臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)一、術(shù)語和定義（1）.氣溶膠：懸浮于氣體介質(zhì)中的粒徑一般為0.001~1000um的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對(duì)穩(wěn)定的分散體系。（2）.生物安全柜：具備氣流控制及高效空氣過濾裝置的操作柜，可有效降低實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的有害氣溶膠對(duì)操作者和環(huán)境的危害。第二頁，共25頁。二.實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平分級(jí)

將實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)，一級(jí)防護(hù)水平最低，四級(jí)防護(hù)水平最高：A.生物安全防護(hù)水平為一級(jí)的實(shí)驗(yàn)室適用于操作在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物B.生物安全防護(hù)水平為二級(jí)的實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物C.生物安全防護(hù)水平為三級(jí)的實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物D.生物安全防護(hù)水平為四級(jí)的實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物第三頁，共25頁。三、臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全管理A.生物安全柜應(yīng)安放在實(shí)驗(yàn)室中的什么地方比較合適：1.遠(yuǎn)離人員活動(dòng)，物品流動(dòng)以及可能會(huì)擾亂氣流的地方，避免放在離門口很近的地方。2.進(jìn)入生物安全柜的低速率的定向氣流，極易受到干擾，包括人員走進(jìn)生物安全柜所形成的氣流、打開窗戶、送風(fēng)系統(tǒng)調(diào)整以及開關(guān)門等都可能造成影響。第四頁，共25頁。B.生物安全柜性能檢測

1.個(gè)體防護(hù)能力

2.樣品保護(hù)能力3.交叉污染防護(hù)能力第五頁，共25頁。

C.個(gè)體防護(hù)裝備

包括：眼鏡、口罩、帽子、防護(hù)衣、手套、鞋套、聽力保護(hù)器。第六頁，共25頁。D.微生物危害評(píng)估：

1.當(dāng)建設(shè)使用傳染性或有潛在傳染性材料的實(shí)驗(yàn)室前，必須進(jìn)行微生物危害評(píng)估。2.確定對(duì)象微生物應(yīng)在那一級(jí)的生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行操作。3.制定相應(yīng)的操作規(guī)程，實(shí)驗(yàn)室管理制度和緊急事故處理方法，必須形成書面文件并嚴(yán)格遵守執(zhí)行。第七頁，共25頁。四、各類緊急情況處理A.手部清洗消毒

1.推薦使用肘動(dòng)式或者自動(dòng)式洗手開關(guān)2.流動(dòng)水沖洗手部多次，然后用液體皂滴在手上，反復(fù)撮手，在用水徹底沖洗3.清洗完畢再用干凈的紙巾或手巾擦干4.可用75%的酒精擦手來清除雙手的輕度污染5.在沒有洗手池的地方，可以使用含酒精的“免洗”手部清潔產(chǎn)品代替第八頁，共25頁。B.刺傷、切割傷或擦傷應(yīng)急處理：1.保持鎮(zhèn)靜，立即停止實(shí)驗(yàn)，脫掉手套。2.用清水或肥皂水清洗傷口。3.盡量擠出傷口處的血液，取出急救箱，用碘酒或75%的酒精擦洗傷口適當(dāng)?shù)陌?.及時(shí)就醫(yī)，告知醫(yī)生受傷原因及可能的微生物污染，必要時(shí)要進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。5.向?qū)嶒?yàn)室安全員報(bào)告，進(jìn)行事故記錄。第九頁，共25頁。C.生物安全柜內(nèi)益處處理1.處理益撒物時(shí)不要將頭伸入安全柜內(nèi)，也不要將臉直接面對(duì)前操作口，而應(yīng)處于前視面板的后方。2.選擇消毒劑時(shí)需要考慮消毒劑對(duì)生物安全柜的腐蝕性。3.如果溢灑的量不足1ml時(shí)，可直接用消毒劑浸濕的紙巾擦拭。4.如溢灑量大或容器破碎，按操作規(guī)程消毒。5.如果溢灑物流入生物安全柜內(nèi)部，則視情況，如需要可隊(duì)生物安全柜進(jìn)行熏蒸。第十頁，共25頁。D.衣物污染：1.盡快脫掉最外層防護(hù)衣，并注意防止感染物質(zhì)進(jìn)一步擴(kuò)散。2.將已污染的防護(hù)服放入黃色垃圾袋內(nèi)，待高壓滅菌3.脫掉手套，到污染區(qū)出口洗手4.更換防護(hù)服和手套5.必要時(shí)對(duì)發(fā)生污染及托防護(hù)服的地方進(jìn)行消毒處理6.如果內(nèi)衣被污染，應(yīng)立即脫掉易污染的衣物，消毒處理第十一頁，共25頁。E.皮膚粘膜被污染

1.感染性液體外溢到皮膚（1）立即停止工作，脫掉手套（2）用75%的酒精進(jìn)行皮膚消毒（2）再用大量水沖洗

2.感染性液體濺入眼睛（1）立即停止工，脫掉手套(2)迅速到緩沖區(qū)用洗眼器沖洗（3）用生理鹽水沖洗

3.兩種情況都應(yīng)做適當(dāng)?shù)念A(yù)防治療和醫(yī)學(xué)觀察，并報(bào)告實(shí)驗(yàn)室安全員進(jìn)行事故記錄第十二頁，共25頁。五、離心機(jī)內(nèi)有感染性物質(zhì)破裂的處理A.非封閉離心機(jī)內(nèi)帶有感染性物質(zhì)離心管發(fā)生破裂：

1.離心機(jī)正在運(yùn)行時(shí)發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉電源，密閉30分鐘使氣溶膠沉淀，離心機(jī)停止后發(fā)生破裂，應(yīng)立即蓋上蓋子密閉30分鐘。2.帶結(jié)實(shí)的手套或口罩（避免吸入氣溶膠）3.使用鑷子清理玻璃碎片，或用鑷子夾著的棉花來清理。4.破碎的離心管及離心筒、轉(zhuǎn)軸或轉(zhuǎn)子都應(yīng)放在屋腐蝕性的、對(duì)相關(guān)微生物具有殺滅作用的消毒劑內(nèi)浸泡60分鐘以上。第十三頁，共25頁。

B.在可封閉的離心筒內(nèi)離心管發(fā)生破裂：

1.如果懷疑封閉的離心筒內(nèi)有管子破裂，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)打開離心筒蓋子查看。2.確有破裂時(shí)，松開離心筒蓋子，但不要打開，放入黃色垃圾袋，直接高壓滅菌。3.或者采用化學(xué)消毒法：將離心筒及內(nèi)容物放到對(duì)該種微生物有效的無腐蝕性消毒劑里浸泡60分鐘以上4.離心杯在使用消毒劑浸泡后5.應(yīng)再用清水洗凈后干燥6.向?qū)嶒?yàn)室安全員報(bào)告7.進(jìn)行事故記錄第十四頁，共25頁。C.運(yùn)輸途中發(fā)生泄漏的應(yīng)急操作：1.現(xiàn)將污染區(qū)域隔離，物管人員撤離2.穿好防護(hù)裝備3.可以用土、沙或其他不燃性物質(zhì)吸收漏出物質(zhì)，同事避免直接接觸4.用吸收材料覆蓋遺灑物質(zhì)，從外圍向中性傾倒適當(dāng)量的消毒劑，使消毒劑與溢灑物混合并作用30-60分鐘5.將污染材料置于防漏、防穿透的廢棄物溶劑中密封6.對(duì)溢出區(qū)域再次清潔并消毒，并消毒手套和防護(hù)衣7.所有處理材料和防護(hù)服都放入廢棄物溶器中密封8.向主管部門報(bào)告溢出情況和消除污染情況。出現(xiàn)嚴(yán)重泄漏時(shí)要向當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防疾控中心報(bào)告。第十五頁，共25頁。六、微生物實(shí)驗(yàn)室的消毒要求

1.實(shí)驗(yàn)室如果發(fā)現(xiàn)微生物污染了實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)立即停下實(shí)驗(yàn)，用實(shí)驗(yàn)前備好的消毒劑進(jìn)行消毒處理。2.如實(shí)驗(yàn)室被空氣和氣溶膠傳播的微生物污染，應(yīng)立即關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行消毒處理。3.盛裝污染微生物實(shí)驗(yàn)耗材的容器應(yīng)有足量的消毒劑，用過的耗材立即侵泡在消毒劑中。4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)立即對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行消毒處理，擦洗、消毒工作臺(tái)面、地面，開啟紫外線燈等照射1小時(shí)以上。生物安全3級(jí)和4級(jí)實(shí)驗(yàn)室、層流實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后繼續(xù)開啟空氣循環(huán)系統(tǒng)30分鐘以上。第十六頁，共25頁。5.實(shí)驗(yàn)廢棄物應(yīng)立即進(jìn)行滅菌或消毒燈無害化處理。6.實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)立即清洗消毒雙手，必要時(shí)應(yīng)洗澡，更衣。7.對(duì)需消毒的物品應(yīng)采取徹底的消毒措施，不留死角。8.用消毒劑浸泡消毒時(shí)要保證消毒物品全部浸沒在消毒劑中。9.用消毒劑擦拭消毒時(shí)要保證所有需要消毒的表面都被均勻的擦拭到10.所有消毒方法均應(yīng)保證消毒時(shí)間第十七頁，共25頁。11.要根據(jù)消毒對(duì)象和微生物的種類選擇合適的消毒和滅菌方法：（1）對(duì)受到細(xì)菌芽孢、真菌孢子和枝桿菌污染的物品，選用高水平消毒法或滅菌法。（2）對(duì)受到真菌、親水病毒、螺旋體、支原體、衣原體和病毒微生物污染的物品，選用中水平以上的消毒方法（3）對(duì)受到一般細(xì)菌和親脂病毒等污染的物品，可選用低水平或中水平消毒法（4）對(duì)從在較多較多有機(jī)物的物品消毒時(shí)，應(yīng)加大消毒劑的使用劑量或延長消毒作用時(shí)間。（5）消毒物品上微生物污染特比嚴(yán)重時(shí)，應(yīng)加大消毒藥劑的使用劑量和延長消毒作用時(shí)間。（6）選擇表面消毒方法，應(yīng)考慮表面性質(zhì)，光滑表面可選擇紫外線消毒器近距照射，或體液消毒劑擦拭；多孔材料表面可采用噴霧消毒法第十八頁，共25頁。八、常用消毒方法A.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空氣的消毒：1.一般可加強(qiáng)開窗通風(fēng)，自讓通風(fēng)換氣，條件許可時(shí)采用排氣扇人工機(jī)械通風(fēng)，做到每小時(shí)換氣10-15次。2.紫外線燈管適用于室內(nèi)空氣，無疑表面的消毒。常用的室內(nèi)懸吊式紫外線燈對(duì)室內(nèi)空氣消毒時(shí)安裝的數(shù)量為平均1.5W每立方米，照射時(shí)間不少于30分鐘。3.使用循環(huán)風(fēng)紫外線空氣消毒器連續(xù)開機(jī)器達(dá)到使用說明書規(guī)定的時(shí)間即可起到空氣消毒作用。第十九頁，共25頁。B.實(shí)驗(yàn)室地面物體表面消毒：

實(shí)驗(yàn)室、辦公室等場所地面要濕式拖掃，禁止干拖干掃?？捎?.1%過氧乙酸拖地或0.2%-0.5%過氧乙酸噴灑或拖地消毒劑的用量不少于100ml每立方米，拖把應(yīng)專用，污染區(qū)和清潔區(qū)不得混用。第二十頁，共25頁。C.物體表面的消毒：

1.實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、桌子、椅子、凳子、床頭柜、門把手、實(shí)驗(yàn)記錄夾等可用0.2%~0.5%的過氧乙酸噴灑或有效氯為1.0g/L~2.0mg/L的含氯消毒劑噴灑、擦拭，消毒作用10~15min。2.若實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面等明顯被傳染性標(biāo)本污染，應(yīng)立即用0.2%~0.5%的過氧乙酸噴灑或有效氯為1.0g/L~2.0g/L的汗氯消毒劑噴灑于污染表面，保持30~60min。第二十一頁，共25頁。D.一般實(shí)驗(yàn)器材的消毒：1.凡直接或間接接觸臨床標(biāo)本或?qū)嶒?yàn)微生物的器材均應(yīng)視為有傳染性，均應(yīng)作消毒處理。金屬器材、玻璃器皿可用壓力蒸汽和干燥滅菌的方法使用于耐高溫、高濕的醫(yī)用器械和物品的滅菌。2.玻璃器材使用過的玻璃吸管、試管、離心管、玻片、玻璃棒、三角瓶和平皿等應(yīng)立即浸入有效氯為2.0g/L的含氯消毒劑中1小時(shí)以上，消毒后用超聲波清洗的方法洗凈瀝干，使用前再進(jìn)行高壓滅菌處理。第二十二頁，共25頁。E.污染冰箱和冰柜的消毒處理：1.將可能污染的冰箱冰柜外表面用0.2%的過氧乙酸擦拭，作用30min。2.將冰箱冰柜放置在特制的PVC板制成的大托盤上，托盤面積大于冰箱冰柜底面積，邊沿高度為10cm，托盤內(nèi)放入適量的含氯消毒粉劑，是消毒粉和化凍水混合后有效氯的含量大于1.0g/L。