微生物檢定初級(jí)培訓(xùn)微生物檢定初級(jí)培訓(xùn)微生物檢定工大綱基本要求：1、職業(yè)道德基本知識(shí):身體健康無(wú)傳染性疾病，有良好的衛(wèi)生習(xí)慣和質(zhì)量無(wú)差錯(cuò)意識(shí)、了解藥品管理法、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范等法律與法規(guī)相關(guān)知識(shí)；有強(qiáng)烈的責(zé)任感。2、基礎(chǔ)理論知識(shí)：應(yīng)用化學(xué)、應(yīng)用微生物學(xué)、生物化學(xué)。3、專業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)：藥品、食品、化妝品及日化產(chǎn)品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)4、專業(yè)知識(shí)：藥品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)知識(shí)、質(zhì)量管理基本知識(shí)。衛(wèi)生檢驗(yàn)基本技術(shù)知識(shí)，常用工具設(shè)備使用基本知識(shí)，常見(jiàn)供試品、原材料、中間體一般性能知識(shí)。微生物檢定工大綱基本要求：基本要求：5、專業(yè)相關(guān)知識(shí)：藥品檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、化妝品及日化產(chǎn)品檢驗(yàn)、潔凈操作和安全操作知識(shí)。藥品、食品、化妝品及日化產(chǎn)品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)和鑒定技術(shù)知識(shí)，工具設(shè)備使用和維護(hù)知識(shí)，供試品、原材料、中間體性能和鑒別知識(shí)。6、質(zhì)量管理知識(shí)：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范相關(guān)知識(shí)、一般衛(wèi)生檢驗(yàn)崗位的質(zhì)量保證措施與責(zé)任。7、安全文明生產(chǎn)與環(huán)境保護(hù)知識(shí)：微生物檢定安全操作與勞動(dòng)保護(hù)基本知識(shí)，常見(jiàn)廢品處理方法等環(huán)境保護(hù)基本知識(shí)。藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范、衛(wèi)生檢驗(yàn)部門的質(zhì)量保證措施與責(zé)任?；疽螅?、專業(yè)相關(guān)知識(shí)：藥品檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、化妝品及日2023/1/3培訓(xùn)講師吳華英4微生物檢定工大綱見(jiàn)深圳市勞動(dòng)局網(wǎng)站參考資料：1.《中華人民共和國(guó)藥典》（2005版），國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年；2.《藥品生物檢定技術(shù)》，汪穗福主編，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，1999年7月；3.《中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范》（2005年版），中國(guó)藥品生物制品檢定所編，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2005年2月；4.《微生物學(xué)教程》（第二版）周德慶，高等教育出版社；5.《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》沈萍等，高等教育出版社，2003年?。ǖ诙妫?；6.《中華人民共和國(guó)藥品管理法》（２００１年２月２８日）7.《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(1998年修訂)》(1999年3月18日)8.《中國(guó)醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理辦法》衛(wèi)生部1985年頒布9.《使用有毒物品作業(yè)場(chǎng)所勞動(dòng)保護(hù)條例》（２００２年４月３０日）10.《中華人民共和國(guó)職業(yè)病防治法》(2001年10月27日)

2022/12/28培訓(xùn)講師吳華英4微生物檢定工大綱《藥品生物測(cè)定技術(shù)》，汪穗福主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年8月；《藥品生物測(cè)定技術(shù)》，汪穗福主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年考試題型ClicktoedittextstylesEdityourcompanyslogan1.單選題50*12.多選題10*23.判斷題30*1時(shí)間：2小時(shí)考試題型ClicktoedittextstylesE微生物限度檢查考核內(nèi)容細(xì)菌,霉菌總數(shù)1大腸菌群限度檢查2致病菌檢查(大腸,沙門,銅綠,金葡)3無(wú)菌檢查4抗生素效價(jià)檢查5微生物限度檢查考核內(nèi)容細(xì)菌,霉菌總數(shù)1大腸菌群限度檢查2致細(xì)菌的總數(shù)檢查藥品中細(xì)菌的計(jì)數(shù)檢查是檢測(cè)藥物在單位質(zhì)量或體積內(nèi)所含有的活菌數(shù)量，用以判斷藥品被污染的程度和標(biāo)志。細(xì)菌數(shù)越多，表面藥品受到致病菌污染的機(jī)會(huì)和可能性也較大，安全性也就越差。同時(shí)細(xì)菌數(shù)計(jì)數(shù)測(cè)定也包括藥物的各種原料，工具設(shè)備，操作人員及工藝流程等各個(gè)環(huán)節(jié)的衛(wèi)生狀況和GMP評(píng)價(jià)的一個(gè)綜合依據(jù)之一。細(xì)菌的總數(shù)檢查藥品中細(xì)菌的計(jì)數(shù)檢查是檢測(cè)藥物在單位質(zhì)量或體積細(xì)菌，霉菌總數(shù)計(jì)數(shù)樣品稀釋平板接種倒培養(yǎng)基平板培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)結(jié)果報(bào)告細(xì)菌，霉菌總數(shù)計(jì)數(shù)樣品稀釋平板接種倒培養(yǎng)基平板培養(yǎng)結(jié)果報(bào)告細(xì)菌菌數(shù)報(bào)告規(guī)則細(xì)菌數(shù)宜選取平均菌落數(shù)在30~300之間的稀釋級(jí)，作為報(bào)告菌數(shù)計(jì)算的依據(jù)。*如有1個(gè)稀釋級(jí)平均菌落數(shù)在30~300之間，將該稀釋級(jí)的菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。*如同時(shí)有2個(gè)稀釋級(jí)平均菌落數(shù)在30~300之間時(shí)，計(jì)算比值：比值=高稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)/低稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)當(dāng)比值≤2時(shí)，以兩稀釋級(jí)的均值報(bào)告；當(dāng)比值＞2時(shí)，以低稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。*如同時(shí)有3個(gè)稀釋級(jí)平均菌落數(shù)在30~300之間時(shí)，以后2個(gè)稀釋級(jí)計(jì)算級(jí)間比值報(bào)告。*如各稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)均不在30~300之間，以最接近30或300的稀釋級(jí)平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。細(xì)菌菌數(shù)報(bào)告規(guī)則細(xì)菌數(shù)宜選取平均菌落數(shù)在30~300之間的稀大腸埃希菌的介紹大腸埃希菌為腸桿菌科埃希菌屬代表菌?，F(xiàn)被列為糞便污染指示菌，是口服藥品常規(guī)必檢項(xiàng)目。生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色2.培養(yǎng)與生化反應(yīng)3.抵抗力大腸埃希菌的介紹大腸埃希菌為腸桿菌科埃希菌屬代表菌?，F(xiàn)被列為大腸埃希氏菌檢查1.增菌培養(yǎng)BL2.MUG-Indole檢查3.分離培養(yǎng)EMB平板4.生化實(shí)驗(yàn)IMV-PC5.結(jié)果判斷大腸埃希氏菌檢查1.增菌培養(yǎng)BL微生物初級(jí)教材課件微生物初級(jí)教材課件制片：涂菌，干燥，固定

染色：1）結(jié)晶紫初染1min2）碘液媒染1min3）95％乙醇脫色30s4）番紅液復(fù)染2min顯微鏡檢查革蘭氏染色法制片：涂菌，干燥，固定革蘭氏染色法微生物初級(jí)教材課件

分離培養(yǎng)

取供試液BL培養(yǎng)基分別在伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB瓊脂）平板上劃線分離。菌落呈紫黑色、紫紅色、紅色、圓形，扁平或潲凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤(rùn)然后置36±1℃溫箱內(nèi)，培養(yǎng)18～24h后取出，如有菌落生長(zhǎng)，挑選菌落做IMVC實(shí)驗(yàn)，并做革蘭氏染色。

分離培養(yǎng)

取供試液BL培養(yǎng)基分別在伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB瓊生化鑒定挑選EMB劃線分離培養(yǎng)的2~3個(gè)可疑菌落：靛基質(zhì)試驗(yàn)（I）蛋白胨水培養(yǎng)基中，培養(yǎng)24小時(shí)甲基紅試驗(yàn)（M）磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基中，培養(yǎng)48小時(shí)2小時(shí)乙酰甲基甲醇生成試驗(yàn)（V-P）磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基中，培養(yǎng)48小時(shí)2小時(shí)枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（C）枸櫞酸鹽培養(yǎng)基的斜面上，一般培養(yǎng)48~72小時(shí)生化鑒定挑選EMB劃線分離培養(yǎng)的2~3個(gè)可疑菌落：靛基質(zhì)試驗(yàn)（I）甲基紅試驗(yàn)（M）枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（C）靛基質(zhì)試驗(yàn)（I）甲基紅試驗(yàn)（M）枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（C）大腸菌群分布大腸菌群分布較廣，在溫血?jiǎng)游锛S便和自然界廣泛存在。調(diào)查研究表明，大腸菌群細(xì)菌多存在于溫血?jiǎng)游锛S便、人類經(jīng)?；顒?dòng)的場(chǎng)所以及有糞便污染的地方，人、畜糞便對(duì)外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。糞便中多以典型大腸桿菌為主，而外界環(huán)境中則以大腸菌群其他型別較多。大腸菌群分布大腸菌群分布較廣，在溫血?jiǎng)游锛S便和自然界廣泛存在大腸菌群限度檢查法1.1取樣及稀釋方法：與菌落總數(shù)檢驗(yàn)方法相同，做成1：10的均勻稀釋液為檢樣。1.2乳糖發(fā)酵試驗(yàn)

選擇3個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種3管乳糖膽鹽發(fā)酵管。接種1ml及1ml以下者，用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管，同時(shí)用大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣腸桿菌混合菌中混合接種于1支單料乳糖膽鹽發(fā)酵管作對(duì)照。置36±1℃溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24±2h，1.3分離培養(yǎng)將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別在伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB瓊脂）平板上劃線分離。然后置36±1℃溫箱內(nèi)，培養(yǎng)18～24h后取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實(shí)實(shí)驗(yàn)。1.4證實(shí)試驗(yàn)1.5結(jié)果判斷

大腸菌群限度檢查法1.1取樣及稀釋方法：與菌落總數(shù)檢驗(yàn)沙門菌特性沙門菌為腸桿菌科沙門菌屬細(xì)菌，是人畜共患得腸道病原菌。廣泛分布于自然界，常引起傷寒，腸炎，腸熱癥和食物中毒，危害人類健康。藥典規(guī)定：含動(dòng)物組織或動(dòng)物類原藥材粉的口服給藥制劑，每10g或10ml不得檢出沙門菌。沙門菌特性沙門菌為腸桿菌科沙門菌屬細(xì)菌，是人畜共患得腸道病原沙門菌檢查供試品

100ml供試液復(fù)蘇培養(yǎng)：100ml營(yíng)養(yǎng)肉湯36*±1℃，培養(yǎng)18～24h增菌培養(yǎng)：四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基(TTB)10ml，36±1℃，培養(yǎng)18~24小時(shí)。分離培養(yǎng)：DHL瓊脂或EMB瓊脂，培養(yǎng)24±2小時(shí)。初步篩選試驗(yàn)：三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基斜面TSI生化鑒定：脲酶試驗(yàn)--，氰化鉀試驗(yàn)--，賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)+，動(dòng)力檢查+，血清凝聚試驗(yàn)+，靛基質(zhì)－沙門菌檢查供試品100ml供試液

沙門菌在膽鹽硫乳瓊脂(DHL)上顯無(wú)色至淺橙色，半透明，菌落中心帶黑色或全部黑色或無(wú)黑色。

沙門菌在TSI瓊脂上的反應(yīng)

沙門菌在膽鹽硫乳瓊脂(DHL)上顯無(wú)色至淺橙色，半透明，菌銅綠假單胞菌菌體特性綠膿桿菌（銅綠假單胞菌）是假單胞菌屬的代表菌種，在瓊脂平板上能產(chǎn)生藍(lán)綠色綠膿素，燒傷、燙傷、眼科疾患常感染傷口時(shí)形成綠色膿液。（外用藥品不得檢出銅綠假單胞菌）可造成眼角膜潰瘍，失明，敗血癥等嚴(yán)重疾患。本菌為無(wú)莢膜、無(wú)芽胞、能運(yùn)動(dòng)的革蘭氏陰性菌，形態(tài)不一，成對(duì)排列或短鏈狀，為專性需氧菌，最適宜生長(zhǎng)溫度為37℃，致病性綠膿桿菌在41℃時(shí)仍能生長(zhǎng)。銅綠假單胞菌菌體特性綠膿桿菌（銅綠假單胞菌）是假單胞菌屬銅綠假單胞菌檢查供試品

10-1供試液增菌培養(yǎng)：膽鹽乳糖培養(yǎng)基100ml，36±1℃，培養(yǎng)18~24小時(shí)。分離培養(yǎng)：溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)18~24小時(shí)。純培養(yǎng)：營(yíng)養(yǎng)瓊脂，培養(yǎng)18~24小時(shí)。生化鑒定：氧化酶試驗(yàn)＋，綠膿菌素試驗(yàn)

+，硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)＋，42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)＋，明膠液化實(shí)驗(yàn)＋。銅綠假單胞菌檢查供試品10-1供試液銅綠假單胞菌分離結(jié)果

除陰性對(duì)照外，其余2份培養(yǎng)液劃線接種于溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)18~24小時(shí)。結(jié)果：菌落呈扁平，無(wú)定型，周邊擴(kuò)散，表面濕潤(rùn)，灰白色，周圍有藍(lán)綠色擴(kuò)散。銅綠假單胞菌分離結(jié)果除陰性對(duì)照外，其余2份培養(yǎng)液劃線接種金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，需氧或兼性厭氧，最適生長(zhǎng)溫度37°C，最適生長(zhǎng)pH7.4。革蘭氏染色陽(yáng)性。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起，直徑1-2mm。金黃色葡萄球菌分布在皮膚，腔道，空氣，土壤，水，物品表面。引起局部和全身化膿性炎癥，嚴(yán)重導(dǎo)致敗血癥，膿毒血癥。金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)金黃色葡萄球菌檢查1.增菌培養(yǎng)

亞碲酸鈉或營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基。2.分離培養(yǎng)：甘露醇高鹽瓊脂或卵黃氯化鈉瓊脂3.革蘭氏染色鏡檢4.血漿凝固酶試驗(yàn)金黃色葡萄球菌檢查1.增菌培養(yǎng)亞碲酸鈉或營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起，直徑1-2mm。

革蘭氏染色陽(yáng)性平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起，直徑1-2mm。革蘭氏染色金黃色葡萄球菌分離結(jié)果金黃色葡萄球菌的菌落在甘露醇高鹽瓊脂平板上呈金黃色，圓形,凸起、邊緣整齊，外圍有黃色環(huán)，菌落直徑0.7～1mm。金黃色葡萄球菌分離結(jié)果金黃色葡萄球菌的菌落在甘露醇高鹽瓊脂平無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法系指檢查藥品與敷料是否無(wú)菌的一種方法。(無(wú)菌注射劑,手術(shù)用眼藥等)

無(wú)菌檢查的全部過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物的污染。無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法系指檢查藥品與敷料是否無(wú)菌的一種方法。(注射劑無(wú)菌檢查1、最低檢驗(yàn)量（查表）：直接接種法取供試品數(shù)：11支（瓶）2、接種（提問(wèn)：培養(yǎng)溫度、時(shí)間、方法）需氣菌、厭氣菌：培養(yǎng)基15ml/管，硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基（1）樣品：5管，全量（2）陽(yáng)性對(duì)照：1管，同上+金黃色葡萄球菌液1ml（3）陰性對(duì)照：1管，無(wú)菌生理鹽水1ml真菌：培養(yǎng)基15ml/管，改良馬丁培養(yǎng)基（1）樣品，同上5管（3）陰性對(duì)照：1管，無(wú)菌生理鹽水1ml注射劑無(wú)菌檢查1、最低檢驗(yàn)量（查表）：直接接種法微生物檢驗(yàn)大腸桿菌的分離培養(yǎng)檢查陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)為ＭＵＧ陽(yáng)性、靛基質(zhì)陽(yáng)性口服液的微生物限度檢查項(xiàng)目大腸桿菌，細(xì)菌，霉菌銅綠假單胞菌的檢查所用的對(duì)照菌種銅綠假單胞菌綠膿桿菌增菌培養(yǎng)后陽(yáng)性對(duì)照、樣品對(duì)照都為渾濁，陰性對(duì)照不渾濁，應(yīng)做以下分離培養(yǎng)。常見(jiàn)控制菌（致病菌）綠膿桿菌檢查，分離培養(yǎng)陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。除陰性對(duì)照外，取其余2份培養(yǎng)液劃線接種于溴化十六烷基三甲銨瓊脂平板培養(yǎng)。綠膿桿菌分離培養(yǎng)陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)、陽(yáng)性對(duì)照有菌生長(zhǎng)、樣品平板上有疑似菌落生長(zhǎng)應(yīng)做下一步純培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。銅綠假單胞菌在分離培養(yǎng)的形態(tài)是灰白色。微生物檢驗(yàn)大腸桿菌的分離培養(yǎng)檢查陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)為ＭＵＧ陽(yáng)性、靛基微生物檢驗(yàn)微生物限度檢查細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)中所用的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；霉菌計(jì)數(shù)所用的培養(yǎng)基一般為玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基；酵母菌計(jì)數(shù)所用的培養(yǎng)基一般為酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)；大腸桿菌增菌培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基一般為膽鹽乳糖培養(yǎng)（BL）TSI培養(yǎng)基是指:三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基TTB培養(yǎng)基是指:四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基SS培養(yǎng)基是指：沙門、志賀菌司瓊脂培養(yǎng)基DHL培養(yǎng)基是指：膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基YPD瓊脂培養(yǎng)基是指:酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基EMB瓊脂培養(yǎng)基是指：曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基微生物檢驗(yàn)微生物限度檢查細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)中所用的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂1.檢驗(yàn)技術(shù)知識(shí)1.掌握微生物檢定基本原理及相關(guān)概念；2.掌握所用檢定菌的接種，培養(yǎng)，保藏，各種培養(yǎng)基制備的知識(shí)；3.掌握常用的消毒劑及相關(guān)試劑的使用知識(shí)；4.掌握影響微生物檢定及無(wú)菌檢驗(yàn)（無(wú)菌操作程序和要求，微生物限度檢測(cè)，樣品稀釋等）的因素；5.掌握無(wú)菌操作程序；6.掌握判斷檢測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)的異?，F(xiàn)象知識(shí)。1.檢驗(yàn)技術(shù)知識(shí)1.掌握微生物檢定基本原理及相關(guān)概念；普通微生物知識(shí)微生物學(xué)的奠基人是巴斯德微生物特別適合作為遺傳學(xué)研究對(duì)象的優(yōu)點(diǎn)繁殖周期短；培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單；表型性狀豐富細(xì)菌的特征有：多數(shù)以二分裂方式繁殖；構(gòu)造簡(jiǎn)單；水生性較強(qiáng)細(xì)胞壁的主要功能：固定細(xì)胞外形；賦予細(xì)菌特定的抗原性；為細(xì)胞生長(zhǎng)分裂所必須屬于單細(xì)胞真菌的是酵母菌在受氮磷等元素污染后發(fā)生富營(yíng)養(yǎng)化的海水赤潮和湖泊水華的元兇，是某些藍(lán)細(xì)菌普通微生物知識(shí)微生物學(xué)的奠基人是巴斯德普通微生物知識(shí)TCA途徑稱為三羧酸途徑EMP途徑稱為糖酵解途徑HMP途徑稱為：己糖一磷酸途徑關(guān)于支原體的敘述：介于獨(dú)立生活和細(xì)胞內(nèi)寄生生活間；最小型原核生物；細(xì)胞膜含有甾醇；無(wú)細(xì)胞壁；原核微生物可以分為“三菌”，包括放線菌；細(xì)菌；藍(lán)細(xì)菌生物氧化的特點(diǎn)不包括一步式快速反應(yīng)；包括條件溫和；有酶參加；大部分生成ATPL型細(xì)菌專指通過(guò)自發(fā)突變而形成的遺傳穩(wěn)定的細(xì)胞缺損菌株普通微生物知識(shí)TCA途徑稱為三羧酸途徑普通微生物知識(shí)廣泛分布于自然界，有“先鋒生物”之美稱的微生物是酵母菌；酵母菌最常見(jiàn)的繁殖方式為芽殖。一般以單細(xì)胞狀態(tài)存在；能發(fā)酵糖類產(chǎn)能。屬于絲狀真菌的是霉菌；屬于大型子實(shí)體真菌的是蕈菌；藍(lán)細(xì)菌的特征的是：進(jìn)化歷史悠久；能進(jìn)行產(chǎn)氧性光合作用；大型原核生物防腐的方法包括低溫；缺氧；干燥劑等濕熱滅菌常用121℃高壓蒸汽滅菌20min；干熱滅菌160℃，2h普通微生物知識(shí)廣泛分布于自然界，有“先鋒生物”之美稱的微生物普通微生物知識(shí)消毒是指：殺死物體上的病原微生物常用的碘液濃度為：2.5%乙醇消毒劑常用的濃度為：75％殺滅芽孢最常用和最有效的方法是：高壓蒸汽滅菌法高錳酸鉀屬于氧化劑的消毒劑常用于空氣或物體表面消毒的是：紫外；常用于血清除菌的是：濾過(guò)除菌法；濕熱滅菌法中效果最好的是，常用于手術(shù)器械或基礎(chǔ)培養(yǎng)基滅菌的是：高壓蒸汽滅菌法；適用于接種環(huán)，針的滅菌的最徹底的干熱滅菌法是灼燒。用來(lái)測(cè)量細(xì)菌大小的單位是um；瓊脂在98℃以上溶于水，以下凝固。配制固體培養(yǎng)基一般加1.4~2.0%的瓊脂，半固體0.2~0.7%普通微生物知識(shí)消毒是指：殺死物體上的病原微生物2.工具設(shè)備知識(shí)1.掌握常用設(shè)備的名稱，規(guī)格，型號(hào)，結(jié)構(gòu)，性能，材質(zhì)，使用維護(hù)，安全保護(hù)知識(shí)和儀器正確使用知識(shí)，了解工作原理2.掌握常用計(jì)量器具，儀器，儀表，電器的名稱，型號(hào)，規(guī)格，使用，維護(hù)及安全知識(shí)。2.工具設(shè)備知識(shí)1.掌握常用設(shè)備的名稱，規(guī)格，型號(hào)，結(jié)構(gòu)，工具設(shè)備知識(shí)1.普通光學(xué)顯微鏡2.手提式壓力蒸汽滅菌鍋－濕熱滅菌3.恒溫水浴鍋4.電熱恒溫干燥箱－干熱滅菌5.水浴恒溫震蕩器6.生化培養(yǎng)箱7.超凈工作臺(tái)8.菌落計(jì)數(shù)器9.紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)10.無(wú)菌室－要求11.激光塵埃粒子計(jì)數(shù)器

12.抑菌圈自動(dòng)分析儀工具設(shè)備知識(shí)1.普通光學(xué)顯微鏡7.超凈工作臺(tái)顯微鏡使用用顯微鏡的油鏡觀察時(shí)，在載玻片上滴加的鏡油是香柏油；操作顯微鏡的油鏡觀察物體時(shí)，操作的順序是……，油鏡頭的放大倍數(shù)為100倍顯微鏡的工作環(huán)境要求最大相對(duì)濕度為：85%；工作環(huán)境要求室溫為：0~40℃顯微鏡選用目鏡10倍，物鏡40倍，總放大倍數(shù)為400顯微鏡視野里有臟物，直接原因可能是目鏡上有臟物；物鏡有臟物；玻片上有臟物顯微鏡圖象某一側(cè)發(fā)暗，原因可能是轉(zhuǎn)換器不在定位處顯微鏡圖象略帶黃色，原因可能是未用蘭色濾光片顯微鏡使用用顯微鏡的油鏡觀察時(shí)，在載玻片上滴加的鏡油是香柏油手提式壓力蒸汽滅菌鍋手提式壓力蒸汽滅菌鍋，蓋上面裝有安全閥，壓力超過(guò)0.14MpA.后，能自動(dòng)跳起，釋放過(guò)高的壓力。消毒液體結(jié)束時(shí)，必須等壓力指針到達(dá)0MpA后方可排放余氣。手提式壓力蒸汽滅菌鍋，消毒液體時(shí)，應(yīng)將液體裝在硬質(zhì)的耐熱玻璃瓶中，以不超過(guò)3/4體積為好。手提式壓力蒸汽滅菌鍋，消毒液體時(shí)，應(yīng)將液體裝在硬質(zhì)的耐熱玻璃瓶中，瓶口選用棉花塞。干熱滅菌一般在160～170℃,1～2h進(jìn)行，電烘箱內(nèi)溫度降到70℃以下后，才可以打開(kāi)箱門，取出滅菌物品。電熱恒溫干燥箱工作室設(shè)有進(jìn)風(fēng)孔，空氣流動(dòng)方向是：箱底進(jìn)，箱頂出，耐熱物品適宜放入箱內(nèi)作高溫烘焙實(shí)驗(yàn)。手提式壓力蒸汽滅菌鍋手提式壓力蒸汽滅菌鍋，蓋上面裝有安全閥，生化培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱具有制冷和加熱的調(diào)溫系統(tǒng)，是實(shí)驗(yàn)室常用的設(shè)備之一。生化培養(yǎng)箱的箱體的隔熱材料采用聚胺酯泡沫塑料，對(duì)冷熱源具有較強(qiáng)的抗干擾能力。箱體的內(nèi)腔采用工程塑料材料制成，具有較強(qiáng)的抗腐蝕能力。為保護(hù)生化培養(yǎng)箱的制冷壓縮機(jī)，控制線路設(shè)計(jì)有斷電保護(hù)和4分鐘延時(shí)的功能。生化培養(yǎng)箱的培養(yǎng)架上的樣品，放置要保持適當(dāng)間隔，有利于空氣的循環(huán)。生化培養(yǎng)箱低溫使用時(shí)，盡量避免腔壁上凝結(jié)水珠，主要是為了避免污染。經(jīng)常不關(guān)箱門屬于不正確使用和維護(hù)生化培養(yǎng)箱的做法是。生化培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱具有制冷和加熱的調(diào)溫系統(tǒng)，是實(shí)驗(yàn)室常用的法律法規(guī)《藥品管理法》第1條，2，7～12，32，34，35，38，43，44，48，49，51，52，54，56,68，84,102。.《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(1998年修訂)》第5條,31~36,62《中國(guó)醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理辦法》

1,2《使用有毒物品作業(yè)場(chǎng)所勞動(dòng)保護(hù)條例》14,36,39,57,58,59.《勞動(dòng)保護(hù)知識(shí)問(wèn)答》6~9，16，19，22，23，40，49，65，67，73，74法律法規(guī)《藥品管理法》第1條，2，7～12，32，34，3例題1（2）.在我國(guó)境內(nèi)，除從事藥品監(jiān)督管理的單位或者個(gè)人外，還有哪些單位或者個(gè)人必須遵守《藥品管理法》？ABCDA.從事藥品研制的；B.從事藥品生產(chǎn)的；C.從事藥品使用的；D.從事藥品經(jīng)營(yíng)的；E.從事藥物科學(xué)研究的。2（8）.《藥品管理法》規(guī)定，開(kāi)辦藥品生產(chǎn)企業(yè)必須具有哪幾類依法經(jīng)過(guò)資格認(rèn)定的人員？BCEA.醫(yī)學(xué)技術(shù)人員；B.藥學(xué)技術(shù)人員；C.工程技術(shù)人員；D.監(jiān)督管理人員；E.相應(yīng)的技術(shù)工人。3（7）.《藥品生產(chǎn)許可證》應(yīng)當(dāng)標(biāo)明什么內(nèi)容？A.有效期；B.生產(chǎn)批號(hào)；C.生產(chǎn)范圍；D.藥品批準(zhǔn)文號(hào)；E.生產(chǎn)品種。例題1（2）.在我國(guó)境內(nèi)，除從事藥品監(jiān)督管理的單位或者個(gè)人4.工會(huì)勞動(dòng)保護(hù)監(jiān)督檢查的三個(gè)《條例》是什么？A.《工會(huì)勞動(dòng)保護(hù)監(jiān)督檢查員工作條例》；B.《基層工會(huì)勞動(dòng)保護(hù)監(jiān)督檢查委員會(huì)工作條例》；C.《工會(huì)小組勞動(dòng)保護(hù)檢查員工作條例》；D.《工會(huì)成員代表大會(huì)組織條例》；E.《工會(huì)委員選舉產(chǎn)生實(shí)施條例》。5.劃分因工傷亡事故和非因工傷亡事故應(yīng)掌握哪三個(gè)基本要素？只有同時(shí)具有以上三個(gè)基本要素，才能定為因工傷亡事故，否則，缺任何一個(gè)要素，都屬非因工傷亡事故。A.工作時(shí)間（含加班加點(diǎn)）內(nèi)發(fā)生的；B.工作地點(diǎn)，即發(fā)生在生產(chǎn)（工作）崗位上或企事業(yè)生產(chǎn)（工作）活動(dòng)所涉及的區(qū)域內(nèi)；C.工作性質(zhì)，即因從事生產(chǎn)（工作）而引起，或與生產(chǎn)（工作）有關(guān)，或從事對(duì)社會(huì)有益的工作（活動(dòng)）而引起；D.工作內(nèi)容，E.工作人員4.工會(huì)勞動(dòng)保護(hù)監(jiān)督檢查的三個(gè)《條例》是什么？5.對(duì)一般生產(chǎn)區(qū)的生產(chǎn)人員的要求下列哪些說(shuō)法是正確的？A.直接接觸藥品的生產(chǎn)人員至少每年體檢一次，建立健康檔案；B.僅限于該區(qū)域生產(chǎn)操作人員和經(jīng)批準(zhǔn)的人員進(jìn)入；C.直接接觸藥品的操作人員不得化妝；D.患有傳染病、隱性傳染病、精神病者不得從事藥品生產(chǎn)工作；E.經(jīng)常洗澡、理發(fā)、刮胡須、修剪指甲、換洗衣服，保持個(gè)人清潔。5.對(duì)一般生產(chǎn)區(qū)的生產(chǎn)人員的要求下列哪些說(shuō)法是正確的？藥品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)供試品的檢驗(yàn)量每批供試品檢驗(yàn)量一般為10g或10ml。除另有規(guī)定外，中藥膜劑檢驗(yàn)量為30~35cm2化學(xué)藥及生化藥膜劑檢驗(yàn)量為10cm2，貴重的或微量包裝的供試品檢驗(yàn)量可以酌減，但口服藥品不得少于3g，外用藥品不得少于5g。供式品須取自2個(gè)以上的包裝單位，大蜜丸、膜劑除須取自2個(gè)以上的包裝單位外，應(yīng)取自4丸(片)以上樣品。藥品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)例如：紫藥水需要檢查的限度檢查――無(wú)需檢查。葡萄糖注射液需要檢查的項(xiàng)目有無(wú)菌檢查太太口服液需要檢查的項(xiàng)目有細(xì)菌、霉菌總數(shù)、大腸桿菌紅霉素需要做的項(xiàng)目有抗生素效價(jià)測(cè)定感康膠囊需要做的項(xiàng)目有細(xì)菌、霉菌總數(shù)、大腸桿菌糖漿劑需要做的項(xiàng)目有細(xì)菌、霉菌總數(shù)、大腸桿菌作無(wú)菌檢查的有注射液，滴眼液，粉針劑。含動(dòng)物臟器的口服液要做細(xì)菌、霉菌，大腸桿菌，沙門菌檢查。例如：2023/1/3培訓(xùn)講師吳華英522022/12/28培訓(xùn)講師吳華英52ThankYou!AddyourcompanysloganThankYou微生物檢定初級(jí)培訓(xùn)微生物檢定初級(jí)培訓(xùn)微生物檢定工大綱基本要求：1、職業(yè)道德基本知識(shí):身體健康無(wú)傳染性疾病，有良好的衛(wèi)生習(xí)慣和質(zhì)量無(wú)差錯(cuò)意識(shí)、了解藥品管理法、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范等法律與法規(guī)相關(guān)知識(shí)；有強(qiáng)烈的責(zé)任感。2、基礎(chǔ)理論知識(shí)：應(yīng)用化學(xué)、應(yīng)用微生物學(xué)、生物化學(xué)。3、專業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)：藥品、食品、化妝品及日化產(chǎn)品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)4、專業(yè)知識(shí)：藥品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)知識(shí)、質(zhì)量管理基本知識(shí)。衛(wèi)生檢驗(yàn)基本技術(shù)知識(shí)，常用工具設(shè)備使用基本知識(shí)，常見(jiàn)供試品、原材料、中間體一般性能知識(shí)。微生物檢定工大綱基本要求：基本要求：5、專業(yè)相關(guān)知識(shí)：藥品檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、化妝品及日化產(chǎn)品檢驗(yàn)、潔凈操作和安全操作知識(shí)。藥品、食品、化妝品及日化產(chǎn)品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)和鑒定技術(shù)知識(shí)，工具設(shè)備使用和維護(hù)知識(shí)，供試品、原材料、中間體性能和鑒別知識(shí)。6、質(zhì)量管理知識(shí)：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范相關(guān)知識(shí)、一般衛(wèi)生檢驗(yàn)崗位的質(zhì)量保證措施與責(zé)任。7、安全文明生產(chǎn)與環(huán)境保護(hù)知識(shí)：微生物檢定安全操作與勞動(dòng)保護(hù)基本知識(shí)，常見(jiàn)廢品處理方法等環(huán)境保護(hù)基本知識(shí)。藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范、衛(wèi)生檢驗(yàn)部門的質(zhì)量保證措施與責(zé)任?；疽螅?、專業(yè)相關(guān)知識(shí)：藥品檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、化妝品及日2023/1/3培訓(xùn)講師吳華英57微生物檢定工大綱見(jiàn)深圳市勞動(dòng)局網(wǎng)站參考資料：1.《中華人民共和國(guó)藥典》（2005版），國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年；2.《藥品生物檢定技術(shù)》，汪穗福主編，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，1999年7月；3.《中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范》（2005年版），中國(guó)藥品生物制品檢定所編，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2005年2月；4.《微生物學(xué)教程》（第二版）周德慶，高等教育出版社；5.《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》沈萍等，高等教育出版社，2003年?。ǖ诙妫?；6.《中華人民共和國(guó)藥品管理法》（２００１年２月２８日）7.《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(1998年修訂)》(1999年3月18日)8.《中國(guó)醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理辦法》衛(wèi)生部1985年頒布9.《使用有毒物品作業(yè)場(chǎng)所勞動(dòng)保護(hù)條例》（２００２年４月３０日）10.《中華人民共和國(guó)職業(yè)病防治法》(2001年10月27日)

2022/12/28培訓(xùn)講師吳華英4微生物檢定工大綱《藥品生物測(cè)定技術(shù)》，汪穗福主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年8月；《藥品生物測(cè)定技術(shù)》，汪穗福主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年考試題型ClicktoedittextstylesEdityourcompanyslogan1.單選題50*12.多選題10*23.判斷題30*1時(shí)間：2小時(shí)考試題型ClicktoedittextstylesE微生物限度檢查考核內(nèi)容細(xì)菌,霉菌總數(shù)1大腸菌群限度檢查2致病菌檢查(大腸,沙門,銅綠,金葡)3無(wú)菌檢查4抗生素效價(jià)檢查5微生物限度檢查考核內(nèi)容細(xì)菌,霉菌總數(shù)1大腸菌群限度檢查2致細(xì)菌的總數(shù)檢查藥品中細(xì)菌的計(jì)數(shù)檢查是檢測(cè)藥物在單位質(zhì)量或體積內(nèi)所含有的活菌數(shù)量，用以判斷藥品被污染的程度和標(biāo)志。細(xì)菌數(shù)越多，表面藥品受到致病菌污染的機(jī)會(huì)和可能性也較大，安全性也就越差。同時(shí)細(xì)菌數(shù)計(jì)數(shù)測(cè)定也包括藥物的各種原料，工具設(shè)備，操作人員及工藝流程等各個(gè)環(huán)節(jié)的衛(wèi)生狀況和GMP評(píng)價(jià)的一個(gè)綜合依據(jù)之一。細(xì)菌的總數(shù)檢查藥品中細(xì)菌的計(jì)數(shù)檢查是檢測(cè)藥物在單位質(zhì)量或體積細(xì)菌，霉菌總數(shù)計(jì)數(shù)樣品稀釋平板接種倒培養(yǎng)基平板培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)結(jié)果報(bào)告細(xì)菌，霉菌總數(shù)計(jì)數(shù)樣品稀釋平板接種倒培養(yǎng)基平板培養(yǎng)結(jié)果報(bào)告細(xì)菌菌數(shù)報(bào)告規(guī)則細(xì)菌數(shù)宜選取平均菌落數(shù)在30~300之間的稀釋級(jí)，作為報(bào)告菌數(shù)計(jì)算的依據(jù)。*如有1個(gè)稀釋級(jí)平均菌落數(shù)在30~300之間，將該稀釋級(jí)的菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。*如同時(shí)有2個(gè)稀釋級(jí)平均菌落數(shù)在30~300之間時(shí)，計(jì)算比值：比值=高稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)/低稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)當(dāng)比值≤2時(shí)，以兩稀釋級(jí)的均值報(bào)告；當(dāng)比值＞2時(shí)，以低稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。*如同時(shí)有3個(gè)稀釋級(jí)平均菌落數(shù)在30~300之間時(shí)，以后2個(gè)稀釋級(jí)計(jì)算級(jí)間比值報(bào)告。*如各稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)均不在30~300之間，以最接近30或300的稀釋級(jí)平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。細(xì)菌菌數(shù)報(bào)告規(guī)則細(xì)菌數(shù)宜選取平均菌落數(shù)在30~300之間的稀大腸埃希菌的介紹大腸埃希菌為腸桿菌科埃希菌屬代表菌?，F(xiàn)被列為糞便污染指示菌，是口服藥品常規(guī)必檢項(xiàng)目。生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色2.培養(yǎng)與生化反應(yīng)3.抵抗力大腸埃希菌的介紹大腸埃希菌為腸桿菌科埃希菌屬代表菌?，F(xiàn)被列為大腸埃希氏菌檢查1.增菌培養(yǎng)BL2.MUG-Indole檢查3.分離培養(yǎng)EMB平板4.生化實(shí)驗(yàn)IMV-PC5.結(jié)果判斷大腸埃希氏菌檢查1.增菌培養(yǎng)BL微生物初級(jí)教材課件微生物初級(jí)教材課件制片：涂菌，干燥，固定

染色：1）結(jié)晶紫初染1min2）碘液媒染1min3）95％乙醇脫色30s4）番紅液復(fù)染2min顯微鏡檢查革蘭氏染色法制片：涂菌，干燥，固定革蘭氏染色法微生物初級(jí)教材課件

分離培養(yǎng)

取供試液BL培養(yǎng)基分別在伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB瓊脂）平板上劃線分離。菌落呈紫黑色、紫紅色、紅色、圓形，扁平或潲凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤(rùn)然后置36±1℃溫箱內(nèi)，培養(yǎng)18～24h后取出，如有菌落生長(zhǎng)，挑選菌落做IMVC實(shí)驗(yàn)，并做革蘭氏染色。

分離培養(yǎng)

取供試液BL培養(yǎng)基分別在伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB瓊生化鑒定挑選EMB劃線分離培養(yǎng)的2~3個(gè)可疑菌落：靛基質(zhì)試驗(yàn)（I）蛋白胨水培養(yǎng)基中，培養(yǎng)24小時(shí)甲基紅試驗(yàn)（M）磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基中，培養(yǎng)48小時(shí)2小時(shí)乙酰甲基甲醇生成試驗(yàn)（V-P）磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基中，培養(yǎng)48小時(shí)2小時(shí)枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（C）枸櫞酸鹽培養(yǎng)基的斜面上，一般培養(yǎng)48~72小時(shí)生化鑒定挑選EMB劃線分離培養(yǎng)的2~3個(gè)可疑菌落：靛基質(zhì)試驗(yàn)（I）甲基紅試驗(yàn)（M）枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（C）靛基質(zhì)試驗(yàn)（I）甲基紅試驗(yàn)（M）枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（C）大腸菌群分布大腸菌群分布較廣，在溫血?jiǎng)游锛S便和自然界廣泛存在。調(diào)查研究表明，大腸菌群細(xì)菌多存在于溫血?jiǎng)游锛S便、人類經(jīng)?；顒?dòng)的場(chǎng)所以及有糞便污染的地方，人、畜糞便對(duì)外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。糞便中多以典型大腸桿菌為主，而外界環(huán)境中則以大腸菌群其他型別較多。大腸菌群分布大腸菌群分布較廣，在溫血?jiǎng)游锛S便和自然界廣泛存在大腸菌群限度檢查法1.1取樣及稀釋方法：與菌落總數(shù)檢驗(yàn)方法相同，做成1：10的均勻稀釋液為檢樣。1.2乳糖發(fā)酵試驗(yàn)

選擇3個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種3管乳糖膽鹽發(fā)酵管。接種1ml及1ml以下者，用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管，同時(shí)用大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣腸桿菌混合菌中混合接種于1支單料乳糖膽鹽發(fā)酵管作對(duì)照。置36±1℃溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24±2h，1.3分離培養(yǎng)將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別在伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB瓊脂）平板上劃線分離。然后置36±1℃溫箱內(nèi)，培養(yǎng)18～24h后取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實(shí)實(shí)驗(yàn)。1.4證實(shí)試驗(yàn)1.5結(jié)果判斷

大腸菌群限度檢查法1.1取樣及稀釋方法：與菌落總數(shù)檢驗(yàn)沙門菌特性沙門菌為腸桿菌科沙門菌屬細(xì)菌，是人畜共患得腸道病原菌。廣泛分布于自然界，常引起傷寒，腸炎，腸熱癥和食物中毒，危害人類健康。藥典規(guī)定：含動(dòng)物組織或動(dòng)物類原藥材粉的口服給藥制劑，每10g或10ml不得檢出沙門菌。沙門菌特性沙門菌為腸桿菌科沙門菌屬細(xì)菌，是人畜共患得腸道病原沙門菌檢查供試品

100ml供試液復(fù)蘇培養(yǎng)：100ml營(yíng)養(yǎng)肉湯36*±1℃，培養(yǎng)18～24h增菌培養(yǎng)：四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基(TTB)10ml，36±1℃，培養(yǎng)18~24小時(shí)。分離培養(yǎng)：DHL瓊脂或EMB瓊脂，培養(yǎng)24±2小時(shí)。初步篩選試驗(yàn)：三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基斜面TSI生化鑒定：脲酶試驗(yàn)--，氰化鉀試驗(yàn)--，賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)+，動(dòng)力檢查+，血清凝聚試驗(yàn)+，靛基質(zhì)－沙門菌檢查供試品100ml供試液

沙門菌在膽鹽硫乳瓊脂(DHL)上顯無(wú)色至淺橙色，半透明，菌落中心帶黑色或全部黑色或無(wú)黑色。

沙門菌在TSI瓊脂上的反應(yīng)

沙門菌在膽鹽硫乳瓊脂(DHL)上顯無(wú)色至淺橙色，半透明，菌銅綠假單胞菌菌體特性綠膿桿菌（銅綠假單胞菌）是假單胞菌屬的代表菌種，在瓊脂平板上能產(chǎn)生藍(lán)綠色綠膿素，燒傷、燙傷、眼科疾患常感染傷口時(shí)形成綠色膿液。（外用藥品不得檢出銅綠假單胞菌）可造成眼角膜潰瘍，失明，敗血癥等嚴(yán)重疾患。本菌為無(wú)莢膜、無(wú)芽胞、能運(yùn)動(dòng)的革蘭氏陰性菌，形態(tài)不一，成對(duì)排列或短鏈狀，為專性需氧菌，最適宜生長(zhǎng)溫度為37℃，致病性綠膿桿菌在41℃時(shí)仍能生長(zhǎng)。銅綠假單胞菌菌體特性綠膿桿菌（銅綠假單胞菌）是假單胞菌屬銅綠假單胞菌檢查供試品

10-1供試液增菌培養(yǎng)：膽鹽乳糖培養(yǎng)基100ml，36±1℃，培養(yǎng)18~24小時(shí)。分離培養(yǎng)：溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)18~24小時(shí)。純培養(yǎng)：營(yíng)養(yǎng)瓊脂，培養(yǎng)18~24小時(shí)。生化鑒定：氧化酶試驗(yàn)＋，綠膿菌素試驗(yàn)

+，硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)＋，42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)＋，明膠液化實(shí)驗(yàn)＋。銅綠假單胞菌檢查供試品10-1供試液銅綠假單胞菌分離結(jié)果

除陰性對(duì)照外，其余2份培養(yǎng)液劃線接種于溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)18~24小時(shí)。結(jié)果：菌落呈扁平，無(wú)定型，周邊擴(kuò)散，表面濕潤(rùn)，灰白色，周圍有藍(lán)綠色擴(kuò)散。銅綠假單胞菌分離結(jié)果除陰性對(duì)照外，其余2份培養(yǎng)液劃線接種金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，需氧或兼性厭氧，最適生長(zhǎng)溫度37°C，最適生長(zhǎng)pH7.4。革蘭氏染色陽(yáng)性。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起，直徑1-2mm。金黃色葡萄球菌分布在皮膚，腔道，空氣，土壤，水，物品表面。引起局部和全身化膿性炎癥，嚴(yán)重導(dǎo)致敗血癥，膿毒血癥。金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)金黃色葡萄球菌檢查1.增菌培養(yǎng)

亞碲酸鈉或營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基。2.分離培養(yǎng)：甘露醇高鹽瓊脂或卵黃氯化鈉瓊脂3.革蘭氏染色鏡檢4.血漿凝固酶試驗(yàn)金黃色葡萄球菌檢查1.增菌培養(yǎng)亞碲酸鈉或營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起，直徑1-2mm。

革蘭氏染色陽(yáng)性平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起，直徑1-2mm。革蘭氏染色金黃色葡萄球菌分離結(jié)果金黃色葡萄球菌的菌落在甘露醇高鹽瓊脂平板上呈金黃色，圓形,凸起、邊緣整齊，外圍有黃色環(huán)，菌落直徑0.7～1mm。金黃色葡萄球菌分離結(jié)果金黃色葡萄球菌的菌落在甘露醇高鹽瓊脂平無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法系指檢查藥品與敷料是否無(wú)菌的一種方法。(無(wú)菌注射劑,手術(shù)用眼藥等)

無(wú)菌檢查的全部過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物的污染。無(wú)菌檢查法無(wú)菌檢查法系指檢查藥品與敷料是否無(wú)菌的一種方法。(注射劑無(wú)菌檢查1、最低檢驗(yàn)量（查表）：直接接種法取供試品數(shù)：11支（瓶）2、接種（提問(wèn)：培養(yǎng)溫度、時(shí)間、方法）需氣菌、厭氣菌：培養(yǎng)基15ml/管，硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基（1）樣品：5管，全量（2）陽(yáng)性對(duì)照：1管，同上+金黃色葡萄球菌液1ml（3）陰性對(duì)照：1管，無(wú)菌生理鹽水1ml真菌：培養(yǎng)基15ml/管，改良馬丁培養(yǎng)基（1）樣品，同上5管（3）陰性對(duì)照：1管，無(wú)菌生理鹽水1ml注射劑無(wú)菌檢查1、最低檢驗(yàn)量（查表）：直接接種法微生物檢驗(yàn)大腸桿菌的分離培養(yǎng)檢查陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)為ＭＵＧ陽(yáng)性、靛基質(zhì)陽(yáng)性口服液的微生物限度檢查項(xiàng)目大腸桿菌，細(xì)菌，霉菌銅綠假單胞菌的檢查所用的對(duì)照菌種銅綠假單胞菌綠膿桿菌增菌培養(yǎng)后陽(yáng)性對(duì)照、樣品對(duì)照都為渾濁，陰性對(duì)照不渾濁，應(yīng)做以下分離培養(yǎng)。常見(jiàn)控制菌（致病菌）綠膿桿菌檢查，分離培養(yǎng)陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。除陰性對(duì)照外，取其余2份培養(yǎng)液劃線接種于溴化十六烷基三甲銨瓊脂平板培養(yǎng)。綠膿桿菌分離培養(yǎng)陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)、陽(yáng)性對(duì)照有菌生長(zhǎng)、樣品平板上有疑似菌落生長(zhǎng)應(yīng)做下一步純培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。銅綠假單胞菌在分離培養(yǎng)的形態(tài)是灰白色。微生物檢驗(yàn)大腸桿菌的分離培養(yǎng)檢查陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)為ＭＵＧ陽(yáng)性、靛基微生物檢驗(yàn)微生物限度檢查細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)中所用的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；霉菌計(jì)數(shù)所用的培養(yǎng)基一般為玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基；酵母菌計(jì)數(shù)所用的培養(yǎng)基一般為酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)；大腸桿菌增菌培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基一般為膽鹽乳糖培養(yǎng)（BL）TSI培養(yǎng)基是指:三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基TTB培養(yǎng)基是指:四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基SS培養(yǎng)基是指：沙門、志賀菌司瓊脂培養(yǎng)基DHL培養(yǎng)基是指：膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基YPD瓊脂培養(yǎng)基是指:酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基EMB瓊脂培養(yǎng)基是指：曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基微生物檢驗(yàn)微生物限度檢查細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)中所用的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂1.檢驗(yàn)技術(shù)知識(shí)1.掌握微生物檢定基本原理及相關(guān)概念；2.掌握所用檢定菌的接種，培養(yǎng)，保藏，各種培養(yǎng)基制備的知識(shí)；3.掌握常用的消毒劑及相關(guān)試劑的使用知識(shí)；4.掌握影響微生物檢定及無(wú)菌檢驗(yàn)（無(wú)菌操作程序和要求，微生物限度檢測(cè)，樣品稀釋等）的因素；5.掌握無(wú)菌操作程序；6.掌握判斷檢測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)的異?，F(xiàn)象知識(shí)。1.檢驗(yàn)技術(shù)知識(shí)1.掌握微生物檢定基本原理及相關(guān)概念；普通微生物知識(shí)微生物學(xué)的奠基人是巴斯德微生物特別適合作為遺傳學(xué)研究對(duì)象的優(yōu)點(diǎn)繁殖周期短；培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單；表型性狀豐富細(xì)菌的特征有：多數(shù)以二分裂方式繁殖；構(gòu)造簡(jiǎn)單；水生性較強(qiáng)細(xì)胞壁的主要功能：固定細(xì)胞外形；賦予細(xì)菌特定的抗原性；為細(xì)胞生長(zhǎng)分裂所必須屬于單細(xì)胞真菌的是酵母菌在受氮磷等元素污染后發(fā)生富營(yíng)養(yǎng)化的海水赤潮和湖泊水華的元兇，是某些藍(lán)細(xì)菌普通微生物知識(shí)微生物學(xué)的奠基人是巴斯德普通微生物知識(shí)TCA途徑稱為三羧酸途徑EMP途徑稱為糖酵解途徑HMP途徑稱為：己糖一磷酸途徑關(guān)于支原體的敘述：介于獨(dú)立生活和細(xì)胞內(nèi)寄生生活間；最小型原核生物；細(xì)胞膜含有甾醇；無(wú)細(xì)胞壁；原核微生物可以分為“三菌”，包括放線菌；細(xì)菌；藍(lán)細(xì)菌生物氧化的特點(diǎn)不包括一步式快速反應(yīng)；包括條件溫和；有酶參加；大部分生成ATPL型細(xì)菌專指通過(guò)自發(fā)突變而形成的遺傳穩(wěn)定的細(xì)胞缺損菌株普通微生物知識(shí)TCA途徑稱為三羧酸途徑普通微生物知識(shí)廣泛分布于自然界，有“先鋒生物”之美稱的微生物是酵母菌；酵母菌最常見(jiàn)的繁殖方式為芽殖。一般以單細(xì)胞狀態(tài)存在；能發(fā)酵糖類產(chǎn)能。屬于絲狀真菌的是霉菌；屬于大型子實(shí)體真菌的是蕈菌；藍(lán)細(xì)菌的特征的是：進(jìn)化歷史悠久；能進(jìn)行產(chǎn)氧性光合作用；大型原核生物防腐的方法包括低溫；缺氧；干燥劑等濕熱滅菌常用121℃高壓蒸汽滅菌20min；干熱滅菌160℃，2h普通微生物知識(shí)廣泛分布于自然界，有“先鋒生物”之美稱的微生物普通微生物知識(shí)消毒是指：殺死物體上的病原微生物常用的碘液濃度為：2.5%乙醇消毒劑常用的濃度為：75％殺滅芽孢最常用和最有效的方法是：高壓蒸汽滅菌法高錳酸鉀屬于氧化劑的消毒劑常用于空氣或物體表面消毒的是：紫外；常用于血清除菌的是：濾過(guò)除菌法；濕熱滅菌法中效果最好的是，常用于手術(shù)器械或基礎(chǔ)培養(yǎng)基滅菌的是：高壓蒸汽滅菌法；適用于接種環(huán)，針的滅菌的最徹底的干熱滅菌法是灼燒。用來(lái)測(cè)量細(xì)菌大小的單位是um；瓊脂在98℃以上溶于水，以下凝固。配制固體培養(yǎng)基一般加1.4~2.0%的瓊脂，半固體0.2~0.7%普通微生物知識(shí)消毒是指：殺死物體上的病原微生物2.工具設(shè)備知識(shí)1.掌握常用設(shè)備的名稱，規(guī)格，型號(hào)，結(jié)構(gòu)，性能，材質(zhì)，使用維護(hù)，安全保護(hù)知識(shí)和儀器正確使用知識(shí)，了解工作原理2.掌握常用計(jì)量器具，儀器，儀表，電器的名稱，型號(hào)，規(guī)格，使用，維護(hù)及安全知識(shí)。2.工具設(shè)備知識(shí)1.掌握常用設(shè)備的名稱，規(guī)格，型號(hào)，結(jié)構(gòu)，工具設(shè)備知識(shí)1.普通光學(xué)顯微鏡2.手提式壓力蒸汽滅菌鍋－濕熱滅菌3.恒溫水浴鍋4.電熱恒溫干燥箱－干熱滅菌5.水浴恒溫震蕩器6.生化培養(yǎng)箱7.超凈工作臺(tái)8.菌落計(jì)數(shù)器9.紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)10.無(wú)菌室－要求11.激光塵埃粒子計(jì)數(shù)器

12.抑菌圈自動(dòng)分析儀工具設(shè)備知識(shí)1.普通光學(xué)顯微鏡7.超凈工作臺(tái)顯微鏡使用用顯微鏡的油鏡觀察時(shí)，在載玻片上滴加的鏡油是香柏油；操作顯微鏡的油鏡觀察物體時(shí)，操作的順序是……，油鏡頭的放大倍數(shù)為100倍顯微鏡的工作環(huán)境要求最大相對(duì)濕度為：85%；工作環(huán)境要求室溫為：0~40℃顯微鏡選用目鏡10倍，物鏡40倍，總放大倍數(shù)為400顯微鏡視野里有臟物，直接原因可能是目鏡上有臟物；物鏡有臟物；玻片上有臟物顯微鏡圖象某一側(cè)發(fā)暗，原因可能是轉(zhuǎn)換器不在定位處顯微鏡圖象略帶黃色，原因可能是未用蘭色濾光片顯微鏡使用用顯微鏡的油鏡觀察時(shí)，在載玻片上滴加的鏡油是香柏油手提式壓力蒸汽滅菌鍋手提式壓力蒸汽滅菌鍋，蓋上面裝有安全閥，壓力超過(guò)0.14MpA.后，能自動(dòng)跳起，釋放過(guò)高的壓力。消毒液體結(jié)束時(shí)，必須等壓力指針到達(dá)0MpA后方可排放余氣。手提式壓力蒸汽滅菌鍋，消毒液體時(shí)，應(yīng)將液體裝在硬質(zhì)的耐熱玻璃瓶中，以不超過(guò)3/4體積為好。手提式壓力蒸汽滅菌鍋，消毒液體時(shí)，應(yīng)將液體裝在硬質(zhì)的耐熱玻璃瓶中，瓶口選用棉花塞。干熱滅菌一般在160～170℃,1～2h進(jìn)行，電烘箱內(nèi)溫度降到70℃以下后，才可以打開(kāi)箱門，取出滅菌物品。電熱恒溫干燥箱工作室設(shè)有進(jìn)風(fēng)孔，空氣流動(dòng)方向是：箱底進(jìn)，箱頂出，耐熱物品適宜放入箱內(nèi)作高溫烘焙實(shí)驗(yàn)。手提式壓力蒸汽滅菌鍋手提式壓力蒸汽滅菌鍋，蓋上面裝有安全閥，生化培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱具有制冷和加熱的調(diào)溫系統(tǒng)，是實(shí)驗(yàn)室常用的設(shè)備之一。生化培養(yǎng)箱的箱體的隔熱材料采用聚胺酯泡沫塑料，對(duì)冷