犐犆犛６５．１２０

犅４６

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２３１８７—２００８

飼料中葉黃素的測定高效液相色譜法

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２００８１２３１發(fā)布２００９０５０１實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

書

犌犅／犜２３１８７—２００８

前言

本標(biāo)準(zhǔn)由全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（ＳＡＣ／ＴＣ７６）提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、廣州匯標(biāo)檢測技術(shù)中心、廣州立達(dá)爾生物科技有限公司、佛山市南

海區(qū)維德生物技術(shù)有限公司。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：齊德生、于炎湖、陳紅、陶正國、高俊勤、鄺金媚、辜垂鵬、黃楷彬、孫玉國、

張妮婭。

Ⅰ

書

犌犅／犜２３１８７—２００８

飼料中葉黃素的測定高效液相色譜法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了高效液相色譜法測定飼料中葉黃素的方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于單一飼料、添加劑預(yù)混合飼料、濃縮飼料及配合飼料中葉黃素的測定。方法的定量限

為０．５ｍｇ／ｋｇ。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法（ＧＢ／Ｔ６６８２—２００８，ＩＳＯ３６９６：１９８７，ＭＯＤ）

ＧＢ／Ｔ１４６９９．１飼料采樣（ＧＢ／Ｔ１４６９９．１—２００５，ＩＳＯ６４９７：２００２，ＩＤＴ）

ＧＢ／Ｔ２０１９５動物飼料試樣的制備（ＧＢ／Ｔ２０１９５—２００６，ＩＳＯ６４９８：１９９８，ＩＤＴ）

３原理

試樣中葉黃素經(jīng)堿液皂化及有機(jī)溶劑提取后，取上清液過濾，注入高效液相色譜儀進(jìn)行分離，用紫

外檢測器檢測，外標(biāo)法計(jì)算葉黃素的含量。

４試劑和材料

除特殊說明外，所用試劑均為分析純試劑，用水符合ＧＢ／Ｔ６６８２中一級水的規(guī)定。

４．１正己烷。

４．２丙酮。

４．３無水乙醇。

４．４甲苯。

４．５甲醇。

４．６異丙醇。

４．７氫氧化鉀。

４．８無水硫酸鈉。

４．９提取劑：正己烷丙酮無水乙醇甲苯（３４＋２３＋２０＋２３）混合液。

４．１０氫氧化鉀甲醇溶液（４００ｇ／Ｌ）：４０ｇ氫氧化鉀溶于甲醇中，冷卻后用甲醇稀釋至１００ｍＬ。

４．１１硫酸鈉溶液（１００ｇ／Ｌ）：１０ｇ無水硫酸鈉溶于１００ｍＬ水中。

４．１２葉黃素標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取葉黃素標(biāo)準(zhǔn)品（含量大于９９．０％）２ｍｇ（精確至０．１ｍｇ），先加入少

量流動相超聲溶解，用流動相定容至１００ｍＬ棕色容量瓶，作標(biāo)準(zhǔn)儲備液，４℃避光保存，保存期３天。

４．１３葉黃素標(biāo)準(zhǔn)工作液：取葉黃素標(biāo)準(zhǔn)儲備液（４．１２）用流動相逐級稀釋成０．５μｇ／ｍＬ、１．０μｇ／ｍＬ、

２．０μｇ／ｍＬ、５．０