ICS07080

A21.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T38481—2020

微生物超低頻突變測定雙重測序法

Determinationofultralow-frequencymutationsformicroorganisms—

Duplexsequencing

2020-11-19發(fā)布2020-11-19實(shí)施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

中華人民共和國

國家標(biāo)準(zhǔn)

微生物超低頻突變測定雙重測序法

GB/T38481—2020

*

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

202011

*

書號

:155066·1-63938

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T38481—2020

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位清華大學(xué)洛陽華清天木生物科技有限公司江漢大學(xué)中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院

:、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人張翀邢新會李梅剪興金王立言郭肖杰張樂樂彭海馬愛進(jìn)

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T38481—2020

微生物超低頻突變測定雙重測序法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用雙重測序法測定微生物超低頻突變的方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于微生物基因組或基因片段超低頻突變的測定

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

超低頻突變ultralow-frequencymutations

化學(xué)物理或生物因素導(dǎo)致微生物發(fā)生的頻率低于-5的永久性改變

、DNA1×10。

32

.

條形碼標(biāo)簽barcodelabel

接在待測片段兩側(cè)的核苷酸片段用以標(biāo)示同一擴(kuò)增家族的協(xié)助進(jìn)行突變位點(diǎn)的

DNA,DNA,

確認(rèn)

。

33

.

互補(bǔ)標(biāo)簽家族complementarytagfamily

所有含兩端互補(bǔ)條形碼標(biāo)簽的片段

DNA。

34

.

雙鏈同源序列double-strandconsensussequencesDCSs

;

帶有相同條形碼標(biāo)簽的雙鏈序列包含反向互補(bǔ)鏈

DNA,。

4原理

在待測片段兩端接上一段隨機(jī)且互補(bǔ)的雙鏈核苷酸條形碼標(biāo)簽然后對所有帶有條形

DNA12nt,

碼標(biāo)簽的序列進(jìn)行雙重的高通量測序利用隨機(jī)互補(bǔ)標(biāo)簽排除掉測序文庫制備過程中所引入

。12nt,

的突變進(jìn)而準(zhǔn)確檢測突變位點(diǎn)和突變率

,。

5試劑

除非另有規(guī)定僅使用分析純試劑