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關(guān)于染色體分帶帶實(shí)驗(yàn)第一頁(yè),共七頁(yè),2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)?zāi)康某醪秸莆杖旧w分帶(C帶)的顯帶技術(shù)第二頁(yè),共七頁(yè),2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)原理
用常規(guī)的染色體處理方法和染色方法,一般只能顯示染色體的外部形態(tài)特征,如大小或長(zhǎng)短、著絲點(diǎn)或次縊痕的位置以及隨體等。但對(duì)于核型分析中較準(zhǔn)確地識(shí)別染色體組的每個(gè)成員,以及其結(jié)構(gòu)的變異,則仍有不少困難。通過(guò)不同的預(yù)處理和染色方法可導(dǎo)致染色體內(nèi)部結(jié)構(gòu)的分化染色,以獲得更多的具鑒別性特征的信息,即染色體的“解剖學(xué)”特征。也就是染色體的分帶技術(shù)。廣義而言,凡能顯示染色體結(jié)構(gòu)分化的實(shí)驗(yàn)技術(shù),均可列為染色體的分帶技術(shù)。
第三頁(yè),共七頁(yè),2022年,8月28日常見(jiàn)的帶型
G帶也叫G顯帶,這是臨床上最常用的顯帶方法。用蛋白水解酶,尿素待處理中期染色體標(biāo)本均可顯帶。G帶的特性是顯帶方法簡(jiǎn)單恒定,帶型穩(wěn)定,保存時(shí)間長(zhǎng)。
Q帶用喹吖因染料染中期染色體標(biāo)本可出現(xiàn)一種特征性黃光亮暗帶型,一般富含AT-DNA區(qū)段表現(xiàn)為亮帶,富含GC-DNA區(qū)段黃光較暗,常用于人類(lèi)Y染色體長(zhǎng)臂的觀察。臨床上較少用,不能長(zhǎng)久保存。
C帶這種方法將結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)和高度重復(fù)的DNA區(qū)域染色。在人類(lèi)染色體上這些區(qū)域位于著絲粒和Y染色體上。常用于某一科題的研究。
R帶與G帶相近,常用于染色體末端的研究。
Ag-NOR也稱(chēng)銀染色,著色的為與rDNA轉(zhuǎn)錄有關(guān)的酸性蛋白,即顯示的是有轉(zhuǎn)錄活性的核仁形成區(qū)。用于研究rRNA的初態(tài)變化,臨床上常用于著絲粒,隨體等研究。
第四頁(yè),共七頁(yè),2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)用品1.材料小鼠骨髓細(xì)胞制片2.藥品5%BaOH溶液、2*SCC溶液、0.1mol/L鹽酸、5%Giemsa染液3.器具顯微鏡、水浴鍋、染缸第五頁(yè),共七頁(yè),2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)步驟1.
0.1mol/L鹽酸處理30分鐘,蒸餾水洗凈2.染色體標(biāo)本放入新配的5%BaOH染液的染缸中,室溫靜置15分鐘。然后將染缸連同制片放在水龍頭下沖洗(逐步置換法)3.
復(fù)性制片放入60℃,2*SCC溶液中保溫1小時(shí),洗凈4.
染色放入5%Giemsa染液的染缸中,染色10-20分鐘5.
觀察洗
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