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化學發(fā)光標記免疫分析法何為化學發(fā)光標記免疫分析?1第一部分化學發(fā)光:又稱為冷光,它是在沒有任何光、熱或電場等激發(fā)的情況下由化學反應(yīng)而產(chǎn)生的光輻射?;瘜W發(fā)光標記物為吖啶酯或者ABEI直接化學發(fā)光標記物為堿性磷酸酶或者辣根過氧化物酶酶促化學發(fā)光標記物為三聯(lián)吡啶釕電化學發(fā)光化學發(fā)光劑在化學發(fā)光反應(yīng)中參與能量轉(zhuǎn)移并最終以發(fā)射光子的形式釋放能量的化合物01Addyourtextshere01020304吖啶酯三聯(lián)吡啶釕魯米諾及其衍生物
AMPPD化學發(fā)光劑吖啶酯:在堿性條件下被H2O2氧化時,發(fā)出波長為470nm的光,具有很高的發(fā)光效率,其激發(fā)態(tài)產(chǎn)物N-甲基吖啶酮是該發(fā)光反應(yīng)體系的發(fā)光體?;瘜W發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕:[RU(bpy)3]2+是電化學發(fā)光劑,它和電子供體三丙胺(TPA)在陽電極表面可同時失去一個電子而發(fā)生氧化反應(yīng)。電化學發(fā)光劑反應(yīng)原理
化學發(fā)光劑魯米諾:化學名稱為3-氨基鄰苯二甲酰肼魯米諾發(fā)光原理化學發(fā)光劑AMPPD:化學名稱為
3-(2-螺旋金剛烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧環(huán)乙烷二鈉鹽
AMPPD發(fā)光原理化學發(fā)光劑酶標記元素標記01STEP02STEP03STEP標記技術(shù)發(fā)光物標記
標記技術(shù):將化學發(fā)光劑的分子與某些分子結(jié)合,直接或間接地測定待測組分。通過分析被標記物來完成對待測組分的測定化學發(fā)光免疫分析化學發(fā)光免疫分析(CLIA):將化學發(fā)光或生物發(fā)光體系與免疫反應(yīng)相結(jié)合,用于檢測微量抗原或抗體的一種新型標記免疫測定技術(shù)。直接化學發(fā)光免疫分析化學發(fā)光酶免疫分析電化學發(fā)光免疫分析ABC發(fā)光YYY磁微粒被測抗原+抗體+帶吖啶酯標記物抗體YYYYYYYYYYY沖洗后---夾心法(1)加入H2O2(pH<10)(2)加入堿(pH>10)直接化學發(fā)光免疫分析化學發(fā)光酶免疫分析辣根過氧化物酶標記的化學發(fā)光免疫分析化學發(fā)光酶免疫分析堿性磷酸酶標記的化學發(fā)光免疫分析電化學發(fā)光免疫分析
文獻調(diào)研2第二部分人體免疫球蛋白G檢測檢測原理,A:初步免疫;B:競爭免疫1.魯米諾;2.FITC425nm處魯米諾的化學發(fā)光信號增強525nm處的FITC發(fā)光信號降低不同IgG濃度下CRET免疫傳感器的熒光光譜。IgG濃度分別為:0(a),0.5(b),1(c),1.5(d),2(e),2.5(f),3(g),3.5(h),及4nM(i)。插入的曲線為熒光強度比率(R=I425/I525)隨濃度變化曲線表人血清樣品IgG濃度檢測相對標準偏差(RSD):<5%檢測限(LOD):2.9×10?11M其他免疫法檢測IgG的檢測限:時間熒光免疫分析:5μg/L流免疫分析5.0×10?7M電化學免疫分析法:1.0×10?10M熒光共振能量轉(zhuǎn)移(LRET)免疫分析:0.88μg/mL人體免疫球蛋白A檢測化學發(fā)光夾心法檢測lgA裝置:多毛細管玻璃板的
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