鴨超氧化揚歧化酶 酶聯(lián)免疫分析試劉盒使用說朗書本試利盒僅供研兗使用。96T松測范?:12U/L-500U/L使用目的：本試利盒用于測定鴨血請樣本中超氧化揚岐化酶CSOD；活性。實驗原理本試利盒應用玖抗體夾心'法測定標本中鴨超氧化物咬化酶(SOD)木平。用純化的鴨超氧化揚咬化酶(SOD丿抗體包彼微孔板，制成固相抗體，往包彼單抗的微孔中依次加入翅氧化揚咬化酶：(SOD),再與HRP標記的超氧化物歧化酶(SOD)抗體結金，形成抗體■抗原■酶標抗體復金揚，經(jīng)過徹底洗滌后加底揚TMB顯色。TMB疫HRP酶的催化下轉化成藍色，并在 酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的竦龍和樣鳳中的超氧化楊歧化酶(SOD)呈正相關。用酶標儀4450nm長下測定吸光度(OD值丿，通過標準曲線計算樣品中鴨超氧化物歧化酶(SOD)活性。試利盒組成130信濃縮洗滌液20mlx1瓶7終止液6mlx1瓶2酶標試利6mlx1瓶8標準品(960U/L)0.5mlx1瓶3酶標包彼板12孔x8條9標準品稀猝液1.5mlx1瓶46mlx1瓶10說朗書1份5顯色利A液6mlx1瓶11封板朕2張6顯色利B浚6mlx1/瓶12?密封篆1個標本要求1、標本采集后盡早進行提取，提取按相關文秋進行，提取后應盡快進行實殮。若不能馬上進行試驗，可將標本放于?20°C保存，但應避免反復凍融2、不能檢測含NaN3的樣鳳，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP；活性。操作步驟標準鳳的稀釋：本試利盒提供原信標準鳳一支，用戶可按照下列圖表亦小試管中進行稀釋。480U/L5號標準品」50卩的原信標準為加入150(.11標準品稀猝液240U/L4號標準晶150卩的5號標準為加入150(11標準品稀猝液120U/L3號標準品」50卩的4號標準為加入150(11標準品稀猝液60U/L2號標準晶150卩的3號標準鳳加入150|11標準為稀猝浚t30U/L1號標準晶150M的2號標準品加入150pl標準品稀猝液(加樣：分別設空勺孔(空自對照孔不加樣品及酶標試利，其余冬步操作相同丿、標準孔、待測樣鳳孔。農(nóng)酶標包彼板上標準鳳準確加樣50(11,待測樣為孔中先加樣為稀猝液40)11,然后再加待測樣品10）11（樣鳳最終稀猝度為5信丿O加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37°C溫育30分鐘。配液：將30信濃縮洗滌浚用蒸館木30信稀猝后備用洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，毎孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：毎孔加入酶標試，利50）11,空倉孔除外。溫.育：操作同3o洗滌：操作同5o顯色：毎孔先加入顯色利A50（.11,再加入顯色利B50卩I,輕輕震蕩混勻，37°C避光顯色10分鐘.終止：毎孔加終止液50（11,終止反應（此時藍色立轉黃色丿。測定：以空自?空調零，450nm疵長依序測量冬孔的吸光度（OD值）。測定應疫加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，淮.坐標絨上繪出標準曲線，根推樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀猝信數(shù)；或用標準楊的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀猝信數(shù)，印為樣品的實際濃度。注意事項1.試利盒從冷藏環(huán)境中取出應石室溫平衡15?30分鐘后方可使用，酶標包彼板開封后如未用完，板條應裝入?密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出，稀猝時可疫木浴中加溫助涿，洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常枝對其準確性，以避免試臉誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。詩每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過壽（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值丿，詩先用樣為稀猝液稀猝一定信數(shù)丫n信丿后再測定，計算時錯■最后乘以總稀猝信數(shù)（xnx5Jo封板朕只限一次性使用，以避免交又污染。底物詩避光保存。嚴格按照說朗書的操作進行