ICS07080

C27.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T35540—2017

限制性凝血酶

Restrictionthrombin

2017-12-29發(fā)布2018-07-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T35540—2017

目次

前言

…………………………Ⅰ

引言

…………………………Ⅱ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術(shù)語和定義

3………………1

技術(shù)要求

4…………………1

檢驗(yàn)方法

5…………………1

包裝運(yùn)輸及貯存

6、…………………………2

保質(zhì)期

7……………………2

附錄規(guī)范性附錄限制性凝血酶酶活檢測

A()…………3

附錄規(guī)范性附錄限制性凝血酶純度檢測

B()…………5

GB/T35540—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國工具酶標(biāo)準(zhǔn)化工作組歸口

(SAC/SWG11)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位福建華燦制藥有限公司華燦南生廈門生物技術(shù)有限公司福建南生科技有限

:、()、

公司山東大學(xué)安琪酵母股份有限公司三明市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)所福建農(nóng)林大學(xué)復(fù)旦大學(xué)蘇州大學(xué)

、、、、、、、

上海百賽生物科技有限公司海貍納米科技蘇州有限公司上海博仕生物科技有限公司

、()、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人黃發(fā)燦鄭登忠詹學(xué)雄郭曉墘陳秀蘭趙晶章麗麗莊麗瓊黃發(fā)喜

:、、、、、、、、、

林樂鈔陳勁春姚娟劉斌張熙穎鐘江朱力任輝邢志剛

、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T35540—2017

引言

限制性凝血酶是一種專一性很強(qiáng)的絲氨酸蛋白水解酶能識(shí)別氨基酸序

,LeuValProArg↓GlySer

列是基因工程中重組融合蛋白的酶切工具制定限制性凝血酶國家標(biāo)準(zhǔn)用以推動(dòng)該類工具酶的產(chǎn)業(yè)

,。,

化對于限制性凝血酶的生產(chǎn)和使用具有重要意義

,。

Ⅱ

GB/T35540—2017

限制性凝血酶

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了限制性凝血酶的技術(shù)要求檢驗(yàn)方法包裝運(yùn)輸貯存和保質(zhì)期

、、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于從豬血液中提取的限制性凝血酶

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志

GB/T191

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

限制性凝血酶restrictionthrombin

一種專一性很強(qiáng)的絲氨酸蛋白水解酶能識(shí)別氨基酸序列用于酶切具有

,LeuValProArg↓GlySer,

凝血酶酶切位點(diǎn)的重組融合蛋白

。

32

.

限制性凝血酶活力單位activityunitofrestrictionthrombin

條件下在含有

20℃,pH8.4,50μL20mmol/LTris-HCl、0.15mol/LNaCl、2.5mmol/LCaCl2

的緩沖液里內(nèi)酶切水解融合蛋白所需的限制性凝血酶量為一個(gè)活力單位

,16h1μmol(Facanunit)。

4技術(shù)要求

41外觀

.

白色或類白色的凍干塊狀物或粉末

。

42酶活

.

≥350Facanunit/mg。

43純度

.

限制性凝血酶經(jīng)電泳結(jié)果顯示為單條帶