新藥安全藥理學(xué)研究與進(jìn)展第二軍醫(yī)大學(xué)藥物安全性評(píng)價(jià)中心陸國(guó)才袁伯俊內(nèi)容CFDA安全藥理研究要求1ICH安全藥理研究要求2安全藥理研究趨勢(shì)展望3安全藥理學(xué)：研究藥物治療范圍內(nèi)或治療范圍以上的劑量時(shí)，潛在不期望出現(xiàn)的對(duì)生理功能的不良影響次要藥效學(xué)：主要研究藥物非期望的、與治療目的不相關(guān)的效應(yīng)和作用機(jī)制概念CFDA要求核心組合試驗(yàn)(CoreBattery)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)研究追加的安全藥理學(xué)研究（Follow-up）對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)進(jìn)行深入的研究補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究（Supplemental）研究藥物對(duì)三大系統(tǒng)以外器官(如泌尿系統(tǒng)、自主神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸道系統(tǒng)和其它器官組織)功能的影響概念CFDA要求確定藥物可能存在的非期望藥效作用評(píng)價(jià)藥物在毒理學(xué)和/或臨床研究中所觀察到的藥物不良反應(yīng)和/或病理生理作用研究所觀察到的和/或推測(cè)的藥物不良反應(yīng)機(jī)制目的CFDA要求有助于了解新藥的藥理作用特點(diǎn)和機(jī)制有助于發(fā)現(xiàn)新藥理作用，一藥多用，藥盡其用為毒理學(xué)研究打下基礎(chǔ)，是各種毒性實(shí)驗(yàn)的必要補(bǔ)充目的CFDA要求貫穿在新藥研究全過(guò)程中，可分階段進(jìn)行在藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn)前，應(yīng)完成CoreBatteryStudies追加和/或補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究可在申報(bào)生產(chǎn)前進(jìn)行階段性CFDA要求內(nèi)容要求CFDA要求神經(jīng)系統(tǒng)運(yùn)動(dòng)功能、行為改變、協(xié)調(diào)功能、感覺(jué)運(yùn)動(dòng)反射和體溫等的變化(小鼠)心血管系統(tǒng)

給藥前后血壓（包括收縮壓、舒張壓和平均壓）、心電圖（包括QT間期、PR間期、ST段和QRS波等）和心率等變化(Beagle犬)呼吸系統(tǒng)呼吸頻率和呼吸幅度(Beagle犬)根據(jù)情況增加其它系統(tǒng)或指標(biāo)1.動(dòng)物選擇可采用不同類型動(dòng)物(正?；蚰Ｐ停逍鸦蚵樽?。一般多用正常動(dòng)物2.劑量途徑產(chǎn)生主要藥效作用及以上的3個(gè)劑量，臨床給藥途徑3.觀察時(shí)間

藥效學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)特性、受試動(dòng)物、臨床研究方案等因素選擇觀察時(shí)間點(diǎn)和觀察時(shí)間CFDA要求有關(guān)問(wèn)題4.系統(tǒng)指標(biāo)中樞神經(jīng)系統(tǒng)心血管系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)根據(jù)情況增加其它系統(tǒng)或指標(biāo)5.體外研究

應(yīng)確定受試物的濃度-效應(yīng)關(guān)系。無(wú)明顯影響作用時(shí)，應(yīng)說(shuō)明濃度選擇范圍CFDA要求有關(guān)問(wèn)題中樞神神經(jīng)系系統(tǒng)：對(duì)行行為、、學(xué)習(xí)習(xí)記憶憶、神神經(jīng)生生化、、視覺(jué)覺(jué)、聽聽覺(jué)和和電生生理等等的影影響心血管管系統(tǒng)統(tǒng)：對(duì)心心輸出出量、、心肌肌收縮縮作用用、血血管阻阻力等等指標(biāo)標(biāo)的檢檢測(cè)呼吸系系統(tǒng)：對(duì)氣氣道阻阻力、、肺動(dòng)動(dòng)脈壓壓力、、血?dú)鈿夥治鑫龅戎钢笜?biāo)的的檢測(cè)測(cè)CFDA要求追加安安全藥藥理學(xué)學(xué)泌尿系系統(tǒng)：對(duì)腎腎功能能的影影響，，如對(duì)對(duì)尿量量、比比重、、滲透透壓、、pH、電解解質(zhì)平平衡、、蛋白白質(zhì)、、細(xì)胞胞和血血生化化（如如尿素素氮、、肌酐酐、蛋蛋白質(zhì)質(zhì)）等等指標(biāo)標(biāo)的檢檢測(cè)自主神神經(jīng)系系統(tǒng)：有關(guān)關(guān)受體體的結(jié)結(jié)合、、體內(nèi)內(nèi)或體體外對(duì)對(duì)激動(dòng)動(dòng)劑或或拮抗抗劑的的功能能反應(yīng)應(yīng)、對(duì)對(duì)自主主神經(jīng)經(jīng)的直直接刺刺激作作用和和對(duì)心心血管管反應(yīng)應(yīng)、壓壓力反反射和和心率率等指指標(biāo)的的檢測(cè)測(cè)CFDA要求補(bǔ)充安安全藥藥理學(xué)學(xué)胃腸系系統(tǒng)：觀察察藥物物對(duì)胃胃腸系系統(tǒng)的的影響響，如如胃液液分泌泌量和和pH、胃腸腸損傷傷、膽膽汁分分泌、、離體體回腸腸收縮縮、胃胃液pH等指標(biāo)標(biāo)的測(cè)測(cè)定其它研研究：潛在在的依依賴性性、骨骨骼肌肌、免免疫和和內(nèi)分分泌功功能等等的影影響CFDA要求補(bǔ)充安全全藥理學(xué)學(xué)體內(nèi)血藥藥濃度低低，或其其它組織織器官分分布很少少的局部部用藥（（如皮膚膚、眼科科用藥））只用于治治療晚期期癌癥病病人的細(xì)細(xì)胞毒類類藥物，，在首次次用于臨臨床前可可不做一一般藥理理學(xué)研究究，但不不包括具具有新作作用機(jī)制制的此類類藥物CFDA要求免做安全全藥理學(xué)學(xué)內(nèi)容容CFDA安全藥理研究要求1ICH安全藥理研究要求2安全藥理研究趨勢(shì)展望3“Safetypharmacologyincludestheassessmentofeffectsonvitalfunctions,suchascardiovascular,centralnervoussystemandrespiratorysystems,andtheseshouldbeevaluatedpriortohumanexposure.””ICHM3:Nonclinicalsafetystudiesfortheconductofhumanclinicaltrialsforpharmaceuticals.(July1997)ValueofsafetypharmacologyacknowledgedbyregulatorsandsponsorsICH要求ICHGuidelineM3,1997“[Safetypharmacologystudies]..investigatethepotentialforundesirablepharmacologicalactivityinappropriateanimalmodelsand,wherenecessary,toincorporateparticularmonitoringfortheseactivitiesinthetoxicitystudiesand/orclinicalstudies.”“..thesestudiesmayallowforamechanistically-basedexplanationofspecificorgantoxicities,whichshouldbeconsideredcarefullywithrespecttohumanuseandindication(s).”ICHS6““PreclinicalSafetyEvaluationofBiotechnology-DerivedPharmaceuticals””(July1997)PharmacologicalactivityinanimalsshouldbeconsideredintoxicologyandclinicalstudiesMechanism-basedunderstandingoftoxicities(orpharmacologicalactivities)shouldbecarefullyconsideredintheriskassessmentICH要求ICHGuidelineS6,1997“Thisguidancewasdevelopedtohelpprotectclinicaltrialparticipantsandpatientsreceivingmarketedproductsfrompotentialadverseeffectsofpharmaceuticals,whileavoidingunnecessaryuseofanimalsandotherresources.”ICHS7A“SafetyPharmacologyStudiesforHumanPharmaceuticals””(July2001)SafetypharmacologystudieshavethepotentialtoreduceuseofanimalsandotherresourcesICH要求ICHGuidelineS7A,2001清醒動(dòng)物物----遙測(cè)系統(tǒng)統(tǒng)檢測(cè)清醒醒狀態(tài)下下、自由由活動(dòng)動(dòng)動(dòng)物的安安全藥理理學(xué)指標(biāo)標(biāo)節(jié)省動(dòng)物物符合動(dòng)物物福利要要求適合不同同給藥方方式連續(xù)動(dòng)態(tài)態(tài)、長(zhǎng)時(shí)時(shí)間檢測(cè)測(cè)指標(biāo)ICH要求AnimalIDCompound/DosePeriodDosePeriod1Day1DosePeriod2Day4DosePeriod3Day8DosePeriod4Day11No.1LHCMNo.2HMLCNo.3CLMHNo.4MCHL4x4拉丁方實(shí)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)計(jì)ICH要求AnimalIDCompound/DosePeriodDosePeriod1Day1DosePeriod2Day4DosePeriod3Day8DosePeriod4Day11No.1LHCMNo.2HMLCNo.3CLMHNo.4MCHLNo.5LHCMNo.6HMLCNo.7CLMHNo.8MCHL4x8拉丁方實(shí)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)計(jì)ICH要求Drugtoincreasegastrointestinal(GI)motilityOver5.4millionprescriptionsin1996(US)34patientsTdP,23longQT(1993-1996)CardiotoxicityreportedwhenusedwithKetoconazoleand/orErythromycinCasereportof8-yearoldgirl––intensivecareICH要求CisaprideStoryICH要求DrugInteractionsLeadingtoQTDrugtoincreasegastrointestinal(GI)motilityOver5.4millionprescriptionsin1996(US)34patientsTdP,23longQT1993-1996CardiotoxicityreportedwhenusedwithKetoconazoleand/orErythromycinCasereportof8-yearoldgirl––intensivecare4deathsand16resuscitatedfrom1993to1996DrugwithdrawnfromUSmarket––July,2000ICH要求CisaprideStoryFDArecommendedremovalofTerfenadinecontainingproductsfromthemarketin01/1997FDAissuedwarninglettertoDoctorsaboutcardiacsafetyofCisapridePost-marketingsurveillancebecamemoreimportant–MedwatchreportingsystemSafetypharmacologyguidanceswereapprovedtolookatcardiovascular,respiratoryandCNSside-effectsofdrugcandidates––ICHS7AandS7BScreeningforQTprolongationisnowanintegralpartofdrugdevelopment(leadoptimizationtoclinical)ICH要求RegulatoryResponse“Thestudyresultscanbeusedtoelucidatethemechanismofactionand,whenconsideredwithotherinformation,estimateriskfordelayedventricularrepolarizationandQTintervalprolongationinhumans.””ICHS7B:NonclinicalEvaluationofthePotentialforDelayedVentricularRepolarization(QTIntervalProlongation)byHumanPharmaceuticals(October2005)MechanismofactioncanbeagoalofstudiesUsedatawithotherdatatoestimateriskforQTprolongationinhumansICH要求ICHGuidelineS7B,2005QTc(msec)Male FemaleNormal<430<450Borderline 431-450451-470Prolonged>450>470Bazett:QTc=QT/RR0.5Fridericia:QTc=QT/RR0.33ICH要求QTcIntervalICH要求QTcInterval心率年齡性別種屬HR/RR公式心肌動(dòng)作作電位時(shí)時(shí)的離子子通道ICH要求IKr:快速延遲遲整流K+電流心肌動(dòng)作作電位時(shí)時(shí)的離子子通道ICH要求hERG(人類Ether-a-go-go相關(guān)基因因)(KCNH2)編碼Kv11.1鉀離子通通道，使使心臟動(dòng)動(dòng)作電位位Ikr流復(fù)極化化QT/QTcProlongationIKrInhibitionDelayedVentricularRepolarizationArrhythmiaADDITIONALRISKFACTORSIKrinhibitorypotency:canhelppredictriskofQT/QTcprolongationisabiomarkerforincreasedriskofVentricularArrhythmiasisnotabiomarkerforTorsadedePointesICH要求求IKr&TdPICH要求求Earlyafter-depolarization（早早后后去去極極化化））TdPDrugClassDateWithdrawnTerfenadineAntihistamineFeb1998SertindoleAntipsychoticDec1998AstemizoleAntihistamineJun1999GrepafloxacinAntibioticNov1999CisaprideGIProkineticJuly2000ICH要求求DrugsWithdrawnforTdPrisk采用用離離體體動(dòng)動(dòng)物物或或人人體體心心臟臟細(xì)細(xì)胞胞、、培培養(yǎng)養(yǎng)心心臟臟細(xì)細(xì)胞胞系系或或克克隆隆人人離離子子通通道道的的異異種種表表達(dá)達(dá)體體系系測(cè)測(cè)定定離離子子流流在離離體體心心臟臟標(biāo)標(biāo)本本進(jìn)進(jìn)行行動(dòng)動(dòng)作作電電位位參參數(shù)數(shù)測(cè)測(cè)定定，，或或在在麻麻醉醉動(dòng)動(dòng)物物中中進(jìn)進(jìn)行行能能體體現(xiàn)現(xiàn)動(dòng)動(dòng)作作電電位位周周期期的的特特異異性性電電生生理理參參數(shù)數(shù)檢檢測(cè)測(cè)測(cè)定定清清醒醒或或麻麻醉醉動(dòng)動(dòng)物物的的ECG參數(shù)數(shù)在離離體體心心臟臟標(biāo)標(biāo)本本或或動(dòng)動(dòng)物物進(jìn)進(jìn)行行致致心心律律失失常常作作用用測(cè)測(cè)定定QT間期期延延長(zhǎng)長(zhǎng)非非臨臨床床研研究究方方法法ICH要求求QT間期期延延長(zhǎng)長(zhǎng)非非臨臨床床研研究究方方法法ICH要求求Langendorff系統(tǒng)統(tǒng)QT間期期延延長(zhǎng)長(zhǎng)非非臨臨床床研研究究方方法法ICH要求求ECGPR間期期,QRS時(shí)間間,QT間期期等等心臟臟功功能能左心心室室壓壓變力力性性,松弛弛性性,變時(shí)時(shí)性性變更更神神經(jīng)經(jīng)傳傳導(dǎo)導(dǎo)性性A-V傳導(dǎo)導(dǎo)單級(jí)級(jí)動(dòng)動(dòng)作作電電位位APD30APD50APD90QT間期延長(zhǎng)非非臨床研究究方法ICH要求QT間期延長(zhǎng)非非臨床研究究方法ICH要求一般來(lái)說(shuō)，，臨床上易易誘發(fā)Tdp的藥物的hERGIC50和有效游離離治療血漿漿濃度ETPCunbound之間的比值值大多小于于30，因此藥物物對(duì)hERG作用的IC50是Cmax的30倍時(shí)，認(rèn)為為是可以接接受的安全全程度，出出現(xiàn)假陽(yáng)性性結(jié)果的可可能性也很很低安全窗應(yīng)該該考慮疾病病的嚴(yán)重性性和治療的的需要對(duì)于如果不不給予治療療就會(huì)死亡亡的疾病，，如腫瘤，，AIDS，一些感染染性疾病等等，IC50是Cmax的10倍可認(rèn)為是是安全的對(duì)于較為嚴(yán)嚴(yán)重的疾病病，如中風(fēng)風(fēng)、帕金森森病、精神神分裂癥、、癲癇癥、、哮喘癥、、關(guān)節(jié)炎等等，30倍可以認(rèn)為為是安全的的對(duì)于較輕的的疾病，如如雷諾病、、季節(jié)性鼻鼻炎、濕疹疹等，100倍甚至更高高的倍數(shù)才才可認(rèn)為是是安全的內(nèi)容容CFDA安全藥理研究要求1ICH安全藥理研究要求2安全藥理研究趨勢(shì)展望32009趨勢(shì)展望安全藥理學(xué)學(xué)政策法規(guī)規(guī)不斷完善善趨勢(shì)展望QT間期研究策策略體外電生理理IKr研究采用原代或或表達(dá)的IKr通道蛋白(如由hERG編碼的蛋白白)評(píng)價(jià)藥物對(duì)對(duì)離子電流流的影響體內(nèi)對(duì)QT的研究從體內(nèi)測(cè)定定心室復(fù)極極化，如QT間期檢測(cè)結(jié)結(jié)果進(jìn)行評(píng)評(píng)價(jià)化學(xué)/藥理的分類類可誘導(dǎo)人QT間期延長(zhǎng)作作用的藥物物如抗精神神病類藥物物，組胺H1受體拮抗劑劑、氟喹酮酮類QT間期研究策策略趨勢(shì)展望追加試驗(yàn)離體心臟麻麻醉動(dòng)物重復(fù)給藥試試驗(yàn)動(dòng)物種屬和和性別的選選擇用代謝性誘誘導(dǎo)劑或用用拮抗劑用陽(yáng)性藥和和參比化合合物其他通道的的抑制作用用在多個(gè)時(shí)間間點(diǎn)測(cè)定電電生理參數(shù)數(shù)模擬病理狀狀況和心律律失常綜合風(fēng)險(xiǎn)評(píng)評(píng)估QT間期研究策策略趨勢(shì)展望QT間期延長(zhǎng)的的問(wèn)題在很很大程度上上已得到解解決藥物對(duì)血壓壓的影響非非常重要藥物對(duì)心臟臟功能（收收縮能力））的影響非非常重要很多化合物物，通過(guò)重重復(fù)給藥的的毒理實(shí)驗(yàn)驗(yàn)來(lái)獲得心心血管系統(tǒng)統(tǒng)的安全藥藥理實(shí)驗(yàn)數(shù)數(shù)據(jù)，而不不需要再單單獨(dú)進(jìn)行安安全藥理實(shí)實(shí)驗(yàn)特別是生物物類藥品如如單克隆抗抗體等大多多采用此法法通過(guò)設(shè)計(jì)周周全的安全全藥理實(shí)驗(yàn)驗(yàn)和毒理實(shí)實(shí)驗(yàn)，大大大提高了整整體動(dòng)物模模型的心血血管系統(tǒng)藥藥理實(shí)驗(yàn)的的研究水平平和數(shù)據(jù)質(zhì)質(zhì)量QT間期研究策策略為什么血壓壓檢測(cè)很重重要？降低高血壓壓患者的血血壓可以降降低死亡率率微小血壓的的變化的重重要性：“哪怕只是降降低2mmHg的系統(tǒng)血壓壓，中風(fēng)死死亡率就會(huì)會(huì)降低10%，中年IHD患者和其他他血管疾病病患者的死死亡率會(huì)減減少7%為什么心肌肌耗氧很重重要？心肌全靠有有氧代謝，，不能生成成乳酸，不不能負(fù)擔(dān)超超氧負(fù)荷因此，心肌肌細(xì)胞耗氧氧量能提供供非常準(zhǔn)確確的，實(shí)時(shí)時(shí)的能量消消耗狀況心肌耗氧量量也是判斷斷冠狀血流流的一個(gè)重重要指標(biāo)心肌耗氧的的三大決定定因素心臟收縮期期室壁張力力（壓力））心率收縮力心肌收縮VS心肌變力狀狀態(tài)正性肌力類類藥物可以以增加心肌肌收縮負(fù)性肌力作作用類藥物物則可以降降低心肌收收縮改變心肌收收縮力的結(jié)結(jié)果心肌收縮減減弱意味著著心臟做功功能力降低低心肌收縮力力的顯著降降低，臨床床體現(xiàn)可為為急性或慢慢性心衰心肌收縮力力增強(qiáng)可增增加心臟的的做功量，，通常來(lái)說(shuō)說(shuō)是在身體體需求增加加時(shí)的正常常生理反應(yīng)應(yīng)但是心肌收收縮力增強(qiáng)強(qiáng)的同時(shí)會(huì)會(huì)急劇增加加心肌耗氧氧量心肌耗氧升升高三大因因素收縮期室壁壁張力（血壓）哪怕平均血血壓只是微微小地緩慢慢上升都會(huì)會(huì)引起死亡亡率的明顯顯升高心率心率的微小小緩慢上升升也會(huì)引起起死亡率明明顯升高心肌收縮心肌收縮力力的長(zhǎng)期緩緩慢增強(qiáng)會(huì)會(huì)導(dǎo)致什么么結(jié)果呢？？HESI心肌收縮力力評(píng)價(jià)項(xiàng)目目綜合策略：：收集實(shí)驗(yàn)數(shù)數(shù)據(jù)和提出出建議，以以改善非臨臨床心血管管數(shù)據(jù)的預(yù)預(yù)提示能力力（從動(dòng)物物到人類，，從短期到到長(zhǎng)期用藥藥）心肌收縮力力被選定為為一個(gè)重點(diǎn)點(diǎn)研究項(xiàng)目目目的：用已知藥效效的藥物，，評(píng)估犬類類和大鼠整整體動(dòng)物模模型在檢測(cè)測(cè)藥物正性性和負(fù)性肌肌力作用應(yīng)應(yīng)用上的靈靈敏度該研究同時(shí)時(shí)也對(duì)比了了嚙齒類模模型和犬類類模型在此此類應(yīng)用中中的相對(duì)靈靈敏度實(shí)驗(yàn)研究將將由美國(guó)和和歐洲的HESI成員來(lái)完成成健康和環(huán)境境科學(xué)研究究所（HESI）心肌收縮能能力實(shí)驗(yàn)設(shè)設(shè)計(jì)比格犬雙4X4拉丁方交叉叉設(shè)計(jì)(N=8)正性&負(fù)性肌力藥藥物空白溶劑&3個(gè)劑量測(cè)試藥物和和劑量選擇擇植入式遙測(cè)測(cè)DSI&ITS系統(tǒng)LVP,AoP,ECG,TempdP/dtmaxdP/dt40,dP/dtmin,QASD或者Wistar大鼠雙4X4拉丁方交叉叉設(shè)計(jì)(N=8)正性&負(fù)性肌力藥藥物空白溶劑&3個(gè)劑量測(cè)試藥物和和劑量選擇擇植入式遙測(cè)測(cè)DSIHD-S21系統(tǒng)LVP,AoP,ECG,TempdP/dtmaxdP/dt40,dP/dtmin,QA計(jì)算機(jī)模擬擬(insilico)干細(xì)胞定向向分化為心心肌細(xì)胞下丘腦病理理切片HERG通道體外篩篩選新方法法熒光篩選(測(cè)量膜電位位)結(jié)合試驗(yàn)(標(biāo)記的HERG通道阻滯劑劑，HTS)斑馬魚HTS結(jié)合藥代/藥效，研究究毒理學(xué)生生物標(biāo)志，，預(yù)測(cè)臨床床安全藥理學(xué)學(xué)研究新技技術(shù)新方法法趨勢(shì)展望計(jì)算機(jī)模擬擬(insilico)干細(xì)胞定向向分化為心心肌細(xì)胞下丘腦病理理切片HERG通道體外篩篩選新方法法熒光篩選(測(cè)量膜電位位)結(jié)合試驗(yàn)(標(biāo)記的HERG通道阻滯劑劑，HTS)斑馬魚HTS結(jié)合藥代/藥效，研究究毒理學(xué)生生物標(biāo)志，，預(yù)測(cè)臨床床安全藥理學(xué)學(xué)研究新技技術(shù)新方法法趨勢(shì)展望PARTIMUTAGENESISANDMUTANTSHighlyEfficientENUMutagenesisinZebrafishProductionofPseudotypedRetrovirusandtheGenerationofProviralTransgenicZebrafishUndertakingaSuccessfulGynogeneticHaploidScreeninZebrafishCryopreservationandInVitroFertilizationattheZebrafishInternationalResourceCenter計(jì)算機(jī)模擬擬(insilico)干細(xì)胞定向向分化為心心肌細(xì)胞下丘腦病理理切片HERG通道體外篩篩選新方法法熒光篩選(測(cè)量膜電位位)結(jié)合試驗(yàn)(標(biāo)記的HERG通道阻滯滯劑，HTS)斑馬魚HTS結(jié)合藥代代/藥效，研研究毒理理學(xué)生物物標(biāo)志，，預(yù)測(cè)臨臨床安全藥理理學(xué)研究究新技術(shù)術(shù)新方法法趨勢(shì)展望望PARTIITRANSGENESISTransientandStableTransgenesisUsingTol2TransposonVectorsAnalysisofGenesandGenomebytheTol2-MediatedGeneandEnhancerTrapMethodsBacterialArtificialChromosomeTransgenesisforZebrafishSimpleandEfficientTransgenesiswithMeganucleaseConstructsinZebrafish計(jì)算機(jī)模模擬(insilico)干細(xì)胞定定向分化化為心肌肌細(xì)胞下丘腦病病理切片片HERG通道體外外篩選新新方法熒光篩選選(測(cè)量膜電電位)結(jié)合試驗(yàn)驗(yàn)(標(biāo)記的HERG通道阻滯滯劑，HTS)斑馬魚HTS結(jié)合藥代代/藥效，研研究毒理理學(xué)生物物標(biāo)志，，預(yù)測(cè)臨臨床安全藥理理學(xué)研究究新技術(shù)術(shù)新方法法趨勢(shì)展望望PARTIIITISSUE-SPECIFICMANIPULATIONSNitroreductase-MediatedCellAblationinTransgenicZebrafishEmbryosFocalElectroporationinZebrafishEmbryosandLarvaeTissueMicromanipulationinZebrafishEmbryos計(jì)算機(jī)模模擬(insilico)干細(xì)胞定定向分化化為心肌肌細(xì)胞下丘腦病病理切片片HERG通道體外外篩選新新方法熒光篩選選(測(cè)量膜電電位)結(jié)合試驗(yàn)驗(yàn)(標(biāo)記的HERG通道阻滯滯劑，HTS)斑馬魚HTS結(jié)合藥代代/藥效，研研究毒理理學(xué)生物物標(biāo)志，，預(yù)測(cè)臨臨床安全藥理理學(xué)研究究新技術(shù)術(shù)新方法法趨勢(shì)展望望PARTIVANALYZINGGENEEXPRESSIONZebrafishSpotted-MicroarrayforGenome-WideExpressionProfilingExperiments.PartI:ArrayPrintingandHybridizationPartII:DataAcquisitionandAnalysisValidatingmicroRNATargetTranscriptsUsingZebrafishAssays計(jì)算機(jī)模模擬(insilico)干細(xì)胞定定向分化化為心肌肌細(xì)胞下丘腦病病理切片片HERG通道體外外篩選新新方法熒光篩選選(測(cè)量膜電電位)結(jié)合試驗(yàn)驗(yàn)(標(biāo)記的HERG通道阻滯滯劑，HTS)斑馬魚HTS結(jié)合藥代代/藥效，研研究毒理理學(xué)生物物標(biāo)志，，預(yù)測(cè)臨臨床安全藥理理學(xué)研究究新技術(shù)術(shù)新方法