白血病及其預(yù)防第一頁，共四十九頁，2022年，8月28日一、白血病概述二、白血病分類三、白血病預(yù)防、診斷鑒別及并發(fā)癥四、生化藥物治療白血病的方法及

研究進(jìn)展第二頁，共四十九頁，2022年，8月28日白血病全稱為骨髓增生異常綜合癥。白血病患者血細(xì)胞增殖失控，產(chǎn)生過多的白細(xì)胞，且有分化障礙，凋亡受阻，使得多數(shù)白細(xì)胞停止細(xì)胞發(fā)育，而處于幼稚細(xì)胞階段。在骨髓、脾、肝等造血組織中白血病細(xì)胞大量增生累積，抑制紅細(xì)胞和血小板止血的產(chǎn)生，甚至沒有足夠多的正常白細(xì)胞抗感染。因此，非常容易受傷、出血、感染。該病發(fā)病率在年輕人與兒童惡性疾病中居首位。白血病的病理造血干細(xì)胞大量增殖各種幼稚的血細(xì)胞分裂正常情況白血病血細(xì)胞的增殖分化失去控制各種成熟的血細(xì)胞分化第三頁，共四十九頁，2022年，8月28日白血病早期癥狀不太明顯，典型的癥狀——出現(xiàn)白血病細(xì)胞。主要表現(xiàn)在以下幾點：貧血及相關(guān)癥狀如：虛弱、面色蒼白，有生病感。食欲減退，體重下降。容易擦傷或出血，如：牙床出血，流鼻血。極易感染，如出現(xiàn)咽喉痛，支氣管炎并伴有頭疼、低熱、嘴痛及皮疹等。淋巴結(jié)腫大，特別在喉部、腋下及腹股溝。病情嚴(yán)重時，突發(fā)高熱，意識模糊，無力講話和移動四肢。第四頁，共四十九頁，2022年，8月28日一、病毒肯定能引起人類產(chǎn)生白血病的化學(xué)物有苯及甲苯等。二、電離輻射可引起白血病，與劑量大小及放射部位有關(guān)，一次較大劑量或多次小劑量照射，均可致白血病。例：日本廣島和長崎原子彈爆炸，強直性脊柱炎和真性紅細(xì)胞增多癥放射治療，X線工作者。第五頁，共四十九頁，2022年，8月28日三、化學(xué)物質(zhì)職業(yè)性接觸苯、氯乙烯、金屬毒物和長期應(yīng)用抗癌藥物(特別是多種烷化劑)。骨髓毒性的化學(xué)物質(zhì)：氯霉素、磺胺、保泰松等。乙雙嗎啉。四、遺傳因素

一些先天遺傳性疾病比較容易發(fā)生白血病。在同卵的雙生子女中，一方發(fā)生白血病，另一方發(fā)生白血病的機會高達(dá)25%?？傊《緸橹饕牟∫?，電離輻射、化學(xué)物質(zhì)、遺傳為輔助因素，免疫功能缺陷有助于發(fā)??；染色體異常，癌基因活化，抑癌基因失活，基因突變是白血病發(fā)生的主要機制。第六頁，共四十九頁，2022年，8月28日1、白血病總發(fā)病率約2—5/10萬人，無地域差別。

2、不同類型白血病的發(fā)病率與人種、地域、年齡有關(guān)

(1)歐美白人CLL

(2)亞洲人AL

＜10歲AL尤ALL，CL罕見

＞10歲AML

＜40歲CLL罕見

3、男性＞女性尤CL男性更多見。其中，AL是急性白血病，CL是慢性白血病，AML急非淋巴細(xì)胞白血病，ALL急性非淋巴細(xì)胞白血病,CLL慢性淋巴細(xì)胞性白血病。第七頁，共四十九頁，2022年，8月28日白血病由于病變廣泛，極難像胃癌、肺癌那樣能早期手術(shù)切除，只能采取全身性的各種治療。慢性白血病患者的病程通常數(shù)年，隨著治療水平的提高，已有一些慢性白血病病人生存期明顯延長。急性白血病病情發(fā)展迅速，如果診斷后不給與治療，壽命一般不超過半年。近20多年來隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，預(yù)后已有了很大的改觀，白血病的緩解率有了明顯的提高。國外急性白血病5年以上的生存病例可達(dá)20～80%，國內(nèi)也有不少長期生存的病例，生存十年以上也有不少報道，有一些病人已被徹底治愈。第八頁，共四十九頁，2022年，8月28日

白血病治療方法有很多，如：化療、放療、基因治療、免疫治療、造血干細(xì)胞移植等，其中化療是急性白血病最主要的治療方法。當(dāng)急性白血病的診斷確定后，最重要的就是要及時進(jìn)行化療?；?，是“化學(xué)治療”的簡稱。對于白血病而言，就是用不同的化學(xué)藥物對病人進(jìn)行治療，這種治療通常是細(xì)胞殺傷性的，即用細(xì)胞毒藥物將腫瘤細(xì)胞殺滅，不少患者通過化療得到治愈。但化療物常在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時，也殺傷正常細(xì)胞。第九頁，共四十九頁，2022年，8月28日抑制骨髓：表現(xiàn)為全血減少，白細(xì)胞缺乏，很容易合并各種感染，貧血加重，血小板減少可能引起重要臟器出血。心臟毒性：有些化療藥物有較強的心臟毒性，胃腸反應(yīng)：食欲減退、惡心、嘔吐、腹痛、口腔潰瘍、便秘等神經(jīng)毒性：有些藥物可引起末稍神經(jīng)炎，表現(xiàn)為指（趾）麻木。肝臟毒性：藥物大多從肝臟代謝，一些病人會有藥物性肝損害，醫(yī)生會在化療中加用保肝藥物。泌尿系統(tǒng)損害：化療藥物代謝后，隨尿液排出，可能損傷腎臟和膀胱壁。粘膜損害：一些特殊的藥物易引起粘膜潰瘍。

其它：

脫發(fā)、色素沉著、皮疹、局部組織壞死及靜脈炎等。

第十頁，共四十九頁，2022年，8月28日

治療白血病成本很高，化療藥特貴，且如果要進(jìn)行移植，檢查的項目就相應(yīng)增多，還涉及到移植后的治療。一旦配型成功，還有很多費用生成。關(guān)鍵是ICU(重癥檢測治療室)的費用。移植前必須先把患者體內(nèi)的白細(xì)胞全部殺滅，然后再移植造血干細(xì)胞。這個過程由于患者體內(nèi)沒有白細(xì)胞，特別容易感染，因此必須住進(jìn)無菌室，還要用抗感染的藥。這個過程需要一兩個月。

白血病的治療費用對普通家庭來說是一個很大的負(fù)擔(dān)。第十一頁，共四十九頁，2022年，8月28日根據(jù)增生細(xì)胞類型，可分為粒細(xì)胞性、淋巴細(xì)胞性和單核細(xì)胞性三類。主要表現(xiàn)為感染、發(fā)熱、貧血和出血。按白血病細(xì)胞分化程度可分為急性及慢性兩大類：急性白血病根據(jù)白血病細(xì)胞的類型，臨床上又分為急性淋巴細(xì)胞性白血?。ˋLL）和急性非淋巴細(xì)胞性白血?。ˋNLL）兩大類，每類又有幾型。目前國內(nèi)外通用的分型如下：二、白血病的分類第十二頁，共四十九頁，2022年，8月28日①ANLL分為8型M0——急性髓細(xì)胞白血病微分化型M1——急性粒細(xì)胞白血病未分化型M2——急性粒細(xì)胞白血病部分分化型M3——急性早幼粒細(xì)胞白血病M4——急性粒-單核細(xì)胞白血病M5——急性單核細(xì)胞白血病M6——急性紅白血病M7——急性巨核細(xì)胞白血?、贏LL分為L1、L2和L3型，近年來又根據(jù)細(xì)胞的免疫學(xué)特點分為T、B、前B、普通型和未分化型。第十三頁，共四十九頁，2022年，8月28日M0（急性髓細(xì)胞白血病微小分化型）原始細(xì)胞在光鏡下類似L2型細(xì)胞。核仁明顯。胞漿透明，嗜堿性，無嗜天青顆粒及Auer小體。髓過氧化物酶（MPO）及蘇丹黑B陽性＜3%。在電鏡下，MPO（+），CD33或CD13等髓系標(biāo)志可呈（+）。通常淋巴系抗原為（—），但有時CD7+、TdT+。M1（急性粒細(xì)胞白血病未分化型）未分化原粒細(xì)胞（I型+II型）占骨髓非紅系細(xì)胞的90%以上，至少3%細(xì)胞為過氧化物酶染色（+）。M2（急性粒細(xì)胞白血病部分分化型）原粒細(xì)胞（I型+II型）占骨髓非紅系細(xì)胞的30%～89%，單核細(xì)胞＜20%，其他粒細(xì)胞＞10%。M2a的染色體有t（8;21）易位，可查到AML1/ETO融合基因。第十四頁，共四十九頁，2022年，8月28日M3（急性早幼粒細(xì)胞白血?。┕撬柚幸远囝w粒的早幼粒細(xì)胞為主，此類細(xì)胞在非紅系細(xì)胞中≥30%?？刹榈饺旧wt（15；17）易位和PML/RARα融合基因。M4（急性粒-單核細(xì)胞白血病）骨髓中原始細(xì)胞占非紅系細(xì)胞的30%以上，各階段粒細(xì)胞占30%～＜80%，各階段單核細(xì)胞＞20%。CD14陽性。M4Eo：除M4各特點外，嗜酸性粒細(xì)胞在非紅系細(xì)胞中≥5%?？刹榈絠nv/del(16)。第十五頁，共四十九頁，2022年，8月28日M5（急性單核細(xì)胞白血?。┕撬璺羌t系細(xì)胞中原單核、幼單核≥30%。如果原單核細(xì)胞（I型+II型）≥80%為M5a，＜80%為M5b。CD14陽性。M6（急性紅白血?。┕撬柚杏准t細(xì)胞≥50%，非紅系細(xì)胞中原始細(xì)胞（I型+II型）≥30%。M7（急性巨核細(xì)胞白血?。┕撬柚性季藓思?xì)胞≥30%。CD41，CD61，CD42陽性。說明：原始細(xì)胞漿中無顆粒為I型，出現(xiàn)少數(shù)顆粒為II型。第十六頁，共四十九頁，2022年，8月28日急性白血病癥狀1、貧血：貧血癥狀往往出現(xiàn)的比較的早而嚴(yán)重，且呈現(xiàn)進(jìn)行性發(fā)展，往往還伴有頭暈、心悸、乏力、氣短等現(xiàn)象，血紅蛋白也往往多低于6克/毫升。急性白血病癥狀2、出血：急性白血病患者往往會有廣泛、局部出血現(xiàn)象，往往在牙齦、鼻腔、口腔粘膜等處常見，皮膚膜淤血或紫癜，內(nèi)臟出血引起的嘔血及便血，女性急性白血病患者往往會有月經(jīng)增多現(xiàn)象，也往往有經(jīng)期延長現(xiàn)象等。當(dāng)出現(xiàn)腦出血現(xiàn)象時，常常導(dǎo)致死亡。急性白血病癥狀3、感染和發(fā)熱：急性白血病患者身體不同部位有感染且高熱不退，以口腔炎為多見，齒齦炎、咽峽炎、肛周炎、肛旁膿腫現(xiàn)象比較的常見，肺部感染現(xiàn)象也往往比較的常見，有時還有可能引發(fā)敗血癥和菌血癥，危及患者的生命。第十七頁，共四十九頁，2022年，8月28日療效根據(jù)類型和發(fā)現(xiàn)的時期不同而不同?；颊咴侥贻p緩愈率也就越高。這里的緩愈指的是患者體內(nèi)不再有癌細(xì)胞，骨髓表現(xiàn)正常。近年來對白血病療效有較大提高，有些病人已治愈，除輸血和抗感染等對癥支持治療外，聯(lián)合化療是當(dāng)前主要的治療方法，由于新的有效化療藥物的不斷涌現(xiàn)和聯(lián)合用藥方法的改進(jìn)，完全緩解率已達(dá)80％以上；另外分化誘導(dǎo)劑維甲酸等可使早幼粒白血病細(xì)胞分化誘導(dǎo)成熟，療效顯著，是近年來的重要發(fā)現(xiàn)；骨髓移植可獲痊愈，但仍有一些問題尚待解決。第十八頁，共四十九頁，2022年，8月28日慢性白血病起病緩慢，早期多無癥狀，常在看其他疾病驗血時無意中發(fā)現(xiàn)，根據(jù)細(xì)胞類型又分為慢性粒細(xì)胞性白血?。–ML）和慢性淋巴細(xì)胞性白血病（CLL）兩大類。CML常有明顯脾腫大，白細(xì)胞計數(shù)常高達(dá)100～200×109／升(L)，骨髓粒細(xì)胞極度增生，以成熟和中、晚幼粒細(xì)胞為主，90％以上有特征性的費城（ph1）染色體。治療可用羥基脲和馬利蘭，近來發(fā)現(xiàn)干擾素α-2b有較好療效，還能消除ph1染色體，骨髓移植可望治愈。第十九頁，共四十九頁，2022年，8月28日

CML晚期可急性變，治療同急性白血病，但預(yù)后更差。CLL常有肝脾和淋巴結(jié)腫大，白細(xì)胞計數(shù)多為15～50×109／L，骨髓淋巴細(xì)胞極度增生，主要是成熟淋巴細(xì)胞，早期常不需要治療，而有明顯淋巴結(jié)腫大、貧血、血小板減少者可用瘤可寧，也可放療，近年來發(fā)現(xiàn)干擾素亦有一定療效。主要死亡原因是骨髓衰竭和感染，骨髓衰竭是疾病終末期的表現(xiàn)，難以治療，但積極預(yù)防和控制感染會延長壽命。第二十頁，共四十九頁，2022年，8月28日慢性骨髓性白血病(CML)是較為棘手的一種，因為此病一旦發(fā)展無法控制，一般僅能存活4年。慢性淋巴性白血病(CLL)進(jìn)程緩慢且通常為老年人患有，一般的治療趨向于保守治療。隨著癥狀消失，該種病也就無需治療了。如果淋巴結(jié)或其他器官出現(xiàn)腫脹，可通過一些口服化學(xué)性藥品加以控制，所有CLL型患者都能過正常人的生活。在沒有發(fā)展為急性血癌之前，口服藥可有效地控制。第二十一頁，共四十九頁，2022年，8月28日CML型患者的癥狀達(dá)好幾年，CML型患者若攝取干擾素，還可把生命延長的更長。但不管如何治療，所有的CML型白血病最終都要發(fā)展為急性白血病，所以大夫一般建議患者進(jìn)行骨髓移植。化療對于白血病患者是基本的治療，接受化學(xué)治療的病人都經(jīng)歷了副作用的不適。許多放松療法--包括針灸、按摩、瑜珈、氣功、藥物或程序肌肉松弛都可幫助減輕化療引起的疼痛及惡心。同時注意攝取一些能增強免疫能力的維生素、營養(yǎng)物質(zhì)和其他中藥。第二十二頁，共四十九頁，2022年，8月28日(1)避免接觸過多的X射線及其他有害的放射線，對從事放射工作的人員需做好個人防護(hù)，孕婦及嬰幼兒尤其應(yīng)注意避免接觸放射線。

(2)防治各種感染，特別是病毒感染，如C型RNA病毒。(3)慎重使用某些藥物，如氯霉素，保泰松，某些抗病毒藥物，某些抗腫瘤藥物及免疫抑制劑等，應(yīng)避免長期使用或濫用。第二十三頁，共四十九頁，2022年，8月28日(4)避免接觸某些致癌物質(zhì)，做好職業(yè)防護(hù)及監(jiān)測工作，如在生產(chǎn)酚，氯苯，硝基苯，香料，藥品，農(nóng)藥，合成纖維，合成橡膠，塑料，染料等的過程中，注意避免接觸有害，有毒物質(zhì)。

(5)對白血病高危人群應(yīng)做好定期普查工作，特別注意白血病警號及早期癥狀，有條件者可服用天仙活力源做預(yù)防性治療。(6)多吃天然食物及經(jīng)過衛(wèi)生檢驗的正規(guī)生產(chǎn)食品，如：新鮮蔬菜、五谷雜糧等。第二十四頁，共四十九頁，2022年，8月28日診斷

白血病是骨髓的病變，因此需要進(jìn)行骨髓穿刺檢查以及骨髓切片檢查，才能夠確定診斷，為了進(jìn)一步確認(rèn)白血病的種類，還需要額外的特殊檢查，才能精確將白血病予以分類并給予最適當(dāng)?shù)闹委煟@些特殊檢查包括：細(xì)胞生化特殊染色，流式細(xì)胞儀檢查，染色體檢查。第二十五頁，共四十九頁，2022年，8月28日應(yīng)與再生障礙性貧血，骨髓增生異常綜合征，傳染性單核細(xì)胞增多癥，原發(fā)性血小板減少性紫癜及類白血病反應(yīng)等病鑒別。

1、再生障礙性貧血2、骨髓增生異常綜合征3、傳染性單核細(xì)胞增多4、原發(fā)性血小板減少性紫癜5、類白血病反應(yīng)第二十六頁，共四十九頁，2022年，8月28日(1)感染：由于白血病造成正常白細(xì)胞減少，尤其是中性粒細(xì)胞減少，同時化療等因素亦導(dǎo)致粒細(xì)胞的缺乏，使患者易發(fā)生嚴(yán)重的感染或敗血癥，常引起感染的細(xì)菌有：革蘭陽性菌，如金黃色葡萄球菌，溶血性鏈球菌，棒狀桿菌等，革蘭陰性桿菌，如綠膿桿菌，大腸桿菌，克雷白氏桿菌等，霉菌感染以白色念珠菌，曲霉菌，毛霉菌擴頭毛孢子菌等，上述霉菌感染多發(fā)生于長期粒細(xì)胞減少或持續(xù)發(fā)熱而抗生素不敏感的患者，有的接受皮質(zhì)激素治療的患者，由于細(xì)胞免疫功能低下，更易被病毒感染，如水痘帶狀皰疹病毒，單純皰疹病毒等，此外卡氏肺囊蟲感染也常見，上呼吸道感染及肺炎為其常見類型。第二十七頁，共四十九頁，2022年，8月28日(2)腸功能衰竭：由于治療白血病中的化療藥物，放療手段影響腸胃功能，而導(dǎo)致怕胃功能衰竭，患者的營養(yǎng)補充成為一個突出的問題，目前采用鎖骨下靜脈插管到上腔靜脈內(nèi)進(jìn)行高營養(yǎng)輸液僅解決部分問題，營養(yǎng)缺乏可發(fā)生肺炎，腸炎等并發(fā)癥。第二十八頁，共四十九頁，2022年，8月28日(3)高尿酸血證：正常人由于核酸代謝分解，每日尿中排出尿酸300～500mg，白血病患者因大量白血病細(xì)胞的核酸分解可使尿酸排出量增加數(shù)十倍，當(dāng)患者接受化療，放療等治療時則出現(xiàn)高尿酸血癥，應(yīng)用皮質(zhì)激素等又能增加高尿酸癥，高濃度的尿酸很快過飽和而沉淀，引起腎小客廣泛損傷和尿酸結(jié)石，可導(dǎo)致少尿，無尿，因此白血病患者必須補充較充分的液體，以保證一定的尿量，并服用別嘌噙醇，如發(fā)生腎功能衰竭則須限制補液量，并作透析治療。第二十九頁，共四十九頁，2022年，8月28日(4)出血：白血病患者由于白血病細(xì)胞惡性增生，血小板明顯減低，易引起呼吸道，消化道，泌尿系出血，尤其是顱內(nèi)出血，所以要根據(jù)病因打取積極止血措施，包括輸注濃縮血小板。(5)肺部疾患：由于白血病患者正常成熟中性粒細(xì)胞減少，免疫功能降低，常常導(dǎo)致肺部感染，此外白血病細(xì)胞，浸潤可阻塞肺部小血管，支氣管而發(fā)生呼吸困難，呼吸窘迫綜合征，胸片可有毛玻璃狀或粟粒網(wǎng)狀，可作肺部放射的試驗性治療。第三十頁，共四十九頁，2022年，8月28日(6)電解質(zhì)失衡：白積壓病治療過程中常因白血病細(xì)胞破壞過多或因化療藥物性腎損害等原因而排鉀過多，又因化療引起飲食欲差，消化系統(tǒng)功能紊亂，鈉入量不足而致低血鉀，或因白血病細(xì)胞破壞使磷釋放增多，導(dǎo)致低鈣等，因此在治療過程中要注意鉀，鈣，鈉等電解質(zhì)濃度。(7)播散性血管內(nèi)凝血(DIC)：播散性血管是一組嚴(yán)重的出血綜合征。第三十一頁，共四十九頁，2022年，8月28日第三十二頁，共四十九頁，2022年，8月28日1.治療性抗體2.細(xì)胞治療3.基因治療4.干擾素治療第三十三頁，共四十九頁，2022年，8月28日人類戰(zhàn)勝病魔主要依靠自身免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的特異性抗體,在人體免疫功能不足的情況下,補充給予與人體產(chǎn)生的相似或相同的單克隆抗體可以治療一些疾病,這是被確認(rèn)的治療性抗體;其療效與化學(xué)藥物相同,但更安全,幾乎無副作用,抗體聯(lián)合化療有效率高達(dá)80%以上。目前,鼠源性單克隆抗體由于副反應(yīng)大、代謝快,已經(jīng)逐漸退出市場。人源化和全人源化單克隆抗體由于副反應(yīng)小、在體內(nèi)滯留時間長,有利于治療。重組多克隆抗體可以克服單抗治療的局限性,更有效地捕捉可能逃逸的突變靶標(biāo)。少數(shù)重組多克隆抗體藥物(antiRhD)已進(jìn)入臨床研究。第三十四頁，共四十九頁，2022年，8月28日Lintuzumab林妥珠單抗是一種人源化的單克隆抗體，從原始鼠科M195發(fā)展而來。林妥珠單抗作為一個未改性和放射性標(biāo)記的單克隆抗體已被用于治療AML。第三十五頁，共四十九頁，2022年，8月28日Gemtuzumabozogamicin(GO)是重組人源化抗CD33的抗體，與一種抗腫瘤抗生素卡奇霉素的衍生物有關(guān)，是唯一的通過美國食品和藥物管理局（FDA）批準(zhǔn)的抗體藥物。它用來治療復(fù)發(fā)性急性髓系白血病（AML）的老年患者。概括的講，GO結(jié)合CD33分子并內(nèi)化，分配到溶酶體中，其中卡奇霉素釋放，導(dǎo)致DNA氧化性損傷、線粒體損傷，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。第三十六頁，共四十九頁，2022年，8月28日細(xì)胞治療是以組織細(xì)胞、成體干細(xì)胞/前體細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞移植為手段的一種新的生物治療方法。用人體自身的干細(xì)胞治療自身疾病,不危及自身的健康,不存在免疫排斥問題,因此是理想的醫(yī)學(xué)臨床治療和研究的來源。第三十七頁，共四十九頁，2022年，8月28日造血干細(xì)胞移植(HSCT)是通過大劑量放化療預(yù)處理，清除受者體內(nèi)的腫瘤或異常細(xì)胞，再將自體或異體造血干細(xì)胞移植給受者，使受者重建正常造血及免疫系統(tǒng)。造血干細(xì)胞移植已臨床使用近半個世紀(jì),長期以來治愈了數(shù)以萬計的白血病患者。第三十八頁，共四十九頁，2022年，8月28日作為造血微環(huán)境重要組成的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)由于其來源廣泛、取材方便、可進(jìn)行體外擴增、具有多分化潛能、促進(jìn)造血和具有免疫調(diào)節(jié)能力等優(yōu)點，成為了近年來研究的熱點，并逐漸被應(yīng)用于臨床治療。Ball等報道，輸注體外擴增的供者來源的MSC(1.6×106／kg)能夠加快半相合移植后白細(xì)胞恢復(fù)，尤其是淋系的恢復(fù)，并促進(jìn)移植物長期植入，減少了感染的發(fā)生。第三十九頁，共四十九頁，2022年，8月28日MacMillan等對15例兒童高危急性白血病患者行臍血造血干細(xì)胞移植，移植時同時輸注體外培養(yǎng)擴增的父／母單倍型相合骨髓來源MSC(至少5×106／kg)，結(jié)果縮短了中性粒細(xì)胞及血小板植入時間，延長了生存時間。第四十頁，共四十九頁，2022年，8月28日定義：將人正常基因或有治療作用的基因通過一定的途徑導(dǎo)入機體靶細(xì)胞以糾正基因缺陷或發(fā)揮治療作用?；蛑委煹耐緩街饕虚g接體內(nèi)(exvivo)和體內(nèi)(invivo)兩種。間接體內(nèi)法是先在體外將外源基因?qū)胼d體細(xì)胞,然后將基因轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞回輸給病人,使攜有外源基因的載體細(xì)胞在體內(nèi)表達(dá)治療產(chǎn)物,以達(dá)到治療的目的,這是目前研究和應(yīng)用較多的一種方法。體內(nèi)法是將外源性基因通過肌肉注射、靜脈注射、器官內(nèi)灌注、皮下包埋等方法導(dǎo)入受體體內(nèi)有關(guān)的器官組織和細(xì)胞內(nèi),但此法轉(zhuǎn)染率較低。第四十一頁，共四十九頁，2022年，8月28日基因治療的載體選擇恰當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)移方法或載體,使目的基因靶向,可控并有效地表達(dá),是基因治療成功的關(guān)鍵。目前外源基因的轉(zhuǎn)移方法主要有病毒法和非病毒法。第四十二頁，共四十九頁，2022年，8月28日反義核酸療法是應(yīng)用反義核酸在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平阻斷某些異?；虻谋磉_(dá),使腫瘤細(xì)胞進(jìn)人正常分化軌道或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。反義核酸有3種：一類是人工合成的寡脫氧核昔酸（ODN）,注射進(jìn)人機體后以胞吞的方式進(jìn)入細(xì)胞,直接結(jié)合到DNA雙鏈的特定部位,形成三聚體,影響轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,使轉(zhuǎn)錄不能啟動;同時ODN可以防止雙鏈解旋,也進(jìn)一步影響了轉(zhuǎn)錄。另一類是將特定的反義核酸連接到表達(dá)載體上(質(zhì)粒、病毒),導(dǎo)人靶細(xì)胞后直接轉(zhuǎn)錄出反義RNA,與相應(yīng)的mRNA形成雙鏈,阻止蛋白翻譯。第三類是核酶,一種具有催化活性的RNA分子,與相應(yīng)的mRNA結(jié)合后具有位點特異性的剪切作用,從而將mRNA降解。第四十三頁，共四十九頁，2022年，8月28日Spiller等構(gòu)建了MP:PO:MP嵌合型ODN,嵌合型ODN特異性反義作用更強,且更穩(wěn)定。由于反義核酸療法最大障礙在于細(xì)胞攝取率過低,他們比較了3種CML細(xì)胞攝取ODN的方式發(fā)現(xiàn),電穿孔,鏈球菌溶血素-O穿透處理細(xì)胞能明顯增強細(xì)胞攝取率,明顯抑制靶mRNA的水平;但是與不同脂質(zhì)連接的ODN的細(xì)胞攝取率無明顯提高。Skorski等給SCID小鼠注射CML急變的細(xì)胞,然后分別給予等劑量針對bcr-abl、c-myc或bcr-abl+c-myc的ODN,聯(lián)合用藥組雖未能治愈,但疾病進(jìn)展更易于控制,提示針對多個癌基因的反義核酸療法可能會增加療效。第四十四頁，共四十九頁，2022年，8月28日Fabritis等利用反義核酸凈