微 生 物 習(xí) 題 集第一章?緒論一、術(shù)語(yǔ)或名詞???微生物(microorganism)毒、擬病毒、朊病毒)；具原核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的真細(xì)菌、古生菌以及具真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、單細(xì)胞藻類、原生動(dòng)物等。但其中也有少數(shù)成員是肉眼可見的。微生物學(xué)(microbiology)3．分子微生物學(xué)(molecularmicrobiology)?在分子水平上研究微生物生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué)。4．細(xì)胞微生物學(xué)(cellularmicrobiology)?重點(diǎn)研究微生物與寄主細(xì)胞相互關(guān)系的科學(xué)。5．微生物基因組學(xué)(microbicgenomics)?研究微生物基因組的分子結(jié)構(gòu)、信息含量及其編碼的基因產(chǎn)物的科學(xué)。6．自生說(spontaneousgeneration)?一個(gè)古老的學(xué)說，認(rèn)為一切生命有機(jī)體能夠從無生命的物質(zhì)自然發(fā)生的。安東·(AntonyvanLeeuwenhoek，1632—1723)?荷蘭商人，他是真正看見并描述微生物的第一人，他利用自制放大倍數(shù)為50～300倍的顯微鏡發(fā)現(xiàn)了微生物世界(當(dāng)時(shí)被稱之為微小動(dòng)物)，首次揭示了一個(gè)嶄新的生物世界——微生物界。路易斯·巴斯德(LouisPasteur，1822—1895)卓越的貢獻(xiàn)，成為微生物學(xué)的奠基人。主要貢獻(xiàn)：用曲頸瓶實(shí)驗(yàn)徹底否定了“自生說”，從此建立了病原學(xué)說，推動(dòng)了微生物學(xué)的發(fā)展；研究了雞霍亂，發(fā)現(xiàn)將病原菌減毒可誘發(fā)免疫性，以預(yù)防雞霍亂?。黄浜笏盅芯苛伺！⒀蛱烤也『涂袢?，并首次制成狂犬疫苗，證實(shí)其免疫學(xué)說，為人類防病、治病做出了重大貢獻(xiàn)；分離到了許多引起發(fā)酵的微生物，并證實(shí)酒精發(fā)酵是由酵母菌引起的，也發(fā)現(xiàn)乳酸發(fā)酵、醋酸發(fā)酵和丁酸發(fā)酵都是不同細(xì)菌所引起的，為進(jìn)一步研究微生物的生理生化和工業(yè)微生物學(xué)奠定了基礎(chǔ)。羅伯特．柯赫(RobertKoch，1843—1910)?德國(guó)人，著名的細(xì)菌學(xué)家，曾經(jīng)是一名醫(yī)生，對(duì)病原細(xì)菌的研究做出了突出的貢獻(xiàn)：A證實(shí)了炭疽病菌是炭疽病的病原菌；BC伍連德(1879—1960)?我國(guó)廣東香山人，著名公共衛(wèi)生學(xué)家，我國(guó)海港檢疫創(chuàng)始人。他用微生物學(xué)理論和技術(shù)對(duì)鼠疫和霍亂的病原進(jìn)行研究和防治，在中國(guó)最早建立起衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)，培養(yǎng)了第一支預(yù)防鼠疫的專業(yè)隊(duì)伍，在他的領(lǐng)導(dǎo)和組織下，有效地戰(zhàn)勝了1910—19111920—192119114主席和中國(guó)首席代表。著有“論肺型鼠疫”、“鼠疫概論”和“中國(guó)醫(yī)史”等。湯飛凡(1879—1958)?我國(guó)湖南醴陵人，著名的醫(yī)學(xué)微生物學(xué)家，在醫(yī)學(xué)細(xì)菌學(xué)、病毒學(xué)和免疫學(xué)等方面的某些領(lǐng)域做出·貢獻(xiàn)，特別是首次應(yīng)用雞胚卵黃囊接種法從病人的眼結(jié)膜刮屑物中分離、培養(yǎng)沙眼衣原體的成功，確證了沙眼衣原體的存在，為世界上首創(chuàng)，成為醫(yī)學(xué)微生物學(xué)方面的重大成果。SARS?SevereAcuteRespiratorySyndrome二、習(xí)題?填空題1．微生物與人類關(guān)系的重要性，你怎么強(qiáng)調(diào)都不過分，微生物是一把十分鋒利的雙刃劍，它們?cè)诮o人類帶來???的同時(shí)也帶來???。2．1347年的一場(chǎng)由???引起的瘟疫幾乎摧毀了整個(gè)歐洲，有1／3的人(約2500萬(wàn)人)死于這場(chǎng)災(zāi)難。3．2003SARSSARS所引起。的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、單細(xì)胞藻類、原生動(dòng)物等。RogerStranier重點(diǎn)研究微生物與寄主細(xì)胞相互關(guān)系的新型學(xué)科領(lǐng)域，稱為???。68，19種和滅菌等一系列獨(dú)特的微生物技術(shù)，從而奠定了微生物學(xué)的基礎(chǔ)，同時(shí)開辟了醫(yī)學(xué)和工業(yè)微生物學(xué)等分支學(xué)科。???和???是微生物學(xué)的奠基人。9．20離、培養(yǎng)和在發(fā)酵罐中進(jìn)行生產(chǎn)。3種常規(guī)的研究方法，為從本質(zhì)上認(rèn)識(shí)微生物自身以及利用和改造微生物將產(chǎn)生質(zhì)的飛躍。30020植物兩大生物產(chǎn)業(yè)后的???。?選擇題(4個(gè)答案選1)1???A鼠疫???B天花???C艾滋病(AIDS)???D霍亂2．微生物在整個(gè)生物界的分類地位，無論是五界系統(tǒng)，還是三域(domain)系統(tǒng)，微生物都占據(jù)了(???)的“席位”。???A少數(shù)???B非常少數(shù)???C不太多???D絕大多數(shù)3．微生物學(xué)的不斷發(fā)展，已形成了基礎(chǔ)微生物學(xué)和應(yīng)用微生物學(xué)，它又可分為(???)的分支學(xué)科。???A???B???C???D44910???A曲蘗釀酒???B用鼻苗法種痘?C烘制面包???D釀制果酒5．安東·列文虎克制造的顯微鏡放大倍數(shù)為(???)倍，利用這種顯微鏡，他清楚地看見了細(xì)菌和原生動(dòng)物。???A50—300???B10左右???C2—20???D500～1000據(jù)有關(guān)統(tǒng)計(jì)表明，20???A1／10???B2／3???C1／20???D1／3巴斯德為了否定“自生說”，他在前人工作的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了許多試驗(yàn)，其中著名的 (???)無可辯駁地證實(shí)：空氣中確實(shí)含有微物，它們引起有機(jī)質(zhì)的腐敗。???A厭氧試驗(yàn)???B滅菌試驗(yàn)?C曲頸瓶試驗(yàn)???D菌種分離試驗(yàn)8．柯赫提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則——(???)。A?B???C???D究這些基因的功能，為認(rèn)識(shí)龐大的人類基因組及其功能做出重要貢獻(xiàn)。???A模式生物???B受體???C供體???D突變材料我國(guó)學(xué)者湯飛凡教授的(???)分離和確證的研究成果，是一項(xiàng)具有國(guó)際領(lǐng)先水平的開創(chuàng)性成果。???A鼠疫桿菌???B沙眼病原體???C結(jié)核桿菌???D天花病毒?是非題微生物是人類生存環(huán)境中必不可少的成員，有了它們才使得地球上的物質(zhì)進(jìn)行循環(huán)，否則地球上的所有生命將無法繁衍下去。等，不可能有“卷土重來”之勢(shì)。當(dāng)今研究表明：所有的細(xì)菌都是肉眼看不見的。用特殊的技術(shù)，例如：消毒滅菌和培養(yǎng)基的應(yīng)用等，這也是微生物學(xué)有別于動(dòng)、植物學(xué)的。發(fā)酵是由微生物引起的，首次制成狂犬疫苗，建立了巴氏消毒法等。物學(xué)、植物病理學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)及免疫學(xué)等，都是微生物學(xué)的分支學(xué)科。對(duì)發(fā)展緩慢，特別是人類遺傳學(xué)的限制大。???8．微生物學(xué)與迅速發(fā)展起來的分子生物學(xué)理論和技術(shù)以及其他學(xué)科匯合，使微生物學(xué)全面進(jìn)入分子研究水平，并產(chǎn)生了其分支學(xué)科“分子微生物學(xué)”。在基因工程的帶動(dòng)下，傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵工業(yè)已從多方面發(fā)生了質(zhì)的變化，成為現(xiàn)代生物技術(shù)的重要組成部分。DNA微生物個(gè)體小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)周期短，易大量繁殖，易變異等特性，因而與動(dòng)、植相比，十分難于實(shí)驗(yàn)操作。共有的基本生物學(xué)特性，及其廣泛的應(yīng)用性。?問答題???1．用具體事例說明人類與微生物的關(guān)系。???2．為什么說巴斯德和柯赫是微生物學(xué)的奠基人????3．為什么微生物學(xué)比動(dòng)、植物學(xué)起步晚，但卻發(fā)展非常迅速????4．簡(jiǎn)述微生物學(xué)在生命科學(xué)發(fā)展中的地位。填空題5．試述微生物學(xué)的發(fā)展前景三、習(xí)題解答填空題?1234567．齊民要術(shù)???8．巴斯德?柯赫?巴910???11．第三大產(chǎn)業(yè)選擇題?1．?C???2．?D???3．?C???4．?D???5．?A?6．?D???7．?C???8．?B???9．?A???10．?B問答題是非題對(duì)錯(cuò)錯(cuò)對(duì)對(duì)錯(cuò)對(duì)對(duì)對(duì)錯(cuò)錯(cuò)對(duì)問答題微生物與人類關(guān)系的重要性，可以從它們?cè)诮o人類帶來巨大利益的同時(shí)也可能帶來極大的危害兩方面進(jìn)行分析。能夠例舉：面了“自然發(fā)生”學(xué)說；發(fā)現(xiàn)將病原菌減毒可誘發(fā)免疫性，首次制成狂犬疫苗，進(jìn)行預(yù)防接種；證實(shí)發(fā)酵是由微生物引起的；創(chuàng)立巴斯德消毒法等。柯赫對(duì)病原細(xì)菌的研究做出了突出的成就：證實(shí)了炭疽病菌是炭疽病的病原菌，發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌，提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則——柯赫原則，創(chuàng)建了分離、純化微生物的技術(shù)等。小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)周期短，易大量培養(yǎng)，易變異，重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)，十分易于操作。動(dòng)、植物由于結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性及技術(shù)方法的限制而相對(duì)發(fā)展緩慢。微生物的廣泛的應(yīng)用性，能迅速地符合現(xiàn)代學(xué)科、社會(huì)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的需求。4．2040物這樣一種簡(jiǎn)單而又具完整生命活動(dòng)的小生物成了生物學(xué)研究的“明星”。微生物學(xué)很快與生物學(xué)主流匯合，并被推到了整個(gè)生命科學(xué)發(fā)展的前沿，獲得了迅速的發(fā)展，為整個(gè)生命科學(xué)的發(fā)展做出了巨大的貢獻(xiàn)(可舉例說明)，在生命科學(xué)的發(fā)展中占有重要的地位。5．可從以下幾方面論述微生物學(xué)的發(fā)展前量景：微生物基因組學(xué)研究將全面展開；以了解微生物之間、微生物與其他生物、微生物與環(huán)境的相互作用為研究?jī)?nèi)容的微生物生態(tài)學(xué)、環(huán)境微生物學(xué)、細(xì)胞微生物學(xué)等，將在基因組信息的基礎(chǔ)上獲得長(zhǎng)足發(fā)展，為人類的生存和健康發(fā)揮積極的作用；微生物生命現(xiàn)象的特性和共性將更加受到重視；與其他學(xué)科實(shí)現(xiàn)更廣泛的交叉，獲得新的發(fā)展；微生物產(chǎn)業(yè)將呈現(xiàn)全新的局面。培養(yǎng)物能較好地被研究、利用和重復(fù)結(jié)果。第二章微生物的純培養(yǎng)和顯微鏡技術(shù)一、術(shù)語(yǔ)或名詞菌落(c010ny)子細(xì)胞生長(zhǎng)群體。菌苔(lawn)?固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時(shí)所形成的微生物生長(zhǎng)群體。???3．平皿(Petridish)?由玻璃或透明塑料制成的圓形皿底和皿蓋組成，皿蓋可覆蓋于皿底之?上，防止空氣中微生物的污染。其英文名稱是為紀(jì)念其發(fā)明者RichardPetri。???4．純培養(yǎng)物(pureculture)?由一種微生物組成的細(xì)胞群體，通常是由一個(gè)單細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖所形成。???5．培養(yǎng)基(culturemedium)?供微生物生長(zhǎng)、繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，根據(jù)其中固化劑含量的不同可分為固體、半固體、液體3種。???6．無菌技術(shù)(aseptictechnique)?在分離、轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)純種微生物時(shí)，防止其被環(huán)境中微生物污染或其自身污染環(huán)境的技術(shù)。???7．培養(yǎng)平板(cultureplate)?常簡(jiǎn)稱為平板，指固體培養(yǎng)基倒人無菌平皿，冷卻凝固后所形成的培養(yǎng)基平面。???8．稀釋倒平板法(pourplatemethod)?將待分離的材料稀釋后與已熔化并冷卻至50℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后制成可能含菌的培養(yǎng)平板，保溫培養(yǎng)后分離得到的微生物菌落生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)基表面和里面。???9．涂布平板法(spreadplatemethod)?在培養(yǎng)平板表面均勻涂布經(jīng)過稀釋的微生物懸液后，保溫培養(yǎng)，在固體培養(yǎng)基表面得到生長(zhǎng)分離的微生物菌落。???10．平板劃線法(streakplatemethod)?用接種環(huán)在培養(yǎng)平板表面劃線接種微生物，使微生物細(xì)胞數(shù)量隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分開。保溫培養(yǎng)后，在固體培養(yǎng)基表面得到生長(zhǎng)分離的微生物菌落。???11．稀釋搖管法(dilutionshakeculturemethod)?將待分離的材料稀釋后與已熔化并冷卻至?50~C左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后用石蠟封蓋，保溫培養(yǎng)后分離得到的微生物菌落生長(zhǎng)在瓊脂柱中間。???12．單細(xì)胞分離法(singlecellpickupmethod)?采用顯微操作技術(shù)直接挑取微生物的單細(xì)胞(孢子)，培養(yǎng)后獲得純培養(yǎng)物。???13．富集培養(yǎng)(enrichmentculture)?利用不同微生物間生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同，制定特定的環(huán)境條件，使僅適應(yīng)于該條件的微生物旺盛生長(zhǎng)，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，從自然界中分離到所需的特定微生物。???14．二元培養(yǎng)物(two—componentculture)?由兩種具有特定關(guān)系(例如寄生或捕食)的微生?物組成的混合培養(yǎng)物。???15．原子力顯微鏡(atomicforcemicroscope)?掃描探針顯微鏡的一種，利用細(xì)小的探針對(duì)樣品表面進(jìn)行恒定高度的掃描，同時(shí)通過一個(gè)激光裝置來監(jiān)測(cè)探針隨樣品表面的升降變化來獲取樣品表面形貌的信息。???16．明視野顯微鏡(bright—fieldmicroscope)?這種顯微鏡的照明方式為透射照明，即光線直接進(jìn)入視野，在一個(gè)相對(duì)明亮的背景中形成一個(gè)暗的物像。???17．聚焦掃描激光顯微鏡(confocalscanninglasermicroscope，CSLM)而大大減少樣品其他部分發(fā)出的雜散光的干擾。觀察時(shí)通過激光器或載物臺(tái)掃描，計(jì)算機(jī)處理，最終獲得反差鮮明、高分辨率的三維立體數(shù)字圖像。???18．熒光顯微鏡(fluorescencemicroscope)形成的物像。19．?dāng)?shù)值孔徑(numericalaperture)?決定顯微鏡物鏡分辨率性能物理指標(biāo)，取決于物鏡的鏡口角和玻片與鏡頭間介質(zhì)的折射率。20．相差顯微鏡(phase—contrastmicroscope)?這種光學(xué)顯微鏡通過特殊的裝置把樣品不同部位間折射率和細(xì)胞密度的微弱差異轉(zhuǎn)變?yōu)槿搜劭梢圆煊X的明暗差，可在不染色的情況下對(duì)透明的活細(xì)胞及其內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行直接觀察。21．分辨率(resolution)?能辨析兩點(diǎn)之間最小距離的能力，距離越小，分辨率越高。掃描電子顯微鏡(scanningelectronmicroscope，SEM)成樣品的表面圖像。掃描探針顯微鏡(scanningprobemicroscope)鏡)。掃描隧道顯微鏡(scanningtunnelingmicroscope)和樣品間隧道效應(yīng)電流的變化形成物像。透射電子顯微鏡(transmissionelectronmicroscope)26．反差(contrast)?被觀察物區(qū)別于背景的程度。(dark—fieldmicroscope)像。固定(fixation)29．負(fù)染色(negativestaining)?染料使背景顏色加深而樣品沒有著色的染色法。30．菌絲體(mycelium)?聚成一團(tuán)的分支菌絲，見于真菌和某些細(xì)菌。31．菌絲(hypha)32．雙球菌(diplococcus)?分裂后成對(duì)排列的球菌。33．球菌(COCCUS)?細(xì)胞大致呈球狀的細(xì)菌。34．螺菌(spirillum)?剛性的螺旋狀細(xì)菌。35．螺旋體(spirochete)?柔韌的螺旋狀細(xì)菌，具有周質(zhì)鞭毛。桿菌(rod)?細(xì)胞呈桿狀的細(xì)菌。柄細(xì)菌(prosthecatebacteria)?細(xì)胞上有柄、菌絲、附器等細(xì)胞質(zhì)伸出物，細(xì)胞呈桿狀或梭狀，并有特征性細(xì)柄的細(xì)菌。霉菌(mold)?以多細(xì)胞絲狀群體形式生存的真菌。真菌(fungi)?有線粒體，無葉綠體，沒有根、莖、葉分化，以無性和有性孢子進(jìn)行繁殖的真核微生物。酵母菌(yeast)?單細(xì)胞真菌。藻類(algae)?能進(jìn)行光合作用的真核微生物。原生動(dòng)物(prokaryote)二、習(xí)?題填空題動(dòng)植物的研究能以???體為單位進(jìn)行，而對(duì)微生物的研究一般用體。在微生物學(xué)中，在人為規(guī)定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體稱為培養(yǎng)物，其中只有? ?一般情況下，培養(yǎng)微生物的器具，在使用前必須先行??? ，使容器中不含?? ?。???4．用培養(yǎng)平板進(jìn)行微生物純培養(yǎng)分離的方法包括：??

?、?

??和??? 。???5．微生物在特定培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征，可以成為對(duì)該微生物進(jìn)行??依據(jù)。

?、?? ?的重要???6．微生物保藏的目標(biāo)就是要使所保藏菌株在一段時(shí)間不?????7．一般說來，采用冷凍法時(shí)，保藏溫度越???，保藏效果越???。???8,???、???和???是影響顯微鏡觀察效果的3個(gè)重要因素。

?、不?? ?和不??? 。???X???x分辨。在???的照射下，發(fā)熒光的物體會(huì)在黑暗的背景下表現(xiàn)為光亮的有色物體，這就是熒光顯微技術(shù)的原理。或???進(jìn)行觀察、記錄。???3顯微鏡才能看見。選擇題（4個(gè)答案選1）???1．培養(yǎng)微生物的常用器具中，(???)是專為培養(yǎng)微生物設(shè)計(jì)的。???A平皿???B試管???C燒瓶???D燒杯???2．(???)可用來分離培養(yǎng)出由科學(xué)家設(shè)計(jì)的特定環(huán)境中能生長(zhǎng)的微生物，盡管我們并不知道什么微生物能在這種特定的環(huán)境中生長(zhǎng)。???A選擇平板???B富集培養(yǎng)???C稀釋涂布???D單細(xì)胞顯微分離???3．下面哪一項(xiàng)不屬于稀釋倒平板法的缺點(diǎn)?(???)A菌落有時(shí)分布不夠均勻B熱敏感菌易被燙死?C嚴(yán)格好氧菌因被固定在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)受到影響D環(huán)境溫度低時(shí)不易操作???4．下面哪一種方法一般不被用作傳代保藏?(???)??????A瓊脂斜面???B半固體瓊脂柱?C培養(yǎng)平板???D搖瓶發(fā)酵???5．冷凍真空干燥法可以長(zhǎng)期保藏微生物的原因是微生物處于(???)的環(huán)境，代謝水平大大降低。???A????B???C???D6?A???B???C???DA???B???C???D胞內(nèi)的某些細(xì)微結(jié)構(gòu)，是因?yàn)樗淖兞藰悠凡煌课婚g光的(???)，使人眼可以察覺。?A波長(zhǎng)???B顏色???C相位???D振幅9．(???)不是鑒別染色。A抗酸性染色???B革蘭氏染色???C活菌染色???D芽孢染色10．細(xì)菌的下列哪項(xiàng)特性一般不用作對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分類、鑒定?(???)?A???B?C???D是非題1．為了防止雜菌，特別是空氣中的雜菌污染，試管及玻璃燒瓶都需采用適宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各種金屬、塑料及硅膠帽，并在使用前進(jìn)行高溫干熱滅菌。2，所有的微生物都能在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，因此，用固體培養(yǎng)基分離微生物的純培養(yǎng)是最重要的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。所有的培養(yǎng)基都是選擇性培養(yǎng)基。直接挑取在平板上形成的單菌落就可以獲得微生物的純培養(yǎng)。用稀釋搖管法分離獲得的微生物均為厭氧微生物。為主要的微生物保存手段。光學(xué)顯微鏡的分辨率與介質(zhì)折射率有關(guān)，由于香柏油的介質(zhì)折射率(約1．5)高于空氣(1．0高倍鏡，目前科學(xué)家正在尋找折射率比香柏油更高的介質(zhì)以進(jìn)一步改善光學(xué)顯微鏡的觀察效果。與其他電子顯微鏡相比，掃描隧道顯微鏡在技術(shù)上的最大突破是能對(duì)活樣品進(jìn)行觀察。與光學(xué)顯微鏡相比，電子顯微鏡的分辨率雖然有很大的提高，但卻無法拍攝彩色照片。樣可以看得更清楚。問答題培養(yǎng)平板、在日常環(huán)境中直接打開皿蓋觀察和挑取菌落，而其研究結(jié)果并沒有因此受到影響，你知道這是為什么嗎?如果希望從環(huán)境中分離得到厭氧固氮菌，你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?15X30x)來進(jìn)?一步提高顯微鏡的總放大倍數(shù)?觀察樣品的表面結(jié)構(gòu)?試論電子顯微鏡在進(jìn)行生物樣品制備與觀察時(shí)應(yīng)注意的問題。三、習(xí)題解答填空題???1．個(gè)?群???2．純???3。滅菌?任何生物???4．稀釋倒平板法?涂布平板法?平板劃線法???5．分類?鑒定???6．死亡?污染?變異???7．低(高)?好(差)???8．放大?反差?分辨率??9．1000～1500x?10或15?90或100?香柏油???10???11．紫外線???12．光源?真空?熒光屏?照片???13．球狀?桿狀?螺旋狀???14．菌絲體?營(yíng)養(yǎng)菌絲?氣生菌絲??繁殖菌絲???15．原生動(dòng)物選擇題???1．?A???2．?B???3．?A???4．?D???5．?B???6．?B???7．?C???8．?D???9．?C???10．?D問答題是非題??錯(cuò)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)對(duì)對(duì)錯(cuò)對(duì)問答題???1．培養(yǎng)極端嗜鹽菌的培養(yǎng)平板需要添加很高濃度的氯化鈉(25％)，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中的一般微生物都不能在這種選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，因此在實(shí)驗(yàn)過程中即使不采取無菌操作技術(shù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果仍不會(huì)受到影響。???2．（1）根據(jù)選擇分離的原理設(shè)計(jì)不含氮的培養(yǎng)基，在這種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌，其氮素應(yīng)來自固氮作用。（2）將環(huán)境樣品(例如土樣)稀釋涂布到選擇平板上，放置于厭氧罐中。對(duì)厭氧罐采用物理、化學(xué)方法除去氧氣，保留氮?dú)狻Ｅ囵B(yǎng)后在乎板上生長(zhǎng)出來的細(xì)菌應(yīng)是厭氧固氮菌或兼性厭氧固氮菌。（3）挑取一定數(shù)量的菌落，對(duì)應(yīng)點(diǎn)種到兩塊缺氮的選擇平板上，分別放置于厭氧罐內(nèi)、外保溫培養(yǎng)。在厭氧罐內(nèi)外均能生長(zhǎng)的為兼性厭氧固氮菌，而在厭氧罐外的平板上不生長(zhǎng)，在厭氧罐內(nèi)的平板上生長(zhǎng)的即為可能的厭氧固氮菌。（4）分離得到的厭氧固氮菌菌落樣品進(jìn)行系列稀釋，涂布于相應(yīng)的選擇平板，重復(fù)上述步驟直到獲得厭氧固氮菌的純培養(yǎng)。3．光學(xué)顯微鏡的分辨率受到光源波長(zhǎng)及物鏡性能的限制，在使用最短波長(zhǎng)的可見光(4．50nnl)作為光源時(shí)在油鏡下可以達(dá)到的最大0．18μm0．25mm1000～1500100x15x30x)進(jìn)一步提高顯微鏡的放大能力對(duì)觀察效果的改善并無幫助。???4．（1）透射電子顯微鏡的成像原理類似于普通光學(xué)顯微鏡，作為光源的電子束在成像時(shí)要穿透樣品。由于電子束的穿透力有限，因此在進(jìn)行透射電鏡觀察時(shí)要求樣品一定要薄。而掃描電鏡的成像原理類似于電視或電傳真照片，圖像是通過收集樣品表面被激發(fā)的二次電子形成的，因此對(duì)樣品的厚度并無特別的要求。（2）掃描電鏡一般被用于觀察樣品的表面結(jié)構(gòu)，但通過樣品制備過程中的冰凍蝕刻技術(shù)，用掃描電鏡也可觀察到樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，獲得立體的圖像。（3）制備過程中的復(fù)型技術(shù)，用透射電鏡也可對(duì)樣品的表面結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察。5．（1）電子束的穿透能力：電子束的穿透能力是十分有限的，超薄切片是基本的透射電鏡實(shí)驗(yàn)技術(shù)。相比之下，掃描電鏡對(duì)樣品的大小和厚度沒有嚴(yán)格的要求。（2）生物組織的特點(diǎn)：生物組織的主要成分之一是水，若生物樣品不經(jīng)處理直接放進(jìn)電鏡，鏡筒中的高真空必然會(huì)使樣品發(fā)生嚴(yán)重的脫水現(xiàn)象，失去樣品原有的空間構(gòu)型，所以一般都不能用電鏡進(jìn)行生物樣品的活體觀察。而且，由于生物樣品很容易遭到破壞，在對(duì)樣品進(jìn)行固定、干燥、染色及其他一些處理過程中，也必須隨時(shí)注意使樣品盡量保持生活狀態(tài)下的精細(xì)結(jié)構(gòu)，而不嚴(yán)重失真。另外，在掃描電鏡的使用中，除要求樣品干燥外，還需要樣品具一定的導(dǎo)電能力，以減少樣品表面電荷的堆積并得到良好的二次電子信號(hào)。而生物樣品一般都是不導(dǎo)電的，所以在制備掃描電鏡生物樣品時(shí)，一般需在其表面鍍上一層金屬薄膜。（3）增加樣品的反差：顯微觀察時(shí)，只有樣品具有一定的反差，才能得到清晰的圖像。光學(xué)顯微鏡可以通過各種染色技術(shù)來增加樣品的反差，并得到彩色的樣品圖像。而在電鏡的使用中，彩色染料是不采用的，因?yàn)閮煞N不同的顏色在電鏡中是不能區(qū)別的。電鏡中生物樣品不同結(jié)構(gòu)之間反差的取得一般是用重金屬鹽染色或噴鍍，凡是嗜金屬的結(jié)構(gòu)，對(duì)電子的散射與吸收的能力增強(qiáng)，易于形成明暗清晰的電子圖像。而且，由于電子圖像是靠不同電子密度形成的亮度差異而構(gòu)成，所以，電鏡得到的電視或照相圖像都是黑白的。6．（1）首先應(yīng)使用稀釋涂布等方法對(duì)待檢菌株的純度、群落形態(tài)、生理特性等進(jìn)行檢查、確認(rèn)。（2）選用正常的新鮮培養(yǎng)基和新鮮培養(yǎng)物進(jìn)行培養(yǎng)和觀察，避免培養(yǎng)過程中一些物理、化學(xué)條件的改變或培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)等因素對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響。（3）應(yīng)選用多個(gè)細(xì)胞檢測(cè)的平均數(shù)，并記錄所用的實(shí)驗(yàn)方法，包括培養(yǎng)條件、培養(yǎng)時(shí)間、樣品制備方法和染色方法等。（4）上對(duì)細(xì)菌、酵母菌和原生動(dòng)物進(jìn)行區(qū)分。酵母菌、原生動(dòng)物個(gè)體較大，一般可用低倍鏡觀察，酵母菌細(xì)胞一般呈卵圓形、圓形、圓柱形或檸檬形，不具運(yùn)動(dòng)性，原生動(dòng)物細(xì)胞形態(tài)多變，能夠運(yùn)動(dòng)。相比較而言，細(xì)菌細(xì)胞一般較小，需用高倍鏡或油鏡才能看清。?附：顯微鏡種類比較顯微鏡類型基本原理及特點(diǎn)應(yīng)???用明視野顯光線透射照明，物像處于亮背景中。為光學(xué)顯各種情況下染色樣品或活細(xì)胞個(gè)體形態(tài)的觀微鏡微鏡的最基本配置，價(jià)格便宜、容易使用察明視野顯微鏡下不易看清的活細(xì)胞的觀察；光學(xué)顯暗視野顯?通過特殊的聚光器實(shí)現(xiàn)斜射照明，亮物像形成于暗背不易被染色或易被染色過程破壞的細(xì)胞的觀微鏡微鏡景中察(例如對(duì)梅毒密螺旋體的檢測(cè))；觀察活細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)性鏡

通過特殊的聚光器和物鏡提高樣品不同部位間的反差(明暗差異)

?活細(xì)胞及其內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察電子顯微鏡探針掃描顯微鏡

鏡微鏡透射電鏡掃描電鏡顯微鏡微鏡

經(jīng)熒光染料染色或熒光抗體處理的樣品在紫外線照射下激發(fā)出各種波長(zhǎng)的可見光，在黑暗的背景中形成明亮的彩色物像掃描后經(jīng)計(jì)算機(jī)處理獲得樣品的二維或三維圖像。顯微鏡價(jià)格昂貴用電子束作為“光源”聚焦成像，分辨率較光學(xué)顯微鏡大大提高。儀器龐大、昂貴、對(duì)工作環(huán)境和操作技術(shù)有較高要求電子束在樣品表面掃描，收集形成的二次電子形成物作環(huán)境和操作技術(shù)有較高要求用細(xì)小的探針在樣品表面進(jìn)行掃描，通過檢測(cè)針尖和樣品間隧道效應(yīng)電流的變化形成物像利用細(xì)小的探針對(duì)樣品表面進(jìn)行恒定高度的掃描，同時(shí)通過一個(gè)激光裝置來監(jiān)測(cè)探針隨樣品表面的升降變化來獲取樣品表面形貌的信息

環(huán)境微生物的直接觀察；病灶或醫(yī)學(xué)樣品中特定病原微生物的直接檢測(cè)(使用特定的熒光抗體)?對(duì)完整細(xì)胞的細(xì)微立體結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察和分析?對(duì)病毒顆粒或超薄片處理后對(duì)細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察一般用于觀察樣品的表面立體結(jié)構(gòu)?與電子顯微鏡相比，這類顯微鏡能提供子或細(xì)胞結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察。同時(shí)儀器體積較小，價(jià)格也相對(duì)便宜項(xiàng)?目?內(nèi)質(zhì)網(wǎng)?核糖體?高爾基體?溶酶體?微體?線粒體?葉綠體

?形?態(tài)囊腔，細(xì)管形小顆粒狀扁平膜囊和小囊泡?球形小·囊泡?球形小囊泡?桿菌狀或囊狀扁球狀或扁橢圓狀

???構(gòu)?造有膜。分兩種：糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜上有核糖體粒，光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜上無核糖體粒?無膜。表層為蛋白質(zhì)，內(nèi)芯為RNA有膜。由數(shù)個(gè)扁平膜囊和大小不等的囊泡組成有膜。小囊泡內(nèi)含數(shù)十種酸性水解酶有膜。小囊泡內(nèi)含氧化酶和過氧化氫酶等有內(nèi)外兩層膜。內(nèi)膜可形成嵴，其上有大量的基粒(ATP酶復(fù)合體)?；|(zhì)內(nèi)含TCA酶系、70S核糖體和雙鏈環(huán)狀DNA由內(nèi)、外兩層膜以及類囊體和基質(zhì)構(gòu)成。70SDNA類囊體數(shù)量多，常疊成基粒

???數(shù)?量?數(shù)量少數(shù)量極多，變化大?數(shù)量少數(shù)量較多，但變化大數(shù)量較多，但變化大?數(shù)量多，但變化大僅存在于光合生物中。不同細(xì)胞中數(shù)量變化很大

???功?能質(zhì)，光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成磷脂合成蛋白質(zhì)濃縮蛋白質(zhì)，合成糖蛋白和脂蛋白，協(xié)調(diào)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境?執(zhí)行細(xì)胞內(nèi)的消化功能?對(duì)脂肪酸進(jìn)行氧化?對(duì)底物進(jìn)行氧化磷酸化以產(chǎn)生ATP利用CO：和H：O進(jìn)行光合作用，以合成葡萄糖和釋放氧第三章微生物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能一、術(shù)語(yǔ)或名詞原核生物(proksryotes)?一大類細(xì)胞微小、只有稱作核區(qū)(無細(xì)胞膜包裹的裸露DNA)的原核單細(xì)胞生物。所有原核生物都是微生物，包括真細(xì)菌和古生菌兩大類群。原核生物與真核生物的主要區(qū)別是：①基因組由無核膜包裹的雙鏈DNA70S細(xì)菌細(xì)胞壁(ceUWaUofbacteris)?位于細(xì)菌細(xì)胞最外面的一層厚實(shí)、堅(jiān)韌的外被，主要由肽聚糖組成，有固定細(xì)胞外形和保護(hù)細(xì)胞免受損傷等多種功能。革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌細(xì)胞壁的特點(diǎn)是厚度大(20—80rim)和化學(xué)組分簡(jiǎn)單，一般只含90％肽聚糖和10性細(xì)菌的細(xì)胞壁由外膜(含脂多糖、磷脂和外膜蛋白)和一薄層肽聚糖(2～3am)組成。肽聚糖(peptidoglycan)?真細(xì)菌細(xì)胞壁的特有成分，由無數(shù)肽聚糖單體以網(wǎng)狀形式交聯(lián)而成。肽聚糖單體由肽與聚糖兩部分構(gòu)成，其N—乙酰葡糖胺和／V—乙酰胞壁酸以"—1，4CL—AlaD—Glu、L—LysD—Ala45GlyCL—AlaD—Glum—DAPD—Ala磷壁酸(teichoicacid)?G是與肽聚糖分子間進(jìn)行共價(jià)結(jié)合的磷壁酸，后者則是跨越肽聚糖層并與細(xì)胞膜相交聯(lián)的磷壁酸。外膜(outermembrane)?位于G(LPS)、磷脂、脂蛋白和其他蛋白組成的厚膜。脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS)C8—10nmAO—3C—細(xì)菌致病物質(zhì)內(nèi)毒素的成分。外膜蛋白(outermembraneprotein)嵌合在C—細(xì)菌細(xì)胞壁外膜上的多種蛋白質(zhì)成分，如脂蛋白和孔蛋白等。8．周質(zhì)空間(periplasmicspace)C和受體蛋白等。假肽聚糖(pseudopeptidoglycan)?甲烷桿菌屬(Methanobacterium)等部分古生菌細(xì)胞壁的主要成分。其多糖骨架由N—乙酰葡糖胺和N—乙酰塔羅糖胺糖醛酸以"—1，3L—Glu、L—AlaL—Lys3LL—Gin缺壁細(xì)菌(cellwalldeficientbacteria)L11．L型細(xì)菌(1formofbacteria)?指在實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi)通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷菌株。因最初發(fā)現(xiàn)的念珠狀鏈桿菌(Streptobacillusmonil扣rmis)是在英國(guó)Lister研究所發(fā)現(xiàn)，故稱L型細(xì)菌。原生質(zhì)體(protoplast)?在人為條件下，用溶菌酶除盡細(xì)菌等微生物原有細(xì)胞壁或用青霉素抑制新生細(xì)胞壁合成后，所得到的僅有一C殖能力。球狀體(sphaeroplast)G—細(xì)菌一般只形成球狀體。14．細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜(cytoplasmicmembraneOfbacteria)?又稱細(xì)菌細(xì)胞膜。是緊貼在細(xì)菌細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)、包圍著細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜，厚約?～8nm，由磷脂(占20％-30％)和蛋白質(zhì)(占50％～70％外的物質(zhì)交流。間體(mesosome)?細(xì)菌細(xì)胞中的一種由細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)褶而形成的囊狀構(gòu)造，其中充滿著層狀或管狀的泡囊。多見于GDNA細(xì)菌的細(xì)胞質(zhì)(cytoplasmofbacteria)內(nèi)含物，核糖體、酶類、中間代謝物、質(zhì)粒、各種營(yíng)養(yǎng)牧和大分子的單體等。細(xì)菌的內(nèi)含物(inclusionbodyofbacteria)?細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形狀較大的顆粒和泡囊狀構(gòu)造，包括各種貯藏物、羧酶體、氣泡或磁小體等。18．聚—β—羥丁酸(poly—βhydroxybutyrate，PHB)藏能量、碳源和降低細(xì)胞內(nèi)滲透壓的作用。異染粒(metachromaticgranules)菌和結(jié)核分枝桿菌中易見到異染粒。羧酶體(carboxysome)?存在于一些自養(yǎng)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的多角形或六角形內(nèi)含物，內(nèi)含1，5—二磷酸核酮糖羧化酶，在自養(yǎng)細(xì)菌的固定中起著關(guān)鍵作用。21．．核區(qū)(nuclearregion)?又稱核質(zhì)體，指原核生物所特有的無核膜結(jié)構(gòu)、無固定形態(tài)的原始細(xì)胞核。其成分是一個(gè)大型環(huán)狀雙鏈DNA分子，它是細(xì)菌負(fù)載遺傳信息的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。22．芽孢(endospore)輻射等)極強(qiáng)的休眠體。產(chǎn)芽孢的細(xì)菌主要有芽孢桿菌屬(Bacillus(Clostridium)兩屬。23．滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說(osmoregulatoryexpandedcortextheory)?解釋芽孢耐熱機(jī)制的一個(gè)較新的學(xué)說。它認(rèn)為芽孢的耐熱性在于芽孢衣對(duì)多價(jià)陽(yáng)離子和水分的透性很差，以及皮層的離子強(qiáng)度很高，從而使皮層產(chǎn)生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分，其結(jié)果導(dǎo)致皮層的充分膨脹，而作為芽孢的生命部分——芽孢核心的細(xì)胞質(zhì)卻發(fā)生高度失水，并由此變得高度耐熱了。24．伴孢晶體(parasporalcrystal)?蘇云金芽孢桿菌等少數(shù)芽孢桿菌在其形成芽孢的同時(shí)，會(huì)在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體(6內(nèi)毒素)，稱為伴孢晶體。它對(duì)約200種昆蟲尤其是鱗翅目的幼蟲有毒殺作用，故可制成細(xì)菌殺蟲劑。25．糖被(glycocalyx)?指包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質(zhì)。糖被有數(shù)種：①形態(tài)固定、層次厚的為莢膜。②形態(tài)固定、層次薄的為微莢膜。③形態(tài)不固定、結(jié)構(gòu)松散的為黏液層。④包裹在細(xì)胞群體上有一定形態(tài)的糖被稱菌膠團(tuán)。糖被的主要功能是保護(hù)菌體免受干旱損傷或被宿主免疫活性細(xì)胞吞噬。細(xì)菌鞭毛(flagellaofbacteria)?生長(zhǎng)在某些細(xì)菌體表的長(zhǎng)絲狀、波曲、可旋轉(zhuǎn)的蛋白質(zhì)附屬物，其數(shù)目一至數(shù)十條，具有運(yùn)動(dòng)功能。鞭毛由基體、鉤形鞘和鞭毛絲3要指標(biāo)。菌毛(fimbriae)C—致病細(xì)菌。菌毛的功能是使細(xì)菌可牢固地黏附于寄主的呼吸道、消化道或泌尿生殖道等的黏膜細(xì)胞上，以利定植和致病。?性毛(pili，sexpili)G—細(xì)菌的雄性菌株上，其主要功能是向雌性菌株傳遞遺傳物質(zhì)。真核微生物(eukaryoticmicrooganisms)?凡是細(xì)胞核具有核膜、細(xì)胞能進(jìn)行有絲分裂、細(xì)胞質(zhì)中存在線粒體或同時(shí)存在葉綠體等細(xì)胞器的生物，稱真核生物。微生物中的真菌、顯微藻類、原生動(dòng)物和地衣均屬于真核生物，故可稱為真核微生物。30．“9+2”型鞭毛(“9+2”typeflagella)?在某些真核細(xì)胞表面長(zhǎng)有毛發(fā)狀、具有運(yùn)動(dòng)功能的細(xì)胞器，稱為鞭毛。它由基體、過渡區(qū)和39型鞭毛。細(xì)胞核(nucleus)?存在于一切真核細(xì)胞中的形態(tài)完整、有核膜包裹的細(xì)胞核，它是細(xì)胞內(nèi)遺傳信息(：DNA要部位，并對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及遺傳和變異等生命活動(dòng)起著決定性的作用。細(xì)胞核由核被膜、染色質(zhì)、核仁和核基質(zhì)等構(gòu)成。染色質(zhì)(chromatin)?真核細(xì)胞處于分裂的間期時(shí)，其細(xì)胞核內(nèi)的DNA物，稱為染色質(zhì)。染色質(zhì)的基本單位是核小體。染色體(chromasome)濃縮成在光學(xué)顯微鏡下可見的棒狀結(jié)構(gòu)，即稱染色體。核小體(nucleosome)HA、HB、HH2 2 3 4體外有以左手方向盤繞兩周的DNA鏈，另有一個(gè)組蛋白分子H，與連接DNA相結(jié)合，鎖住了核小體的進(jìn)出口，從而保持其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。1核仁(nucleolus)?細(xì)胞核中一個(gè)沒有膜包裹的圓形或橢圓形小體。每個(gè)核中有一至數(shù)，富含蛋白質(zhì)和RNA，是真核細(xì)胞中合成和裝配核糖體的部位。核基質(zhì)(nuclearmatrix)功能。細(xì)胞器(organelle)葉綠體等。細(xì)胞骨架(cytoskeleton)3內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmicreticulum)其一因膜上附有核糖體顆粒，稱糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，具有合成和運(yùn)送胞外分泌蛋白至高爾基體中去的功能；其二為膜上無核糖體的光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，是脂代謝、鈣代謝和合成磷脂的部位。核糖體(ribosome)?是一種無膜包裹的顆粒狀細(xì)胞器，具有合成蛋白質(zhì)的功能。外層為蛋白質(zhì)，內(nèi)層為RNA70S80S高爾基體(Golgiapparatus)白，對(duì)某些蛋白質(zhì)原進(jìn)行酶切加工，以及對(duì)新細(xì)胞壁和細(xì)胞膜提供合成原料等多種功能。溶酶體(1ysosome)?一種由單層膜包裹、內(nèi)含多種酸性水解酶的囊泡狀細(xì)胞器，具有進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)消化的功能。微體(microbody)氧化物酶體。線粒體(mitochondria)?一種由雙層膜包裹的、執(zhí)行氧化磷酸化產(chǎn)能反應(yīng)的重要細(xì)胞器，一般呈桿菌狀，數(shù)量很多。由內(nèi)外兩層膜包裹，內(nèi)膜向內(nèi)伸展，形成許多嵴，其上著生許多基粒(即為ATP4TCADNA70S葉綠體(chloroplast)3DNA1)~70S二、習(xí)?題?填空題?1．證明細(xì)菌存在細(xì)胞壁的主要方法有???，?????，?????和?????等4種。?2．細(xì)菌細(xì)胞壁的主要功能為????，?????，?????和????等。3．革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分為和，而革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分則是?????、?????、?????和?????。?4．肽聚糖單體是由??

? ??和??? ??以??? ??糖苷鍵結(jié)合的?? ???，以?

??和? ??3種成分組成的，其中的糖苷鍵可被???? ?水解。?5．+’細(xì)菌細(xì)胞壁上磷壁酸的主要生理功能?? ?? ??、????? 、?????和?????????等幾種。?6．——細(xì)菌細(xì)胞外膜的構(gòu)成成分??? ??、?? ??、?? ??和?????。?7．脂多糖(LPS)是由3種成分組成的，?? ?????? ??和?????。?8．在LPS的分子中，存在有3種獨(dú)特糖，它們是??? ?、??? ??和?????。?9．用人為方法除盡細(xì)胞壁的細(xì)菌稱?? ?，未除盡細(xì)胞壁的細(xì)菌稱為????，因在實(shí)驗(yàn)室中發(fā)生缺壁突變的細(xì)菌稱為???，而在自然界長(zhǎng)期進(jìn)化中形成的穩(wěn)定性缺壁細(xì)菌則稱為??? ??。?10．細(xì)胞質(zhì)膜的主要功能???? ?、?? ????? ???????

?和?

????。?11．在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)貯藏有大量聚犀—羥基丁酸(PHB)的細(xì)菌有?????、??

??、??

??和??

???等。?124

?、??? ?? 、???

?和??? ??。?13．在芽孢皮層中，存在的物質(zhì)，稱為?? ???。

??和?

??2種特有的與芽孢耐熱性有關(guān)的物質(zhì)，在芽孢核心中則存在另一種可防護(hù)DNA免受損傷?14．芽孢的形成須經(jīng)過7個(gè)階段，它們?? ??、?????????15．芽孢萌發(fā)要經(jīng)過???、???和???3個(gè)階段。

??、????、???????、?????和?????。?16．在不同的細(xì)菌中存在著許多休眠體構(gòu)造，如?????、????

?、??? ??和??

?等。?174

????、????

?、?? ??和???

??。?18．細(xì)菌糖被的主要生理功能為????

?、?????

、???

??、???

?、???

?和???

?等。?19．細(xì)菌的糖被可被用于?????、??

???、??

???和????

?等實(shí)際工作中。?20．判斷某細(xì)菌是否存在鞭毛，通?？刹捎????

?、???

?、????

?和??? ??等方法。?21G—???3環(huán)。

?、????????和????4個(gè)與鞭毛旋轉(zhuǎn)有關(guān)的在G—于????????，功能為??????。等。

?和??????等，而借側(cè)生鞭毛運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌則有???????327．真核生物的細(xì)胞核由?????、?????、??????和??????4部分組成。???3?????S?????S??S著???S????S????S31．真核微生物包括?????、?????、????和?????等幾個(gè)大類。32選擇題（41）CA???B???C???DLPS?2．C’細(xì)菌細(xì)胞壁中不含有的成分是(???)。A類脂???B磷壁酸???C肽聚糖???D蛋白質(zhì)?3．肽聚糖種類的多樣性主要反映在(???)結(jié)構(gòu)的多樣性上。A肽橋???B黏肽???C雙糖單位???D四肽尾?4A???B???CG???DG—?5．在G—細(xì)菌肽聚糖的四肽尾上，有一個(gè)與G+???A賴氨酸???B蘇氨酸???C二氨基庚二酸???D絲氨酸?6．脂多糖(LPS)是C—細(xì)菌的內(nèi)毒素，其毒性來自分子中的(???)。A阿比可糖???B核心多糖???CO特異側(cè)鏈???D類脂A?7．用人為的方法處理G—A原生質(zhì)體???B支原體???C球狀體???DL型細(xì)菌?8．異染粒是屬于細(xì)菌的(???)類貯藏物。A磷源類???B碳源類???C能源類???D氮源類?9．最常見的產(chǎn)芽孢的厭氧菌是(???)。A芽孢桿菌屬???B梭菌屬???C孢螺菌屬???D芽孢八疊球菌屬?10．在芽孢的各層結(jié)構(gòu)中，含DPA—Ca量最高的層次是(???)。A孢外壁???B芽孢衣???C皮層???D芽孢核心?11．在芽孢核心中，存在著一種可防止DNA降解的成分(???)。ADPA—Ca???B小酸溶性芽孢蛋白C二氨基庚二酸???D芽孢肽聚糖?12．蘇云金芽孢桿菌主要產(chǎn)生4種殺蟲毒素，其中的伴孢晶體屬于(???)。Ao毒素???Bp毒素???C丁毒素???D6毒素?13．在真核微生物，例如(???)中常常找不到細(xì)胞核。A真菌菌絲的頂端細(xì)胞B酵母菌的芽體C曲霉菌的足細(xì)胞D青霉菌的孢子梗細(xì)胞?14．按鞭毛的著生方式，大腸桿菌屬于(???)。A單端鞭毛菌??B周生鞭毛菌??C兩端鞭毛菌??D側(cè)生鞭毛菌?15．固氮菌所特有的休眠體構(gòu)造稱為(???)。A孢囊???B外生孢子???C黏液孢子???D芽孢?16．在酵母菌細(xì)胞壁的4種成分中，賦予其機(jī)械強(qiáng)度的主要成分是(???)。A幾丁質(zhì)???B蛋白質(zhì)???C葡聚糖???D甘露聚糖?17．在真核微生物的“9+2”型鞭毛中，具有ATP酶功能的構(gòu)造是(???)。A微管二聯(lián)體???B中央微管???C放射輻條???D動(dòng)力蛋白臂?18．構(gòu)成真核微生物染色質(zhì)的最基本單位是(???)。A螺線管???B核小體???C超螺線管???D染色體?19．在真核微生物的線粒體中，參與TCA循環(huán)的酶系存在于(???)中。A內(nèi)膜???B膜間隙???C嵴內(nèi)隙???D基質(zhì)?20．在葉綠體的各結(jié)構(gòu)中，進(jìn)行光合作用的實(shí)際部位是(???)。A基粒???B基質(zhì)???C類囊體???D基質(zhì)類囊體?是非題1G+細(xì)菌的細(xì)胞壁，不僅厚度比G-細(xì)菌的大，而且層次多、成分復(fù)雜。G—細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)中，甘氨酸五肽是其肽橋的常見種類。G+細(xì)菌的細(xì)胞壁上存在，而LPSG—細(xì)胞壁上存在。古生菌細(xì)胞壁假肽聚糖上的糖鏈與真細(xì)菌肽聚糖的糖鏈一樣，都可以被溶菌酶水解。—細(xì)菌細(xì)胞膜上的孔蛋白，是一種可控制營(yíng)養(yǎng)物被細(xì)胞選擇吸收的蛋白質(zhì)。假肽聚糖只是一部分古生菌所具有的細(xì)胞壁成分。在嗜高溫古生菌的細(xì)胞膜上，存在著其他任何生物所沒有的單分子層膜。產(chǎn)芽孢的細(xì)菌都是一些桿狀的細(xì)菌，如芽孢桿菌屬和梭菌屬等。在芽孢萌發(fā)前，可用加熱等物理或化學(xué)處理使其活化，這種活化過程是可逆的。處于萌發(fā)階段的芽孢，具有很強(qiáng)的感受態(tài)。γ內(nèi)毒素。芽孢是細(xì)菌的內(nèi)生孢子，具有休眠、抵御不良環(huán)境和繁殖等功能。有菌毛的細(xì)菌多數(shù)是G+細(xì)菌。細(xì)菌和真菌的鞭毛都是以旋轉(zhuǎn)方式來推動(dòng)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的。細(xì)菌的鞭毛是通過其頂端生長(zhǎng)而非基部生長(zhǎng)而伸長(zhǎng)的。在枯草芽孢桿菌等G+4菌毛一般著生于G+致病細(xì)菌的細(xì)胞表面。藻青素和藻青蛋白都是藍(lán)細(xì)菌細(xì)胞中的氮源類貯藏物。羧酶體是異養(yǎng)微生物細(xì)胞質(zhì)內(nèi)常見的內(nèi)含物。氣泡只存在于一些光合營(yíng)養(yǎng)型、無鞭毛運(yùn)動(dòng)的水生細(xì)菌中。真核生物的細(xì)胞膜上都含有甾醇，而原核生物細(xì)胞膜上都不含甾醇。同一種真菌，在其不同的生長(zhǎng)階段中，其細(xì)胞壁的成分會(huì)發(fā)生明顯的變化。真核微生物的“9+292在真菌中，有的細(xì)胞中找不到細(xì)胞核，菌絲尖端細(xì)胞就是一例。真核微生物染色質(zhì)中的組蛋白，都是以八聚體形式存在于核小體中。28，為了保證DNA的穩(wěn)定性，存在于染色質(zhì)中呈堿性的組蛋白就自然的與呈酸性的DNA保持大體相同的數(shù)量。核仁的生理功能是合成rRNA在真菌中，高爾基體并不是普遍存在的細(xì)胞器。存在于真核微生物細(xì)胞中的微體，通常都是過氧化氫酶體。粒體。70S問答題10試用表解法對(duì)細(xì)菌的一般構(gòu)造和特殊構(gòu)造作一介紹。—細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)作一表解。G—細(xì)菌肽聚糖單體構(gòu)造的差別，并作簡(jiǎn)要說明。什么是細(xì)菌的周質(zhì)蛋白？它有哪些類型？如何提取它們？G—10試述細(xì)菌革蘭氏染色的機(jī)制。何謂液體鑲嵌模型？試述該假說的要點(diǎn)。試列表比較真細(xì)菌與古生菌細(xì)胞膜的差別。試設(shè)計(jì)一表解來說明細(xì)菌芽孢的構(gòu)造和各部分成分的特點(diǎn)。1012什么叫“拴菌”試驗(yàn)?試分析這項(xiàng)研究在思維方式和實(shí)驗(yàn)方法上的創(chuàng)新點(diǎn)。請(qǐng)列表比較細(xì)菌的鞭毛、菌毛和性毛間的異同。三、習(xí)題解答選擇題???填空題?1．細(xì)胞壁染色法?質(zhì)壁分離法?制成原生質(zhì)體?用電鏡觀察超薄切片???2．固定外形?提高機(jī)械強(qiáng)度?支持細(xì)胞生長(zhǎng)和運(yùn)動(dòng)?阻攔有害物質(zhì)進(jìn)人細(xì)胞???3．肽聚糖?磷壁酸?脂多糖?磷脂?脂蛋白?肽聚糖???4．N—乙酰葡糖胺?N-乙酰胞壁酸?β-1，4?雙糖單位?四肽尾?肽橋?溶菌酶???5．提高M(jìn)g2+’)???6AO8．KDO(2—酮—3)?Abq(阿比可糖)?Hep(L—甘油—D-甘露庚糖)???9．原生質(zhì)體?球狀體?L???10???11???12???13?DPAG????15???17．莢膜?微莢膜?黏液層?菌膠團(tuán)???18．保護(hù)作用?貯藏養(yǎng)料?滲透屏障?附著作用?堆積代謝廢物?信息識(shí)別???19．生產(chǎn)代血漿(葡聚糖)?用作鉆井液(黃原膠)?污水處理(菌膠團(tuán))?用作菌種鑒定指標(biāo)???20．電鏡觀察?鞭毛染色?半固體穿刺培養(yǎng)?菌落形態(tài)觀察???21?L?P?S?M???22．Mot?S—MS—M?F1i?S-M轉(zhuǎn)向???23．大腸桿菌?枯草芽孢桿菌?霍亂弧菌?假單胞菌?反芻月形單胞菌???24．葡聚糖?纖維素?幾丁質(zhì)?纖維素???259+2型鞭毛?基體?過渡區(qū)?鞭桿???26．9+2?9+0???27???28???29肌動(dòng)蛋白絲?中間絲30．80?60?40?70?50?30???31．真菌?原生動(dòng)物?顯微藻類?地衣???32．藻類?原生動(dòng)物?真菌?草履蟲?大腸桿菌?枯草芽孢桿菌?假單胞菌選擇題???是非題BDACC?DCABC?BDABA??CDBDC是非題對(duì)錯(cuò)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)錯(cuò)對(duì)對(duì)錯(cuò)對(duì)對(duì)錯(cuò)錯(cuò)錯(cuò)錯(cuò)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)對(duì)對(duì)對(duì)對(duì)對(duì)對(duì)錯(cuò)對(duì)對(duì)填空題填空題1．答：見表3—7。一、術(shù)語(yǔ)和名詞????

第四章微生物的營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(nutrient)微生物從外界攝取的用于生物合成和產(chǎn)生能量的物質(zhì)，以滿足微生物生長(zhǎng)、繁殖和完成各種生理代謝活動(dòng)。(macroelement)?微生物細(xì)胞干重的95成，將這些微生物生長(zhǎng)需要量相對(duì)較大的元素稱為主要元素。微量元素(traceelement或microelement)4．碳源(sourceofcarbon)?為微生物生長(zhǎng)提供碳素來源的物質(zhì)。氮源(sourceofnitrogen)?為微生物生長(zhǎng)提供氮素來源的物質(zhì)蛋白胨(peptone)制培養(yǎng)基。牛肉浸膏(beefextract)基。酵母浸膏(yeastextract)?酵母細(xì)胞水溶性提取物濃縮而成的，富含B基。生長(zhǎng)因子(growthfactor)微生物生長(zhǎng)所必需且需要量很小，而微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長(zhǎng)需要的有機(jī)化合物。水活度值(water。activity，aw0.98自養(yǎng)型生物(autotroph)CO2異養(yǎng)型生物(1leterotroph)?以還原性有機(jī)物為主要碳源的生物。13．光能營(yíng)養(yǎng)型生物(phototroph)?以光能為能源的生物。14．化能營(yíng)養(yǎng)型生物(chemotroph)無機(jī)營(yíng)養(yǎng)型生物(1ithotroph)?以還原性無機(jī)物為電子供體的生物。有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型生物(organotroph)?以有機(jī)物為電子供體的生物。光能無機(jī)自養(yǎng)型(photolithoautotrophy)(HH0HS、SC02 2 2 2光能有機(jī)自養(yǎng)型(I)hotoorganoheterotroph)r)?利用光能并以有機(jī)物作為電子供體及碳源的生物?；軣o機(jī)自養(yǎng)型(chemolithoautotrophy)?氧化還原性無機(jī)物獲得能量和電子，以CO2

為碳源的生物?；苡袡C(jī)異養(yǎng)型(chemoorganoheterotrophy)?氧化有機(jī)物獲得能源、電子及碳源的生物。21．腐生型(metatrophy)寄生型(paratrophy)?寄生在活的寄主機(jī)體中的化能有機(jī)異養(yǎng)型生物，離開寄主不能生存。兼養(yǎng)型生物(mixotroph)碳源。原養(yǎng)型(prototroph)?與自然發(fā)生的同種其他個(gè)體一樣，具有相同營(yíng)養(yǎng)需求的微生物。培養(yǎng)基(culturemedium)?由人工配制的、適合微生物生長(zhǎng)、繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。復(fù)合(天然)培養(yǎng)基(complexmedium)(chemicallyundefinedmedium)。27(syntheticmedium)?固體培養(yǎng)基(solid．medium)?在液態(tài)培養(yǎng)基中加入一定量凝固劑而制成的固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。半固體培養(yǎng)基(semisolidmedium30．液體培養(yǎng)基(1iquidmedium)?不含凝固劑的液態(tài)培養(yǎng)基?；A(chǔ)培養(yǎng)基(minimummedium)含有一般微生物生長(zhǎng)所需基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。加富培養(yǎng)基(enrichmentmedium)在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，用于培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基。鑒別培養(yǎng)基(differentialmedium)微生物。選擇培養(yǎng)基(selectivemedium)質(zhì)，抑制不需要微生物的生長(zhǎng)，將所需微生物從復(fù)雜的微生物群體中選擇分離出來。瓊脂(agar)明膠(gelatin)?由膠原蛋白制備的培養(yǎng)基凝固劑。37．透過屏障(permeabilitybarrier)成的限制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的屏障。38．?dāng)U散(diffusion)?營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)通過原生質(zhì)膜上的含水小孔，由高濃度胞外(內(nèi))環(huán)境向低濃度胞內(nèi)(外)進(jìn)行運(yùn)輸?shù)倪^程。39．促進(jìn)擴(kuò)散(facilitateddiffusion)?營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)由載體(透過酶)輔助的跨質(zhì)膜擴(kuò)散過程。透過酶(permease)?一種由膜結(jié)合載體蛋白質(zhì)或由兩種以上蛋白質(zhì)組成的系統(tǒng)，能幫助營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)跨膜運(yùn)輸。被動(dòng)運(yùn)輸(passivetransport)?包括擴(kuò)散和促進(jìn)擴(kuò)散在內(nèi)的依靠膜內(nèi)外被運(yùn)輸物質(zhì)濃度差而進(jìn)行的物質(zhì)運(yùn)輸方式。主動(dòng)運(yùn)輸(activetransport)?在載體的幫助下，依靠細(xì)胞提供的能量進(jìn)行的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸，可以進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸。初級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸(primaryactivetransport)?由電子傳遞系統(tǒng)、ATP濃度差。能化膜(energizedmembrane)度差(或電勢(shì)差)，使膜處于充能狀態(tài)。次級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸(secondaryactivetransport)46．同向運(yùn)輸(symport)?某種物質(zhì)與質(zhì)子通過同一載體以相同方向進(jìn)行的次級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸。逆向運(yùn)輸(antiport)?某種物質(zhì)與質(zhì)子通過同一載體以相反方向進(jìn)行的次級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸。單向運(yùn)輸(uniport)基團(tuán)轉(zhuǎn)位(grouptranslocation)中化學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變。Na+K+ATP(Na+，ATPase)ATPNa+K+Na+K+一泵。ATP(ATP—bindingcassettetransporters，ABCtransporters)ATPABC膜泡運(yùn)輸(membranevesicletransport)53．胞吞作用(endocytosis)?細(xì)胞通過原生質(zhì)膜吸附、包裹并吸收溶質(zhì)或顆粒物質(zhì)的過程。胞飲作用(pinocytosis)?通過原生質(zhì)膜包裹液態(tài)物質(zhì)的胞吞作用。吞噬作用(phagocytosis)?通過原生質(zhì)膜包裹顆粒狀物質(zhì)的胞吞作用。鐵載體(siderophore)?微生物細(xì)胞向胞外分泌的一種能絡(luò)合Fe3的小分子化合物，鐵一鐵載體復(fù)合物通過ABc二、習(xí)?題填空題1．組成微生物細(xì)胞的主要元素包括??????、?????、?????、?????、?????和?????等。2．微生物生長(zhǎng)繁殖所需六大營(yíng)養(yǎng)要素是??????、?????、?????、?????、?????和?????。3．碳源物質(zhì)為微生物提供???和???，碳源物質(zhì)主要有?????、?????、?????、?????、?????等。4．氮源物質(zhì)主要有???、???、???、常用的速效氮源如????、?????，有利于????；遲效氮如??????、???????它有利于???????。5．無機(jī)鹽的生理作用包括?????、?????、??????、?????、???????。6．生長(zhǎng)因子主要包括??????、???????和???????，其主要作用是??????????????????????。7．水的生理作用主要包括???、???、?????、????、????、????。根據(jù)???，微生物可分為自養(yǎng)型和異養(yǎng)型。根據(jù)???，微生物可分為光能營(yíng)養(yǎng)型和化能營(yíng)養(yǎng)型。根據(jù)???，微生物可分為無機(jī)營(yíng)養(yǎng)型和有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型。12．設(shè)計(jì)、配制培養(yǎng)基所要遵循的原則包括??????、?????、?????、?????、???和???。按物理狀態(tài)劃分，培養(yǎng)基可分?????????????和 。4選擇題(41)在含有下列物質(zhì)的培養(yǎng)基中，大腸桿菌首先利用的碳物質(zhì)是()A???B???C???D在工業(yè)生產(chǎn)中為提高土霉素產(chǎn)量，培養(yǎng)基中可采用的混合氮源是(???)。?A蛋白胨／酵母浸膏???B黃豆餅粉／花生餅粉C玉米漿／黃豆餅粉???D玉米漿／(NH)S042 4A???B?CNaCl?C4．一般酵母菌生長(zhǎng)最適水活度值為(???)。A0.95???B0.76?C0.66????D0.88ABC???DA?BC???D硝化細(xì)菌屬于(???)型的微生物A?B???CDA???B???C?DAC0???BH???CO2 2 2A???B???C???DA???B???C?D12．固體培養(yǎng)基中瓊脂含量一般為(???)。???A0.5％???B1.5％???C2.5％???D5％ALB???BC???DA???B???C???DA???B???C???D16．一般酵母菌適宜的生長(zhǎng)pH為(???)。A5.0～6.0???B3.0～4.0???C8.0～9.O???D7.0～7.517．一般細(xì)菌適宜的生長(zhǎng)pH為(???)。A5.0～6.0???B3.0～4.0???C8.0～9.0???D7.0～7.5A???B???C???DA???B???C???DA???B???C???D是非題所有碳源物質(zhì)既可以為微生物生長(zhǎng)提供碳素來源，也可以提供能源。90碳源對(duì)配制任何微生物的培養(yǎng)基都是必不可少的。氨基酸在碳源缺乏時(shí)可被微生物用作碳源物質(zhì)，但不能提供能源。以(NHSOpH42 4KN03

作為氮源培養(yǎng)微生物被稱為生理堿性鹽。在配制復(fù)合培養(yǎng)基時(shí)，必須向培養(yǎng)基中定量補(bǔ)加微量元素。培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)缺陷型微生物的培養(yǎng)基必須同時(shí)加入維生素、氨基酸、嘌呤及嘧啶。目前已知的致病微生物都是化能有機(jī)異養(yǎng)型生物。只有自養(yǎng)型微生物能夠以CO2培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以由簡(jiǎn)單的無機(jī)物組成。為使微生物生長(zhǎng)旺盛，培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好。在培養(yǎng)基中蛋白胨可以作為天然的緩沖系統(tǒng)。121.320minn半固體培養(yǎng)基常用來觀察微生物的運(yùn)動(dòng)特征。基礎(chǔ)培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)所有類型的微生物。一些化能有機(jī)異養(yǎng)微生物可以在以葡萄糖為碳源、銨鹽為氮源的合成培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。伊紅美藍(lán)(EMB)培養(yǎng)基中，伊紅美藍(lán)的作用是促進(jìn)大腸桿菌的生長(zhǎng)。在用于分離G細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基中可加入結(jié)晶紫抑制G細(xì)菌的生長(zhǎng)。當(dāng)葡萄糖胞外濃度高于胞內(nèi)濃度時(shí)，葡萄糖可通過擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞。在促進(jìn)擴(kuò)散過程中，載體蛋白對(duì)被運(yùn)輸物質(zhì)具有較高的專一性，一種載體蛋白只能運(yùn)輸一種物質(zhì)。被動(dòng)運(yùn)輸是微生物細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要方式。消耗代謝能。Na+K+一ATPATPK+‘泵”出胞外，而將胞外Na+‘泵”入胞內(nèi)。微生物細(xì)胞向胞外分泌鐵載體，通過ABcFe3問答題能否精確地確定微生物對(duì)微量元素的需求，為什么?為什么生長(zhǎng)因子通常是維生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶，而葡萄糖通常不是生長(zhǎng)因子?以紫色非硫細(xì)菌為例，解釋微生物的營(yíng)養(yǎng)類型可變性及對(duì)環(huán)境條件變化適應(yīng)能力的靈活性。如果要從環(huán)境中分離得到能利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物，你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?某些微生物對(duì)生長(zhǎng)因子的需求具有較高的專一性，可利用它們通過“微生物分析”?(microbiologicalassayB以伊紅美藍(lán)(EMB)培養(yǎng)基為例，分析鑒別培養(yǎng)基的作用原理。解圈與菌落直徑比大，就斷定該菌株產(chǎn)胞外蛋白酶的能力就大，而將其選擇為高產(chǎn)蛋白酶的菌種，為什么?與促進(jìn)擴(kuò)散相比，微生物通過主動(dòng)運(yùn)輸吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是什么?以大腸桿菌磷酸烯醇式丙酮酸一糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)(PTs)為例解釋基團(tuán)轉(zhuǎn)位。填空題試分析在主動(dòng)運(yùn)輸中，ATP(ABc三、習(xí)題解答填空題1．C?H?0?N?P?S???2．碳源?氮源?無機(jī)鹽?生長(zhǎng)因子?水?能源???3．碳素來源?能源?糖?有機(jī)酸?醇?脂?烴???4．蛋白質(zhì)(肽、氨基酸)?氨及銨鹽?硝酸鹽?分子氮(N，)玉米漿?(NH)SO?菌體生長(zhǎng)?黃豆餅粉?玉米餅粉?代謝產(chǎn)物積累???5．酶活性中心組分???維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和生42 4?選擇題物大分子穩(wěn)定?調(diào)節(jié)滲透壓?控制氧化還原電位?作為能源物質(zhì)???6．維生素?氨基酸?嘌呤和嘧啶?作為酶的輔基或輔酶?合成細(xì)胞結(jié)構(gòu)及組分的前體???7．溶劑?參與化學(xué)反應(yīng)?維持生物大分子構(gòu)象?熱導(dǎo)體?維持細(xì)胞形態(tài)?控制多?基結(jié)構(gòu)的裝配與解離?8．碳源性質(zhì)???9．能源???10．電子供體???11．光能無機(jī)自養(yǎng)?光能有機(jī)異養(yǎng)?化能無機(jī)自養(yǎng)?化能有機(jī)異養(yǎng)???12．選擇適宜營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)?營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適?控制pH?控制氧化?還原電位?原料來源?滅菌處理???13．復(fù)合(天然)培養(yǎng)基?合成培養(yǎng)基???14，固體?牛固體??液體???15．基礎(chǔ)?加富?鑒別?選擇???16．瓊脂?明膠?硅膠???17．營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)性質(zhì)?微生物所處環(huán)境?微生物細(xì)胞透過屏障???18．?dāng)U散?促進(jìn)擴(kuò)散?主動(dòng)運(yùn)輸?膜泡運(yùn)輸?選擇題是非題?BCDDD?ACABA?DBDBC?ADBCD是非題?錯(cuò)對(duì)錯(cuò)錯(cuò)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)錯(cuò)對(duì)對(duì)對(duì)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)錯(cuò)錯(cuò)錯(cuò)錯(cuò)錯(cuò)錯(cuò)錯(cuò)問答題問答題1．不能。微生物對(duì)微量元素需要量極低；微量元素常混雜在天然有機(jī)化合物、無機(jī)化學(xué)試劑、自來水、蒸餾水、普通玻璃器皿中；細(xì)胞中微量元素含量因培養(yǎng)基組分含量不恒定、藥品生產(chǎn)廠家及批次、水質(zhì)、容器等條件不同而變化，難以定量分析檢測(cè)。2(如營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株)自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長(zhǎng)需要的有機(jī)化合物。而葡萄糖通常作為碳源和能源物質(zhì)被微生物利用，需要量較大，而且其他一些糖類等碳源物質(zhì)也可以代替葡萄糖滿足微生物生長(zhǎng)所需。3．紫色非硫細(xì)菌在沒有有機(jī)物時(shí)可同化c0：進(jìn)行自養(yǎng)生活，有有機(jī)物時(shí)利用有機(jī)物進(jìn)行異養(yǎng)生活，在光照及厭氧條件下利用光能進(jìn)行光能營(yíng)養(yǎng)生活，在黑暗及好氧條件下利用有機(jī)物氧化產(chǎn)生的化學(xué)能進(jìn)行化能營(yíng)養(yǎng)生活。4．AB(A)，另一種不含任何碳源作為對(duì)照(B)；CA；D(5A號(hào)并分別轉(zhuǎn)接至B平板，置于相同溫度條件下培養(yǎng)(在B平板上生長(zhǎng)的菌落是可利用空氣中C02

的自養(yǎng)型微生物)；(6)挑取在A平板上生長(zhǎng)而不在BA將初步確定的目標(biāo)菌株轉(zhuǎn)接至以苯作為惟一碳源的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，利用相應(yīng)化學(xué)分析方法定量分析該菌株分解利用苯的情況。5．AB。：但含有過量其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基分裝于一系列試管，分別定量接入用于測(cè)定的微生物；BB，：標(biāo)準(zhǔn)樣品及待測(cè)樣品，在適宜條件下培養(yǎng)；C0D準(zhǔn)曲線；DB．：的含量。6．EMB培養(yǎng)基含有伊紅和美藍(lán)兩種染料作為指示劑，大腸桿菌可發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸造成酸性環(huán)境時(shí)，這兩種染料結(jié)合形成復(fù)合物，使大腸桿菌菌落帶金屬光澤的深紫色，而與其他不能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的微生物區(qū)分開。7不同微生物所產(chǎn)蛋白酶的性質(zhì)(如最適催化反應(yīng)溫度、pH、對(duì)底物酪素的降解能力等)不同；（3）該學(xué)生所采用的是一種定性及初步定量的方法，應(yīng)進(jìn)一步針對(duì)獲得的幾株菌分別進(jìn)行培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件優(yōu)化，并在分析這些菌株所產(chǎn)蛋白酶性質(zhì)的基礎(chǔ)上利用搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)確定蛋白酶高產(chǎn)菌株。8．主動(dòng)運(yùn)輸與促進(jìn)擴(kuò)散相比的優(yōu)點(diǎn)在于可以逆濃度運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。通過促進(jìn)擴(kuò)散將營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞，需要環(huán)境中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度高于胞內(nèi)，而在自然界中生長(zhǎng)的微生物所處環(huán)境中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量往往很低，在這種情況下促進(jìn)擴(kuò)散難以發(fā)揮作用。主動(dòng)運(yùn)輸則可以逆濃度運(yùn)輸，將環(huán)境中較低濃度營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)入胞內(nèi)，保證微生物正常生長(zhǎng)繁殖。大腸桿菌PTs5I、酶Ⅱa、酶Ⅱb、酶ⅡcHn)組成，酶Ⅱa、酶b、酶Ⅱc3IHPrabc相結(jié)合。酶Ⅱ?qū)⒁粋€(gè)葡萄糖運(yùn)輸進(jìn)入胞內(nèi)，磷酸烯醇式丙酮酸(PEPIHPrPTsAABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白常由兩個(gè)疏水性跨膜結(jié)構(gòu)域與胞內(nèi)的兩個(gè)核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域形成復(fù)合物，跨膜結(jié)構(gòu)域在膜上形成一個(gè)孔，核苷酸結(jié)合ATPABcG(G一ABCATP，ABCB白(透過酶)也是跨膜蛋白，被運(yùn)輸物質(zhì)在膜外表面與透過酶結(jié)合，而膜內(nèi)外質(zhì)子濃度差在消失過程中，被運(yùn)輸物質(zhì)與質(zhì)子一起通過透過酶進(jìn)入細(xì)胞。CABCATP輸，后者依靠膜內(nèi)外質(zhì)子濃度差消失中偶聯(lián)物質(zhì)運(yùn)輸。第五章微生物代謝一、術(shù)語(yǔ)或名詞?1．分解代謝(catabolism)也稱產(chǎn)能代謝，生物氧化，是指大分子物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)降解成小分子物質(zhì)，并產(chǎn)生能量的過程。?2．合成代謝(anabolism)是指利用小分子物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)合成復(fù)雜大分子物質(zhì)，并消耗能量的過程。?3．糖酵解(glycolysis)?無氧條件下，異養(yǎng)生物降解葡萄糖生成兩個(gè)丙酮酸并產(chǎn)生能量的過程。是葡萄糖分解代謝的共同途徑。?4．發(fā)酵(fermentation)?廣義的發(fā)酵，泛指一切利用微生物進(jìn)行生產(chǎn)的過程，多指?jìng)鹘y(tǒng)的與實(shí)際生產(chǎn)有關(guān)的工業(yè)化生產(chǎn)，多是好氧過程，如氨基酸發(fā)酵、抗生素發(fā)酵、單細(xì)胞蛋白生產(chǎn)等。微生物生理學(xué)上的發(fā)酵又稱狹義的發(fā)酵，是指微生物細(xì)胞將有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某種中間產(chǎn)物，同時(shí)釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物的過程。?5．底物水平磷酸化(substrate—levelphosphorylation)EMP3ATPGTP于呼吸過程中，但產(chǎn)生能量相對(duì)較少。?6．乙醇發(fā)酵(alcoholicfermentation)Sarcin、：EnterobacteriaceaEMP者某些細(xì)菌(如運(yùn)動(dòng)發(fā)酵假單胞菌)中經(jīng)ED途徑降解成丙酮酸，進(jìn)一步生成乙醛，乙醛還原生成乙醇。?7．乳酸發(fā)酵(1acticacidfermentation)?有兩種方式，葡萄糖經(jīng)EMPNADH酸，終產(chǎn)物只有一種乳酸，稱為同型乳酸發(fā)酵(1lomolacticfermentation)；葡萄糖經(jīng)PKHKHMP酸外，還有乙醇或乙酸，故稱異型乳酸發(fā)酵（heterolacticfermentation）。?8．呼吸(respiration)?微生物在降解底物的過程中，將釋放出的電子交給NAD(PFADFMN源電子受體，從而生成水或其他還原型產(chǎn)物并釋放出能量的過程。以分子氧作為最終電子受體的稱為有氧呼吸(aerobicrespiration)，以氧化型化合物作為最終電子受體的稱為無氧呼吸(anaerobicrespiration)。?9．電子傳遞系統(tǒng)(electrontransportsystem)?一系列膜相關(guān)電子載體，把電子傳遞給最終的電子受體，除了泛醌之外，電子載體在膜上的排列順序?yàn)檫€原電位最負(fù)到最正。一般電子傳遞系統(tǒng)的組成及電子傳遞方向?yàn)椋篘AD(P)一FP(黃素蛋白)一Fes(鐵硫蛋白)一CoQ(輔酶Q)一cytb_Cytc_CytaCyta3。?10．氧化磷酸化(oxidativephosphorylation)?在糖酵解和三羧酸循環(huán)過程中，形成的NAD(P)H和FADH：，通過電子傳遞系統(tǒng)將電子傳遞給電子受體(氧或其他氧化性化合物)，同時(shí)偶聯(lián)ATP合成的生物過程。?11．巴斯德效應(yīng)(Pasteureffect)?當(dāng)微生物從厭氧條件轉(zhuǎn)換到有氧條件時(shí)，微生物轉(zhuǎn)向有氧呼吸，糖分解代謝速率降低。?12．反硝化作用(denitrification)?又稱硝酸鹽呼吸(nitraterespiration)，以硝酸或?硝酸鹽為電子受體進(jìn)行的無氧呼吸，此過程中硝酸鹽還原形成氣態(tài)產(chǎn)物NO、N。2?13．同化型硝酸還原(assimilativenitratereduction)?在厭氧或好氧條件下，某些兼性厭氧細(xì)菌還原硝酸為?硝酸，進(jìn)一步轉(zhuǎn)變成銨，作為氮源被細(xì)胞利用。?14．異化型硝酸還原(dissimilartivenitratereduction)?硝酸作為最終電子受體被還原成?硝酸，分泌到細(xì)胞外或形成N：被釋放。在這個(gè)過程中，硝酸只作為電子受體，用于生物氧化產(chǎn)能，而不作為細(xì)胞氮源。?15．Stickland反應(yīng)(Sticklandreaction)?某些微生物利用氨基酸作為碳源、能源和氮源。以一種氨基酸作為供氫體而氧化，另一種氨基酸作為電子受體被還原的生物氧化產(chǎn)能方式，產(chǎn)能效率低，每分子氨基酸產(chǎn)生1個(gè)ATP。?16(chemoautotrophs)

ATP[H(NH+、NO＿、HS、0、

Fe2)的氧化而獲得2的，產(chǎn)能途徑是氧化磷酸化，一般為好氧菌。

4 2 2 2?17．不產(chǎn)氧光合作用(anoxygenicphotosynthesis)?又稱環(huán)式光合磷酸化，光合細(xì)菌所特有。光能驅(qū)動(dòng)下，電子從菌綠素分子出發(fā)，通過電子傳遞鏈的循環(huán)，又回到菌綠素，期間產(chǎn)生ATP，還原力來自環(huán)境中的無機(jī)化合物供氫，不產(chǎn)生氧氣。?18．產(chǎn)氧光合作用(oxygenicphotosynthesis)?又稱非環(huán)式光合磷酸化，綠色植物、藻類和藍(lán)細(xì)菌所共有。光能驅(qū)動(dòng)下，電子從光反應(yīng)中心I(PsI)的葉綠素a出發(fā)，通過電子傳遞鏈，連同光反應(yīng)中心Ⅱ(PsⅡ)水的光解生成的H’，生成還原力；光反應(yīng)中心Ⅱ(PsⅡ)由水的光解產(chǎn)生氧氣和電子，電子通過電子傳遞鏈，傳給光反應(yīng)中心PsI，期間生成ATP。?19．紫膜光合磷酸化(photophosphorylationbypurplemembrane)?紫膜由細(xì)菌視紫紅質(zhì)蛋白和類脂組成，細(xì)菌視紫紅質(zhì)蛋白功能與葉綠素相似，能吸收光能，并在光量子驅(qū)動(dòng)下起著質(zhì)子泵的作用，將質(zhì)子泵出紫膜外，從而形成紫膜內(nèi)外的質(zhì)子梯度差(質(zhì)子動(dòng)勢(shì))，驅(qū)使ATP的形成。?20．代謝補(bǔ)償途徑(replenishmentpathway)?或代謝物回補(bǔ)順序(anapleroticsequence)，是指能補(bǔ)充兩用代謝途徑中因合成代謝而消耗的中間代謝產(chǎn)物的那些反應(yīng)。如微生物特有的乙醛酸循環(huán)。?21．初級(jí)代謝(primarymetaboli