血液生理試驗(yàn)[實(shí)驗(yàn)原理]血液抗凝后，經(jīng)離心，將出現(xiàn)分層。上面無(wú)色（或淡黃色）透明的部分為血漿，下面紅色部分為紅細(xì)胞，在紅細(xì)胞之上有一薄層灰白色部分為白細(xì)胞和血小板。下部壓緊的血細(xì)胞占全血的體積比稱(chēng)為紅細(xì)胞壓積，又叫紅細(xì)胞比容。若不加抗凝劑任血液自然凝固或去纖維蛋白，就可區(qū)別血清、血塊及纖維蛋白。[實(shí)驗(yàn)對(duì)象]哺乳動(dòng)物（種類(lèi)不限）[實(shí)驗(yàn)材料]草酸鹽抗凝劑、或10g/L肝素，75%酒精，溫氏分血管，酒精燈，離心機(jī)，天平，注射器，長(zhǎng)針頭，干棉球，帶有開(kāi)叉橡皮管的玻棒，燒杯等。[實(shí)驗(yàn)方法與步驟]1．溫氏分血管比容測(cè)定草酸鹽抗凝劑配成水溶液，取適量該溶液（根據(jù)取血量確定抗凝劑溶液用量，如草酸鉀，每1mL血需加1-2mg。配制10%水溶液，每管加0.1mL則可使5-10mL血液不凝固），放入大試管，烘干后備用。取血：可采取靜脈取血或心臟取血，將血液沿大試管壁緩慢放入管內(nèi)，用涂有凡仕林的大拇指堵住試管口，緩慢顛倒試管2～3次，讓血液與抗凝劑充分混勻，并不使血細(xì)胞破碎，制成抗凝血。用帶有長(zhǎng)注針頭的注射器，取抗凝血2mL將其插入分血管的底部，緩慢放入，邊放邊抽出注射針頭，使血液至刻度10cm處。離心：將分血管以3000r/min離心30min，取出分血管，讀取紅細(xì)胞柱的高度，再以同樣的轉(zhuǎn)速離心5min，第二次讀取紅細(xì)胞柱的高度，如果讀數(shù)與前次相同，表明紅細(xì)胞已被壓緊。該讀數(shù)即為紅細(xì)胞比容值。例如，讀數(shù)為4.2cm，即表示100mL血液中紅細(xì)胞容積占42mL，或者以4.2乖以10即得到紅細(xì)胞比容的數(shù)值。[注意事項(xiàng)]1．選擇抗凝劑必須考慮到不使紅細(xì)胞變形、溶解。草酸鉀使紅細(xì)胞皺縮，而草酸銨使紅細(xì)胞膨脹，二者配合使用可互相緩解。2．血液與抗凝劑混合時(shí)應(yīng)避免劇烈振動(dòng)而引起紅細(xì)胞破裂。3．操作過(guò)程應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)完成，以免溶血和水分蒸發(fā)?？鼓尤氲椒盅苤袘?yīng)避免產(chǎn)生氣泡，影響讀數(shù)的準(zhǔn)確性。[思考題]1．血液由哪些成分組成，各有什么生理作用。2．血漿和血清有何區(qū)別，如何制備？3．測(cè)定紅細(xì)胞比容的實(shí)際意義是什么？

[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯熟悉用比色法測(cè)定血紅蛋白的方法。[實(shí)驗(yàn)原理]血紅蛋白測(cè)定的方法有多種，最常用而最簡(jiǎn)單的是比色法。由于血紅蛋白的顏色，常隨結(jié)合的氧量多少而改變，因而不利于比色，但血紅蛋白與稀鹽酸作用后，能使亞鐵血紅素變成不易變色的棕色的高鐵血紅蛋白，用水稀釋后可與標(biāo)準(zhǔn)比色板比色，從而測(cè)得血紅蛋白含量。通常以每100毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)來(lái)表示。實(shí)驗(yàn)二血紅蛋白的測(cè)定[實(shí)驗(yàn)對(duì)象]哺乳動(dòng)物（種類(lèi)不限）[實(shí)驗(yàn)材料]沙里血紅蛋白計(jì)、抗凝血、0.1mol/LHCl、蒸鎦水、棉球等。

[方法及步驟]①用滴管加5～6滴0.1mol/L

HCl到刻度測(cè)定管內(nèi),至管下方刻度“2”或10%處。②用血紅蛋白吸管吸取血液至20μL處，用脫脂棉仔細(xì)揩去吸管外的血液。③將吸血管中的血液輕輕吹到測(cè)定管底部的鹽酸中，反復(fù)以上清吸吹3次，使吸管壁上的血液全部進(jìn)入測(cè)定管中。在吸吹時(shí)盡量避免產(chǎn)生氣泡,以免影響比色。用細(xì)玻棒輕輕攪動(dòng)，將血液與鹽酸充分混合，靜置10min，使管內(nèi)的鹽酸和血紅蛋白完全作用，形成棕色的高鐵血紅蛋白。④把比色管插入標(biāo)準(zhǔn)比色箱，使無(wú)刻度的兩面位于空格的前后方向，便于透光和比色。用滴管向比色管內(nèi)逐滴加入蒸餾水，并不斷攪勻，同時(shí)對(duì)著自然光用肉眼進(jìn)行比色，直至溶液的顏色與標(biāo)準(zhǔn)比色板的顏色相同為止。⑤讀出管內(nèi)液體凹面所在的刻度，可以是相對(duì)值，也可以是絕對(duì)值，可參照血紅蛋白計(jì)的使用說(shuō)明書(shū)。國(guó)產(chǎn)沙里氏血紅蛋白計(jì)通常100%相當(dāng)于14.5g，如液體表面在刻度70%處，要計(jì)算其絕對(duì)克數(shù)，可用下列比例求得：x:14.5=70:100,x=10.15。[注意事項(xiàng)]1．要準(zhǔn)確用吸血管吸取和轉(zhuǎn)移20μL血液至比色測(cè)定管中，若吸入過(guò)快，有鹽酸或血液被吸入采血管的乳膠頭，則應(yīng)將吸管洗滌干凈，重新吸血。洗滌過(guò)程是：先用清水將血跡洗去，然后再依次吸取蒸餾水、95%酒精、乙醚洗滌采血管1～2次，使采血管內(nèi)干凈、干燥。2．血液和稀鹽酸的作用時(shí)間不能少于10min，不然血紅蛋白不能充分變成高鐵血紅蛋白，使結(jié)果偏低。3．比色應(yīng)在散射自然光下進(jìn)行，避免在黃色燈光下進(jìn)行比色，以免影響結(jié)果。4．加蒸餾水時(shí)，開(kāi)始可以多加幾滴，隨后逐滴加入，并用玻棒不斷混勻，以防稀釋過(guò)度。[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯學(xué)習(xí)測(cè)定紅細(xì)胞滲透脆性的方法，理解細(xì)胞外液滲透張力對(duì)維持細(xì)胞正常形態(tài)與功能的重要性。[實(shí)驗(yàn)原理]紅細(xì)胞在高滲溶液內(nèi)會(huì)因失去水分而皺縮；反之，在低滲溶液內(nèi)，則水分進(jìn)入紅細(xì)胞，使紅細(xì)胞膨脹。如溶液滲透壓繼續(xù)下降，紅細(xì)胞會(huì)膨脹而破裂，并釋放血紅蛋白，稱(chēng)之為溶血。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液的抵抗力稱(chēng)為紅細(xì)胞滲透脆性。實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞的脆性試驗(yàn)[實(shí)驗(yàn)對(duì)象]動(dòng)物種類(lèi)不限。[實(shí)驗(yàn)材料]抗凝血，1%氯化鈉溶液，蒸餾水，10mL小試管，試管架，滴管，1mL移液管。[實(shí)驗(yàn)方法及步驟]1.先將試管分別排列在試管架上，按下表把1%NaCl，稀釋成不同濃度的低滲溶液，每管溶液均為2ml。試管號(hào)123456789101%NaCl1.401.301.201.101.000.900.800.700.600.50蒸餾水0.600.700.800.901.001.101.201.301.401.50NaCl濃度0.700.650.600.550.500.450.400.350.300.252．加抗凝血：用滴管吸取抗凝血，在各試管中各加一滴，輕輕搖勻（用拇指堵住試管口，順序?qū)⒃嚬芫徛怪枚巍?．在室溫下靜置1～2h。4．觀察結(jié)果：依據(jù)各管中液體顏色和渾濁度的不同，判斷紅細(xì)胞溶血程度。①試管內(nèi)液體下層為渾濁紅色，上層為無(wú)色透明，表明無(wú)紅細(xì)胞破裂，未發(fā)生溶血。②試管內(nèi)液體下層為渾濁紅色，上層出現(xiàn)透明紅色，表示部分紅細(xì)胞破裂，稱(chēng)為不完全溶血。③試管內(nèi)液體完全變成透明紅色，管底無(wú)紅細(xì)胞沉淀，表明紅細(xì)胞完全破裂，稱(chēng)為完全溶血。5．紅細(xì)胞滲透脆性范圍：根據(jù)前述原理判斷出開(kāi)始溶血及剛開(kāi)始完全溶血的試管，前者的NaCl濃度為紅細(xì)胞的最小抗力，后者為紅細(xì)胞的最大抗力。