構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)DNA連接酶檢測(cè)與鑒定基因工程考試說(shuō)明學(xué)生要求1.基因工程的誕生(Ⅰ)

1．知道理論和技術(shù)在基因工程發(fā)展中的作用2.基因工程的原理及技術(shù)(Ⅱ)

2．掌握基因工程的基本工具和操作程序3.基因工程的應(yīng)用(Ⅰ)3.掌握基因工程在生產(chǎn)生活中的應(yīng)用4.蛋白質(zhì)工程(Ⅰ)

4.了解蛋白質(zhì)工程的一般步驟1、以植物作為生物反應(yīng)器可以大大降低生產(chǎn)成本,簡(jiǎn)化儲(chǔ)存方式,現(xiàn)已成為各國(guó)科學(xué)家研究的一個(gè)熱點(diǎn)。下圖是以轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應(yīng)器來(lái)生產(chǎn)人的胰島素的過(guò)程,已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是―G↓GATCC―,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是―↓GATC―,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)圖中a、b所示獲得目的基因的方法是

。

(2)據(jù)圖分析,在構(gòu)建c的過(guò)程中,需用

切割目的基因。

(3)為檢驗(yàn)重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入番茄細(xì)胞,可利用的標(biāo)記基因是

,也可利用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作探針,其原理是

。

(4)欲大量培育上述轉(zhuǎn)基因番茄植株,可采用

技術(shù)進(jìn)行快速繁殖;另外,還可由利用該技術(shù)誘導(dǎo)形成的

制成的人工種子進(jìn)行快速繁殖。

逆(反)轉(zhuǎn)錄法

限制酶Ⅰ

基因ⅠDNA分子雜交

植物組織培養(yǎng)

胚狀體

2、普通番茄細(xì)胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制細(xì)胞產(chǎn)生多聚半乳糖醛酸酶,該酶能破壞細(xì)胞壁,使番茄軟化,不耐貯藏?？茖W(xué)家們通過(guò)基因工程技術(shù),培育出了抗軟化、保鮮時(shí)間長(zhǎng)的番茄新品種,操作流程如圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)在番茄新品種的培育過(guò)程中,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞采用最多的方法是

,篩選出含重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌時(shí)通常依據(jù)質(zhì)粒上的

的表達(dá)。

(2)要快速培育轉(zhuǎn)基因抗軟化番茄植株,目前常用的科技方法是

。為獲得這種番茄的脫毒苗,應(yīng)用其

進(jìn)行培養(yǎng)。

(3)除了圖示培育方法外,還可通過(guò)蛋白質(zhì)工程技術(shù),對(duì)

的結(jié)構(gòu)進(jìn)行特定改變,其中關(guān)鍵的操作是對(duì)

進(jìn)行定向改造。

(4)為防止轉(zhuǎn)基因番茄通過(guò)花粉將抗多聚半乳糖醛酸酶基因傳播給其他植物而造成基因污染,可將抗多聚半乳糖醛酸酶基因?qū)敕阎参锛?xì)胞的

(結(jié)構(gòu))中。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

標(biāo)記基因

植物組織培養(yǎng)

莖尖

多聚半乳糖醛酸酶

多聚半乳糖醛酸酶基因

線粒體或葉綠體

單克隆抗體細(xì)胞工程考試說(shuō)明學(xué)生要求1.植物的組織培養(yǎng)(Ⅱ)1.掌握植物組織培養(yǎng)的流程與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)2.植物細(xì)胞工程取得了哪些成果3.植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用

2.動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆(Ⅰ)

4.了解動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理及條件5.了解動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物3.細(xì)胞融合與單克隆抗體(Ⅱ)6.掌握動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備技術(shù)3、(2013·天津理綜)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)過(guò)程①所需的酶是

。

(2)過(guò)程②后,在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的

存在,這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。

(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是

。

原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)

再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。

(4)若分析再生植株的染色體變異類型,應(yīng)剪取再生植株和

植株的根尖過(guò)

、

、染色和制片等過(guò)程制成裝片,然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。

纖維素酶和果膠酶

葉綠體

保持原生質(zhì)體完整性

細(xì)胞壁

雙親(或花椰菜和黑芥)

解離

漂洗

4、克隆羊的成功轟動(dòng)世界,它不僅奠定了克隆性治療疾病的基礎(chǔ),又解決了器官移植中供體不足的問(wèn)題,同時(shí)也給人類帶來(lái)了一些過(guò)去尚未遇到的問(wèn)題。下圖為人類對(duì)克隆羊技術(shù)的拓展和應(yīng)用。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)圖中所涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有

和

等。

(2)圖中兩個(gè)克隆動(dòng)物長(zhǎng)大后,各方面特征與原型動(dòng)物相同,這說(shuō)明

具有全能性,早期胚胎發(fā)育在

階段及其以前的細(xì)胞是全能細(xì)胞。

(3)使用培養(yǎng)基進(jìn)行胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常要加入

等天然成分,除了保證被培養(yǎng)細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒及充足氧氣的環(huán)境中,還需要保證細(xì)胞生活所需的

。

(4)圖中從內(nèi)細(xì)胞團(tuán)→胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中,一般用

處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán),使之分散成單個(gè)細(xì)胞。

核移植胚胎移植動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

動(dòng)物體細(xì)胞核桑椹胚

血清

溫度和pH

胰蛋白酶原腸胚胚胎工程考試說(shuō)明學(xué)生要求1.動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程與胚胎工程的理論基礎(chǔ)(Ⅰ)

1.精子和卵細(xì)胞各是怎樣形成的2.哺乳動(dòng)物受精卵發(fā)育及各階段的特點(diǎn)3.胚胎的早期培養(yǎng)及體外受精胚胎工廠化生產(chǎn)流程

4.在胚胎移植操作中，怎樣才能使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致5.胚胎移植的基本程序

2.胚胎干細(xì)胞的移植(Ⅰ)

3.胚胎工程的應(yīng)用(Ⅱ)C

6、（多選）下列有關(guān)胚胎移植的敘述正確的是()A.沖卵指的是從子宮中沖出胚胎,而非沖出卵細(xì)胞B.只有供、受體生理環(huán)境高度一致,移入受體的胚胎才能被接受C.供體和受體要進(jìn)行免疫檢查,防止發(fā)生免疫排斥反應(yīng)D.不同動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不同,人的胚胎移植最好在原腸胚時(shí)期進(jìn)行AB7、(2013·山東)科學(xué)家通過(guò)誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得誘導(dǎo)性干細(xì)胞(iPS)，繼而利用iPS細(xì)胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠。流程如下：

(1)從黑鼠體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為_(kāi)_______，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱為_(kāi)_______。(2)圖中2－細(xì)胞胚胎可用人工方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得，該過(guò)程為_(kāi)___；也可從灰鼠體內(nèi)取出卵子，通過(guò)________后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)獲得。(3)圖中重組囊胚通過(guò)________技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用________方法保存。(4)小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)可由囊胚的_____

___分離培養(yǎng)獲得。iPS與ES細(xì)胞同樣具有發(fā)育全能性，有望對(duì)人類iPS細(xì)胞進(jìn)行定向________后用于疾病的細(xì)胞治療。原代培養(yǎng)

接觸抑制沖卵

體外受精

胚胎移植

冷凍(低溫)

內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞

誘導(dǎo)分化

8、[2012福建]肺細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng)，會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let-7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá)，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。請(qǐng)回答：(1)進(jìn)行過(guò)程①時(shí)，需用

酶切開(kāi)載體以插入let-7基因。載體應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動(dòng)let-7基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為

。(2)進(jìn)行過(guò)程②時(shí),需用

酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞，以利于傳代培養(yǎng)。(3)研究發(fā)現(xiàn)，let-7基因能影響癌基因RAS的表達(dá)，其影響機(jī)理如圖2。據(jù)圖分析，可從細(xì)胞中提取

進(jìn)行分子雜交，以直接檢測(cè)let-7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制，可能是由于細(xì)胞中

(RASmRNA／RAS蛋白質(zhì))含最減少引起的。限制啟動(dòng)子胰蛋白R(shí)NARAS蛋白質(zhì)感悟高考9、[2013福建]克隆豬成功率較低，與早期胚胎細(xì)胞異常凋亡有關(guān)。Bcl-2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因，用PCR技術(shù)可以檢測(cè)該基因轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞淍亡的關(guān)系?？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程如圖。請(qǐng)回答：(1)圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來(lái)自____細(xì)胞，早期胚胎移入受體子宮繼續(xù)發(fā)育，經(jīng)桑椹胚、囊胚和____胚最終發(fā)育為克隆豬。(2)在PCR過(guò)程中可檢測(cè)出cDNA中Bcl-2cDNA的分子數(shù)，進(jìn)而計(jì)算總mRNA中Bcl-2mRNA的分子數(shù)，從而反映出Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平。①圖中X表示____過(guò)程。②從基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢Bcl-2mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成____用于PCR擴(kuò)增，PCR過(guò)程第一輪循環(huán)的模板是____感悟高考體原腸逆轉(zhuǎn)錄引物Bcl-2cDNA生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題考試說(shuō)明學(xué)生要求1.轉(zhuǎn)基因生物的安全性(Ⅰ)