體液電解質(zhì)檢驗第一頁，共三十三頁，2022年，8月28日授課內(nèi)容:第一節(jié)概述電解質(zhì)的生理功能二、電解質(zhì)的測定方法及評價第二節(jié)血清鉀鈉測定第三節(jié)血清氯化物測定硝酸汞測定法二、硫氰酸汞比色法第二頁，共三十三頁，2022年，8月28日教學(xué)目標與要求：

掌握：1.鈣平衡紊亂的分類及原理；2.鉀平衡紊亂的分類及原理；3.鉀鈉氯測定的原理、影響因素及臨床意義熟悉：1.鈉平衡紊亂；2.電解質(zhì)的生理功能；3.電解質(zhì)平衡第三頁，共三十三頁，2022年，8月28日教學(xué)重點、難點與進展：

重點：鉀鈉氯測定的原理、影響因素及臨床意義2.鉀平衡紊亂的分類及原理難點：理解各種電解質(zhì)紊亂的臨床意義第四頁，共三十三頁，2022年，8月28日第五頁，共三十三頁，2022年，8月28日電解質(zhì)質(zhì)的生理功能1、維持體液滲透壓和酸堿平衡2、維持肌肉、心肌的應(yīng)激性3、維持細胞的正常新陳代謝4、其他第六頁，共三十三頁，2022年，8月28日電解質(zhì)的測定方法1、火焰光度法2、化學(xué)試劑顯色法3、滴定法4、電量分析法5、原子吸收分光光度法6、酶動力學(xué)法7、離子選擇電極法第七頁，共三十三頁，2022年，8月28日第八頁，共三十三頁，2022年，8月28日第九頁，共三十三頁，2022年，8月28日第十頁，共三十三頁，2022年，8月28日第十一頁，共三十三頁，2022年，8月28日第十二頁，共三十三頁，2022年，8月28日第十三頁，共三十三頁，2022年，8月28日第十四頁，共三十三頁，2022年，8月28日硫氰酸汞比色法原理：血清氯化物的氯離子與未解離的硫氰酸汞溶液混合時，氯離子首先與汞結(jié)合形成難以解離的氯化汞，并釋放相應(yīng)的硫氰酸離子，此離子與試劑中的鐵離子結(jié)合，生成紅色的硫氰酸鐵，其色澤與氯的含量呈正比。第十五頁，共三十三頁，2022年，8月28日臨床意義降低：1.異常丟失2.排除增多3.攝入不足增高：1.脫水2.排出減少3.其他腦脊液綠化物1.降低2.增加3.正常第十六頁，共三十三頁，2022年，8月28日授課內(nèi)容:第四節(jié)血清鈣測定一、乙二胺四乙酸鈉滴定法二、甲基麝香草酚藍比色法第五節(jié)血清無機磷測定硫酸亞鐵-磷鉬酸比色法第六節(jié)血清鐵及總鐵結(jié)合力測定亞鐵嗪比色法第十七頁，共三十三頁，2022年，8月28日教學(xué)目標與要求：

掌握：1.EDTA滴定法測定血清鈣；2.比色法測定血清鈣；3.血清磷測定的原理及注意事項4.血清鐵及總鐵結(jié)合力的測定熟悉：1.血清磷測定的臨床意義；2.血清鈣測定的臨床意義；3.血清鐵測定的臨床意義第十八頁，共三十三頁，2022年，8月28日教學(xué)重點、難點

重點：1.比色法測定血清鈣；2.血清磷測定的原理及注意事項難點：血清鐵及總鐵結(jié)合力的測定第十九頁，共三十三頁，2022年，8月28日血清中的鈣可分為擴散性鈣和非擴散性鈣兩大類.前者約占60%,其中包括離子鈣約45%以及與檸檬酸、磷酸等結(jié)合的復(fù)合鈣約15%;非擴散性鈣為蛋白結(jié)合鈣,約占血鈣的40%,其中包括清蛋白結(jié)合鈣約32%和球蛋白結(jié)合鈣約8%。離子鈣是鈣的生理活性形式,它直接影響神經(jīng)肌肉的應(yīng)激性和甲狀旁腺釋放甲狀旁腺激素。血清鈣的測定對患者是否存在高鈣血癥或低鈣血癥的診斷以及病因追查具有重要意義。第二十頁，共三十三頁，2022年，8月28日血清鈣測定的方法很多.(1)

滴定法(2)原子吸收法(3)離子選擇電極法(4)比色法第二十一頁，共三十三頁，2022年，8月28日血清鈣測定（滴定法）一、原理：在堿性溶液中，血清鈣離子與鈣紅指示劑結(jié)合為可溶性復(fù)合物（In-Ca2+），溶液變成淡紅色。EDTA-Na2對鈣離子有更強的親合力，能從復(fù)合物（In-Ca2+）中奪取鈣離子形成配位物，使鈣紅指示劑重新游離，溶液變成藍色。根據(jù)EDTA-Na2溶液滴定量計算血清鈣的含量。第二十二頁，共三十三頁，2022年，8月28日二、試劑與器材1、鈣標準液2、鈣紅指示劑3、氫氧化鉀4、EDTA-Na25、器材：試管、試管架、移液管、滴管第二十三頁，共三十三頁，2022年，8月28日三、實踐步驟P182四、計算P182五、參考范圍：2.25～2.75mmol/L六、注意事項P182第二十四頁，共三十三頁，2022年，8月28日血清鈣測定（比色法）鈣離子（Ca2+）在堿性溶液中和鄰甲酚酞絡(luò)合酮（OCPC）形成紫色復(fù)合物，在577nm處有一個最大吸收峰，加入8-羥基喹啉消除鎂和鐵的干擾。在570/600nm讀取吸光度，復(fù)合物顯色強弱與血清鈣濃度成正比。第二十五頁，共三十三頁，2022年，8月28日血清磷的水平亦相當穩(wěn)定。它和鈣一樣，骨骼中的磷不斷地與血漿中的磷進行交換以保持血漿磷水平的穩(wěn)定。

第二十六頁，共三十三頁，2022年，8月28日磷鉬酸比色法原理：在無蛋白血濾液中加入鉬酸銨溶液，與無機磷結(jié)合生成磷鉬酸，再以硫酸亞鐵為還原劑，可將磷鉬酸還原為藍色的磷鉬藍。與同樣處理的標準液比較，可求得血清無機磷的含量。第二十七頁，共三十三頁，2022年，8月28日【臨床意義】血清磷增高

(1)甲狀旁腺功能減退，因PTH分泌減少，腎小管對磷重吸收亢進。

(2)甲狀腺機能亢進，可出現(xiàn)高血磷。

(3)維生素D中毒，出現(xiàn)高血鈣同時有高血磷。因為維生素D亦可促進腎小管對磷的重吸收，也促進腸道對磷的吸收。

(4)垂體前葉機能亢進，如生長激素分泌過多，可使尿磷排泄減少，故肢端肥大癥患者可出現(xiàn)高血磷。血清磷升高與否可作為肢端肥大癥病情是否活動的指標。

(5)慢性腎功能不全，可有磷潴留而致高血磷。血清磷降低

(1)甲狀旁腺機能亢進，使尿中磷排出量增加，導(dǎo)致血清磷減少。

(2)腸道吸收不良或維生素D缺乏，可引起血磷降低。

(3)腎小管重吸收功能缺陷，如范可尼綜合征、腎小管性酸中毒等可出現(xiàn)血清磷降低。第二十八頁，共三十三頁，2022年，8月28日鐵及總鐵結(jié)合力測定總鐵結(jié)合力(TIBC)是指血清中運鐵蛋白所能結(jié)合的最大鐵量。將過量鐵標準液加到血清中，使之與未結(jié)合鐵的運鐵蛋白結(jié)合，多余的鐵被輕質(zhì)碳酸鎂粉吸附除去，然后測定血清中總鐵含量，即為總鐵結(jié)合力。第二十九頁，共三十三頁，2022年，8月28日原理：血清中Fe3+與運鐵蛋白結(jié)合成復(fù)合物，在酸性介質(zhì)中Fe3+從復(fù)合物中解離出來，被還原劑還原成Fe2+，F(xiàn)e2+與亞鐵嗪直接作用生成紫紅色復(fù)合物，與同樣處理的鐵標準液比較，即可求得血清鐵含量。第三十頁，共三十三頁，2022年，8月28日血清鎂測定臨床生化測定血清鎂的比色法較多,主要有甲基麝香草酚藍法、Calmagite染料法、二甲苯胺蘭法近來報道的偶氮氯磷Ⅰ法第三十一頁，共三十三頁，2022年，8月28日血清鎂測定（甲基麝香草酚藍法）血清中鎂、鈣在堿性溶液中能與甲基麝香草酚藍（MTB）染料結(jié)合，形成一種藍紫色的復(fù)合物。此復(fù)合物在600nm波長處的吸光度與樣本中的鎂含量成正比。在試劑中加入EGTA可掩蔽鈣離子的干擾。表面活性劑可防止蛋白干擾，以避免復(fù)合物吸收峰的偏移。第三十二頁，共三十三頁，2022年，8月28日【試劑】1．堿性緩沖液稱取無水亞硫酸鈉2g，疊氮鈉100mg，甘氨酸750mg和乙二醇雙（乙氨基乙基）四乙酸（EGTA）90mg于小燒杯中，加1mol/LNaOH溶液23ml，使其溶解后，轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，加去離子水至刻度。2．MTB試劑精確取MTB(AR)20mg和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.6g于燒杯中，加1mol/L鹽酸溶液10ml，使其溶解后轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，加去離子水至刻度，混勻，置棕色瓶中保存。3．顯色應(yīng)用液臨用前將上述1和2液等量混合即可。4．鎂標準液（含鎂1.0mmol/L即2.43mg/dl，鈣2.5mmol/L,即10mg/dl）精確稱取硫酸鎂(MgSO4·7H2O