第九微生物遺傳變異與育種微生物的遺傳和變異遺傳性是指親代生物傳遞給子代的與自身相同性狀的遺傳信息，這種遺傳性是相對穩(wěn)定的。變異性凡在遺傳物質(zhì)水平上發(fā)生了改變從而引起某些相應(yīng)性狀發(fā)生改變的特性，稱為變異性，這種變異性是可以遺傳的。第一節(jié)微生物的遺傳微生物的遺傳---遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)證明核酸是遺傳變異物質(zhì)基礎(chǔ)的經(jīng)典實驗①肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗②噬菌體感染實驗③病毒的拆開和重建實驗4（二）噬菌體感染實驗A.D.Hershey和M.Chase，1952年實驗證明，進入細菌細胞內(nèi)部的物質(zhì)是DNA。DNA包含有產(chǎn)生完整噬菌體的全部信息。DNA的結(jié)構(gòu)與復(fù)制DNA的化學(xué)組成:DNA是一種高分子化合物，它由四種核苷酸組成，每一種核苷酸均含環(huán)狀堿基、脫氧核糖和磷酸根三種組分。四種核苷酸的差異僅僅在于堿基的不同。四種堿基為：腺嘌呤(Adenine,簡稱A)、鳥嘌呤(Guanine簡稱G)、胸腺嘧啶(Thymine，簡稱T)、胞嘧啶(Cytosine，簡稱C)，含這四種堿基的核苷酸分別稱為腺嘌呤核苷酸、鳥嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸和胞嘧啶核苷酸。

嘌呤堿結(jié)構(gòu)示意圖嘧啶堿結(jié)構(gòu)示意圖

核苷結(jié)構(gòu)圖

核苷結(jié)構(gòu)圖核苷結(jié)構(gòu)圖核苷酸結(jié)構(gòu)

1核苷酸結(jié)構(gòu)

25-脫氧腺苷酸

DNA的多核苷酸鏈

的結(jié)構(gòu)及其縮寫式

表示法

DNA中多核苷酸鏈的一部分示意圖DNA的結(jié)構(gòu)

Watson—Crick所提出的模型(稱為B-DNA)螺旋是以DNA的X—射線衍射圖譜為根據(jù)的，這個模型里螺旋每圈含約10個堿基，在此右手螺旋中堿基對平面垂直于螺旋軸。

DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型DNA圖DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性

的三種力量互補堿基之間有氫鍵DNA分子中的堿基堆積力離子鍵DNA的復(fù)制DNA是生物遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)，遺傳信息就儲存在DNA分子上，生物遺傳性狀就是由DNA分子中堿基對的數(shù)目和排列順序所決定的。為了在細胞分裂中確保子代的遺傳性狀不變，必須將DNA分子上的遺傳信息原封不動地傳給子代，即母代細胞中的DNA中堿基對的數(shù)目和排列順序十分精確地被復(fù)制。DNA的復(fù)制過程首先是DNA的雙鏈從一端打開，分離成兩條單鏈，然后以每條單鏈為模板，通過堿基配對逐漸建立起完全互補的一套核苷酸單位，新連接上的多核苷酸鏈與原有的多核苷酸鏈重新形成新的雙螺旋DNA。這樣，在DNA復(fù)制中，引起堿基缺失、置換或插入，改變了堿基排列順序，就會發(fā)生子代的變異。

在DNA聚合酶的催化下，一個DNA分子最終復(fù)制成兩個結(jié)構(gòu)完全相同的DNA，從而準確地將遺傳特性傳遞給子代。復(fù)制后的DNA分子，各由一條新鏈和一條舊鏈構(gòu)成雙螺旋結(jié)構(gòu)，這種復(fù)制方法稱為半保留復(fù)制。

二、遺傳信息的傳遞——基因的表達

染色體是由許多不同的基因所構(gòu)成的，基因是某一特定遺傳信息的貯藏場所，從分子水平上來看就是具有某一特定堿基排列順序和數(shù)目的DNA分子片段?；蛏腺A存的遺傳信息需要通過一系列物質(zhì)和能量代謝過程才能在生理上或形態(tài)上表達出相應(yīng)的遺傳性狀。所以，遺傳信息的傳遞，即基因的表達過程就可以決定微生物表現(xiàn)出某種性狀(如是否產(chǎn)生莢膜、鞭毛等)。

在遺傳信息傳遞過程中，必須存在一種稱為核糖核酸(RNA)的物質(zhì)，它也是由四種核苷酸所組成的高分子物質(zhì)，與DNA的化學(xué)成分相似。不同的是核苷酸中不是脫氧核糖而是核糖，并且以尿嘧啶(U)代替了DNA中的胸腺嘧啶（T）。已知細胞中參與信息傳遞的RNA至少有三種類型：①信使核糖核酸(簡稱mRNA)，指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成；②核蛋白體核糖核酸(簡稱rRNA)，rRNA與蛋白質(zhì)組成核糖體(又稱核蛋白體)，是蛋白質(zhì)(或多肽)合成的場所；③轉(zhuǎn)運核糖核酸(簡稱tRNA)，可識mRNA上的信息，并將特定的氨基酸送到rRNA上供蛋白質(zhì)合成。分子遺傳學(xué)研究指出，貯存DNA上的遺傳信息是通過DNA的復(fù)制傳給子代的，而通過RNA的中間作用來指導(dǎo)蛋白質(zhì)(酶)的合成。這種關(guān)于DNA的復(fù)制和遺傳信息傳遞的基本規(guī)律被稱為分子遺傳學(xué)的“中心法則”。中心法則1958年F．Crick提出了中心法則,中心法則表示了遺傳信息傳遞的方向:信息可以通過復(fù)制一直世代傳遞下去；信息也可以從DNA傳遞到RNA，又從RNA傳遞到蛋白質(zhì)。但信息不能離開蛋白質(zhì)再傳遞到其它分子。轉(zhuǎn)錄能產(chǎn)生編碼一個或幾個遺傳信息的RNA(包括mRNA)分子。翻譯則將編碼在mRNA核苷酸順序中的信息轉(zhuǎn)變?yōu)榈鞍踪|(zhì)中的氨基酸順序。RNA溝通了遺傳物質(zhì)和蛋白質(zhì)之間的聯(lián)系。遺傳信息的這種傳遞順序在生物中是千真萬確的。中心法則的完善70年代以后隨著對病毒的認識，中心法則得到進一步的完善。如RNA病毒，遺傳信息本來就編碼在RNA中而不是在DNA里。所以能通過自身復(fù)制其RNA分子，并產(chǎn)生mRNA。

另外，如RNA腫瘤病毒，它含有一種逆轉(zhuǎn)錄酶，能將病毒RNA復(fù)制成DNA分子，它產(chǎn)生了與中心法則規(guī)定的方向相反的信息流向。完整的中心法則路線

轉(zhuǎn)錄——mRNA的合成以DNA的雙鏈中的一條鏈為模板，按互補方式合成RNA，這種遺傳信息由DNA到RNA的傳遞過程稱為轉(zhuǎn)錄。翻譯轉(zhuǎn)錄后的mRNA作為合成蛋白質(zhì)的模板，并且由mRNA的堿基排列順序決定多肽鏈中氨基酸的排列順序，這種遺傳信息從mRNA到蛋白質(zhì)的傳遞過程稱為翻譯。性狀的表達遺傳密碼的主要特征

密碼子高度簡并 密碼的通用性 遺傳密碼的改變 重疊基因與重疊密碼

遺傳密碼表大腸桿菌70s核糖體示意圖蛋白質(zhì)合成氨基酸的活化肽鏈的形成（包括肽鏈合成的起始、延長和終止）肽鏈的釋放AA+tRNA+ATP氨酰-tRNA合成酶氨酰-tRNA+AMP+PPi第二節(jié)微生物的突變突變的原因隨著科學(xué)的發(fā)展，人們越來越清楚地認識到，突變是DNA分子中堿基對發(fā)生變化的結(jié)果。即由于某些原因，引起DNA分子堿基的缺失、置換或插入，改變了基因內(nèi)部原有的排列順序和數(shù)目，從而引起微生物性狀的改變，并能夠遺傳給子代。所以，突變往往發(fā)生在DNA的復(fù)制過程中。DNA分子中堿基對的變化可以在自然條件下自發(fā)進行，也可以人為地誘發(fā)引起。因此，從發(fā)生突變的原因來看，可分為自發(fā)突變和誘發(fā)突變。

自發(fā)突變可以由自然界中的某些物理、化學(xué)因子的干擾引起(如輻射、臭氧等)，可以由微生物體內(nèi)的代謝產(chǎn)物亞硝酸、過氧化氫等引起；亦可由堿基本身的互變異構(gòu)引起。自發(fā)突變的機率很低，一般自發(fā)突變率為10-5～10-9。

誘發(fā)突變(又稱誘變)是人為地應(yīng)用物理化學(xué)因素引起的突變，這些引起誘發(fā)突變的物理化學(xué)因素稱為誘變劑。常用的誘變劑有紫外線、亞硝酸等。誘發(fā)突變可以大大提高突變率。

以往人們一直認為，突變是定向突變，直到1943年后，人們才通過大量科學(xué)實驗得出突變的發(fā)生是非定向的結(jié)論，即認為突變的結(jié)果與突變的原因間是不相對應(yīng)的?；駾NA上堿基對的改變是隨機的，但突變體發(fā)生后能否生長、繁殖則取決于環(huán)境條件能否滿足突變體的要求，即適者生存，不適者淘汰?；蛲蛔兗捌錂C制

341、誘發(fā)突變：物理、化學(xué)和生物的因素，提高突變率的人為的作法（1）堿基的置換35堿基的置換引起的突變36★直接引起置換的誘變劑定義：一類可直接與核酸的堿基發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的誘變劑，不論在機體內(nèi)或是在離體條件下均有作用。種類：很多。例如亞硝酸、羥胺和各種烷化劑（硫酸二乙酯，甲基磺酸乙酯，N-甲基-N′硝基-N-亞硝基胍，N-甲基-N-亞硝基脲，乙烯亞胺，環(huán)氧乙酸，氮芥等）。作用：它們可與一個或幾個核苷酸發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，從而引起DNA復(fù)制時堿基配對的轉(zhuǎn)換，并進一步使微生物發(fā)生變異。羥胺只引起G┇C→A:T，其余都是可使G┇C=A:T發(fā)生互變的。能引起顛換的誘變劑很少，只是部分烷化劑才有。37這類誘變劑主要是一些堿基類似物,如：5-溴尿嘧啶(5-BU)和5-氨基尿嘧啶（5—AU）、疊氮胸腺嘧啶（AIT）等等；作用方式：通過活細胞的代謝活動參入到DNA分子中，主要是在DNA復(fù)制時堿基類似物插入DNA中，引起堿基對配對錯誤，造成堿基置換。以5-溴尿嘧啶(5-BU)為例：5-BU是胸腺嘧啶（T）的類似物，酮式的5-BU可以和A配對，烯醇式的5-BU可以和G配對，在DNA分子復(fù)制的過程中，由于5-BU的插入和互變異構(gòu)導(dǎo)致堿基置換?！镩g接引起置換的誘變劑38（2）移碼突變：添加或缺失核苷酸，引起閱讀錯誤錯誤+錯誤-+正常---正常+++正常39（3）染色體畸變：缺失、重復(fù)、插入、倒位、易位40（3）染色體畸變

（chromosomalaberration）某些理化因子，如X射線等的輻射及烷化劑、亞硝酸等，除了能引起點突變外，還會引起DNA的大損傷（macrolesion）——染色體畸變，它包括：染色體結(jié)構(gòu)上的變化：缺失（deletion）重復(fù)（duplication）易位（translocation）倒位（inversion）染色體數(shù)目的變化41★染色體結(jié)構(gòu)上的變化分為染色體內(nèi)畸變和染色體間畸變兩類。染色體內(nèi)畸變：只涉及一條染色體上的變化，如發(fā)生染色體的部分缺失或重復(fù)時，其結(jié)果可造成基因的減少或增加；如發(fā)生倒位或易位時，則可造成基因排列順序的改變，但數(shù)目卻不改變。倒位--------是指斷裂下來的一段染色體旋轉(zhuǎn)180后，重新插入到原來染色體的原位置上，從而使其基因順序與其它的基因順序相反；易位--------是指斷裂下來的一小段染色體再順向或逆向地插入到同一條染色體的其它部位上。染色體間畸變：指非同源染色體間的易位。42染色體畸變第三節(jié)細菌的基因重組基因重組(Generecombination)是微生物變異的又一途徑。所謂基因重組，就是指兩個不同性狀的生物細胞，其中一個生物細胞中的基因轉(zhuǎn)移到另一個生物細胞中，并與這個細胞中的基因進行重新排列。轉(zhuǎn)化受體細胞直接吸收了來自供體細胞的(處于游離狀態(tài)的)DNA片段，并把它整合到自己的基因組中，從而獲得了供體細胞部分遺傳性狀的現(xiàn)象，稱為轉(zhuǎn)化(Transformation)。接合接合(conjugation)，就是指供體菌和受體菌的完整細胞經(jīng)直接接觸而傳遞大段DNA(包括質(zhì)粒)遺傳信息的現(xiàn)象。在細菌和放線菌中都存在著接合現(xiàn)象。轉(zhuǎn)導(dǎo)

通過噬菌體的媒介，把供體細胞中的DNA片段攜帶到受體細胞中，從而使后者獲得了前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象，稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)(Transduction)。45一、原核生物的基因重組

（一）轉(zhuǎn)化概念：受體菌直接吸收了來自供體菌的DNA片段，通過交換，把它組合到自己的基因組中，從而獲得供體菌部分遺傳性狀的現(xiàn)象。

轉(zhuǎn)化后的受體菌，稱轉(zhuǎn)化子transformant

來自供體的DNA片段稱為轉(zhuǎn)化因子

。

供體菌受體菌DNA片段461928年，Griffith發(fā)現(xiàn)肺炎鏈球菌（Streptococcuspneumoniae）的轉(zhuǎn)化現(xiàn)象,目前已知有二十多個種的細菌具有自然轉(zhuǎn)化的能力；真菌有釀酒酵母等47轉(zhuǎn)化的過程strrstrr481、能進行轉(zhuǎn)化的細胞必須是感受態(tài)的。即受體菌最易接收外源DNA片段并實現(xiàn)轉(zhuǎn)化的生理狀態(tài)。感受態(tài)：受體細胞最易于接受外源DNA片段并能實現(xiàn)轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài).

2、外源游離DNA分子（轉(zhuǎn)化因子）進行自然轉(zhuǎn)化，需要二方面必要的條件：

轉(zhuǎn)染(transfection)：提純病毒核酸被感受態(tài)細胞攝取并產(chǎn)生有活性的病毒顆粒（二）轉(zhuǎn)導(dǎo)transduction

概念：通過缺陷噬菌體的媒介，把供體細胞的DNA片段攜帶到受體細胞中，從而使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。512.轉(zhuǎn)導(dǎo)的種類

完全普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)

普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)

流產(chǎn)普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)

轉(zhuǎn)導(dǎo)

低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)

局限轉(zhuǎn)導(dǎo)

高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)52（1）普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)（generalizedtransduction）定義：通過完全缺陷噬菌體對供體菌任何DNA小片段的“誤包”而實現(xiàn)其遺傳性狀傳遞至受體菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象，稱為普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)。完全(普遍)轉(zhuǎn)導(dǎo)：completetransduction。1952年發(fā)現(xiàn)，在Salmonellatyphimurium中存在轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象。在它的完全普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)實驗中：以其野生型菌株作為供體菌營養(yǎng)缺陷型菌株作為受體菌P22噬菌體作為轉(zhuǎn)導(dǎo)媒介，對供體菌是烈性噬菌體，對受體菌是溫和噬菌體53完全普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)過程：供體菌正常噬菌體+完全缺陷噬菌體少量裂解物+大量受體菌遺傳穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子裂解54（1）普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)（generalizedtransduction）過程：P22在供體菌內(nèi)增殖時，宿主的核染色體組斷裂，待噬菌體成熟與包裝之際，極少數(shù)（10–6~10–8）噬菌體的衣殼將與噬菌體頭部核心大小相似的一段供體DNA片段誤包入其中，形成了一個完全不含噬菌體自身DNA的缺陷噬菌體。供體菌裂解時，如把少量裂解物與大量受體菌群體相混，使其感染復(fù)數(shù)（）<1，這種完全缺陷噬菌體就會將這一外源DNA片段導(dǎo)入受體細胞內(nèi)。在這種情況下，由于一個受體細胞只感染了一個完全缺陷噬菌體，故受體細胞不會發(fā)生往常的溶原化，也不顯示其免疫性，更不會裂解和產(chǎn)生正常的噬菌體；而由于導(dǎo)入的外源DNA片段可與受體細胞核染色體組上的同源區(qū)段配對，再通過雙交換而整合到受體菌染色體組中，所以使后者成為一個遺傳性狀穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子。55感染復(fù)數(shù)（，multiplicityofinfection）:感染復(fù)數(shù)自外裂解（lysisfromwithout）。56噬菌體裂解第一個宿主時可能有三種情況：1）包入的完全是噬菌體的DNA（正常噬菌體）2）包入的完全是細菌DNA（完全缺陷噬菌體）3）部分帶有噬菌體基因的DNA（部分缺陷噬菌體）轉(zhuǎn)導(dǎo)分別是由后兩種噬菌體參與進行的。噬菌體裂解第一個宿主57一個穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子的形成第一次交換第二次交換交換完成，外源DNA摻入染色體組中58流產(chǎn)普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)（abortivetransduction）概念：受體菌經(jīng)轉(zhuǎn)導(dǎo)獲得的供體DNA片段在受體菌中不發(fā)生復(fù)制、交換和整合，也不迅速消失，而只是進行轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯（性狀表達），這種現(xiàn)象就稱為流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)?，F(xiàn)象：發(fā)生流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)的細胞在其進行細胞分裂后，只能將這段外源DNA分配給一個子細胞，而另一子細胞僅獲得供體基因的產(chǎn)物——酶，在表型上表現(xiàn)出輕微的供體菌特征，每經(jīng)過一次分裂，就受到一次稀釋，所以，能在選擇性培養(yǎng)基平板上形成微小菌落就是流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)的特點。592.局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)定義：通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中，并與后者的基因組整合、重組，獲得表達的轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象。特點：噬菌體對供體菌和受體菌都是溫和噬菌體只能轉(zhuǎn)導(dǎo)供體菌的個別特定基因（一般為噬菌體整合位點兩側(cè)的基因）該特定基因由部分缺陷的噬菌體攜帶缺陷噬菌體是由于其在形成過程中所發(fā)生的低頻率（約10–

5）“誤切”，或由于雙重溶源菌的裂解而形成（約形成50%缺陷噬菌體）分類：低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)與高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)60轉(zhuǎn)導(dǎo)的過程該溶源菌被誘導(dǎo)裂解時，有極少數(shù)（~10–5前噬菌體的兩側(cè)分別為發(fā)酵半乳糖的gal基因或合成生物素的bio基因）連接到噬菌體DNA上（而噬菌體也將相應(yīng)的一段DNA遺留在宿主的染色體組上），通過衣殼的“誤包”，就形成了一種特殊的噬菌體——缺陷噬菌體（defectivephage）。它們沒有將宿主溶源化的能力，而是使宿主成為一個局限轉(zhuǎn)導(dǎo)子，對噬菌體沒有免疫性。溫和噬菌體感染受體菌后，其DNA會開環(huán)，以線狀形式整合到宿主染色體的特定位點上，從而使宿主細胞發(fā)生溶源化，并獲得對相同溫和噬菌體的免疫性。61（三）接合(conjugation)通過細胞與細胞的直接接觸而產(chǎn)生的遺傳信息的轉(zhuǎn)移和重組過程6263F–因子（fertilityfactor）：又稱致育因子或性因子，大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)，含質(zhì)粒為F+（♂）；無質(zhì)粒為F-（♀）；質(zhì)粒DNA整合到染色體上為Hfr。62×106Dalton，100kb，相當(dāng)于核染色體DNA2%的環(huán)狀雙鏈DNA，足以編碼94個中等大小多肽，其中1/3基因（tra區(qū)）與接合作用有關(guān)。存在于腸細菌屬、假單胞菌屬、嗜血桿菌、奈瑟氏球菌、鏈球菌等細菌中，決定性別。64F因子的存在方式65接合中斷試驗與染色體圖：Hfr菌株與F–菌株接合與F+

菌株相似，區(qū)別在于F因子被分隔在核染色體組兩端，F(xiàn)因子的頭先進入受體細胞，然后是核染色體組，只有核染色體組完全進入受體細胞之后，F(xiàn)因子的尾才能進入受體菌細胞，完成DNA的傳遞。Hfr菌株與F–菌株的接合隨時都可能被中斷，所以極少出現(xiàn)轉(zhuǎn)性的結(jié)果，而是形成各種各樣的重組子。接合中斷試驗：由Wollman和Jacob首創(chuàng)（1955），首先認識了原核微生物染色體的環(huán)狀特性。原理：接合試驗的DNA轉(zhuǎn)移過程存在著嚴格的順序性，在接合進行中采用定時人為中斷的方法，可以獲得呈現(xiàn)不同數(shù)量Hfr性狀的F–接合子，據(jù)此，可以選定幾種有特定整合位點的Hfr菌株，使之與F–菌株進行接合，并在不同時間使其中斷，最后，根據(jù)F–中出現(xiàn)Hfr菌株中各種形狀的時間順序（分鐘），可以繪出較為完整的環(huán)狀染色體圖（chromosomemap）。到1983年E.coli染色體上已定位1027個基因。66痢疾桿菌耐藥信息攜帶在質(zhì)粒上。

最初發(fā)現(xiàn)于痢疾志賀氏菌（Shigelladysenteriae），后來發(fā)現(xiàn)還存在于Salmonella、Bacillus、Pseudomonas和Proteus中。R因子由相連的兩個DNA片段組成，即抗性轉(zhuǎn)移因子（resistencetransforfactor，RTF）和抗性決定R因子（r-determinant），RTF為分子量約為11×106Dalton，控制質(zhì)粒copy數(shù)及復(fù)制，抗性決定質(zhì)粒大小不固定，從幾百萬到100×106Dalton以上。其上帶有其它抗生素的抗性基因。R-因子在細胞內(nèi)的copy數(shù)可從1~2個到幾十個，分為嚴緊型和松弛型兩種，經(jīng)氯霉素處理后，松弛型質(zhì)?？蛇_2000~3000個/細胞。1.R因子（resistencefactor）67降解性質(zhì)粒只在假單胞菌屬中發(fā)現(xiàn)。它們的降解性質(zhì)?？蔀橐幌盗心芙到鈴?fù)雜物質(zhì)的酶編碼，從而能利用一般細菌所難以分解的物質(zhì)做碳源。這些質(zhì)粒以其所分解的底物命名，例如有分解CAM（樟腦）質(zhì)粒，XYL（二甲苯）質(zhì)粒，SAL（水楊酸）質(zhì)粒，MDL（扁桃酸）質(zhì)粒，，NAP（萘）質(zhì)粒和TOL（甲苯）質(zhì)粒等。2.降解性質(zhì)粒68（四）原生質(zhì)體融合通過人為方法，使遺傳性狀不同的兩細胞的原生質(zhì)體發(fā)生融合，并產(chǎn)生重組子的過程，又稱細胞融合。第四節(jié)基因工程在環(huán)境工程中的應(yīng)用一、誘變育種就是利用物理、化學(xué)等因素，誘發(fā)基因突變，并從中篩選出具有某一優(yōu)良性狀的突變體。誘變育種一般包括以下主要步驟(1)出發(fā)菌株的選擇(2)誘變劑的選擇(3)誘變劑量的選擇(4)突變體的篩選二、質(zhì)粒育種三、轉(zhuǎn)基因工程菌的構(gòu)建

基因工程(Geneticengineering)是指用人為的方法將所需要的某一供體生物的遺傳物質(zhì)——DNA大分子提取出來，在離體條件下用適當(dāng)?shù)墓ぞ呙高M行切割后，把它與作為載體(Vector)的DNA分子連接起來，然后與載體一起導(dǎo)入某一更易生長、繁殖的受體細胞中，以讓外源物質(zhì)在其中“安家落戶”，進行正常的復(fù)制和表達，從而獲得新物種的一種嶄新技術(shù)?；蚬こ痰幕静僮靼ㄒ韵虏糠郑?/p>

(1)目的基因的獲?、購倪m當(dāng)?shù)墓w細胞的DNA中分離；②通過反轉(zhuǎn)錄酶的作用由mRNA合成cRNA(ComplementaryDNA);③由化學(xué)方法合成特定結(jié)構(gòu)的基因。(2)載體的選擇①載體是一個有自我復(fù)制能力的復(fù)制子(replicon);②載體能在受體細胞內(nèi)大量增殖，即有較高的復(fù)制率；③載體上最好只有一個限制性內(nèi)切酶的切口，使目的