微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)-張小葵、趙麗華_第1頁(yè)
微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)-張小葵、趙麗華_第2頁(yè)
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實(shí)驗(yàn)一、培養(yǎng)基的制備實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿鞔_培養(yǎng)基的配制原理通過(guò)對(duì)基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配制,掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟掌握玻璃器皿的包扎方法實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工配制的供給細(xì)菌或其他微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基必須具備下列條件:①含有碳源;②氮源;③磷源;④無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子;⑤水分和合適的pH。培養(yǎng)基須經(jīng)滅菌后方可使用。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)步驟配培養(yǎng)基(250ml/組)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(P50、P214)高氏Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基(P54、P214)查氏培養(yǎng)基(P214)包扎移液管(1支/人)、培養(yǎng)皿(4皿/人),做棉花塞。分裝入試管(2個(gè)/人)和500ml三角燒瓶?jī)?nèi)(1個(gè)/組),注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。固體分裝的裝量不超過(guò)管高的1/5,滅菌后取出斜躺凝固成斜面。在試管(捆扎好)、三角燒瓶的棉塞外包兩層報(bào)紙,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤(rùn)濕棉塞。注明培養(yǎng)基名稱、組別、日期等。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)二、消毒(disinfection)與滅菌(sterilization)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私鉂駸釡缇?、干熱滅菌和紫外滅菌的原理和?yīng)用范圍學(xué)習(xí)各種滅菌方法的操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)原理(略)實(shí)驗(yàn)步驟將包扎好的移液管、培養(yǎng)皿放入干熱滅菌箱內(nèi),160℃,2h。將包扎好的試管、錐形瓶放入高壓蒸汽滅菌鍋,121℃,20min。滅菌結(jié)束,擺斜面(﹤1/2),備用。超凈工作臺(tái)紫外滅菌30min。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)三、普通光學(xué)顯微鏡的使用及細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馄胀ü鈱W(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)、基本原理掌握油鏡的正確使用方法掌握簡(jiǎn)單染色法的原理及操作步驟微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)三、普通光學(xué)顯微鏡的使用及細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色二.實(shí)驗(yàn)原理油鏡的使用分辨率D=λ/2NANA=nsinαα微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單染色這是最基本的染色方法,由于細(xì)菌在中性環(huán)境中一般帶負(fù)電荷,所以通過(guò)采用一種堿性染料如美蘭、堿性復(fù)紅、結(jié)晶紫、孔雀綠、番紅等進(jìn)行染色。這類染料解離后,染料離子帶正電荷,故使細(xì)菌著色。實(shí)驗(yàn)材料菌種:枯草芽孢桿菌(B.subtillus)染液:草酸銨結(jié)晶紫染液、堿性復(fù)紅等其他物品:無(wú)菌水、顯微鏡、載片、濾紙、香柏油、乙醇乙醚混合液、擦鏡紙、接種環(huán)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)步驟涂片→干燥→固定(在微火上通過(guò)3—4次)→染色(染色1min)→沖洗→吸干→鏡檢實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論思考題微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)四、環(huán)境中微生物的分離與純化實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)、掌握微生物稀釋分離、劃線分離等技術(shù)學(xué)習(xí)從樣品中分離、純化出所需菌株學(xué)習(xí)掌握斜面接種技術(shù)實(shí)驗(yàn)原理(略)實(shí)驗(yàn)材料菌源:土樣10g培養(yǎng)基無(wú)菌水:配置生理鹽水,分裝于錐形瓶中,每瓶裝90ml,及玻璃珠,滅菌,待用。其他物品:無(wú)菌培養(yǎng)皿、無(wú)菌移液管、無(wú)菌玻璃涂棒、稱量紙、藥勺微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)步驟采土樣:選擇肥沃土壤,去表層土,挖5~25cm深度的土壤數(shù)10g,裝入已滅菌的牛皮紙袋,封好袋口,帶回實(shí)驗(yàn)室。倒平板(8個(gè)/組)制備土壤稀釋液:稱取土樣10g,放入盛90ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角瓶中,搖30min。取樣:用無(wú)菌棉簽沾取菌懸液,涂布于培養(yǎng)皿中某一處。(4個(gè)/皿)用接種環(huán)從接種處劃線分離。貼標(biāo)簽,37℃倒置培養(yǎng),24h。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論思考題微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)五、細(xì)菌的革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆崭锾m氏染色法的原理及操作步驟,觀察細(xì)菌形態(tài)掌握無(wú)菌操作和油鏡的使用方法。實(shí)驗(yàn)原理

G﹢菌:細(xì)胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性障,當(dāng)乙醇脫色時(shí),肽聚糖脫水而孔障縮小,故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞壁內(nèi)。呈紫色。

Gˉ菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,其脂含量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫-碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁,沙黃復(fù)染后呈紅色。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)材料

1.菌種:大腸桿菌、枯草芽孢桿菌斜面(37℃下培養(yǎng)10小時(shí)左右)

2.染液:結(jié)晶紫染液、95%乙醇、碘液、番紅染液、蒸餾水。

3.用具:載玻片、接種環(huán)、酒精燈、火柴、香柏油、乙醇乙醚混合液、擦鏡紙、顯微鏡等。實(shí)驗(yàn)步驟涂片:將大腸桿菌(Escherichia.coli)、枯草芽孢桿菌(Bacillus.sub)斜面分別涂片、干燥、固定。初染:加草酸銨結(jié)晶紫一滴,約一分鐘,水洗媒染:滴加碘液沖去殘水,并覆蓋一分鐘,水洗脫色:將水甩凈,并襯以白背景,用95%乙醇滴洗至剛剛無(wú)紫色為止,約20—30秒,立即用水沖凈乙醇復(fù)染:用番紅液染1--2分鐘,水洗鏡檢結(jié)果與討論思考題微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)六、細(xì)菌的芽孢染色實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)細(xì)菌的芽胞染色法實(shí)驗(yàn)原理細(xì)菌的芽胞具有厚而致密的壁,透性低,不易著色,若用一般染色法只能使菌體著色而芽胞不著色(芽胞呈無(wú)色透明狀)。芽胞染色法就是根據(jù)芽胞既難以染色而一旦染上色后又難以脫色這一特點(diǎn)而設(shè)計(jì)的。所有的芽胞染色法都基于同一個(gè)原則:除了用著色力強(qiáng)的染料外,還需要加熱,以促進(jìn)芽胞著色。當(dāng)染芽胞時(shí),菌體也會(huì)著色,然后水洗,芽胞染上的顏色難以滲出,而菌體會(huì)脫色。然后用對(duì)比度強(qiáng)的染料對(duì)菌體復(fù)染,使菌體和芽胞呈現(xiàn)出不同的顏色,因而能更明顯地襯托出芽胞,便于觀察。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)器材菌:枯草桿菌(Bacillussubtilis)、巨大芽包桿菌染色液和試劑:5%孔雀綠水溶液、0.5%蕃紅水溶液器材:小試管(75mm×10mm)、燒杯(300mL)、滴管、木夾、接種環(huán)、擦鏡紙、鑷子、顯微鏡等。實(shí)驗(yàn)步驟孔雀綠染色法制片:涂片、干燥、固定滴孔雀綠染液于涂片中,加熱至產(chǎn)生蒸汽達(dá)3~5min(加熱時(shí)用木夾夾著載玻片,在火焰上方2~3cm處,或火焰附近,添加染液勿使圖片干燥)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)水洗:待玻片冷卻后,用水輕輕地沖洗,直至流出的水中無(wú)染色液為止。復(fù)染:用蕃紅液染色1~2min。水洗、晾干或吸干。鏡檢:先低倍,再高倍,最后在油鏡下觀察芽胞和菌體的形態(tài)。石炭酸復(fù)紅染色法試管一支,加蒸餾水3~4滴,取1-2環(huán)芽孢桿菌于水中,并充分搖蕩制成菌懸液。滴加等量3~4滴石炭酸復(fù)紅溶液搖勻,水浴煮沸10min以上。取上述加熱后的染色菌懸液2~3環(huán)于載玻片上制成涂片,然后經(jīng)過(guò)干燥,火焰固定,水洗。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)美蘭復(fù)染1~2min,經(jīng)水洗,干燥后,鏡檢,繪圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論繪出所用材料菌體的形態(tài)和芽胞的著生位置圖。

思考題微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊笥^察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式,學(xué)習(xí)區(qū)分酵母菌死活細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法;掌握酵母菌的一般形態(tài)特征及其與細(xì)菌的區(qū)別。基本原理美藍(lán)是一種無(wú)毒性的染料,它的氧化型呈藍(lán)色,還原型無(wú)色。用美藍(lán)對(duì)酵母的活細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí),由于細(xì)胞的新陳代謝作用,細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力,能使美藍(lán)由藍(lán)色的氧化型變?yōu)闊o(wú)色的還原型。因此,具有還原能力的酵母細(xì)胞是無(wú)色的,而死細(xì)胞或代謝作用微弱的衰老細(xì)胞則呈藍(lán)色或淡藍(lán)色。器材菌種:釀酒酵母(Saccharomyces

cerevisiae)培養(yǎng)約2d的馬鈴薯斜面培養(yǎng)物。染色劑:0.05%和0.1%呂式堿性美藍(lán)染色液,革蘭氏染色用碘液。儀器或其他用具:顯微鏡,載玻片,蓋玻片等。實(shí)驗(yàn)七、酵母菌形態(tài)的觀察及死活菌的鑒定微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作步驟美藍(lán)浸片的觀察按無(wú)菌操作取少量酵母菌與0.1%呂式堿性美藍(lán)染色液混合均勻,放置約3min后,先用低倍鏡后用高倍鏡觀察酵母的形態(tài)和出芽情況,并用顏色區(qū)別死活細(xì)胞。染色0.5h后再次觀察,注意死細(xì)胞是否增加。用0.05%美蘭染液重復(fù)上述操作觀察酵母形態(tài)及出芽方式實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論記錄美蘭浸片的觀察結(jié)果;酵母形態(tài)及出芽方式;思考題微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)八、微生物細(xì)胞大小的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饽跨R測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺的構(gòu)造和使用原理,掌握微生物細(xì)胞大小的測(cè)定方法。實(shí)驗(yàn)原理

微生物細(xì)胞的大小是微生物重要的形態(tài)特征之一,由于菌體很小,只能在顯微鏡下來(lái)測(cè)量。用于測(cè)量微生物細(xì)胞大小的工具有目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺。

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)n1n2微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)器材活材料:釀酒酵母(Saccharomyces

cerevisiae)斜面菌種、枯草桿菌(Baccillus

subtilis)染色標(biāo)本片。器材:顯微鏡、目鏡測(cè)微尺、鏡臺(tái)測(cè)微尺、蓋玻片、載玻片、滴管、雙層瓶、擦鏡紙。實(shí)驗(yàn)方法鏡測(cè)微尺的校正:在低倍鏡和高倍鏡下分別進(jìn)行校正。細(xì)胞大小的測(cè)定移去鏡臺(tái)測(cè)微尺,換上酵母菌水浸片,先在低倍鏡下找到目的物,然后在高倍鏡下用目鏡測(cè)微尺來(lái)測(cè)量酵母菌菌體的長(zhǎng),寬各占幾格(不足一格的部分估計(jì)到小數(shù)點(diǎn)后一位數(shù))。測(cè)出的格數(shù)乘上目鏡測(cè)微尺每格的校正值,即等于該菌的長(zhǎng)和寬。一般測(cè)量菌體的大小要在同一個(gè)標(biāo)本片上測(cè)定10—20個(gè)菌體,求出平均值,才能代表該菌的大小。而且一般是用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌體進(jìn)行測(cè)定。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下列表格物鏡目尺格數(shù)臺(tái)尺格數(shù)目尺校正值(μm)10×40×表1

目鏡測(cè)微尺校正結(jié)果123456789101112131415平均值長(zhǎng)寬表2

酵母菌大小測(cè)定記錄

(格)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算長(zhǎng)μm=平均格數(shù)×校正值寬μm=平均格數(shù)×校正值大小表示:寬μm×長(zhǎng)μm思考題預(yù)習(xí):實(shí)驗(yàn)28顯微鏡直接計(jì)數(shù)法試驗(yàn)29平板菌落記數(shù)法

P90-94微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)九微生物細(xì)胞的顯微直接計(jì)數(shù)法

目的要求明確顯微鏡計(jì)數(shù)的原理學(xué)習(xí)使用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)的方法基本原理微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)16×2525×160.1mm3→400小格→n1ml→→→→→→→?微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)已知:1mL體積=1000mm3所以:1mL體積應(yīng)含有小方格數(shù)為1000mm3/(1/4000mm3)=4x106個(gè)小方格。即系數(shù)K=4x106。因此:每mL菌懸液中含有細(xì)胞數(shù)=每個(gè)小格中細(xì)胞平均數(shù)(N)x系數(shù)(K)x菌液稀釋倍數(shù)(d)。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)器材活材料:釀酒酵母(Saccharomyces

cerevisiae)培養(yǎng)液。器材:顯微鏡、血球計(jì)數(shù)板、移液管、吸耳球、蓋玻片(22mm×22mm)、吸水紙、計(jì)數(shù)器、滴管、擦鏡紙。實(shí)驗(yàn)方法

視待測(cè)菌懸液濃度,加無(wú)菌水進(jìn)行梯度稀釋至適當(dāng)稀釋,以每小格的菌數(shù)可數(shù)為度。0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml4.5ml微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)取潔凈的血球計(jì)數(shù)板一塊,在計(jì)數(shù)區(qū)上蓋上一塊蓋玻片。將酵母菌懸液搖勻,用滴管吸取少許,從計(jì)數(shù)板中間平臺(tái)兩側(cè)的溝槽內(nèi)沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴(不宜過(guò)多),讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計(jì)數(shù)區(qū),勿使氣泡產(chǎn)生,并用吸水紙吸去溝槽中流出的多余菌懸液。也可以將菌懸液直接滴加在計(jì)數(shù)區(qū)上,不要使計(jì)數(shù)區(qū)兩邊平臺(tái)沾上菌懸液,以免造成計(jì)數(shù)區(qū)深度的升高。然后加蓋蓋玻片(勿使產(chǎn)生氣泡)。靜置片刻,將血球計(jì)數(shù)板置載物臺(tái)上夾穩(wěn),先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)區(qū)后,再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察并計(jì)數(shù)。由于生活細(xì)胞的折光率和水的折光率相近,觀察時(shí)應(yīng)減弱光照的強(qiáng)度。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)計(jì)數(shù)時(shí)若計(jì)數(shù)區(qū)是由16個(gè)中方格組成,按對(duì)角線方位,數(shù)左上、左下、右上、右下的4個(gè)中方格(即100小格)的菌數(shù)。如果是25個(gè)大方格組成的計(jì)數(shù)區(qū),除數(shù)上述四個(gè)大方格外,還需數(shù)中央l個(gè)大方格的菌數(shù)(即80個(gè)小格)。如菌體位于大方格的雙線上,計(jì)數(shù)時(shí)則數(shù)上線不數(shù)下線,數(shù)右線不數(shù)左線,以減少誤差。對(duì)于出芽的酵母菌,芽體達(dá)到母細(xì)胞大小一半時(shí),即可作為兩個(gè)菌體計(jì)算。每個(gè)樣品重復(fù)計(jì)數(shù)3次(每次數(shù)值不應(yīng)相差過(guò)大,否則應(yīng)重新操作),求出每一個(gè)小格中細(xì)胞平均數(shù)(N),按公式計(jì)算出每ml(g)菌懸液所含酵母菌細(xì)胞數(shù)量。測(cè)數(shù)完畢,取下蓋玻片,用水將血球計(jì)數(shù)板沖洗干凈,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免損壞網(wǎng)格刻度。洗凈后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干,放入盒內(nèi)保存。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論取三次樣,進(jìn)行計(jì)數(shù),最后算出每mL菌懸液中含有細(xì)胞數(shù)思考題預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)二十九平板菌落計(jì)數(shù)法實(shí)驗(yàn)三十七生物因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響計(jì)數(shù)一次

每個(gè)中方格菌數(shù)二室平均值稀釋倍數(shù)菌數(shù)/ml12345上室下室

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十平板菌落計(jì)數(shù)法目的要求了解稀釋平板計(jì)數(shù)的原理掌握涂抹平板培養(yǎng)法認(rèn)識(shí)細(xì)菌的菌落特征基本原理平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測(cè)樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋之后,其中的微生物充分分散成單個(gè)細(xì)胞,取一定量的稀釋樣液接種到平板上,經(jīng)過(guò)培養(yǎng),由每個(gè)單細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖而形成肉眼可見(jiàn)的菌落。為了清楚地闡述平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果,現(xiàn)在已傾向使用菌落形成單位(colony-formingunits,cfu)而不以絕對(duì)菌落數(shù)來(lái)表示樣品的活菌含量。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)器材活材料:大腸桿菌菌懸液培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基(附錄三、1)器材:90ml無(wú)菌水、9ml無(wú)菌水、無(wú)菌平皿、lml無(wú)菌吸管、天平、稱樣瓶、記號(hào)筆、玻璃刮鏟等。實(shí)驗(yàn)步驟微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作步驟9ml4.5ml1ml0.5ml0.1ml10-1①倒培養(yǎng)基、貼標(biāo)簽0.5ml0.5ml0.5ml4.5ml4.5ml4.5ml4.5ml4.5ml10-210-310-410-510-6②梯度稀釋③取樣④涂布⑤37℃倒置培養(yǎng)⑥計(jì)數(shù)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):梯度稀釋:菌懸液必須搖勻移液槍的使用:調(diào)刻度、取樣、去除槍頭涂布操作實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論稀釋度10-410-510-6菌落數(shù)12平均數(shù)12平均數(shù)12平均數(shù)1ml樣品活菌數(shù)思考題微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十一生物因素對(duì)微生物的影響目的要求了解某一抗生素的抗菌范圍學(xué)習(xí)抗菌譜試驗(yàn)的基本方法基本原理許多微生物在其生命活動(dòng)過(guò)程中能產(chǎn)生某種特殊的代謝產(chǎn)物,具有選擇性地抑制或殺死其他微生物的作用,例如抗生素。不同抗生素的抗菌譜是不同的。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)器材大腸桿菌、金黃色葡萄球菌,枯草芽孢桿菌;瓊脂培養(yǎng)基,無(wú)菌平皿,接種環(huán)等。操作步驟將瓊脂培養(yǎng)基溶化后,冷至45℃左右倒平板,凝固待用。用接種環(huán)挑取抗生素濾紙條。劃線接種后,倒置于37℃溫室中培養(yǎng)1天。觀察結(jié)果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論繪圖表示并說(shuō)明實(shí)驗(yàn)用抗生素對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的抑菌效能。思考題微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十二

用生長(zhǎng)譜法測(cè)定微生物的營(yíng)養(yǎng)要求目的要求學(xué)習(xí)用生長(zhǎng)譜法測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需要的基本原理和方法。基本原理為了使微生物生長(zhǎng)、繁殖,必須供給所需要的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、生長(zhǎng)因子等,如果缺少其中一種,微生物便不能生長(zhǎng)。根據(jù)這一特性,可將微生物接種在一種只缺少某種營(yíng)養(yǎng)物的完全合適的瓊脂培養(yǎng)基中,倒成平板,再將所缺的營(yíng)養(yǎng)物(例如各種碳源)點(diǎn)植于平板上,經(jīng)適溫培養(yǎng),該營(yíng)養(yǎng)物便逐漸擴(kuò)散于植點(diǎn)周圍。該微生物若需要此種營(yíng)養(yǎng)物,便在這種營(yíng)養(yǎng)物擴(kuò)散處生長(zhǎng)繁殖,微生物繁殖之處便出現(xiàn)圓形落圈,即生長(zhǎng)圖形,故稱此法為生長(zhǎng)譜法。這種方法可以定性、定量的測(cè)定微生物對(duì)各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。在微生物育種和營(yíng)養(yǎng)缺陷型的鑒定中也常用此法。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)器材活材料:大腸桿菌菌懸液培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基器材:無(wú)菌平皿、鑷子、記號(hào)筆、滅菌牙簽等。碳源:葡萄糖、蔗糖、乳糖、木糖、半乳糖、麥芽糖操作步驟將合成培養(yǎng)基約溶化后冷到50℃左右加入大腸桿菌懸液,搖勻,立即傾注于直徑為12㎝的無(wú)菌培養(yǎng)皿中,每組2個(gè)平皿,待充分凝固后,在平板背面用記號(hào)筆劃分為

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