探究：培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化目的要求1、學(xué)習(xí)利用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)的方法2、實(shí)驗(yàn)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化3、注意樣方法的應(yīng)用4、體會(huì)影響種群數(shù)量變化的因素一、實(shí)驗(yàn)原理1.在含糖的液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)中酵母菌繁殖很快，迅速形成一個(gè)封閉容器內(nèi)的酵母菌種群，通過細(xì)胞計(jì)數(shù)可以測(cè)定封閉容器內(nèi)的酵母菌種群隨時(shí)間而發(fā)生的數(shù)量變化。2.用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌，種群的增長(zhǎng)受_________________、________、________、__________等因素的影響。3.在理想的無限環(huán)境中，酵母菌種群呈“J”型增長(zhǎng)；自然界中_____________總是有限的，酵母菌種群呈“S”型增長(zhǎng)。4.計(jì)算酵母菌數(shù)量可用抽樣檢測(cè)的方法——____________法。探究“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化”培養(yǎng)液的成分空間pH溫度資源和空間顯微計(jì)數(shù)基礎(chǔ)知識(shí)點(diǎn)梳理怎樣隨時(shí)間SJ等量相同等量平均值增長(zhǎng)二、實(shí)驗(yàn)研究方法思路三、實(shí)驗(yàn)流程1.酵母菌培養(yǎng)2.抽樣檢測(cè)①將500mL

注入錐形瓶②將0.1g

投入錐形瓶的培養(yǎng)液中混合均勻，并置于適宜的條件下培養(yǎng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的葡萄糖溶液注入錐形瓶中活性干酵母①振蕩酵母菌培養(yǎng)液，使

；②每天定時(shí)采用

方法抽取1mL酵母菌培養(yǎng)液酵母菌均勻分布抽樣檢測(cè)3.觀察計(jì)數(shù)①將含有酵母菌的培養(yǎng)液滴在計(jì)數(shù)板上的

____，讓培養(yǎng)液自行滲入計(jì)數(shù)，用濾紙吸去多余的培養(yǎng)液②待酵母菌細(xì)胞全部

，在顯微鏡下計(jì)數(shù)

內(nèi)酵母菌的數(shù)量③估算1mL培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)蓋玻片邊緣沉降到計(jì)數(shù)室底部一個(gè)方格內(nèi)4.重復(fù)（2）、（3）步驟：5.構(gòu)建模型分析：將所得數(shù)據(jù)用曲線表示出來，得出酵母菌種群數(shù)量變化規(guī)律連續(xù)觀察7天，統(tǒng)計(jì)數(shù)目四、酵母菌計(jì)數(shù)方法——顯微計(jì)數(shù)法先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴在蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液滲入，吸去多余濾液。片刻后，待酵母菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)中央，計(jì)數(shù)一個(gè)方格內(nèi)酵母菌數(shù)量，以此為據(jù)，估算酵母菌總數(shù)。五、表達(dá)和交流1.根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可得如圖所示曲線。增長(zhǎng)曲線的總趨勢(shì)是先

再

。原因是在開始時(shí)培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充足、空間充裕、條件適宜，因此酵母菌大量繁殖，種群數(shù)量劇增；隨著酵母菌數(shù)量的不斷增多，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗，pH變化等，生存條件惡化，酵母菌死亡率高于出生率，種群數(shù)量下降。2.影響酵母菌種群數(shù)量的因素可能有

、溫度、

及_____________等。增加降低養(yǎng)分pH有害代謝廢物歸納小結(jié)1.本探究實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意如下內(nèi)容：(1)每天定時(shí)取樣計(jì)數(shù)，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天，結(jié)果記錄最好用記錄表，如下：

(2)顯微鏡計(jì)數(shù)時(shí)，對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)遵循“計(jì)上不計(jì)下，計(jì)左不計(jì)右”的原則計(jì)數(shù)。(3)從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)前，需將試管輕輕振蕩幾次，目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，減小誤差。(4)每天計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量的時(shí)間要固定。(5)活酵母有出芽生殖現(xiàn)象，若芽體達(dá)到母細(xì)胞大小的一半時(shí)，即可作為兩個(gè)菌體計(jì)數(shù)，若芽體小于母細(xì)胞一半時(shí)為1個(gè)酵母細(xì)胞。時(shí)間/天123456……數(shù)量/個(gè)……(6)溶液要進(jìn)行定量稀釋：如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于酵母菌的計(jì)數(shù)。具體方法是：搖勻試管，取1mL酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無菌水稀釋，稀釋n倍后，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有4—5個(gè)酵母細(xì)胞為宜。(7)計(jì)算1mL菌液的數(shù)量時(shí)必須搞清如下等量關(guān)系：

1mL＝1cm3＝1000mm3(8)培養(yǎng)和記錄過程要尊重事實(shí)，不能主觀臆造。計(jì)數(shù)一個(gè)樣品要從兩個(gè)計(jì)數(shù)室中計(jì)得的平均數(shù)值來計(jì)算，對(duì)每個(gè)樣品可計(jì)數(shù)三次，再取其平均值。計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)不時(shí)調(diào)節(jié)焦距，才能觀察到不同深度的菌體。按公式計(jì)算每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)。(9)血球計(jì)數(shù)板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和沖洗的方法清洗。(10)本實(shí)驗(yàn)無對(duì)照實(shí)驗(yàn)，酵母菌每天的數(shù)量變化可形成前后對(duì)照。2.血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法注意事項(xiàng)：搖勻取樣，適當(dāng)稀釋，適用于需借助顯微鏡計(jì)數(shù)的微生物。計(jì)數(shù)方法：血球計(jì)數(shù)板有兩種方格網(wǎng)，對(duì)于16×25的方格網(wǎng)而言，計(jì)四角的4個(gè)中方格共計(jì)100個(gè)小方格中的個(gè)體數(shù)量；而對(duì)于25×16的方格網(wǎng)而言，計(jì)四角和正中間的(共5個(gè))中方格共計(jì)80個(gè)小方格中的個(gè)體數(shù)量。如圖所示。計(jì)算方法：大方格長(zhǎng)度為1mm，高度為0.1mm(即規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm)，則每個(gè)大方格的體積為0.1mm3(10－4mL)，故1mL培養(yǎng)液中細(xì)胞個(gè)數(shù)＝(中方格中的細(xì)胞總數(shù)/中方格中小方格個(gè)數(shù))×400×104×稀釋倍數(shù)。計(jì)數(shù)室滴液處計(jì)數(shù)室1mm25個(gè)中格16個(gè)小格16個(gè)中格25個(gè)小格25X16=400小格16X25=400小格每個(gè)計(jì)數(shù)室（大方格）共有400小格，總?cè)莘e為0.1mm3*********抽樣檢測(cè)：5×16=80個(gè)小格抽樣檢測(cè)：4×25=100個(gè)小格****#####希利格式：抽取4個(gè)樣方，4個(gè)角的中方格。湯麥?zhǔn)剑撼槿?個(gè)樣方，4個(gè)角和最中間的中方格；如何抽樣？計(jì)算出4個(gè)樣方的平均值，再乘以16（或者計(jì)算出5個(gè)樣方的平均值，再乘以25），即可得到一個(gè)計(jì)數(shù)室的微生物數(shù)目。如何計(jì)數(shù)？（1）16×25型的計(jì)數(shù)板將計(jì)數(shù)室放大，可見它含16中格，每個(gè)中格有25個(gè)小格，抽樣檢測(cè)一般取四角：1、4、13、16四個(gè)中方格（100個(gè)小方格）計(jì)數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml=(100個(gè)小方格細(xì)胞數(shù)/100)×400×10000×稀釋倍數(shù)

=A/4×16×104×B（2）25×16型的計(jì)數(shù)板中央大方格含25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格，供細(xì)胞計(jì)數(shù)用（見圖三）。一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格（80個(gè)小方格）的細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞個(gè)數(shù)/ml=(80個(gè)小方格細(xì)胞數(shù)/

80)×400×10000×稀釋倍數(shù)

=A/5×25×104×B

每毫升培養(yǎng)液中的酵母菌細(xì)胞數(shù)是多少？酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/mL=所數(shù)小方格中細(xì)胞總數(shù)x400x104x稀釋倍數(shù)所數(shù)的小方格數(shù)假設(shè)：計(jì)數(shù)室內(nèi)酵母菌為a個(gè)，稀釋倍數(shù)為b，則10mL培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)為：

a×105×b例1:酵母菌的計(jì)數(shù)通常用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行，血球計(jì)數(shù)板每個(gè)大方格容積為0.1mm3，由400個(gè)小方格組成?，F(xiàn)對(duì)某一樣液進(jìn)行檢測(cè)，如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計(jì)數(shù)，先

____后再計(jì)數(shù)。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有

個(gè)。2×108稀釋解析：根據(jù)公式：5×400×10000×10＝2×108

學(xué)以致用例2：檢測(cè)員將1mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由25×16＝400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為0．1mm3?，F(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻

個(gè)／mL解析：酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)／1mL＝

80個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/80×400×10000×稀釋倍數(shù)＝n/80×400×10000×10＝5n×105

例3.某學(xué)生在“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化”實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制出如圖所示的曲線。下列有關(guān)分析錯(cuò)誤的是(

)A.實(shí)驗(yàn)過程中酵母菌種群的年齡組成先是增長(zhǎng)型，后是穩(wěn)定型，最后變?yōu)樗ネ诵虰.種群數(shù)量在不