胞中含有抗煙草花葉病毒（TＭV）基因，可以合成一種抗ＴＭＶ蛋白,葉片對(duì)TＭV具有抗感染性.煙草是重要的經(jīng)濟(jì)作物，由于ＴＭV的感染會(huì)導(dǎo)致大幅度減產(chǎn).研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗ＴＭＶ的煙草,主要流程如下圖所示。（１）科學(xué)家首先從絞股藍(lán)細(xì)胞中提取抗TMV基因轉(zhuǎn)錄的RＮA，然后合成目的基因。圖中①過(guò)程表示_＿_(dá)____＿。（2）由圖分析,在過(guò)程③構(gòu)建的重組Tｉ質(zhì)粒上應(yīng)該含有的標(biāo)記基因是＿＿_(dá)＿＿_(dá)____＿基因，重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入煙草體細(xì)胞的方法是__________＿_(dá)___＿_(dá)___。（3）在過(guò)程⑤培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營(yíng)養(yǎng)成分外,還必須添加________＿_(dá)_____＿＿，以保證受體細(xì)胞能培養(yǎng)成再生植株。（4）過(guò)程⑥可采取________＿_(dá)__＿_(dá)_＿＿_(dá)__的方法,檢測(cè)植株是否合成了抗TＭV蛋白。在個(gè)體水平的鑒定過(guò)程中，可通過(guò)____＿_(dá)______＿_(dá)__的方法來(lái)確定植株是否具有抗性.12．單純皰疹病毒I型(HＳV-1）可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSＶ－１的單克隆抗體可快速檢測(cè)HSＶ-1。回答下列問(wèn)題：(1）在制備抗HSV－1的單克隆抗體的過(guò)程中,先給小鼠注射一種純化的HSV-l蛋白,一段時(shí)間后，若小鼠血清中抗＿＿_(dá)_＿_(dá)＿＿＿_(dá)_______＿_(dá)＿的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性，說(shuō)明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了__＿_(dá)__________＿_(dá)＿反應(yīng)，再?gòu)男∈蟮腳__＿＿_(dá)___＿_(dá)中獲?。铝馨图?xì)胞。將該Ｂ淋巴細(xì)胞與小鼠的＿_(dá)__＿_(dá)__＿＿_(dá)＿_(dá)_細(xì)胞融合，再經(jīng)過(guò)篩選、檢測(cè),最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是＿＿＿_(dá)＿＿＿_(dá)_＿_(dá)___＿＿_(dá)_＿_(dá)＿_(dá)__＿_(dá)__＿_(dá)__＿_(dá)＿＿_(dá)_＿。(2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可在體外對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，也可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的___＿＿＿_(dá)__＿_(dá)___中使其增殖，再?gòu)腳__＿_(dá)__＿_(dá)_＿_(dá)＿_(dá)中提取、純化獲得。(３)通過(guò)上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HＳV-1蛋白,其原因是該抗體具有＿_(dá)__＿_(dá)_____＿＿_(dá)＿_(dá)＿和___＿_(dá)___＿_(dá)＿_(dá)__＿＿_(dá)等特性.13．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(１)過(guò)程①所需的酶是_＿_(dá)__＿_(dá)＿_(dá)_____＿＿＿_(dá)______＿_(dá)___。（2）過(guò)程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中如有有供體的_＿_(dá)___＿_(dá)＿＿_(dá)_＿_(dá)（填細(xì)胞器）存在，根據(jù)這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(３)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持細(xì)胞具有一定的滲透壓，從而維持__＿_(dá)_＿_(dá)_＿_(dá)______＿_(dá)_＿＿_(dá)＿。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)＿＿_(dá)___＿_(dá)____＿＿再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成_＿_(dá)________＿組織。(４）若分析再生植株的染色體變異類(lèi)型,應(yīng)剪取再生植株和_____＿_(dá)_＿_(dá)_＿＿_(dá)_＿＿＿_(dá)_植株的根尖，通過(guò)_＿＿_(dá)_______、_______＿_(dá)＿＿、染色和制片等過(guò)程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目.(5）采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DＮA進(jìn)行PCＲ擴(kuò)增,得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株１～4進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果.據(jù)圖判斷,再生植株1～4中一定是雜種植株的有_＿_(dá)_＿_(dá)_＿_(dá)__。（６）對(duì)雜種植株進(jìn)行＿_(dá)__＿_(dá)＿_(dá)接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株。14。圖①表示含有目的基因D的ＤNＡ片段長(zhǎng)度（bp即堿基對(duì)）和部分堿基序列,圖②表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有MspⅠ、BａmHⅠ、ＭｂｏⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為Ｃ↓ＣGG、Ｇ↓GＡTCC、↓GATＣ、ＣCC↓GGG.請(qǐng)回答下列問(wèn)題:（1)圖①的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由____＿_(dá)____________連接.（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割圖①中DNＡ片段,產(chǎn)生的末端是_＿＿_(dá)___＿末端，其產(chǎn)物長(zhǎng)度為_(kāi)＿_(dá)_____＿_(dá)____＿_(dá)__＿＿_(dá)_＿_(dá)＿_(dá)___。(3）若圖①中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T.A堿基對(duì)替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞.從雜合子分離出圖①及其對(duì)應(yīng)的DＮA片段，用限制酶SｍaⅠ完全切割，產(chǎn)物中共有_＿_(dá)__＿_(dá)_種不同長(zhǎng)度的ＤNＡ片段.（4）若將圖②中質(zhì)粒和目的基因D通過(guò)同種限制酶處理后進(jìn)行連接，形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是__＿_(dá)_＿＿_(dá)____＿＿_(dá)__＿_(dá)＿_(dá)_。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加_＿＿_(dá)_____＿_(dá)_＿＿_(dá)__＿_(dá)_______的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測(cè)，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中的目的基因D不能正確表達(dá)，其最可能的原因是＿_(dá)__＿_(dá)______＿＿_(dá)____＿_(dá)__＿_(dá)＿_(dá)＿_(dá)________＿＿_(dá)＿_(dá)________＿_(dá)_.答案一、選擇題（每題5分,共5０分)１．小鼠雜交瘤細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體用于人體試驗(yàn)時(shí)易引起過(guò)敏反應(yīng)，為了克服這個(gè)缺陷，可選擇性擴(kuò)增抗體的可變區(qū)基因（目的基因）后再重組表達(dá)。下列相關(guān)敘述正確的是()A．設(shè)計(jì)擴(kuò)增目的基因的引物時(shí)不必考慮表達(dá)載體的序列Ｂ.用ＰCＲ方法擴(kuò)增目的基因時(shí)必須知道基因的全部序列C．PCＲ體系中一定要添加從受體細(xì)胞中提取的DＮＡ聚合酶D．一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細(xì)胞Ｄ本題主要考查PCR技術(shù)的有關(guān)知識(shí).利用PCＲ技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)引物，但不需知道目的基因的全部序列,需要考慮載體的序列；因PCR反應(yīng)在高溫條件下進(jìn)行,故反應(yīng)體系中需加入耐高溫的ＤNA聚合酶；因某些目的基因編碼的產(chǎn)物需經(jīng)特殊的加工修飾過(guò)程,故一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細(xì)胞.2.從某海洋動(dòng)物中獲得一基因，其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1.目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物,首先要做的是（）A。合成編碼目的肽的DNA片段B。構(gòu)建含目的肽DＮA片段的表達(dá)載體C。依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽D。篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽C由題中信息“在Pｌ的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物”可推知本題考查蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識(shí).根據(jù)蛋白質(zhì)工程的基本途徑:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）,可推知答案為Ｃ。3．某種極具觀賞價(jià)值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植，可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗,下列技術(shù)中不能選用的是（)A．利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B.采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C。采集幼芽嫁接到合適的其他種類(lèi)植物體上D。采用幼葉、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)B本題考查對(duì)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗的多種技術(shù)手段的分析。為了使優(yōu)質(zhì)苗的生物性狀不發(fā)生性狀分離,可采用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗，也可采用將幼芽嫁接到合適的其他種類(lèi)植物體上的方法或用莖尖或幼葉等部位的組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗；花粉粒是減數(shù)分裂的產(chǎn)物,利用花粉粒離體培養(yǎng)得到的是單倍體苗，其高度不育，且會(huì)發(fā)生性狀分離，因此Ｂ項(xiàng)方案不能選用。４．如圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述,正確的是（)A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C.③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群D本題主要考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)。①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的漿細(xì)胞;②中使用聚乙二醇或滅活的病毒等，有利于雜交瘤細(xì)胞的形成;③同時(shí)具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性；④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群。故D項(xiàng)正確。５.某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(）Ａ．消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害B．在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞C.出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果,受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控D.生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含α－萘乙酸等生長(zhǎng)素類(lèi)調(diào)節(jié)劑B本題主要考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。在愈傷組織中,因植物細(xì)胞含有細(xì)胞壁,阻礙了細(xì)胞融合，所以此時(shí)加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，不能獲得染色體加倍的細(xì)胞；消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害;愈傷組織出芽是細(xì)胞分化的結(jié)果，而細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，生根時(shí)，培養(yǎng)基通常含有α－萘乙酸等生長(zhǎng)素類(lèi)調(diào)節(jié)劑。故Ｂ項(xiàng)錯(cuò)誤.6。將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)，下列條件中不需要的是Ａ．具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞Ｂ．一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物激素Ｃ．離體狀態(tài)D。導(dǎo)入外源基因D７．芥酸會(huì)降低菜籽的品質(zhì)。油菜有兩對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因(H和h，G和g)控制菜籽的芥酸含量,下圖是獲得低芥酸油菜新品種（HＨGG)的技術(shù)路線.已知油菜單個(gè)花藥由花藥壁（2n）及大量花粉（n）等組分組成,這些組分的細(xì)胞都具有全能性.據(jù)圖分析,下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.①、②兩過(guò)程均需要植物激素來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化B.與④過(guò)程相比，③過(guò)程可能會(huì)產(chǎn)生二倍體再生植株C．圖中三種途徑中，利用花粉培養(yǎng)篩選低芥酸植株(HHGＧ)的效率最高D．F１減數(shù)分裂時(shí)，H基因所在染色體會(huì)與Ｇ基因所在染色體發(fā)生聯(lián)會(huì)D①②兩過(guò)程是脫分化過(guò)程，培養(yǎng)基中需要加入生長(zhǎng)素類(lèi)和細(xì)胞分裂素類(lèi)激素來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化，故A項(xiàng)正確；③過(guò)程是利用植物花藥離體培養(yǎng)獲得植株的過(guò)程，其中花藥壁細(xì)胞屬于正常的二倍體體細(xì)胞,由其獲得的植株為二倍體正常植株,④過(guò)程是利用花粉粒離體培養(yǎng)獲得的，花粉細(xì)胞只有一個(gè)染色體組，由其獲得的植株為單倍體植株，故B項(xiàng)正確；圖中的三種途徑中，利用花粉培養(yǎng)獲得的只有四種品種，比例為1:１：１:1,易篩選出所需品種，故C項(xiàng)正確;Ｈ、h和Ｇ、g分別是兩對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因,故兩者是位于非同源染色體上的，在減數(shù)分裂時(shí)，H和Ｇ基因所在的染色體不會(huì)發(fā)生聯(lián)會(huì)，故Ｄ項(xiàng)錯(cuò)誤。8．天然的玫瑰沒(méi)有藍(lán)色花,這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B,而開(kāi)藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰。下列操作正確的是（）A.提取矮牽牛藍(lán)色花的mＲＮA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的DNA,再擴(kuò)增基因BB.利用限制性核酸內(nèi)切酶從開(kāi)藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫(kù)中獲取基因BC。利用ＤNＡ聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞Ｄ.將基因Ｂ直接導(dǎo)入大腸桿菌,然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞A可以利用mRＮA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因后再進(jìn)一步擴(kuò)增,A項(xiàng)正確；因?yàn)殚_(kāi)藍(lán)色花的矮牽?；颍碌男蛄惺且阎模栽撃康幕蛞瞬捎没瘜W(xué)方法合成或用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增,而不是從開(kāi)藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫(kù)中獲取,B項(xiàng)錯(cuò)誤;目的基因必須與運(yùn)載體結(jié)合后才能導(dǎo)入受體細(xì)胞，且需要ＤNA連接酶縫合,C、D項(xiàng)錯(cuò)誤。9.下圖示植物組織培養(yǎng)過(guò)程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是（）Ａ．⑤植株根尖細(xì)胞的全能性比①植株根尖細(xì)胞的強(qiáng)Ｂ．②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，不含有有機(jī)物C.③試管中的細(xì)胞能進(jìn)行減數(shù)分裂D．調(diào)節(jié)④培養(yǎng)基中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官Ｄ⑤植株根尖細(xì)胞的全能性與①植株根尖細(xì)胞相同；②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和有機(jī)物等；③試管中的細(xì)胞進(jìn)行的分裂方式為有絲分裂；調(diào)節(jié)④培養(yǎng)基中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的比例,可誘導(dǎo)產(chǎn)生根或芽。１0.下列是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟，其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(）①?gòu)幕脊撬枇龅男∈篌w內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞②將Ｘ抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的Ｂ淋巴細(xì)胞③將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)④篩選出能產(chǎn)生抗Ｘ抗體的雜交瘤細(xì)胞⑤利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞⑥從小鼠腹水中提取抗體⑦利用促細(xì)胞融合因子促使細(xì)胞融合A。實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)該是①②⑦⑤④③⑥B．③過(guò)程產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程稱(chēng)為克隆Ｃ．⑦過(guò)程獲得的細(xì)胞均可無(wú)限增殖D．利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體的過(guò)程中通常要經(jīng)過(guò)兩次篩選Ｃ利用促細(xì)胞融合因子促使細(xì)胞融合，可獲得多種融合細(xì)胞.其中B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞不能無(wú)限增殖.二、非選擇題(共50分)１１.絞股藍(lán)細(xì)胞中含有抗煙草花葉病毒（TMV)基因,可以合成一種抗TMV蛋白，葉片對(duì)TMV具有抗感染性。煙草是重要的經(jīng)濟(jì)作物，由于TＭV的感染會(huì)導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV的煙草，主要流程如下圖所示。（１)科學(xué)家首先從絞股藍(lán)細(xì)胞中提取抗TMV基因轉(zhuǎn)錄的ＲＮA，然后合成目的基因。圖中①過(guò)程表示__＿＿_(dá)___。（２）由圖分析，在過(guò)程③構(gòu)建的重組Tｉ質(zhì)粒上應(yīng)該含有的標(biāo)記基因是_＿_(dá)__＿_(dá)____基因，重組Tｉ質(zhì)粒導(dǎo)入煙草體細(xì)胞的方法是______＿＿_(dá)__＿_(dá)___＿＿_(dá)_.(3)在過(guò)程⑤培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營(yíng)養(yǎng)成分外,還必須添加_＿＿＿_(dá)___＿＿＿_(dá)_____,以保證受體細(xì)胞能培養(yǎng)成再生植株.（4）過(guò)程⑥可采取____＿_(dá)_______＿_(dá)_____的方法,檢測(cè)植株是否合成了抗TMV蛋白。在個(gè)體水平的鑒定過(guò)程中,可通過(guò)____＿_(dá)________＿_(dá)的方法來(lái)確定植株是否具有抗性.（1）逆轉(zhuǎn)錄(２)卡那霉素抗性農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（3)植物激素(4)抗原—抗體雜交接種煙草花葉病毒（1)由圖可知,①表示逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄)。（2）由圖示⑤培養(yǎng)基中含有卡那霉素可知，Ti質(zhì)粒的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，將基因表達(dá)載體（重組Tｉ質(zhì)粒)導(dǎo)入植物細(xì)胞中常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。（3）將受體細(xì)胞培養(yǎng)成再生植株需要進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營(yíng)養(yǎng)成分外，還必須添加植物激素。(4）通過(guò)抗原—抗體雜交的方法，檢測(cè)植株是否合成了抗ＴMV蛋白,在個(gè)體水平上，通過(guò)接種煙草花葉病毒的方法可以確定植株是否具有抗性。12。單純皰疹病毒I型(HSＶ－1）可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HＳV—1的單克隆抗體可快速檢測(cè)ＨSV－1?；卮鹣铝袉?wèn)題:（1）在制備抗HSV－1的單克隆抗體的過(guò)程中，先給小鼠注射一種純化的ＨSＶ－ｌ蛋白，一段時(shí)間后，若小鼠血清中抗____＿＿_(dá)＿_(dá)__＿_(dá)_＿_(dá)＿＿_(dá)_的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性,說(shuō)明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了__＿＿_(dá)_______＿＿＿_(dá)_反應(yīng),再?gòu)男∈蟮腳__＿_(dá)__＿_(dá)__中獲取B淋巴細(xì)胞.將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的__＿＿＿_(dá)＿_(dá)__＿_(dá)＿_(dá)細(xì)胞融合，再經(jīng)過(guò)篩選、檢測(cè)，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是______＿＿_(dá)＿_(dá)_____＿＿_(dá)____＿_(dá)_＿_(dá)_＿_(dá)___＿_(dá)___。(2）若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體,可在體外對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),也可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的__＿_(dá)＿＿＿＿_(dá)__＿_(dá)_中使其增殖,再?gòu)模撸達(dá)＿_(dá)_____＿_(dá)_＿中提取、純化獲得。(3）通過(guò)上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSＶ—1蛋白,其原因是該抗體具有____＿_(dá)_＿_(dá)＿＿_(dá)___＿_(dá)和_＿_(dá)_________＿_(dá)＿_(dá)＿等特性。（1)HＳＶ-1蛋白體液免疫(其他合理答案也可）脾臟（其他合理答案也可）骨髓瘤無(wú)限增殖且產(chǎn)生專(zhuān)一抗體（其他合理答案也可）（2）腹腔腹水(3)純度高特異性強(qiáng)（其他合理答案也可）(1）制備單克隆抗體時(shí)，需要先給小鼠注射特定抗原（HSV－1蛋白），當(dāng)小鼠血清中抗HSV－1蛋白的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性時(shí)，就可從小鼠脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞,將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)過(guò)篩選和克隆化培養(yǎng)，最終獲得既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的雜交瘤細(xì)胞.（２)單克隆抗體的獲取有兩條途徑,一是從體外細(xì)胞培養(yǎng)液中提純獲得，二是將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖,再?gòu)母顾刑崛?、純化獲得。（３）單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、純度高等特點(diǎn).13．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病.野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:（1）過(guò)程①所需的酶是____＿_(dá)__＿_(dá)___＿_(dá)__________＿_(dá)_＿。(２）過(guò)程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中如有有供體的＿＿＿＿_(dá)______＿＿_(dá)（填細(xì)胞器）存在，根據(jù)這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持細(xì)胞具有一定的滲透壓，從而維持_____＿_(dá)_____＿_(dá)_＿＿＿_(dá)___＿。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)______＿＿_(dá)____＿再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成__＿_(dá)_＿_(dá)_＿_(dá)＿_(dá)組織.（4）若分析再生植株的染色體變異類(lèi)型,應(yīng)剪取再生植株和__＿_(dá)________＿_(dá)______植株的根尖，通過(guò)_＿_(dá)＿_(dá)＿_(dá)____、_＿_(dá)＿_(dá)_____＿、染色和制片等過(guò)程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。（５）采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DＮA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株1～4進(jìn)行ＰＣR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株１~4中一定是雜種植株的有__＿＿＿_(dá)_____.（６）對(duì)雜種植株進(jìn)行________接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株.(1)纖維素酶和果膠酶（２）葉綠體(3)原生質(zhì)體完整性細(xì)胞壁愈傷（4)雙親(或花椰菜和黑芥)解離漂洗（5）1、2、４（6)黑腐病菌本題考查植物細(xì)胞工程、染色體變異的實(shí)驗(yàn)鑒定以及高抗性的雜種植株的篩選等相關(guān)知識(shí)。(1）去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體需要用纖維素酶和果膠酶處理。（2)葉肉細(xì)胞含有葉綠體,因此通過(guò)PEG誘導(dǎo)融合的雜種細(xì)胞應(yīng)含有葉綠體，以此作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。（3）原生質(zhì)體失去了細(xì)胞壁的保護(hù)作用，因此原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇，使原生質(zhì)體處于等滲溶液中，以維持原生質(zhì)體正常形態(tài)。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞壁再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織.（4）要判斷染色體變異的類(lèi)型,應(yīng)剪取再生植株、花椰菜和黑芥植株的根尖，通過(guò)解離、漂洗、染色、制片等過(guò)程制成裝片，然后進(jìn)行顯微觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。(5)根據(jù)兩親本的差異性條帶，可知再生植株1、２和４既有花椰菜的條帶，又有黑芥的條帶,因此再生植株１、2和４一定為雜種植株.(6）要篩選出高抗性的雜種植株，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的病原體接種實(shí)驗(yàn)，即接種黑腐病菌。14.圖①表示含有目的基因D的ＤＮA片段長(zhǎng)度（bp即堿基對(duì)）和部分堿基序列，圖②表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列.現(xiàn)有MspⅠ、BａmHⅠ、MｂoⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶,它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C↓CＧG、Ｇ↓GＡTＣC、↓GAＴC、ＣCＣ↓GGG。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）圖①的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由___＿＿＿_(dá)__________＿連接。（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割圖①中DNA片段,產(chǎn)生的末端是＿_(dá)＿_(dá)____末端，其產(chǎn)物長(zhǎng)度為_(kāi)_____＿_(dá)__________＿_(dá)__＿_(dá)___＿_(dá).（3）若圖①中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被Ｔ。A堿基對(duì)替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞.從雜合子分離出圖①及其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmａⅠ完全切割，產(chǎn)物中共有_______＿種不同長(zhǎng)度的DNA片段。（4)若將圖②中質(zhì)粒和目的基因D通過(guò)同種限制酶處理后進(jìn)行連接，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是__＿_(dá)__＿＿＿_(dá)_＿_(dá)＿＿_(dá)__＿_(dá)_＿。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加＿_(dá)_＿_(dá)__＿_(dá)_＿＿_(dá)__＿_(dá)__＿_(dá)_____的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測(cè)，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中的目的基因D不能正確表達(dá)，其最可能的原因是__＿_(dá)＿_(dá)＿＿_(dá)＿_(dá)___＿_(dá)_＿_(dá)_____________＿_(dá)__＿_(dá)__＿＿_(dá)＿＿_(dá)_____＿_(dá).（1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖(2）平５３7bp、790bｐ、６61bp（3)4（4）BaｍＨⅠ抗生素B同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因Ｄ與質(zhì)粒反向連接（1)在一條脫氧核苷酸鏈上，相鄰兩個(gè)脫氧核苷酸之間通過(guò)３，5-磷酸二酯鍵相連，所以相鄰堿基之間通過(guò)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖相連接。（2)SｍaⅠ識(shí)別并切割的序列為CCC↓GGＧ，所以產(chǎn)生的末端為平末端,經(jīng)ＳmａⅠ切割后，DNＡ片段會(huì)形成三個(gè)小的DＮA片段，按切割位點(diǎn)計(jì)算分別是：5３4bｐ＋3bp＝53７bp;796bｐ－3bp—3bp＝79０ｂp；６５8ｂｐ＋3bｐ＝6６1bp.（3)雜合子基因型為Ｄd。用SmaⅠ切割基因Ｄ,會(huì)形成53７ｂp、７90bp、661ｂp三種類(lèi)型。題圖①中虛線方框內(nèi)C—G被Ｔ-A替換，失去了一個(gè)酶切位點(diǎn),則會(huì)被切割成534bp＋796ｂｐ－３ｂp＝13２7bp,和6５8bp＋3ｂp＝6６１bｐ。所以一共會(huì)得到4種類(lèi)型的片段。(4)如果要獲得完整的目的基因可用BamＨⅠ和ＭboⅠ切割,但是ＭbｏⅠ會(huì)破壞抗生素Ａ抗性基因和抗生素B抗性基因，質(zhì)粒會(huì)失去標(biāo)記基因，無(wú)法篩選，所以只能用ＢaｍHⅠ切割。用BamＨⅠ切割后破壞了抗生素A抗性基因,所以質(zhì)粒上存在的標(biāo)記基因是抗生素B抗性基因，因此，在加入抗生素B的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)、篩選，經(jīng)過(guò)同種限制酶切割后會(huì)產(chǎn)生相同的末端，部分目的基因與質(zhì)粒反向連接導(dǎo)致基因無(wú)法正常表達(dá)。高二生物《基因工程和細(xì)胞工程》測(cè)試題姓名班級(jí)（時(shí)間:90分鐘分?jǐn)?shù)：１0０分）一．選擇題(本大題包括２5題，每題2分，共50分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題意。）１.以下說(shuō)法正確的是()?A．所有的限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列

B.質(zhì)粒是基因工程中惟一的運(yùn)載體?C．運(yùn)載體必須具備的條件之一是:具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接

D.質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀細(xì)胞器２。植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是（）A。纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理—-酶的專(zhuān)一性B．植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——細(xì)胞的全能性C．植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合——生物膜的流動(dòng)性D。紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)——細(xì)胞分裂３.有關(guān)基因工程的敘述正確的是（）?Ａ.限制性?xún)?nèi)切酶只在獲得目的基因時(shí)才用B．重組質(zhì)粒的形成在細(xì)胞內(nèi)完成

Ｃ.質(zhì)粒都可作運(yùn)載體Ｄ.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料4。能克服遠(yuǎn)緣雜交障礙培育農(nóng)作物新品種的技術(shù)是（）A.基因工程B。組織培養(yǎng)C.誘變育種D。雜交育種5．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(）A.培養(yǎng)人的效應(yīng)Ｔ細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體B。培養(yǎng)人的Ｂ細(xì)胞能夠無(wú)限地增殖C。人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)能形成細(xì)胞株D．用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞６．PCR技術(shù)擴(kuò)增DＮA,需要的條件是()①目的基因 ②引物?③四種脫氧核苷酸④DＮA聚合酶等⑤mＲＮA?⑥核糖體A、①②③④Ｂ、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥７．以下對(duì)DNA的描述，錯(cuò)誤的是()Ａ．人的正常T淋巴細(xì)胞中含有人體全部遺傳信息B.同種生物個(gè)體間DNＡ完全相同C.DNA的基本功能是遺傳信息的復(fù)制與表達(dá)D。一個(gè)DＮＡ分子可以控制多個(gè)性狀8。蛋白質(zhì)工程中直接需要進(jìn)行操作的對(duì)象是()A.氨基酸結(jié)構(gòu)B.蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)C.肽鏈結(jié)構(gòu)D.基因結(jié)構(gòu)9．細(xì)胞工程的發(fā)展所依賴(lài)的理論基礎(chǔ)是（)Ａ。DNＡ雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的建立B．遺傳密碼的確立及其通用性的發(fā)現(xiàn)Ｃ.生物體細(xì)胞全能性的證明D。遺傳信息傳遞的“中心法則"的發(fā)現(xiàn)10．下列不是基因工程中的目的基因的檢測(cè)手段的是:(）A。分子雜交技術(shù)B.抗原—抗體雜交C.抗蟲(chóng)或抗病的接種D.基因槍法1１.在以下４種細(xì)胞工程技術(shù)中，培育出的新個(gè)體中，體內(nèi)遺傳物質(zhì)均來(lái)自一個(gè)親本的是（）A.植物組織培養(yǎng)B．單克隆抗體C。植物體細(xì)胞雜交Ｄ.細(xì)胞核移植12．動(dòng)物細(xì)胞融合與植物細(xì)胞融合相比特有的是(）A.基本原理相同Ｂ.誘導(dǎo)融合的方法類(lèi)Ｃ．原生質(zhì)體融合D．可用滅活的病毒作誘導(dǎo)劑13。下列哪一項(xiàng)屬于克?。ǎ〢.將雞的某個(gè)DNA片段整合到小鼠的DＮA分子中B．將抗藥菌的某基因引入草履蟲(chóng)的細(xì)胞內(nèi)Ｃ。將鼠骨髓細(xì)胞與經(jīng)過(guò)免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞D．將某種瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個(gè)細(xì)胞系１4。在基因工程中，把選出的目的基因（共1000個(gè)脫氧核苷酸對(duì)，其中腺嘌呤脫氧核苷酸46０個(gè))放入ＰCＲ儀中擴(kuò)增4代,那么,在ＰＣＲ儀中放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)至少應(yīng)是（）A．6４0?B．810０ C．600D。864015．下列屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的是()A。培養(yǎng)基成分不同B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行C．動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng),而植物細(xì)胞不能D.動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株1６。用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用(）A.受精卵B.傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞C。傳代10~５0代以?xún)?nèi)的細(xì)胞D．處于減數(shù)分裂第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞17.下面對(duì)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)及意義的敘述，不合理的是（）A．將來(lái)有可能通過(guò)此方法來(lái)生產(chǎn)白細(xì)胞介素B。通過(guò)克服遠(yuǎn)源雜交不親和現(xiàn)象來(lái)獲得新物種C。有助于對(duì)細(xì)胞這一生命單位的更為科學(xué)的認(rèn)識(shí)D。融合本身與生物膜的流動(dòng)性直接相關(guān)18.下列不屬于動(dòng)物細(xì)胞工程應(yīng)用的是(）A.大規(guī)模生產(chǎn)干擾素.用于抵抗病毒引起的感染B.為大面積燒傷的病人提供移植的皮膚細(xì)胞C.大規(guī)模生產(chǎn)食品添加劑、香料等D。利用胚胎移植技術(shù),加快優(yōu)良種畜的繁殖19．科學(xué)家用小鼠骨髓癌細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓癌細(xì)胞融合的是（)A．經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞B．不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞D．不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞20．生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生"將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，以下較易成為“復(fù)生"野驢的方法是（）Ａ.將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù),經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個(gè)體B。將野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體C。取出野驢的體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體D。將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中,培育成新個(gè)體21．與植物體細(xì)胞雜交密切相關(guān)的下列敘述中,錯(cuò)誤的是（)A.利用離心、振動(dòng)、電刺激等誘導(dǎo)B。利用聚乙二醇（PEG）等試劑誘導(dǎo)C．克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙Ｄ?？焖俜敝?、培育無(wú)病毒植物22.關(guān)于細(xì)胞全能性的理解錯(cuò)誤的是(）A。大量的科學(xué)事實(shí)證明,高度分化的植物體細(xì)胞仍具有全能性Ｂ.細(xì)胞內(nèi)含有個(gè)體發(fā)育所需全部基因是細(xì)胞具有全能性的內(nèi)在條件C。通過(guò)植物組織培養(yǎng)得到的試管苗或人工種子,是植物細(xì)胞在一定條件下表現(xiàn)全能性的結(jié)果D.通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得細(xì)胞株或細(xì)胞系,表明了動(dòng)物體細(xì)胞也具有全能性２3。細(xì)胞分化是生物界普遍存在的一種生命現(xiàn)象，下列不正確的是（)A．老年動(dòng)物體內(nèi)也有細(xì)胞的分化B．分化是基因在特定的時(shí)間和空間條件下選擇性表達(dá)的結(jié)果C。愈傷組織的形成是離體的植物細(xì)胞分化的結(jié)果D．分化后的不同細(xì)胞中mRNA的種類(lèi)和數(shù)量不一定相同24．某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí)，列表比較了動(dòng)、植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容。錯(cuò)誤的是(）選項(xiàng)項(xiàng)目植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程Ａ主要技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)、植物細(xì)胞培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交等動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和融合、細(xì)胞核移植、單克隆抗體的制備等Ｂ特殊處理方法機(jī)械法去除細(xì)胞壁胰蛋白酶處理、制細(xì)胞懸浮液Ｃ細(xì)胞融合方法物理方法、化學(xué)方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法D應(yīng)用人工種子、無(wú)病毒植株等單克隆抗體等25．下列有關(guān)生物工程方面的敘述中，不正確的是 （） A．葉肉細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí),經(jīng)再分化過(guò)程可形成胚狀體、叢芽或不定根?Ｂ．培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)應(yīng)選用無(wú)菌的血漿 Ｃ．被去掉細(xì)胞壁的植物細(xì)胞是原生質(zhì)層?D?；蚬こ?、細(xì)胞工程都能克服遠(yuǎn)緣物種雜交之間障礙12３4５67８9101112１3１４1５161718１９202１2223２425二、非選擇題(共50分，除特殊標(biāo)注外，每空１分)26.（7分)資料顯示，近十年來(lái)，PCＲ技術(shù)（DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù))成為分子生物實(shí)驗(yàn)的一種常規(guī)手段,其原理是利用DNA半保留復(fù)制的特性，在試管中進(jìn)行ＤNＡ的人工復(fù)制（如下圖）,在很短的時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬(wàn)倍甚至幾十億倍，使分子生物實(shí)驗(yàn)所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。請(qǐng)據(jù)圖回答：（1)加熱至94℃的目的是使ＤNA樣品的鍵斷裂,這一過(guò)程在生物體細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)_____＿＿酶的作用來(lái)完成的。通過(guò)分析得出新合成的DNA分子中，A=T，C=G，這個(gè)事實(shí)說(shuō)明ＤＮＡ分子的合成遵循。（2）新合成的DNA分子與模板ＤＮA分子完全相同的原因是___和。(3）通過(guò)ＰCR技術(shù)使DＮA分子大量復(fù)制時(shí)，若將一個(gè)用15N標(biāo)記的模板DＮA分子(第一代）放入試管中，以1４N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復(fù)制到第五代時(shí)，含１５N標(biāo)記的DNA分子單鏈數(shù)占全部DNＡ總單鏈數(shù)的比例為。（４）ＰCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來(lái)了便利，而且改進(jìn)了檢測(cè)細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測(cè)一個(gè)人是否感染了艾滋病病毒，你認(rèn)為可以用PCR擴(kuò)增血液中的（）Ａ.白細(xì)胞ＤNAB．病毒蛋白質(zhì)Ｃ。血漿抗體Ｄ.病毒核酸2７.(５分)右圖是利用基因工程辦法生產(chǎn)人白細(xì)胞干擾素的基本過(guò)程圖,據(jù)圖回答（1）①過(guò)程需要_____________＿＿酶的參與。（2)②物質(zhì)是從大腸桿菌分離出的__。其化學(xué)本質(zhì)是＿＿_(dá)_＿_(dá)_____＿＿_(dá)＿_(dá)，它必須能在宿主細(xì)胞中_________＿_(dá)_。（３)③過(guò)程表明目的基因___＿_(dá)____＿_(dá)___＿。28。(5分）動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)常用于生理、病理、藥理等方面的研究。右圖示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的部分過(guò)程:(1）圖示中A與B處理所用的物質(zhì)是＿.(２）在細(xì)胞的分裂增殖過(guò)程中,為了確定DNA合成的時(shí)間長(zhǎng)短，加入以3Ｈ標(biāo)記的（腺嘌吟、鳥(niǎo)嘌吟、胞嘧啶、胸腺嘧啶)。（3)圖中分裝的過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)＿_(dá)＿_(dá)_＿_(dá)培養(yǎng)，成活的細(xì)胞叫作_______，一般能傳40~５0代,其遺傳物質(zhì)____（改變、不變).2９.（10分)下圖是植物組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)略表示.請(qǐng)據(jù)此回答：(1）①表示＿_(dá)＿＿_(dá)__＿_(dá)____＿_(dá)＿_(dá)_＿_(dá)，它能被培養(yǎng)成④的根本原因是_____＿＿_(dá)＿_(dá)_______.?(2)②表示_____＿_(dá)_＿_(dá),它的細(xì)胞特點(diǎn)是_＿＿_(dá)______＿_(dá)____＿_(dá)＿_(dá)＿_(dá)_______________。（3）若想制作人工種子，應(yīng)該選用(填編號(hào)）____＿_(dá)__＿＿。

(4）若①是花藥，則④是＿＿_(dá)＿_(dá)_____________＿_(dá),這項(xiàng)技術(shù)可用_______＿_(dá)＿_(dá)___＿_(dá)__上。?（5)若①是胡蘿卜的根尖細(xì)胞，則培養(yǎng)的④的葉片的顏色是＿_(dá)_＿＿_(dá)___＿,這說(shuō)明根尖細(xì)胞___＿＿_(dá)__。?(６)若利用此技術(shù)制造治療燙傷的藥物—－—-紫草素,培養(yǎng)將進(jìn)行到（填編號(hào))____＿_(dá)＿_(dá)＿.3０。(8分）科學(xué)家通過(guò)基因工程培育抗蟲(chóng)棉時(shí)，需要從蘇云金芽孢桿菌中提取出抗蟲(chóng)基因，“放入”棉花的細(xì)胞中與棉花的DＮA結(jié)合起來(lái)并發(fā)揮作用,請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

(1)從蘇云金芽孢桿菌中切割抗蟲(chóng)基因所用的工具是＿_(dá)，此工具主要存在于中,其特點(diǎn)是____＿_(dá)＿_(dá)_____＿＿＿_(dá)。(2分）

（2）進(jìn)行基因操作一般要經(jīng)過(guò)的四個(gè)步驟是______＿_(dá)______＿_(dá)_________＿_(dá)__＿、___＿＿_(dá)_＿_(dá)_______＿＿_(dá)____、____＿_(dá)_______＿_(dá)__＿_(dá)___、____＿_(dá)＿_(dá)_____＿_(dá)___＿_(dá)＿_(dá)________＿＿_(dá)＿_(dá)_＿_(dá)_________＿＿。３1.（9分）下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。（1）技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ).(2）根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類(lèi)，圖中HＡT培養(yǎng)基屬于______培養(yǎng)基.(2分）(３)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是_＿_(dá).(4）動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外,還可以采用。（5)選出的雜交瘤細(xì)胞具備的_＿＿_(dá)＿_(dá)__特點(diǎn)。（2分）(6）淋巴細(xì)胞是由動(dòng)物體中的__＿_(dá)__細(xì)胞分化、發(fā)育而來(lái).32.(6分）下圖①~⑤列舉了五種作物育種方法，請(qǐng)回答相應(yīng)問(wèn)題:(1)第①種方法屬于常規(guī)育種,一般從Ｆ２開(kāi)始選種，這是因?yàn)開(kāi)_____＿_(dá)＿_(dá)_＿＿_(dá)＿_(dá)_＿_(dá)_。（2）在第②種方法中，若只考慮F1中分別位于ｎ對(duì)同源染色體上的n對(duì)等位基因,則利用其花藥離體培育成的幼苗的基因型，在理論上應(yīng)有＿＿_(dá)＿_(dá)_＿_(dá)種類(lèi)型。（3）第③種方法中使用秋水仙素的作用是促使染色體加倍,其作用機(jī)理是_＿＿＿_(dá)＿_(dá)_＿_(dá)。（４）第④種方法中發(fā)生的變異一般是基因突變。衛(wèi)星搭載的種子應(yīng)當(dāng)選用剛萌發(fā)的而非休眠的種子,原因是______＿＿_(dá)＿_(dá)__＿_(dá)___＿_(dá)___。（5）第⑤種方法屬于基因工程。采用這種方法培育出的新品種可以表達(dá)丙種微生物的某些遺傳信息，其表達(dá)過(guò)程是＿＿＿_(dá)＿_(dá)＿_(dá)___________＿。該遺傳工程得以實(shí)現(xiàn)的重要理論基礎(chǔ)之一是,無(wú)淪是真核生物還是原核生物，它們?cè)诤铣傻鞍踪|(zhì)的過(guò)程中，決定氨基酸的___________都是相同的。高二生物《基因工程和細(xì)胞工程》測(cè)試題一．選擇題(本大題包括2５題,每題2分，共５０分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題意。)123456７８９1０１11213CＢＤAＤＡBＤCDＡＤD1415161７18１92０２122２3２４25BＡBＢCACDDCＢＣ二、非選擇題（共50分，除特殊標(biāo)注外，每空1分）2６。（７分）（1）氫，解旋，堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。(2）DＮA分子中獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu)(或以模板DNA分子的一條鏈為模板進(jìn)行半保留復(fù)制)復(fù)制過(guò)程中嚴(yán)格遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。(3）1/1６。（４)D２7．（５分)(１)限制性?xún)?nèi)切酶(２)質(zhì)粒;DNＡ；復(fù)制并穩(wěn)定地保存（3)在大腸桿菌內(nèi)表達(dá)2８．(5分）(１）胰蛋白酶（２)胸腺嘧啶（3)傳代細(xì)胞株不變2９。（10分）(1）離體的植物器官、組織、細(xì)胞（或外植體）;植物細(xì)胞具有全能性(2)愈傷組織;細(xì)胞排列疏松，高度液泡化，無(wú)定形狀態(tài)，色淺（3）③(4）單倍體植株；單倍體育種（５）綠色；含有能表達(dá)葉綠體的基因（6)②3０.(8分）３１.（９分）（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（微生物培養(yǎng))(2)選擇(2分)（3）特異性強(qiáng)，靈敏度高(4）滅活的病毒(５)在體外大量增殖,分泌特異性抗體(2分)（６）骨髓；造血干32．(6分)(１）從Ｆ２開(kāi)始發(fā)生性狀分離（2）２n（3）秋水仙素抑制紡錘體的形成(４）種子萌發(fā)后進(jìn)行細(xì)胞分裂,ＤNＡ在復(fù)制過(guò)程中容易受到外界因素的影響發(fā)生基因突變(5）密碼子基因工程與細(xì)胞工程練習(xí)題一、選擇題(每小題2分，共30小題,6０分)1、2０世紀(jì)7０年代創(chuàng)立了一種新興生物技術(shù)——基因工程，其最主要的目的是（）A．定向提取生物DＮAB．定向地對(duì)DNA分子進(jìn)行人工剪切C．在生物體外對(duì)DNA分子進(jìn)行改造Ｄ。定向地改造生物的遺傳性狀2、關(guān)于限制酶的說(shuō)法中，正確的是()Ａ．限制酶是一種酶,只識(shí)別GAATTC堿基序列B．EcoRI切割的是Ｇ-A之間的氫鍵C．限制酶一般不切割自身的ＤＮＡ分子,只切割外源ＤNAD.限制酶只存在于原核生物中3、DＮA連接酶催化的反應(yīng)是()A．DNA復(fù)制時(shí)母鏈與子鏈之間形成氫鍵Ｂ．黏性末端堿基之間形成氫鍵C。兩個(gè)ＤNA片段黏性末端之間的縫隙的連接Ｄ．Ａ、B、C都不正確4、下列哪項(xiàng)敘述不是運(yùn)載體必須具備的條件(）A．具有某些標(biāo)記基因B。決定宿主細(xì)胞的生存C．能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制D。有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)5、在基因工程中，切割載體和含有目的基因的DNＡ片段中，一般需使用（）Ａ。同種限制酶B．兩種限制酶C。同種連接酶D．兩種連接酶6、下圖為ＤNA分子的某一片段，其中①、②、③分別表示某種酶的作用部位,則相應(yīng)的酶依次是（）A.DNＡ連接酶、限制性?xún)?nèi)切酶、解旋酶B。限制性?xún)?nèi)切酶、解旋酶、ＤNＡ連接酶Ｃ．解旋酶、限制性?xún)?nèi)切酶、DＮA連接酶D.限制性?xún)?nèi)切酶、DNA連接酶、解旋酶７、下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述，正確的是（)A．重組ＤNＡ技術(shù)所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體B。所有的限制酶都只能識(shí)別同一種特定的核苷酸序列Ｃ．選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞是因?yàn)榧?xì)菌繁殖快D.只要目的基因進(jìn)入了受體細(xì)胞就能成功實(shí)現(xiàn)表達(dá)8、科學(xué)家將含人的α—抗胰蛋白酶基因的DNA片段,注射到羊的受精卵中,該受精卵發(fā)育成的羊能分泌含α-抗胰蛋白酶的奶。這一過(guò)程涉及(

)①DNA按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則自我復(fù)制②DNＡ以其一條鏈為模板合成mRNＡ③mＲNＡ以自身為模板自我復(fù)制④按照ｍRNA密碼子的排列順序合成蛋白質(zhì)Ａ。①②B．③④C．①②③Ｄ．①②④9、下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是(）Ａ.目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物B．限制性核酸內(nèi)切酶和ＤＮA連接酶是兩類(lèi)常用的工具酶C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)10、基因工程中，科學(xué)家常用細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞，主要原因是這些微生物(

）Ａ.結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，操作方便B．繁殖速度快C．遺傳物質(zhì)含量少、簡(jiǎn)單D．性狀穩(wěn)定,變異少１1、圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，ａmpｒ表示氨芐青霉素抗性基因，ｎｅｏ表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是A。圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用PｓtⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DＮAC。用PｓｔⅠ和HiｎdⅢ酶切，可以保證重組ＤＮＡ序列的唯一性D．導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)１2、（201５·北京高考)在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟中,不需要的是（）Ａ．用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞B．用選擇培養(yǎng)基篩選導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞C。用聚乙二醇誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的原生質(zhì)體融合D。用適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)愈傷組織生芽１3．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法，正確的是（）A．蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作Ｂ.蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生出自然界中不曾存在過(guò)的新型蛋白質(zhì)分子C．對(duì)蛋白質(zhì)的改造是通過(guò)直接改造相應(yīng)的mRNA來(lái)實(shí)現(xiàn)的Ｄ。蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過(guò)程是相同的14、（2015·重慶高考）下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述,正確的是(）A。表達(dá)載體中的胰島素基因可通過(guò)人肝細(xì)胞mRNＡ反轉(zhuǎn)錄獲得B．表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動(dòng)于復(fù)制原(起）點(diǎn)Ｃ.借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)D．啟動(dòng)子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用15、農(nóng)桿菌中含有一個(gè)大型的Ti質(zhì)粒（如圖所示)，在侵染植物細(xì)胞的過(guò)程中，其中的T－ＤNA片段轉(zhuǎn)入植物的基因組。若想用基因工程并通過(guò)農(nóng)桿菌向某種植物中導(dǎo)入抗旱基因，以下分析不合理的是(）Ａ．若用Tｉ質(zhì)粒作為抗旱基因的載體,目的基因的插入位置應(yīng)該在T-ＤＮA片段內(nèi),且要保證復(fù)制起始點(diǎn)和用于轉(zhuǎn)移Ｔ－DNＡ的基因片段不被破壞Ｂ．將重組Ｔi質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌中時(shí)，可以用Ca2+處理細(xì)菌Ｃ．轉(zhuǎn)基因抗旱植物培育是否成功的最簡(jiǎn)單檢測(cè)方法是看該植物是否具有抗旱性狀D．若能夠在植物細(xì)胞中檢測(cè)到抗旱目的基因，則說(shuō)明該基因工程項(xiàng)目獲得成功16、下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述,不正確的是（）A.細(xì)胞融合技術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)屬于細(xì)胞工程涉及的技術(shù)范圍B。動(dòng)物可通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)培育出新品種C.植物細(xì)胞工程采用的各項(xiàng)技術(shù)手段的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性D.植物組織培養(yǎng)是將植物細(xì)胞置于包含植物生長(zhǎng)和發(fā)育所需的全部營(yíng)養(yǎng)成分的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)的技術(shù)17、植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的脫分化是指（)A．植物體的分生組織通過(guò)細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞的過(guò)程B.未成熟的種子經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期培養(yǎng),長(zhǎng)出幼苗的過(guò)程C。植物的器官、組織或細(xì)胞,通過(guò)離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程Ｄ。取植物的枝芽培育成一株新植物的過(guò)程1８、下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述錯(cuò)誤的是（)A.培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓B。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素比例影響愈傷組織的生長(zhǎng)和分化C.離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過(guò)脫分化才能形成愈傷組織D。同一株綠色開(kāi)花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織遺傳物質(zhì)相同19、下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述,錯(cuò)誤的是（)A。以根尖、莖尖為材料利用組織培養(yǎng)技術(shù)可獲得具有抗病毒的新品種B。利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得人工種子，能保持親本的性狀C。利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得紫草素,實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)Ｄ．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“蘿卜—甘藍(lán)”，克服了生物遠(yuǎn)緣雜親不親和的障礙20、下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交的敘述,錯(cuò)誤的是(）Ａ．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可克服生殖隔離的限制,培育遠(yuǎn)緣雜種B.不同種植物原生質(zhì)體融合的過(guò)程屬于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程C。使用纖維素酶和果膠酶誘導(dǎo)兩種不同的細(xì)胞融合D.其步驟是分離原生質(zhì)體→誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合→組織培養(yǎng)方法→得到雜種植株21、關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是（)A。用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織Ｂ.將所取的組織先用胰蛋白酶等處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞Ｃ．在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳５０代左右，所培養(yǎng)的細(xì)胞都會(huì)衰老死亡22、下列對(duì)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的敘述正確的是()A。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與植物組織培養(yǎng)的不盡相同Ｂ．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行Ｃ。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可發(fā)生基因重組，而植物組織培養(yǎng)不能D．動(dòng)物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性23、下列關(guān)于動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物的敘述，正確的是（）A．目前科學(xué)家可以用類(lèi)似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整的動(dòng)物個(gè)體Ｂ。動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)可有選擇地繁殖某一性別的家畜C.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代５0代以?xún)?nèi)的細(xì)胞D．用體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行100%的復(fù)制２4、下列現(xiàn)代生物科技的應(yīng)用中，不需要進(jìn)行檢測(cè)與篩選的是()A．對(duì)植物的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗Ｂ。將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與Ｂ淋巴細(xì)胞融合，制備單克隆抗體C．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育“蘿卜—甘藍(lán)”Ｄ。將抗蟲(chóng)基因?qū)胫参锛?xì)胞，培育具有抗蟲(chóng)特性的新植株25、細(xì)胞工程中，選擇合適的生物材料是成功的關(guān)鍵。下列選擇不合理的是（）Ａ.選擇高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)有利于獲得大量細(xì)胞B．選擇胚胎細(xì)胞作為核供體進(jìn)行核移植可提高克隆動(dòng)物的成功率Ｃ.選擇一定大小的植物莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗D．選擇植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理可獲得優(yōu)質(zhì)的突變體26、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是(）A.培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體Ｂ。培養(yǎng)中的人B淋巴細(xì)胞能夠無(wú)限地增殖Ｃ。人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)能形成細(xì)胞株D.用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞27、下圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是（）A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C．③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群２８、下列有關(guān)利用動(dòng)物細(xì)胞工程生產(chǎn)單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．單克隆抗體制備使用的主要生物材料是骨髓瘤細(xì)胞和漿細(xì)胞Ｂ.單克隆抗體制備的原理之一是一個(gè)漿細(xì)胞可以產(chǎn)生多種特異性抗體Ｃ。篩選能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞運(yùn)用了抗原—抗體特異性反應(yīng)原理D。單克隆抗體具有純度高、產(chǎn)量大、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)29、單克隆抗體（單抗)實(shí)質(zhì)上是單個(gè)Ｂ淋巴細(xì)胞通過(guò)克隆形成的細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的免疫球蛋白。下列有關(guān)敘述中,錯(cuò)誤的是(）Ａ．單抗作為生物導(dǎo)彈能定向到達(dá)癌細(xì)胞所在部位Ｂ．單抗制備的過(guò)程要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)Ｃ．在單抗制備的過(guò)程中必須經(jīng)過(guò)至少兩次細(xì)胞篩選D．只有用物理或化學(xué)方法的誘導(dǎo)，才能促使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞３0、下列是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟，其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（)①?gòu)幕脊撬枇龅男∈篌w內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞②將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的Ｂ淋巴細(xì)胞③將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)④篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞⑤利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞⑥從小鼠腹水中提取抗體⑦利用促細(xì)胞融合因子促使細(xì)胞融合A．實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)該是①②⑦⑤④③⑥Ｂ。③過(guò)程產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程稱(chēng)為克隆Ｃ．⑦過(guò)程獲得的細(xì)胞均可無(wú)限增殖D．利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體過(guò)程中通常要經(jīng)過(guò)兩次篩選二、填空題（每空1分，共40分）31、如圖為基因工程的過(guò)程圖，請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題：(１）圖中Ⅰ是___________＿_(dá)_＿_(dá)__，酶A是__＿＿＿_(dá)____＿＿＿_(dá)＿_(dá)＿_(dá)，酶B是____＿_(dá)＿_(dá)_____＿_(dá)_，除了質(zhì)粒常用作運(yùn)載體外，常用的還有＿_(dá)＿_(dá)________＿_(dá)_____。(2）獲得的Ⅲ（細(xì)胞）需要通過(guò)＿_(dá)__＿＿_(dá)__＿＿_(dá)＿_(dá)技術(shù)培養(yǎng)成植株；如果要培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，Ⅱ通常為_(kāi)_______＿_(dá)__＿_(dá)＿_(dá)__，常用的將目的基因?qū)氲姆椒ㄊ莀____＿_(dá)________；如果要利用細(xì)菌生產(chǎn)人的胰島素,常用_________＿_(dá)___處理細(xì)菌,使其處于_____＿_(dá)___＿_(dá)_＿,便于從周?chē)眨腘Ａ分子。32、回答下列有關(guān)基因工程的問(wèn)題。(1）用限制酶HinｄⅢ、BamＨⅠ同時(shí)切割目的基因，可得到__＿_(dá)＿＿_(dá)_個(gè)DNＡ片段。(2)用限制酶ＨindⅢ和BamHⅠ切割Tｉ質(zhì)粒，可得到＿_(dá)________個(gè)DNA片段。(3）過(guò)程①需要用到_____＿_(dá)_____＿_(dá)酶。（4)切割目的基因和質(zhì)粒的酶與①過(guò)程的酶作用的化學(xué)鍵都是＿_(dá)_______________。（５）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),常用Ti質(zhì)粒作為載體，是因?yàn)椋詉質(zhì)粒上具有_＿＿_(dá)＿,它能把目的基因整合到受體細(xì)胞（植株細(xì)胞)的__＿＿＿＿上。（6）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞,除采用上圖中的方法外，還可采用______＿_(dá)___法和＿_(dá)_____________＿法。33、“白菜—甘藍(lán)”是科學(xué)家用細(xì)胞工程的方法培育出來(lái)的蔬菜新品種，它具有生長(zhǎng)期短、耐熱性強(qiáng)和易儲(chǔ)存等優(yōu)點(diǎn)。下面是“白菜—甘藍(lán)”培育過(guò)程示意圖,請(qǐng)完成下列問(wèn)題：(1）由雜種細(xì)胞D培育成“白菜—甘藍(lán)"植株,采用的技術(shù)手段是_＿＿_(dá)___＿_(dá)___＿_(dá)＿。該過(guò)程說(shuō)明植物細(xì)胞具有_______＿_(dá)_______。(2）在d過(guò)程培養(yǎng)中，培養(yǎng)基的成分通常包括水、無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)和＿_(dá)__＿＿_(dá)__＿_(dá)____＿＿_(dá)_____＿等。同時(shí)，在培養(yǎng)過(guò)程中，除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外,另一個(gè)成功的關(guān)鍵是操作過(guò)程中必須保證__＿＿_(dá)_______＿＿。（３)在a過(guò)程中誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合最常用的誘導(dǎo)劑是＿_(dá)________＿＿_(dá)＿，融合依據(jù)的原理是___＿_(dá)__＿＿_(dá)＿_(dá)＿_(dá)＿_(dá)______＿_(dá)＿＿_(dá)__＿_(dá)__＿_(dá)_＿＿_(dá)＿_(dá)__＿_(dá)_______＿_(dá)＿＿_(dá)_。（4）將雜種細(xì)胞D培養(yǎng)成雜種植株,需要經(jīng)過(guò)兩個(gè)關(guān)鍵步驟分別是c________＿＿_(dá)_＿和d___＿＿_(dá)＿_(dá)__＿_(dá)_____＿。３4、科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛,如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆（如下圖所示）,請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列問(wèn)題:(1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)之前，要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織進(jìn)行分離,形成單個(gè)細(xì)胞，這一過(guò)程中需要利用＿_(dá)__＿_(dá)＿＿＿_(dá)＿_(dá)_______＿_(dá)__＿＿＿酶處理。（2)形成重組細(xì)胞時(shí)應(yīng)選用＿＿_(dá)_＿_(dá)_____＿＿_(dá)___期的卵母細(xì)胞。(３)如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞，則在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，會(huì)表現(xiàn)出__＿＿_(dá)______＿＿_(dá)和＿_(dá)___＿_(dá)____＿_(dá)_＿_(dá)＿_(dá)＿_(dá)_＿_(dá)等特點(diǎn)。(4）上圖中所示的生物技術(shù)整體被稱(chēng)為_(kāi)_＿＿_(dá)_＿＿_(dá)_____＿_(dá)____，其中還包括的具體生物技術(shù)有＿_(dá)___＿_(dá)____＿＿_(dá)＿＿等。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功,說(shuō)明了__＿_(dá)____＿_(dá)__＿＿_(dá)_具有全能性。35、科學(xué)家已分離出H7N9病毒(一種ＲNA病毒）。某制藥廠根據(jù)下面流程圖生產(chǎn)預(yù)防和治療甲流的抗體，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題：(1）若Ａ細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自感染病毒的人體內(nèi)的___＿_(dá)___細(xì)胞，促進(jìn)d過(guò)程的常用誘導(dǎo)劑是_＿_(dá)_＿_(dá)＿＿_(dá)__＿_(dá)______＿＿_(dá)＿＿。(2）假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成_＿＿_(dá)_____種類(lèi)型的Ｃ細(xì)胞，因此需要經(jīng)過(guò)篩選，選出_＿_(dá)_______＿_(dá)＿_(dá)___＿_(dá)_＿_(dá)＿_(dá)__＿_(dá)＿_(dá)＿_(dá)_____＿_(dá)_＿_(dá)__＿_(dá)____＿＿_(dá)__(填特點(diǎn)）的D細(xì)胞用于培養(yǎng).D細(xì)胞的名稱(chēng)是_＿＿＿_(dá)＿_(dá)_＿_(dá)____＿_(dá)__＿_(dá)。（３）由細(xì)胞C到細(xì)胞D的兩次篩選，先是用___＿_(dá)_＿＿_(dá)___＿_(dá)___篩選出特定細(xì)胞后，再經(jīng)過(guò)_____＿_(dá)__＿＿＿＿_(dá)_＿和＿_(dá)__＿_(dá)＿_(dá)__＿_(dá)_＿_(dá)___就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞D.基因工程與細(xì)胞工程練習(xí)題題號(hào)123456７８９10答案DCDBＡCＣDＤＢ題號(hào)１１1213１41５1617１８1920答案ＣCＢＣDBCＤAC題號(hào)21２22３2425２６2728293０答案DABＡADDBＤC31、答案：（1)目的基因限制酶DＮA連接酶動(dòng)植物病毒和λ噬菌體的衍生物(2）植物組織培養(yǎng)受精卵顯微注射法鈣離子感受態(tài)32、答案（1)4(2）２(3)DNＡ連接（4)磷酸二酯鍵（５)T－ＤNA（可移動(dòng)的DNA)染色體DNA(６）基因槍花粉管通道33、答案:(1）植物組織培養(yǎng)全能性（2）植物激素?zé)o菌(3）聚乙二醇（PEG)細(xì)胞膜的流動(dòng)性(4）脫分化再分化３4、答案：(1)胰蛋白（或膠原蛋白）（2）MⅡ中（或減Ⅱ中)(3)細(xì)胞貼壁接觸抑制(４)核移植(或體細(xì)胞核移植)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（或胚胎移植也可）動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核３5、答案：（1)B淋巴聚乙二醇（PEG）（滅活的病毒）(２）3既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體雜交瘤細(xì)胞（雜交細(xì)胞）（3）特定的選擇性培養(yǎng)基克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)作業(yè)一:一、名詞解釋?zhuān)?、基因:是遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ),是ＤＮA(脫氧核糖核酸)分子上具有遺傳信息的特定核苷酸序列的總稱(chēng)，是具有遺傳效應(yīng)的DＮA分子片段。2、基因組該指單倍體細(xì)胞中包括編碼序列和非編碼序列在內(nèi)的全部DNA分子3、操縱子：原核生物的幾個(gè)功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因往往排列在一起,轉(zhuǎn)錄生成一個(gè)ｍRNA，然后分別翻譯成幾種不同的蛋白質(zhì)。這些蛋白可能是催化某一代謝過(guò)程的酶，或共同完成某種功能.這些結(jié)構(gòu)基因與其上游的啟動(dòng)子，操縱基因共同構(gòu)成轉(zhuǎn)錄單位，稱(chēng)操縱子。4、啟動(dòng)子：是ＲNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)周?chē)囊唤M轉(zhuǎn)錄控制組件，包括至少一個(gè)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)。在真核基因中增強(qiáng)子和啟動(dòng)子常交錯(cuò)覆蓋或連續(xù)。有時(shí)，將結(jié)構(gòu)密切聯(lián)系而無(wú)法區(qū)分的啟動(dòng)子、增強(qiáng)子樣結(jié)構(gòu)統(tǒng)稱(chēng)啟動(dòng)子.5、增強(qiáng)子：是一種能夠提高轉(zhuǎn)錄效率的順式調(diào)控元件,最早是在ＳＶ40病毒中發(fā)現(xiàn)的長(zhǎng)約20０ｂｐ的一段ＤNA，可使旁側(cè)的基因轉(zhuǎn)錄提高1０0倍，其后在多種真核生物，甚至在原核生物中都發(fā)現(xiàn)了增強(qiáng)子。增強(qiáng)子通常占1０0～２00bｐ長(zhǎng)度，也和啟動(dòng)子一樣由若干組件構(gòu)成，基本核心組件常為8～１2bp，可以單拷貝或多拷貝串連形式存在.6、基因表達(dá)：是指細(xì)胞在生命過(guò)程中,把儲(chǔ)存在DNA順序中遺傳信息經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯,轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子。二、簡(jiǎn)答題１、說(shuō)明限制性?xún)?nèi)切核酸酶的命名原則要點(diǎn)。答：限制性?xún)?nèi)切核酸酶采用三字母的命名原則，即屬名+種名＋株名的各一個(gè)首字母，再加上序號(hào)。基本原則:3—4個(gè)字母組成，方式是:屬名＋種名+株名+序號(hào);首字母:取屬名的第一個(gè)字母,且斜體大寫(xiě);第二字母：取種名的第一個(gè)字母，斜體小寫(xiě)；第三字母：（1)取種名的第二個(gè)字母,斜體小寫(xiě);（２)若種名有詞頭，且已命名過(guò)限制酶,則取詞頭后的第一字母代替.第四字母：若有株名,株名則作為第四字母，是否大小寫(xiě)，根據(jù)原來(lái)的情況而定，但用正體。順序號(hào):若在同一菌株中分離了幾種限制酶,則按先后順序冠以I,Ⅱ,Ⅲ，…等,用正體．2、什么是限制性?xún)?nèi)切核酸酶的星號(hào)活性？受哪些因素影向？答:Ⅱ類(lèi)限制酶雖然識(shí)別和切割的序列都具有特異性，但是這種特異性受特定條件的限制,即在一定環(huán)境條件下表現(xiàn)出來(lái)的特異性。條件的改變，限制酶的特異性就會(huì)松動(dòng)，識(shí)別的序列和切割都有一些改變，改變后的活性通常稱(chēng)第二活性，而將這種因條件的改變會(huì)出現(xiàn)第二活性的酶的右上角加一個(gè)星號(hào)表示,因此第二活性又稱(chēng)為星號(hào)活性。

?

概括起來(lái)，誘發(fā)星活性的因素有如下幾種:

(1）高甘油含量（>5％，

v／ｖ)；

（2)限制性?xún)?nèi)切核酸酶用量過(guò)高(〉１00U/ｕgDＮA）；

(３)低離子強(qiáng)度（＜25

mmoｌ/L)；?（4)高pH（8.0以上)；（5)含有有機(jī)溶劑，如DMSO,乙醇等;?（6)有非Mg2+的二價(jià)陽(yáng)離子存在(如Mn2＋，Cu2+，C02+,Ｚn２+等）。3、影響DNA連接酶催化連接反應(yīng)的因素有哪些？答:（1）DNA的純度（2）DNＡ甲基化的程度（３)酶切消化反應(yīng)的溫度（4)DNA的分子結(jié)構(gòu)(5)核酸內(nèi)切限制酶的緩沖液4、什么是Kｌenow酶？有哪些活性?在基因工程中有什么作用?答:Klenow酶是19７4年Klenoｗ用枯草桿菌蛋白酶水解DＮA聚合酶I，得到兩個(gè)片段,其中大片段的分子量為75kDa，它具有5’-3＇聚合酶和3'—5'外切核酸酶的活性，小片段具有5'—3'外切核酸酶活性。由于大片段失去了DNＡ聚合酶Ｉ中會(huì)降解5’引物的５’—３’外切核酸酶的活性，所以在基因工程中更有用。Kｌeｎｏｗ酶主要有下列用途：(1）修復(fù)反應(yīng)，制備平末端可用Klｅnow酶修復(fù)限制性?xún)?nèi)切核酸酶或其他方法產(chǎn)生的5’或3＇突出末端，制備平末端,這樣可以使原來(lái)具有不相容的黏性末端的DNA片段通過(guò)平末端重組.如在反應(yīng)系統(tǒng)中加入放射性同位素標(biāo)記的脫氧核苷酸，用這種末端填補(bǔ)的方法可以制備3＇末端標(biāo)記的探針。用Klenow酶修復(fù)5’突出末端的反應(yīng)主要是利用了Klenow酶的DＮＡ聚合酶活性，是填補(bǔ)反應(yīng);而修復(fù)３’突出末端則是用Ｋleｎow酶的3＇－5'外切核酸酶的活性,是切割反應(yīng)。用Klenow酶的切割反應(yīng)來(lái)修復(fù)３’突出末端是不理想的,改用T4DＮA聚合酶或其他的酶是更好的選擇。(2)標(biāo)記DＮA3＇突出末端（protｒｕdinｇｅｎd)該反應(yīng)分兩步進(jìn)行:先用3'－５'的外切核酸酶活性除去３’突出末端，產(chǎn)生3＇隱含末端,然后在高濃度的標(biāo)記底物（—32ｐ－ｄN(xiāo)TP）存在下，使降解（3'—5'）作用與聚合（５'-3＇）作用達(dá)到平衡。這種反應(yīng)也叫交換或取代反應(yīng)(exchaｎge／ｒeplaｃemenｔｒｅactioｎ)。不過(guò)這一反應(yīng)用Ｔ4DNA聚合酶的效果更好,因它的３＇—5'外切核酸酶活性較強(qiáng)。（3）其他的一些用途：包括用雙脫氧末端終止法進(jìn)行DNA序列分析、用于cＤＮA第二鏈的合成、在定點(diǎn)突變中用于合成第二鏈、用引物延伸法（primｅrｅxtenｓiｏn)制備單鏈DNA探針等.5、細(xì)菌堿性磷酸酯酶和小牛腸堿性磷酸酯酶有什么不同？在基因工程中有什么用途?答：主要差別是:ＣＩＰ６8°C時(shí)失活，而B(niǎo)AＰ（1)dsＤＮＡ的5'端脫磷酸，防止ＤＮA的自身連接。但是用ＣIP處理后,最好將CIP除去后，再進(jìn)行連接反應(yīng)。（2）DNＡ和RNA脫磷酸,然后用于多核苷酸激酶進(jìn)行末端標(biāo)記。三、論述題１、如果知道某一基因的功能及其相應(yīng)的蛋白質(zhì)的氨基酸序列組成，可以通過(guò)何種方法克隆該基因?答:可以通過(guò)合成核苷酸探針或設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并PCＲ引物從cDNA文庫(kù)或基因組文庫(kù)中篩選.或者利用相應(yīng)的抗體從cＤNＡ表達(dá)文庫(kù)中篩選相應(yīng)的克隆。作業(yè)二：一、名詞解釋?zhuān)?、基因工程:在體外將外源基因進(jìn)行切割并與一定的載體連接,構(gòu)成重組ＤNA分子并導(dǎo)入相應(yīng)受體細(xì)胞，使外源基因在受體細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制、表達(dá),使目的基因大量擴(kuò)增或得到相應(yīng)基因的表達(dá)產(chǎn)物或進(jìn)行定向改造生物性狀。簡(jiǎn)單概括,就是將外源目的基因與載體重組后再進(jìn)入宿主細(xì)胞的過(guò)程.2、載體：能載帶微量物質(zhì)共同參與某種化學(xué)或物理過(guò)程的常量物質(zhì)，在基因工程重組DNA技術(shù)中將ＤNA片段（目的基因)轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的一種能自我復(fù)制的DＮA分子。三種最常用的載體是細(xì)菌質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒。３、轉(zhuǎn)化:指將質(zhì)?；蚱渌庠矗腘Ａ導(dǎo)入處于感受態(tài)的宿主菌，并使其獲得新的表型的過(guò)程。４、感染:利用噬菌體將外源ＤNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞的方法。５、轉(zhuǎn)導(dǎo)：由噬菌體將一個(gè)細(xì)胞的基因傳遞給另一細(xì)胞的過(guò)程。它是細(xì)菌之間傳遞遺傳物質(zhì)的方式之一。其具體含義是指一個(gè)細(xì)胞的DNA或RNA通過(guò)病毒載體的感染轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)胞中。６、轉(zhuǎn)染：指真核細(xì)胞主動(dòng)攝取或被動(dòng)導(dǎo)入外源DＮＡ片段而獲得新的表型的過(guò)程。常用的方法有電穿孔法,磷酸鈣共沉淀法,脂質(zhì)體融合法等。二、簡(jiǎn)答題1、YＡＣ載體具有什么樣的功能性DNＡ序列?為什么在克隆大片段時(shí)，YAC具有優(yōu)越性？答：YAC帶有天然染色體所有的功能元件,包括一個(gè)著絲粒，一個(gè)DNA復(fù)制起點(diǎn)，兩個(gè)端粒。ＹAC能夠容納長(zhǎng)達(dá)幾百kb的外源DNA，這是質(zhì)粒和黏粒辦不到的。大片段的插入更有可能包含完整的基因，在染色體步移中每次允許更大的步移距離,同時(shí)能夠減少完整基因組文庫(kù)所需的克隆數(shù)目。2、列舉質(zhì)粒載體必須具備的4個(gè)基本特性。答:(1）獨(dú)立復(fù)制；(2)有選擇標(biāo)記;（3)有獨(dú)特的酶切位點(diǎn);(4）能轉(zhuǎn)化但不擴(kuò)散。3、PＣR的基本原理是什么？用PCR擴(kuò)增某一基因，必須預(yù)先得到什么樣的信息？答:）DＮＡ半保留復(fù)制的原理,在體外進(jìn)行DNA的變性、復(fù)性和引物延伸.（2）至少要預(yù)先知道足夠合成一對(duì)引物的靶DNA序列.4、cＤNＡ克隆與基因組克隆有何不同？答：基因組克隆包含所有不在cDNA中出現(xiàn)的內(nèi)含子.5、怎樣將一個(gè)平末端DＮＡ片段插入到EcｏRＩ限制位點(diǎn)中去?答:化學(xué)合成一些長(zhǎng)為１0bp含有EcoRI識(shí)別位點(diǎn)的短的DNA片段,然后與待克隆片段兩端連接起來(lái)，如果用EcoＲI切割這種連接片段，就會(huì)產(chǎn)生ＥcoRI的單鏈末端。這種片段就可以插入到任何EcoRI的限制性?xún)?nèi)切酶位點(diǎn)中。三、論述題什么是Ｗesterｎ印跡?它與Ｓouthern印跡有什么不同答:Weｓtｅrn印跡是將蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離后從凝膠中轉(zhuǎn)移到固相支持物上，然后用特異性的抗體進(jìn)行檢測(cè)。它與Soｕｔhｅrn的不同在于探針的性質(zhì)不同，在Ｗestern印跡中使用的探針是抗體（蛋白質(zhì))。作業(yè)三:一、名詞解釋1、DＮA變性:DNA分子由穩(wěn)定的雙螺旋結(jié)構(gòu)松解為無(wú)規(guī)則線性結(jié)構(gòu)的現(xiàn)象。變性時(shí)維持雙螺旋穩(wěn)定性的氫鍵斷裂，堿基間的堆積力遭到破壞，但不涉及到其一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變。2、ＤNA復(fù)性：變性ＤＮA在適當(dāng)條件下,二條互補(bǔ)鏈全部或部分恢復(fù)到天然雙螺旋結(jié)構(gòu)的現(xiàn)象，它是變性的一種逆轉(zhuǎn)過(guò)程。3、退火:指模板雙鏈DNA經(jīng)熱變性,螺旋解開(kāi)成單鏈后，通過(guò)緩慢冷卻到55℃左右,使引物（即具有互補(bǔ)堿基的ＲＮA片段)與該模板DNA單鏈重新配對(duì)，形成新的雙鏈分子的過(guò)程.4、ＤNA芯片：是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接將大量的DNA探針以顯微打印