微生物和免疫學(xué)試驗(yàn)七年制要求講解：腸道桿菌、霍亂弧菌、3種厭氧菌示教片：腸道桿菌、霍亂弧菌、3種厭氧菌示教平板：SS平板（腸道致病均和非致病均各一個(gè)）、雙糖鐵培養(yǎng)基（大腸、痢疾、傷寒、變形）、炭疽卷發(fā)樣菌落；其它示教：小生化反應(yīng)（大腸、痢疾、傷寒、變形）操作：肥達(dá)反應(yīng)（注意標(biāo)簽貼試管上，不要貼到架子上）錄像：腸道桿菌2021/4/272操作：肥達(dá)反應(yīng)（試管凝集反應(yīng)）器材：試管6支/人，試管架1個(gè)/2人，吸管1支/人，標(biāo)簽1個(gè)/人已知：傷寒H抗原、O抗原（4人/組）甲型副傷寒H抗原乙型副傷寒H抗原待檢：病人血清（1：10稀釋）2021/4/273倍比稀釋法123456生理鹽水0.50.50.50.50.50.5血清0.5（吹打）0.50.50.50.50.5（棄）菌液0.5ml/管，從第61管加，振勻水浴43度，2h最終血清1：401：801：1601：3201：640對(duì)照稀釋度凝集強(qiáng)弱效價(jià)*吸管桶，試管鍋,標(biāo)簽貼在試管上。2021/4/274結(jié)果判斷以出現(xiàn)凝集的血清最高稀釋倍數(shù)為該血清抗體效價(jià)O達(dá)到1：80，H達(dá)到1：160

H甲（PA）或H乙（PB）達(dá)到1：80或以上有診斷意義結(jié)合當(dāng)?shù)亓餍胁W(xué)史、病程和抗體消長(zhǎng)的意義進(jìn)行判斷。2021/4/275 第6管均勻混濁＋少量凝集＋＋細(xì)菌部分沉于管底，液體半澄清，凝集呈顆粒狀

＋＋＋大部分凝集，液體輕度混濁，凝集塊較大＋＋＋＋全部凝集，液體澄清，大片凝集塊2021/4/276O、H>正常值感染可能性大O、H

低感染可能性小

O

不高

H

高預(yù)防接種或非特異性回憶反應(yīng)

O

高

H

不高感染早期或交叉反應(yīng)類別凝集效價(jià)意義2021/4/277腸道桿菌的鑒定2021/4/278大腸桿菌傷寒桿菌變形桿菌痢疾桿菌2021/4/279SS培養(yǎng)基膽鹽枸櫞酸鹽煌綠乳糖蛋白胨中性紅抑制雜菌生長(zhǎng)被非致病菌分解產(chǎn)酸被致病菌分解產(chǎn)堿酸：紅堿：黃2021/4/2710Shigella-Salmonellamedium菌落紅色——乳糖發(fā)酵陽(yáng)性，非致病菌菌落無(wú)色——乳糖發(fā)酵陰性，致病菌2021/4/2711雙糖鐵培養(yǎng)基下層上層葡萄糖半固體酚紅乳糖硫酸亞鐵2021/4/2712生化反應(yīng)表葡乳麥甘蔗H2S尿素靛大腸---痢疾------傷寒--/+--變形-----2021/4/2713霍亂弧菌2021/4/2714炭疽桿菌致病菌中最大的G＋粗大桿菌,兩端平切、排列呈竹節(jié)狀；有莢膜，芽胞在有氧條件下形成，呈橢圓形，位于菌體中央2021/4/2715●培養(yǎng):

30~35℃，在普通瓊脂培養(yǎng)基上形成灰白色粗糙型菌落，邊緣不整齊，在低倍鏡下觀察邊緣呈卷發(fā)狀

炭疽桿菌培養(yǎng)基2021/4/2716厭氧菌2021/4/27171、破傷風(fēng)：G＋；芽胞位于菌體頂端，大于菌體，使細(xì)菌呈鼓槌狀；菌體細(xì)長(zhǎng)，有周身鞭毛2021/4/2718厭氧血平板上的羽毛狀菌落2021/4/2719庖肉培養(yǎng)基

成分

牛肉浸液1000mL

蛋白胨30g

酵母膏5g

磷酸二氫鈉5g

葡萄糖3g

可溶性淀粉2g

碎肉渣適量

pH7.8

制法

1稱取新鮮除脂肪和筋膜的碎牛肉500g，加蒸餾水1000mL和1mol/L氫氧化鈉溶液25mL，攪拌煮沸15min，充分冷卻，除去表層脂肪，澄清，過(guò)濾，加水補(bǔ)足至1000mL。加入除碎肉渣外的各種成分，校正pH。

2碎肉渣經(jīng)水洗后晾至半干，分裝15mm×150mm試管約2～3cm高，每管加入還原鐵粉0.1～0.2g或鐵屑少許。將上述液體培養(yǎng)基分裝至每管內(nèi)超過(guò)肉渣表面約1cm。上面覆蓋溶化的凡士林或液體石蠟0.3～0.4cm。121℃高壓滅菌15min。

2021/4/2720庖肉培養(yǎng)基破傷風(fēng)梭菌培養(yǎng)基破傷風(fēng)痙攣2021/4/27212、產(chǎn)氣莢膜梭菌：兩端幾乎平切的G＋粗大桿菌；芽胞位于次極端，呈橢圓形，不大于菌體；在體內(nèi)有明顯的莢膜；無(wú)鞭毛2021/4/2722生化反應(yīng)：血瓊脂平板上，雙層溶血環(huán)（θ、α毒素），“靶樣溶血”血平板（雙層溶血環(huán)）2021/4/2723代謝活躍

高層瓊脂斷裂試驗(yàn)

庖肉培養(yǎng)基：分解肉渣中的糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，肉渣淡紅色

牛乳培養(yǎng)基：可出現(xiàn)“洶涌發(fā)酵”（stormyfermentation）2021/4/272