2010版藥典

生化藥總結(jié)報(bào)告徐康森第一部分:生化藥的基本概況第二部分:2010年版中國藥典生化藥歸總第一部分：生化藥的基本概況1、生化藥的定義2、生化藥的發(fā)展1、生化藥的定義生化藥物是我國醫(yī)藥產(chǎn)品的一個(gè)大類。生化藥主要從動、植物及微生物發(fā)酵提取的、化學(xué)合成、生物-化學(xué)半合成或用現(xiàn)代生物重組技術(shù)制得的一類藥品尤其對于嚴(yán)重危害人類健康和生命的疾病，如心腦血管病、癌癥、糖尿病和病毒疾患等有其獨(dú)特的治療效果。深受人民的歡迎和重視。2、生化藥的發(fā)展歷程時(shí)間發(fā)展階段品種標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)值1950年-1978年初具規(guī)模1978年-1995年準(zhǔn)備發(fā)展品種100個(gè)左右產(chǎn)值20億1995年-2005年初步發(fā)展品種350個(gè)左右產(chǎn)值200億2005年-2009年發(fā)展品種400個(gè)左右產(chǎn)值500-600億醫(yī)藥行業(yè)的發(fā)展?fàn)顩r增長率2005年2006年2007年2008年2009年醫(yī)藥行業(yè)25%18%23%27%25%化學(xué)原料31%5%17%22%15%化藥制劑17%23%22%32%30%中藥飲片-18%28%43%36%35%中成藥35%19%19%23%18%生物生化藥11%29%28%42%40%2009年1月-12月醫(yī)藥制藥業(yè)總值單位：億元名稱總產(chǎn)值（當(dāng)年價(jià)）本月同期增長本月累計(jì)同期增長醫(yī)藥制造業(yè)982.9027.93%9403.0520.22%化學(xué)藥品制造487.3222.94%4831.8316.21%中成藥制造237.2434.53%2111.6822.38%生物生化制品制造94.4640.17%918.7127.88%2009年1月-12月醫(yī)藥制藥業(yè)工業(yè)銷售產(chǎn)值單位：億元名稱工業(yè)銷售產(chǎn)值（當(dāng)年價(jià)）本月同期增長本月累計(jì)同期增長醫(yī)藥制造業(yè)946.1128.58%8965.8921.19%化學(xué)藥品制造460.5823.45%4596.0916.86%中成藥制造225.5232.91%1997.9723.95%生物生化制品制造97.1846.02%887.1529.05%2009年1月-12月醫(yī)藥制藥業(yè)出口交貨值單位：億元名稱出口交貨值本月同期增長本月累計(jì)同期增長醫(yī)藥制造業(yè)78.9334.53%755.766.84%化學(xué)藥品制造48.5828.99%491.920.54%中成藥制造6.3193.50%47.8123.10%生物生化制品制造13.4158.44%112.9435.74%2009年1月-12月醫(yī)藥制藥業(yè)新產(chǎn)品產(chǎn)值單位：億元名稱新產(chǎn)品產(chǎn)值（當(dāng)年價(jià)）本月同期增長本月累計(jì)同期增長醫(yī)藥制造業(yè)145.9950.80%1313.7428.38%化學(xué)藥品制造85.8446.55%793.1325.30%中成藥制造32.9454.76%279.2732.82%生物生化制品制造13.0446.75%121.0718.79%第二部分分：2010年年版中國國藥典生生化化藥藥歸總為貫徹黨黨的十七七大精神神，落實(shí)實(shí)科學(xué)發(fā)發(fā)展觀，，建國以以來的第第九版藥藥典——《中國藥典典》2010年版，已完完成增修訂訂任務(wù)，目目前已經(jīng)正正式出版發(fā)發(fā)行。宗旨：提高藥典質(zhì)質(zhì)量，應(yīng)用高新技技術(shù)，解決安全隱隱患，趕超國際水水平。本屆藥典生生化藥修訂訂工作的特特點(diǎn)時(shí)間短任務(wù)重難度大要求高《中國藥典》2010版生化藥標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品種種數(shù)匯總類別2005版標(biāo)準(zhǔn)（品種）2010版標(biāo)準(zhǔn)（品種）增加標(biāo)準(zhǔn)（品種）標(biāo)準(zhǔn)（品種）增長%刪除氨基酸及其衍生物44（23）53（26）9（3）20.5%（13%）核酸及其衍生物44（10）51（11）7（1）15.9%（10%）酶與輔酶28（11）34（14）6（3）21.4%（27%）多肽、蛋白26（11）30（13）8（3）30.8%（27%）4多糖15（5）19（6）4（1）26.6%（20%）脂2（1）4（2）2（1）100.0%（100.0%）1總數(shù)159（61）191（72）36（12）22.6%（19.6%）5范圍特點(diǎn)工藝（制劑）質(zhì)標(biāo)增修訂內(nèi)容氨基酸及其衍生物人生命的基本組成單位，人健康的基本營養(yǎng)成分，救死扶傷十分重要。85年200萬瓶08年2億萬瓶合成、發(fā)酵、提取、酶轉(zhuǎn)化固：片、膠囊、顆粒、散、口含液：口服液、滴眼液、注射、沖洗液TLC其它aa檢查

有關(guān)物質(zhì)滲透壓

紅外圖譜*可見異物

旋光度：系數(shù)法計(jì)算*抑菌劑

含量測定：非水滴定、比色、*微生物限度

HPLC*細(xì)內(nèi)核酸及其衍生物生命的基本物質(zhì)、臨床治病毒、心血管、腦損傷、缺氧等合成、發(fā)酵固：片、含、膠、顆、凍干液：口服、注射、滴液（眼、鼻）Nacl注射、葡萄糖注射

有關(guān)物質(zhì)

含量均勻度異常毒性

TLC滲透壓

含量測定殘留溶劑

熱源修訂為細(xì)內(nèi)溶液顏色和澄清

說明書增加用法、用量、注射途徑、注速酶與輔酶參與一切代謝、生物體內(nèi)催化劑、往往有生物活性大部分從生物體組織提取、少部分發(fā)酵法固：片、膠囊、顆粒、軟膠囊、凍干、粉液：注射液、溶液溶液的顏色

無菌高分子物質(zhì)

過敏有關(guān)物質(zhì)

降壓物質(zhì)異常毒性細(xì)菌內(nèi)毒素微生物限度多肽蛋白aa殘基組成肽鏈，由肽鏈組成生命的基本物質(zhì)蛋白是國內(nèi)外新崛起一類新品種

3-32aa很關(guān)注大部分合成，少部分提取、重組產(chǎn)品歸發(fā)酵工藝固：注射用液：注射液溶液高分子蛋白

異毒有關(guān)物質(zhì)

細(xì)內(nèi)相關(guān)蛋白

微生物限度含量：HPLC過敏金屬離子：吸收光譜多糖、脂機(jī)體代謝中提供能源、碳源，亦是細(xì)胞結(jié)構(gòu)主要組成部分提取、發(fā)酵固：片、膠囊、乳膏、軟膠囊、注射用液：注射液、Nacl、葡萄糖注射液金屬離子：吸收光譜

有關(guān)物質(zhì)：HPLC比活：

含測：HPLC、GC比旋度

過氧化值有機(jī)殘留

*甲氧基胺值細(xì)內(nèi)

不皂化值一、氨基酸酸及其衍生生物類1、基本介紹紹該類品種是是組成蛋白白質(zhì)的基本本單位。組組成人體蛋蛋白質(zhì)的氨氨基酸只有有20種左右，均均為L-a-氨基酸（除除甘氨酸外外）。因?yàn)闉槭侨祟惤〗】档幕颈緺I養(yǎng)成分分，故在救救死扶傷中中扮演十分分重要角色色。臨床上除單單方使用aa外，其還是是復(fù)方aa注射液的主主要組成成成分。臨床床上常用的的氨基酸注注射液有3aa、6aa、9aa、11aa、15aa、17aa、18aa（I-II）等。從1985年銷售100萬瓶，到2008年銷售量已已經(jīng)達(dá)到2億萬瓶，市市場潛力很很大，前景景美好。2、2010年版中國藥藥典收載的的氨基酸及及其衍生物物類品種?；撬峒捌淦渲苿ㄆ⑸?、顆顆粒、膠囊囊、滴眼液液）；鹽酸酸精氨酸及及其制劑（（片、注射射液）；色色氨酸；谷谷氨酸（鈉鈉）及其制制劑（片、、注射液、、鉀注射液液）；組氨氨酸及鹽酸酸組氨酸；；脯氨酸；；精氨酸；；酪氨酸；；絲氨酸；；異亮氨酸酸；亮氨酸酸；賴氨酸酸（鹽酸、、醋酸、芐芐達(dá)）；纈纈氨酸；門門冬酰胺（（片）、甘甘氨酸（沖沖洗液）、、胱氨酸（（片、鹽酸酸）、丙氨氨酸、甲硫硫氨酸（片片）、蘇氨氨酸、苯丙丙氨酸、谷谷丙甘氨酸酸膠囊、乙乙酰半胱氨氨酸（滴眼眼液、顆粒粒）、乙酰酰谷氨酸（（注射液））、羧甲司司坦（口服服溶液、片片、顆粒））等53個(gè)個(gè)品種。3、收載的的氨基酸及及其衍生物物類藥品基基本特點(diǎn)點(diǎn)幾乎包含了了國內(nèi)外所所有氨基酸酸類產(chǎn)品方便臨床使使用，該類類產(chǎn)品呈現(xiàn)現(xiàn)制劑系列列化特點(diǎn)，，如固體制制劑包括：：片、膠囊囊、顆粒、、散、口含含片；液體體制劑有：：口服溶液液、滴眼液液、注射液液等4、品種增增修訂情況況增訂、修訂訂和統(tǒng)一有有關(guān)檢查項(xiàng)項(xiàng)目內(nèi)容、、使得該類類標(biāo)準(zhǔn)基本本與國外同同類標(biāo)準(zhǔn)接接軌。增訂情況修訂情況TLC法檢查其他氨基酸增加方法學(xué)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)滲透壓可見異物抑菌劑（滴眼液、注射液）微生物限度細(xì)菌內(nèi)毒素增加限度要求、干擾試驗(yàn)等有關(guān)物質(zhì)增加靈敏度要求、最小檢測量熱原修訂為細(xì)菌內(nèi)毒素溶液的顏色紅外光譜旋光度用系數(shù)法計(jì)算含量測定非水滴定比色法

HPLC法二、核酸及及其衍生物物類1、簡介：：核酸是生命命的最基本本物質(zhì)，存存在于一切切生物細(xì)胞胞內(nèi)，DNA只要要存存在在細(xì)細(xì)胞胞的的染染色色體體中中，，RNA主要要存存在在細(xì)細(xì)胞胞的的微微粒粒體體中中。。2、、2010年年版版藥藥典典收收載載的的核核酸酸及及其其衍衍生生物物類類藥藥品品的的品品種種三磷磷酸酸腺腺苷苷二二鈉鈉、、注注射射用用ATP（（注射射液液））、、胞胞磷磷膽膽堿堿鈉鈉（（注注射射用用、、注注射射液液））、、肌肌苷苷（（口口服服溶溶液液、、片片、、注注射射液液、、膠膠囊囊、、注注射射用用））、、環(huán)環(huán)磷磷腺腺苷苷（（注注射射用用））、、鹽鹽酸酸阿阿糖糖胞胞苷苷（（注注射射用用））、、腺腺苷苷鈷鈷胺胺（（片片））、、更更昔昔洛洛韋韋（（注注射射液液、、注注射射用用））、、利利巴巴韋韋林林原原料料及及其其制制劑劑、、阿阿昔昔洛洛韋韋原原料料及及其其制制劑劑、、泛泛昔昔洛洛韋韋（（片片、、膠膠囊囊））、、鹽鹽酸酸伐伐昔昔洛洛韋韋（（片片、、膠膠囊囊））等等51個(gè)個(gè)品品種種。。3、、收收載載的的核核酸酸及及其其衍衍生生物物類類藥藥品品品品種種的的基基本本特特點(diǎn)點(diǎn)臨床床上上治治療療病病毒毒疾疾患患為為主主，，部部分分治治療療心心血血管管及及腦腦損損傷傷、、缺缺氧氧等等疾疾病病。。如早早期期阿阿糖糖胞胞苷苷酸酸是是治治療療威威脅脅人人類類健健康康的的病病毒毒疾疾患患的的首首創(chuàng)創(chuàng)藥藥物物；；第第一一代代核核苷苷酸酸類類藥藥物物利利巴巴韋韋林林，，第第二二代代阿阿昔昔洛洛韋韋、、更更昔昔洛洛韋韋直直至至泛泛昔昔洛洛韋韋等等。。該類類產(chǎn)產(chǎn)品品大大部部分分是是微微生生物物發(fā)發(fā)酵酵或或半半合合成成的的，，化化學(xué)學(xué)結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)清清楚楚、、成成分分明明白白、、質(zhì)質(zhì)量量標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)較較完完善善。。2010年版版藥藥典典收收載載的的核核酸酸類類藥藥物物品品種種較較為為齊齊全全，，尤尤其其制制劑劑，，劑劑型型完完整整，，低低的的2-3種，，多多的的7-8種。。如如利利巴巴韋韋林林有有11種：：固固體體制制劑劑有有4種，，片片、、口口含含片片、、膠膠囊囊、、顆顆粒粒；；液液體體制制劑劑有有7種，，滴滴眼眼液液、、滴滴鼻鼻液液、、口口服服溶溶液液、、注注射射劑劑、、氯氯化化鈉鈉注注射射液液、、葡葡萄萄糖糖注注射射液液、、注注射射用用。。4、品品種種增增修修訂訂情情況況該類類藥藥品品大大部部分分標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)項(xiàng)項(xiàng)目目比比較較完完善善，，大大部部分分未未增增訂訂和和修修訂訂，，少少部部分分進(jìn)進(jìn)行行了了增增修修訂訂。。增訂情況修訂情況有關(guān)物質(zhì)異常毒性滲透壓殘留溶劑含量均勻度熱原修訂為細(xì)菌內(nèi)毒素含量測定方法TLC法分離度要求溶液的澄清度與顏色用法、用量注射途徑、注射速度Chp2010版版生生化化藥藥標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)實(shí)實(shí)例例介介紹紹鹽酸酸阿阿糖糖胞胞苷苷（上上海海所所起起草草，，標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)已已全全面面達(dá)達(dá)到到或或超超過過國國外外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)，，有有代代表表意意義義值值得得借借鑒鑒））修訂訂了了含含量量測測定定為為HPLC法，，限限度度達(dá)達(dá)到到98%-102%增訂訂項(xiàng)項(xiàng)目目共共6項(xiàng)項(xiàng)：：氯氯含含量量（（因因鹽鹽酸酸鹽鹽））、、溶溶液液的的澄澄清清度度與與顏顏色色、、有有關(guān)關(guān)物物質(zhì)質(zhì)、、熾熾灼灼殘殘?jiān)?、重重金金屬屬、、殘殘留留溶溶劑劑等等。。特別別是是其其中中的的氯氯含含量量測測定定、、有有關(guān)關(guān)物物質(zhì)質(zhì)檢檢查查、、殘留留溶溶劑劑檢檢查查等等很很重重要要氯含含量量：：電電位位滴滴定定法法測測定定，，回回收收率率100.4%，，RSD=0.8%（（n=6）；；有關(guān)關(guān)物物質(zhì)質(zhì)：：對對阿阿糖糖腺腺苷苷、、尿尿嘧嘧啶啶、、尿尿苷苷、、阿阿糖糖尿尿苷苷等等進(jìn)進(jìn)行行考考察察，，采采用用2種C18色譜柱柱進(jìn)行行系統(tǒng)統(tǒng)適用用性考考察，，得出出相應(yīng)應(yīng)結(jié)果果。經(jīng)經(jīng)天津津所和和廣東東所復(fù)復(fù)核，，結(jié)果果一致致；殘留溶溶劑：：對5個(gè)企業(yè)業(yè)的8種溶溶劑進(jìn)進(jìn)行考考察（（聚乙乙二醇醇毛細(xì)細(xì)管柱柱，進(jìn)進(jìn)行系系統(tǒng)適適用性性、回回收率率和最最低檢檢出限限進(jìn)行行考察察）。。經(jīng)天天津所所和廣廣東所所復(fù)核核，結(jié)結(jié)果一一致。。鹽酸阿阿糖胞胞苷質(zhì)質(zhì)量標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)對對比2010版

2005版

BP2007

USP30

JP15

鹽酸阿糖胞苷

同左

阿糖胞苷

阿糖胞苷

阿糖胞苷

含量限度

無水干燥98.0%～102.0%

97.0%～103.0%

99.0%～100.5%98.0%～102.0%

98.5%～101.0%性狀

白色、類白色細(xì)小針狀結(jié)晶或結(jié)晶粉末，水易溶，乙醇略溶，乙醚幾乎不溶

同左

白色或近白結(jié)晶性粉末

同左

白色晶體或晶粉，水易溶，乙醇略溶

熔點(diǎn)

189～198℃

同左

215℃

∕

214℃

比旋度

127°→+133°

同左

154°→+160°

同左

同左

鑒別

⑴紫外-可見：280nm最大吸收，241nm最小吸收;⑵含測：與對照液主峰RT一致;⑶紅外圖譜;⑷溶液呈氯化物鑒別反應(yīng)

同左

154°→+160°

⑴紫外-可見:230-350檢測，281nm最大吸收；特殊吸收最大值在540nm～570nm;⑵紅外圖譜;⑶相關(guān)物檢查：與對照品斑點(diǎn)一致

⑴紅外圖譜⑵含測：與對照品主峰RT一致

⑴紅外圖譜⑵紫外-可見與對照在相同nm有相同吸收

澄清度與顏色

1號＜顏色＞2號1.2g→10ml澄清無色

∕

1g→10ml澄清且不得比對照溶液Y5顏色深

∕

0.2g→20ml，澄清無色

PH

∕

∕

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0.20g/20ml水溶液，6.5～8.0三、酶酶及其其輔酶酶類1、簡簡介：：酶是生生物體體內(nèi)的的催化化劑，，參與與一切切代謝謝過程程。酶酶的組組成為為單純純蛋白白質(zhì)和和結(jié)合合蛋白白質(zhì)。。后者者為酶酶蛋白白，非非蛋白白部分分為輔輔酶或或輔基基。酶酶又可可以按按照各各種催催化反反應(yīng)分分類，，如氧氧化還還原酶酶、轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移酶酶、水水解酶酶、異異構(gòu)酶酶、合合成酶酶等。。2、2010年年版藥藥典收收載的的酶及及輔酶酶類藥藥品品品種種胰酶（（腸溶溶片、、腸溶溶膠囊囊）、、胰蛋蛋白酶酶（注注射用用）、、糜蛋蛋白酶酶（注注射用用）、、胃蛋蛋白酶酶（片片、顆顆粒、、含糖糖胃蛋蛋白酶酶）、、玻璃璃酸酶酶（注注射用用）、、抑肽肽酶（（注射射用））、凝凝血酶酶凍干干粉、、尿激激酶（（注射射用））、門門冬酰酰胺酶酶Ⅰ、、Ⅱ*（注注射用用）、、細(xì)胞胞色素素C（注射用用、注注射液液）、、烏司司他丁丁*（（溶液液、注注射用用）、、輔酶酶Q10（片、注注射液液、膠膠囊、、軟膠膠囊））、激激肽原原酶*等34個(gè)個(gè)品種種。*為新新增品品種3、收收載的的酶及及輔酶酶類品品種的的基本本特點(diǎn)點(diǎn)國外藥藥典收收載的的品種種，本本次藥藥典大大部分分均已已收入入。大部分分是生生物體體某些些組織織中提提取、、純化化和精精制的的；另另一部部分是是微生生物經(jīng)經(jīng)發(fā)酵酵、破破壁后后再從從發(fā)酵酵液中中提取取、純純化和和精制制而成成的。。酶是蛋蛋白質(zhì)質(zhì)，具具有生生物活活性，，通常常用于于提純純和純純化蛋蛋白質(zhì)質(zhì)的方方法都都適用用于酶酶。質(zhì)量指指標(biāo)的的制定定中注注意酶酶的總總活性性和比比活力力純度度的關(guān)關(guān)系。。新增訂訂的藥藥品品品種僅僅有3個(gè)。4、增增修訂訂情況況溶液的的顏色色高分子子物質(zhì)質(zhì)檢查查有關(guān)物物質(zhì)異常毒毒性細(xì)菌內(nèi)內(nèi)毒素素微生物物限度度無菌過敏Chp2010版生化化藥標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)實(shí)例介介紹抑肽酶酶該品種種由上上海藥藥檢所所起草草Chp2005、Bp2008/Ep6.0、USP32版均收收載，，本版繼繼續(xù)收收載，，但依依據(jù)USP作了三三個(gè)方方面的的修訂訂。1.檢查去去丙aa-去甘aa-抑肽酶酶和有有關(guān)物物質(zhì)參照USP32采用附附錄新新技術(shù)術(shù)毛細(xì)細(xì)管電電法：：這是是我國國第一一個(gè)用用該法法上藥藥典的品種種。柱：石石英毛毛細(xì)管管分離離柱毛細(xì)管管溫度度：30℃電極液液：磷磷酸二二氫鉀鉀溶液液分離壓壓：12KV波長：：214nm結(jié)果：：去丙丙aa抑肽酶酶~抑肽酶酶RT0.99（上海海所0.989）去丙aa-去甘aa-抑肽酶酶~抑肽酶酶RT0.98（上海海所0.978）（兩相相關(guān)物物分離離度1.40，去丙丙aa-抑肽酶酶~抑肽酶分離離度1.24、抑肽酶拖拖尾因子1.8）對照品圖供試品圖Chp2010版生化藥標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)例介介紹2.檢查N-焦谷氨酰-抑肽酶和有有關(guān)物（參參照USP32）色譜柱：TSK-GELIC-Cation-SW柱溫：40℃流動相：磷磷酸二氫鉀鉀緩沖液流速：1.0ml/min梯度洗程序序結(jié)果：N-焦谷氨酰-抑肽酶~抑肽酶RT0.9（分離度2.2，抑肽酶拖拖尾因子0.92，最低檢出出量：82ng）對照品圖供試品圖Chp2010版生化藥標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)例介介紹3.檢查高分子子蛋白（USP32）關(guān)鍵是采用用三根串聯(lián)聯(lián)Gel色譜柱（TSK-G4000SWXL柱）柱溫35℃，流速1.0ml/min,二聚體相對對RT0.9，分離度1.4，拖尾因子子0.91。以上用新技技術(shù)的三項(xiàng)項(xiàng)檢查，有有效控制抑抑肽酶產(chǎn)品品的純度，，使產(chǎn)品質(zhì)質(zhì)量有一個(gè)個(gè)飛躍，使使標(biāo)準(zhǔn)的制制定達(dá)到或或超過國外外標(biāo)準(zhǔn)。對照品圖供試品圖項(xiàng)目ChP2010版ChP2005版BP2008/EP6.0USP32性狀同右白色、微黃幾乎白色粉，易濕／溶解性同右易溶于水、0.9%NaCl，不溶于乙醇、丙酮、乙醚溶于水溶液不溶于有機(jī)溶劑／鑒別（1）胰蛋白酶能使底物顯紫紅色，本品不能；（2）HPLC（同USP31）同左（1）（1）TLC法（2）抑制抑肽酶活性（1）TLC法（2）HPLC法pH同右5mg/ml：5.0～7.0／／溶液澄清度同右2mg/ml：溶液應(yīng)澄清／／吸光度同右3U/ml：277nm最大吸收度≤0.8同左同左干燥失重／／0.1g真空干燥≤6.0%0.1g真空3h≤6.0%水分≤6.0%≤6.0%／／去丙aa–抑肽酶和去丙aa-去甘aa–抑肽酶同USP32／／毛細(xì)管電泳法，分別＜7.5%和8.0%N-焦谷氨酰-抑肽酶和有關(guān)物質(zhì)同USP32／／HPLC：已知＜1.0%，單個(gè)＜0.5%，未知總量＜1.0%高分子蛋白同USP32凝膠柱＜3.0%分子排阻，抑肽酶前不得有峰分子排阻＜1.0%細(xì)菌內(nèi)毒素／／≤0.14IU/抑肽酶同左熱原／15U/kg，應(yīng)符合同左同左異常毒性同右4U/ml，iv，應(yīng)符合同左同左降壓／1.5U/kg，應(yīng)符合／／效價(jià)同右酶底物法＞3.0U/mg同左同左抑肽酶國內(nèi)內(nèi)外質(zhì)量標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)比較四、多肽、、蛋白類1、簡介：：肽類是氨基基酸相互結(jié)結(jié)合成多肽肽鏈。蛋白質(zhì)就是是由多個(gè)氨氨基酸殘基基組成的多多肽鏈。一一般以51個(gè)aa殘基，分子子量為5733的Insulin劃分，高于于此分子量量的稱為蛋蛋白，小于于的為肽類類。肽鍵(peptidebond)的形成2、2010年版藥藥典收載的的多肽及蛋蛋白類藥品品品種尿促性素、、注射用HMg、絨促性素、、注射用HCg、醋酸丙氨瑞瑞林、注射射用醋酸丙丙氨瑞林、、硫酸魚精精蛋白及其其注射液、、五肽胃泌泌素及其注注射液、縮縮宮素注射射液、鮭降降鈣素及其其注射液、、生長抑素素及其注射射用、甲狀狀腺素片、、醋酸奧曲曲肽（注射射液、注射射用）、胸胸腺法新（（注射用））、胰島素素（系列產(chǎn)產(chǎn)品）、重重組人生長長激素（注注射用）等等30個(gè)品種。3、收載多多肽及蛋白白類品種的的基本特點(diǎn)點(diǎn)本次藥典收收載的產(chǎn)品品中少部分分為臟器提提取的激素素、肽類。。安全性無無法保障的的品種如垂垂體后葉粉粉、注射液液；縮宮素素溶液；甲甲狀腺粉等等刪除。部分肽和小小分子蛋白白中的生物物活性、生生物鑒別由由化學(xué)測定定法代替。。本次藥典收收載的合成成肽類藥品品，純度較較高、質(zhì)量量優(yōu)良，大大部分質(zhì)量量標(biāo)準(zhǔn)與國國際接軌。。生物測定法法修訂情況況修訂類型品種名稱修訂內(nèi)容（修訂原因）刪除品種垂體后葉粉工藝粗糙；產(chǎn)品純度差、雜質(zhì)多、質(zhì)量低；安全沒有保障刪除品種垂體后葉注射液工藝粗糙；產(chǎn)品純度差、雜質(zhì)多、質(zhì)量低；安全沒有保障刪除品種縮宮素溶液工藝粗糙；產(chǎn)品純度差、雜質(zhì)多、質(zhì)量低；安全沒有保障刪除品種甲狀腺粉工藝粗糙；產(chǎn)品純度差、雜質(zhì)多、質(zhì)量低；安全沒有保障刪除部分生物測定胰島素豬胰島素注射液中性胰島素注射液精蛋白胰島素注射液刪除生物效價(jià)和兔血糖法，改用HPLC法測定，加限度試驗(yàn)（動物減半，隨機(jī)涉及生物統(tǒng)計(jì)，結(jié)果為等效）簡化效價(jià)測定為活性鑒別。刪除生物測定硫酸魚精蛋白*國外用化學(xué)滴定法替代生物測定刪除生物測定縮宮素注射液*國外已用HPLC法代替生物測定。國內(nèi)目前產(chǎn)品因雜質(zhì)多，大于30%，故未收載刪除生物測定肝素及其制劑*國外已用抗II和抗Xa（分光法）取代生物測定國內(nèi)尚待盡快改用分光法替代生物測定減少生物測定注射用重組人生長激素常規(guī)用HPLC法測定，同時(shí)一年進(jìn)行至少一次生物測定減少生物測定鮭降鈣素常規(guī)用HPLC法測定，同時(shí)一年進(jìn)行至少一次生物測定*暫未修訂訂4、增修訂情情況高分子蛋白白有關(guān)物質(zhì)相關(guān)蛋白含量測定定：HPLC金屬離子子：吸收收光譜細(xì)菌內(nèi)毒毒素異常毒性性微生物限限度過敏Chp2010版生化化藥標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)實(shí)例介介紹（一）生生長抑素素BP09；EP60有收載；；ChP和USP均未收載載浙江省所所參照各各國藥典典，進(jìn)口口標(biāo)準(zhǔn)等等進(jìn)行起起草。1、含量量限度：：同國外外使用HPLC法，C18柱，進(jìn)樣樣量少，，等度洗洗脫。2、鑒別別：TLC法，點(diǎn)樣樣量改成成10ul，Rf=0.25，展開劑改改為冰醋醋酸。3、有關(guān)關(guān)物質(zhì)：：無中間間體、粗粗品，故故進(jìn)行強(qiáng)強(qiáng)制降解解試驗(yàn)，，最低檢檢測限為為0.1ug4、氨基酸組組成：經(jīng)經(jīng)方法學(xué)學(xué)改進(jìn)采采用二硫硫代二丙丙酸先與與半胱氨氨酸結(jié)合合再水解解進(jìn)行測測定。5、醋酸酸：參照照國內(nèi)外外合成肽肽有關(guān)方方法，用用HPLC法進(jìn)行方方法學(xué)研研究。210nm檢測，梯梯度洗脫脫，線性性10-500ug/ml，回收率101.6%（（n=3）），檢測限2.5ng，定量限7.6ng。6、細(xì)菌內(nèi)毒毒素：方方法學(xué)研研究包括括限值與與熱原對對比，靈靈敏度、、干擾試試驗(yàn)、確確證試驗(yàn)驗(yàn)等。7、殘留留溶劑：：進(jìn)行了了乙腈、、甲醇、、乙醚、、三乙胺胺、二甲甲基甲酰酰胺進(jìn)行行測定Chp2010版生化藥藥標(biāo)準(zhǔn)實(shí)實(shí)例介紹紹（二）胰胰島素ChP2010版依據(jù)USP33、EP6.0標(biāo)準(zhǔn)，參參照2005版分分別別對對來來源源、、性性狀狀、、鑒鑒別別、、檢查查項(xiàng)項(xiàng)下下含含量量測測定定項(xiàng)項(xiàng)、、活活性性檢檢查查作作了了修修訂訂和和補(bǔ)補(bǔ)充充，，（（該該品品種種江江蘇蘇所所起起草草，，檢檢定定所所復(fù)復(fù)核核））1.肽圖圖分分析析：：經(jīng)經(jīng)V8酶水水解解胰胰島島素素、、對對其其分分子子碎碎片片中中的的肽肽圖圖進(jìn)進(jìn)行行分分析析，，該法法能能確確定定不不同同種種屬屬的的胰胰島島素素，，該該法法專專屬屬性性強(qiáng)強(qiáng)。。人胰胰島島素素酶酶解解-HPLC肽圖圖豬胰胰島島素素酶酶解解-HPLC肽圖圖Chp2010版生生化化藥藥標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)實(shí)實(shí)例例介介紹紹胰島島素素2.相關(guān)關(guān)蛋蛋白白：：參參照照USP32、EP6.0由SDS改為為分分離離度度較較好好的的HPLC法，，梯梯度度洗洗脫脫及及系系統(tǒng)統(tǒng)適適用用性性試試驗(yàn)驗(yàn)，，使使A21脫酰酰胺胺胰胰島島素素<0.5%，其其它它相相關(guān)關(guān)蛋蛋白白限限值值<5.0%，而而實(shí)實(shí)測測樣樣前前者者<0.5%；后后者者<3.9~4.0%。3.高分分子子蛋蛋白白：：將將一一般般柱柱色色譜譜改改為為分分子子排排阻阻色色譜譜，，色色譜譜條條件件和和系系統(tǒng)統(tǒng)實(shí)實(shí)用用性試試驗(yàn)驗(yàn)均均與與ChP2005重組組人人胰胰島島素素標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)一一致致。。Chp2010版生生化化藥藥標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)實(shí)實(shí)例例介介紹紹胰島島素素4.含量量測測定定：用用HPLC法代代替替生生物物測測定定法法。。ChP2010版考考慮慮到到胰胰島島素素生生物物活活性性的的重重要要性性，，故故除除改改用用HPLC法外，原原料在檢檢查項(xiàng)中中再加生生物活性性測定，，參考USP32，動物數(shù)數(shù)減半，，生物統(tǒng)統(tǒng)計(jì)簡化化，作限限度實(shí)驗(yàn)驗(yàn)，為常常規(guī)測定定用，該該法既能能省時(shí)、、省力、、省成本本，又能能有效控控制質(zhì)量量。五、多糖糖、脂類類1、簡介介：糖類是自自然界中中一類重重要的含含碳化合合物，主主要生物物學(xué)功能能是在機(jī)機(jī)體代謝謝中提供供能源和和碳源，，也是組組織和細(xì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)構(gòu)的主要要組成成成分。主要分類類有單糖糖（簡單單的多羥羥基醛或或酮）和和聚糖（（單糖縮縮合而成成，20個(gè)單糖糖結(jié)構(gòu)以以下的為為低聚糖糖，20個(gè)以上上的為多多糖。低低聚糖：：蔗糖、、麥芽糖糖、乳糖糖；純純多糖：：右旋糖糖酐、香香菇多糖糖；雜多多糖：肝肝素、硫硫酸軟骨骨素、透透明質(zhì)酸酸）2、2010年年版藥典典收載的的糖及脂脂類品種種硫酸軟骨骨素片、、膠囊肝素鈉、、注射液液、乳膏膏右旋鐵、、片、注注射液右旋糖酐酐20、、氯化鈉鈉注射液液、葡萄萄糖注射射液右旋糖酐酐40、、氯化鈉鈉注射液液、葡萄萄糖注射射液右旋糖酐酐70、、氯化鈉鈉注射液液、葡萄萄糖注射射液前列地爾爾、注射射用前列列地爾多烯酸乙乙酯、軟軟膠囊3、收載載的糖及及脂類品品種的主主要特點(diǎn)點(diǎn)采用高科科技、新新方法，，是質(zhì)量量顯著提提高（如如肝素、、硫酸軟軟骨素等等）脂類，采采用新的的質(zhì)控指指標(biāo)是多多烯酸乙乙酯的質(zhì)質(zhì)量與EP、JP等基基本一致致。4、增修訂訂情況金屬離子子：吸收收光譜有關(guān)物質(zhì)質(zhì)：HPLC比活含量測定定：HPLC、GC比旋度殘留溶劑劑甲氧基苯苯胺值不皂化值值細(xì)菌內(nèi)毒毒素Chp2010版生化藥藥標(biāo)準(zhǔn)實(shí)實(shí)例介紹紹（一）肝素鈉（中檢所所起草））比活：從原150u/mg提高到170u/mg(USP32<180，BP2008為150，JP15為130)產(chǎn)品純度度提高比旋度：：從原+35°°到+50°°（因雜質(zhì)質(zhì)嚴(yán)控，，故該項(xiàng)項(xiàng)提高））吸收度：260nm、280nm是核酸和和蛋白質(zhì)質(zhì)吸收峰峰，因雜雜質(zhì)嚴(yán)控控，260nm吸收度從從原<0.20到<0.10，280nm吸收度從從原<0.15到<0.10說明雜質(zhì)質(zhì)減少。Na+：用原子子吸收光光譜限度度9.5-12.5%（同EP）有機(jī)殘留留：甲醇，，乙醇，，丙酮<中國藥典典規(guī)定細(xì)菌內(nèi)毒毒素：原1單位<0.015Eu到1單位<0.01Eu以上六項(xiàng)項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)均均有十分分明顯的的提高Chp2010版生化藥藥標(biāo)準(zhǔn)實(shí)實(shí)例介紹紹（一）肝素鈉（中檢所所起草））有關(guān)物質(zhì)質(zhì)：應(yīng)用離離子色譜譜HPLC，使雜質(zhì)質(zhì)硫酸皮皮膚軟骨骨素<5.0%，多硫酸酸軟骨素素不得檢檢出。該法USP,EP,BP,JP均沒訂。。美國藥藥典論壇壇可能要要采用該該法，因因該法能能十分清清晰分析析：肝素素，硫酸酸皮膚素素，多硫硫軟骨素素，可代代替昂貴貴核磁共共振及毛毛細(xì)管電電泳。ChP2010的該項(xiàng)目目超過國國際水平平，有十十分重要要的意義義。Chp2010版生化藥藥標(biāo)準(zhǔn)實(shí)實(shí)例介紹紹（二）硫酸軟骨骨素（中檢所所起草））該品質(zhì)量量指標(biāo)有有顯著性性提高，，從含量量原來40%左右直提提至90%（口服）），直接接與國際際接軌。。除標(biāo)準(zhǔn)中中來源豬豬、紅外外、吸收收度、細(xì)細(xì)內(nèi)、有有機(jī)殘留留增修有有提高外外，主要要含量測測定：用用專一性性很強(qiáng)且且靈敏的的酶解法法分離硫硫酸軟骨骨素呈——A、B、C。再用離離子色譜譜柱法很很好分離離硫酸軟軟骨素成成B、C和A。使硫骨骨素含量量為90%（固）、、95%（固）、、97%（注、眼眼）。該法的特特點(diǎn)，抵抵能測豬豬軟骨素素（A/C有固定值值），，因國外外來源很很雜（牛牛、豬、、禽、海海洋動物物），靈靈敏度優(yōu)優(yōu)于USP和EP的電泳法法、EP為滴定時(shí)時(shí)，因無無專屬性性使將其其它多糖糖混雜于于方法中中，使硫硫酸軟骨骨素含量量偏高。。2010版藥典生生化藥完完成情況況總結(jié)1、標(biāo)準(zhǔn)和和品種完完成情況況標(biāo)準(zhǔn)完成成191個(gè)規(guī)格，，增加36個(gè)，增加加率（與與chp2005年版比較較）為22.6%品種完成成72個(gè)、增加加12個(gè)新品種種，增加加率（與與chp2005年版比較較）為19.6%刪除標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)共5個(gè)2、附錄和和指導(dǎo)原原則增訂訂情況（1）蛋白質(zhì)質(zhì)含量測測定（提提供六種種可選擇擇的方法法，適應(yīng)應(yīng)各有關(guān)關(guān)品種的的選擇））（2）多肽醋醋酸含量量測法（（為合成成肽的檢檢查項(xiàng)提提供統(tǒng)一一的方法法）（3）電泳附附錄中等等點(diǎn)聚焦焦法（電電泳附錄錄中增加加先進(jìn)技技術(shù)及常常用方法法）（4）氨基基酸分分析中中的衍衍生法法（為為考慮慮各有有關(guān)單單位習(xí)習(xí)慣等等）其中的的（4）為指指導(dǎo)原原則中中增訂訂（1）蛋白白質(zhì)含含量測測定方方法第一法法：凱凱氏定定氮法法（提提供了了非蛋蛋白氮氮供試試品制制備方方法））。靈靈敏度度較低低，適適用于于0.2-2.0mg氮。換換算系系數(shù)因因蛋白白質(zhì)所所含氨氨基酸酸結(jié)構(gòu)構(gòu)差異異會稍稍有區(qū)區(qū)別。。第二法法：福福林酚酚法（（Lowry法）。。靈敏敏度高高，測測定范范圍通通?？煽蛇_(dá)20-250ug。干擾擾物質(zhì)質(zhì)較多多（還還原物物質(zhì)、、酚類類、檸檸檬酸酸、硫硫酸銨銨、Tris緩沖液液、甘甘氨酸酸、甘甘露醇醇、糖糖類、、甘油油等））第三法法：雙雙縮脲脲法。。快速速、靈靈敏度度低，，測定定范圍圍為1-10mg。干擾擾物質(zhì)質(zhì)有硫硫酸銨銨、Tris緩沖液液和某某些氨氨基酸酸第四法法：2,2’-聯(lián)喹啉啉-4,4’’-二羧酸酸法（（BCA法）。。靈敏敏度較較高，，測定定范圍圍80-400ug。樣品品中不不能有有還原原劑和和銅螯螯合物物。第五法法：考考馬斯斯亮藍(lán)藍(lán)法（（Bradford法）。。靈敏敏度高高，可可測定定1-200ug蛋白量量。干干擾物物質(zhì)有有去污污劑、、TritonX-100、十二烷烷基硫酸酸鈉等。。樣品緩緩沖液呈呈強(qiáng)堿性性也會影影響顯色色。第六法：：紫外分分光光度度法。。干擾因因素多，，常用于于純化蛋蛋白質(zhì)的的微量測測定（2）合成多多肽中的的醋酸測測定法采用液相相色譜法法測定合合成多肽肽中的醋醋酸或醋醋酸鹽的的含量。。C18柱、210nm檢測、梯梯度洗脫脫。醋酸峰的的保留時(shí)時(shí)間約為為3-4分鐘。（3）增訂了了電泳法法增訂第六六法——等電聚焦焦水平板板電泳法法用于檢測測蛋白類類和肽類類供試品品的等電電點(diǎn)。原理：兩性電解解質(zhì)在電電泳場中中形成一一個(gè)pH梯度，由由于蛋白白質(zhì)為兩兩性化合合物，所所帶電荷荷與介質(zhì)質(zhì)的pH值有關(guān)，，帶電的的蛋白質(zhì)質(zhì)在電泳泳中向極極性相反反的方向向遷移，，到達(dá)等等電點(diǎn)（（此處的的pH值使相應(yīng)應(yīng)的蛋白白質(zhì)不再再帶電荷荷）時(shí)，，電流達(dá)達(dá)到最小小，不再再移動。。（4）氨基酸酸分析法法第一法：：PITC柱前衍生生氨基酸酸分析法法第二法：：AQC柱前衍生生氨基酸酸分析法法第三法：：OPA和FMOC柱前衍生生氨基酸酸分析法法第四法：：D