一、植物的組織培養(yǎng)技術(shù)1.基本過程2.菊花的組織培養(yǎng)(1)影響植物組織培養(yǎng)的因素①材料：_____、年齡、保存時間長短等。脫分化再分化種類第1頁/共59頁第一頁，共60頁。③激素：____________________。④菊花的組織培養(yǎng)環(huán)境(2)實驗操作過程制備______________→_______消毒→_____→培養(yǎng)→移栽→栽培維生素蔗糖生長素和細胞分裂素5.8左右18℃～22℃12hMS固體培養(yǎng)基外植體接種條件pH：________溫度：____________光照：每日光照_____第2頁/共59頁第二頁，共60頁。3.月季的花藥培養(yǎng)(1)花粉發(fā)育過程：_____________時期、_____期、_____期等階段。(2)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑小孢子四分體單核雙核花粉脫分化胚狀體愈傷組織叢芽分化叢芽再分化生根移栽誘導(dǎo)第3頁/共59頁第三頁，共60頁。(3)影響花藥培養(yǎng)的因素①主要因素：_____的選擇和_______的組成。②其他因素：親本植株的_________、材料的___________、接種_____。(4)實驗操作①材料的選?。禾暨x完全_______的花蕾，確定花粉發(fā)育時期最常用方法是_________法。②接種：滅菌后的花蕾，在_____條件下除去萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。剝離花藥時盡量不要損傷花藥。

材料培養(yǎng)基生長條件低溫預(yù)處理未開放醋酸洋紅無菌密度第4頁/共59頁第四頁，共60頁。③培養(yǎng)：溫度控制在______左右，幼小植株形成后才需要______。如果花藥開裂釋放出胚狀體，就要在_____開裂后盡快將幼小植株分開。二、植物有效成分的提取1.植物芳香油的提取(1)植物芳香油的主要化學(xué)成分：___________及其衍生物，具有很強的揮發(fā)性。提取方法有蒸餾、_____和萃取等。(2)提取玫瑰精油①方法：____________法。25℃光照花藥萜類化合物壓榨水蒸氣蒸餾第5頁/共59頁第五頁，共60頁。②實驗流程：(3)提取橘皮精油①方法：一般用_____法。②實驗流程：石灰水浸泡→漂洗→_____→過濾→靜置→再次_____→橘皮油。水蒸氣蒸餾NaCl無水Na2SO4

過濾壓榨壓榨過濾第6頁/共59頁第六頁，共60頁。2.胡蘿卜素的提取(1)胡蘿卜素性質(zhì)：___溶于水，___溶于乙醇，___溶于石油醚等有機溶劑。(2)實驗設(shè)計①方法：_____法，_______最適宜作萃取劑。②實驗流程：胡蘿卜→粉碎→_____→萃取→_____→濃縮→胡蘿卜素。(3)鑒定方法：_______法。【點撥】①水蒸氣蒸餾要適當(dāng)延長蒸餾時間，嚴(yán)格控制蒸餾溫度。②用于萃取的有機溶劑必須事先精制，除去雜質(zhì)。③萃取過程中濃縮的本質(zhì)為蒸發(fā)有機溶劑。

不微易萃取石油醚干燥過濾紙層析第7頁/共59頁第七頁，共60頁。三、DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)1.DNA的粗提取與鑒定(1)提取原理：DNA與雜質(zhì)的_______不同，DNA與雜質(zhì)對酶、高溫、洗滌劑的_______不同。(2)提取DNA的具體步驟①實驗材料的選?。罕緦嶒炗胈____細胞做實驗材料。②破碎細胞，釋放DNA：利用血細胞__________的原理，注意玻璃棒的___向攪拌，過濾取濾液。③溶解細胞核內(nèi)的DNA：在高濃度的NaCl溶液中，核蛋白容易集聚，游離出的DNA溶解。溶解度耐受性雞血吸水漲破單第8頁/共59頁第八頁，共60頁。④DNA的析出：加蒸餾水降低NaCl溶液濃度，使DNA_____。⑤DNA的初步純化：將DNA絲狀物再溶解、過濾，向濾液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的_______溶液進行提純。(3)DNA的鑒定：DNA在_______的條件下，與_______呈___色。2.多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA片段(1)PCR相關(guān)技術(shù)原理與條件①PCR：___________反應(yīng)的簡稱，是一種體外迅速擴增_______的技術(shù)。②引物：是一小段______________，它能與DNA母鏈的一段堿基序列_________。析出冷酒精沸水浴二苯胺藍多聚酶鏈?zhǔn)紻NA片段RNA或單鏈DNA互補配對第9頁/共59頁第九頁，共60頁。③擴增方向：總是從子鏈的____端向____端延伸。④解旋：利用了_____________原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合，即雙鏈DNA單鏈DNA。⑤酶：_______的TaqDNA聚合酶，高溫不會失活。⑥PCR的條件：一定的_________下才能進行，需提供_____模板、兩種_____、___種脫氧核苷酸、_____的DNA聚合酶，同時要控制_____。(2)PCR過程①變性：當(dāng)溫度上升到_______以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈。5′3′DNA的熱變性耐高溫緩沖溶液DNA引物四耐熱溫度90℃第10頁/共59頁第十頁，共60頁。②復(fù)性：溫度下降到_______左右，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。③延伸：溫度上升到_______左右，溶液中的四種脫氧核苷酸(A、T、C、G)在___________的作用下，根據(jù)_____________原則合成新的DNA鏈。(3)結(jié)果①PCR一般要經(jīng)歷___多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為_____、_____和_____三步。②兩引物間固定長度的DNA序列呈_____擴增(即___)。50℃72℃DNA聚合酶堿基互補配對30變性復(fù)性延伸指數(shù)2n第11頁/共59頁第十一頁，共60頁。3.血紅蛋白的提取和分離實驗(1)常用的分離方法：___________法、凝膠電泳法等。(2)基本原理①凝膠色譜法的原理：相對分子質(zhì)量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程___，流動___；相對分子質(zhì)量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程___，流動___。②凝膠電泳法的原理：不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、_____、形狀和_____不同，在電場中受到的作用力大小、_____、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運動_____和運動_____不同。凝膠色譜短快長慢電量大小方向速度方向第12頁/共59頁第十二頁，共60頁。(3)血紅蛋白的提取和分離程序①樣品處理紅細胞的洗滌→__________的釋放→分離血紅蛋白溶液②粗分離——_____：除去樣品中相對分子質(zhì)量較___的雜質(zhì)。③純化：一般采用_________法對血紅蛋白進行分離和純化。④純度鑒定：一般用_________________________來測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量，即對血紅蛋白進行純度鑒定。

血紅蛋白透析小凝膠色譜SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法第13頁/共59頁第十三頁，共60頁?！军c撥】①提純出的DNA的鑒定還可用甲基綠染色的方法進行，甲基綠可將DNA染成綠色。②DNA聚合酶不能從頭合成DNA子鏈，只能從引物的3′端開始延伸，從子鏈的5′端開始合成。引物的3′端與子鏈的5′端交匯于一點，屬于對模板和產(chǎn)物的描述，兩種說法都正確。③SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實質(zhì)上測定的是組成蛋白質(zhì)的多肽鏈的相對分子質(zhì)量，電泳后形成的兩條或多條帶并不一定是雜質(zhì)，如血紅蛋白由2條α鏈和2條β鏈組成，本身就會形成2條帶。第14頁/共59頁第十四頁，共60頁。植物組織培養(yǎng)1.植物激素在組織培養(yǎng)過程中的重要作用生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，其作用及特點為：(1)在生長素存在的情況下，細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢。第15頁/共59頁第十五頁，共60頁。(2)使用順序不同，結(jié)果不同

(3)生長素用量與細胞分裂素用量的比例不同，結(jié)果也不同。①高：利于根的分化、抑制芽的形成；②低：利于芽的分化、抑制根的形成；③適中：促進愈傷組織的形成。使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于細胞分裂，但細胞不分化先使用細胞分裂素，后使用生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高第16頁/共59頁第十六頁，共60頁。2.植物組織培養(yǎng)與花藥培養(yǎng)的比較

項目內(nèi)容菊花組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)理論依據(jù)基本過程外植體的細胞類型操作流程植物細胞的全能性脫分化→再分化體細胞生殖細胞制備培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培選材→消毒→接種和培養(yǎng)→篩選和誘導(dǎo)→移栽→栽培選育第17頁/共59頁第十七頁，共60頁。

項目內(nèi)容菊花組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)影響因素培養(yǎng)結(jié)果生殖方式可育性選材、營養(yǎng)、激素、pH、溫度、陽光等正常植株單倍體植株無性生殖有性生殖可育高度不育,秋水仙素處理后可育第18頁/共59頁第十八頁，共60頁?！靖呖季剧姟繉嶒灢僮髦幸族e的幾個問題(1)材料的選?。壕栈ǖ慕M織培養(yǎng)實驗中，應(yīng)選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝；月季花藥的培養(yǎng)實驗中，應(yīng)選擇花粉發(fā)育過程中的單核靠邊期的花粉進行培養(yǎng)。(2)外植體消毒：所用消毒劑為體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是無菌水。(3)培養(yǎng)過程：在初期，菊花的組織培養(yǎng)需光照，月季花藥的培養(yǎng)不需光照；而在后期均需光照。第19頁/共59頁第十九頁，共60頁?！镜淅?xùn)練1】如圖是月季花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑，請據(jù)圖回答有關(guān)問題：(1)選用的材料合適與否是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素，一般來說選用_______期的花粉可提高成功率。選擇花粉時，一般要通過_______來確定花粉是否處于合適的發(fā)育期，這時需要對花粉的細胞核進行染色，常用的染色劑是____________。第20頁/共59頁第二十頁，共60頁。(2)胚狀體與愈傷組織在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別在于愈傷組織的細胞排列疏松無規(guī)則，是一種高度________的薄壁細胞。胚狀體與__________發(fā)育形成的胚有類似的結(jié)構(gòu)，即具有胚芽、胚軸和胚根。(3)無菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素，請說明下列各項需要消毒，還是需要滅菌。需要滅菌：__________(填編號),需要消毒：___________(填編號)。①培養(yǎng)基，②培養(yǎng)皿，③接種環(huán)，④花蕾，⑤實驗操作者的雙手，⑥三角錐形瓶。

第21頁/共59頁第二十一頁，共60頁。【解題指南】1.考查實質(zhì)：本題以月季花藥離體培養(yǎng)途徑為情境考查植物組織培養(yǎng)的選材、過程及無菌技術(shù)。2.解題關(guān)鍵(1)月季花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑和胚狀體與愈傷組織在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別。(2)植物組織培養(yǎng)過程及其培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。.第22頁/共59頁第二十二頁，共60頁。【解析】(1)并不是任何時期的花粉都可以培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織或胚狀體，只有花粉發(fā)育到一定時期對離體的刺激才最敏感。對大多數(shù)植物而言，單核中期至晚期的花粉最容易形成花粉胚或花粉愈傷組織。在培養(yǎng)花藥之前，通常用醋酸洋紅法制片鏡檢以確定花粉發(fā)育的時期。(2)花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株一般有兩種途徑：①花藥中的花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植株；②花藥中花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再誘導(dǎo)其分化成植株。兩種途徑并無絕對界限，主要取決于培養(yǎng)基中的激素種類及其濃度配比。第23頁/共59頁第二十三頁，共60頁。(3)滅菌是用理化方法殺死環(huán)境中所有的微生物細胞、芽孢和孢子。消毒是殺死物體表面的病原微生物。在微生物培養(yǎng)過程中通常對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、三角錐形瓶進行滅菌處理；對花蕾、實驗操作者的雙手進行消毒處理。答案：(1)單核鏡檢(顯微鏡觀察)醋酸洋紅(2)液泡化合子(3)①②③⑥④⑤第24頁/共59頁第二十四頁，共60頁?！净犹骄俊?1)圖中花藥經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于哪些因素？提示：培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。(2)試管苗移栽到土壤中之前，通常要進行壯苗處理，應(yīng)如何壯苗？提示：將試管苗移栽到經(jīng)消毒過的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時間，等幼苗長壯后再移栽到土壤中。第25頁/共59頁第二十五頁，共60頁。

植物芳香油的提取方法第26頁/共59頁第二十六頁，共60頁。提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法有機溶劑萃取法優(yōu)點局限性簡單易行,便于分離生產(chǎn)成本低,易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能出油率高,易分離水中蒸餾會導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題分離較為困難,出油率相對較低使用的有機溶劑處理不當(dāng)會影響芳香油的質(zhì)量第27頁/共59頁第二十七頁，共60頁。【高考警示鐘】水蒸氣蒸餾三種常用方法的原理相同，但原料位置不同(1)水中蒸餾：原料放于蒸餾容器的水中，水完全浸沒原料。(2)水上蒸餾：容器中水的上方有篩板，原料置于篩板上，水量以沸騰時不浸濕原料為宜。(3)水氣蒸餾：蒸餾容器下方有一排氣孔，連接外源水蒸氣，上方有篩板，上面放原料。三種方法中，水中蒸餾設(shè)備簡單，成本低，易操作，而水上蒸餾和水氣蒸餾時間短，出油率高。第28頁/共59頁第二十八頁，共60頁。【典例訓(xùn)練2】(2011·海南高考)許多植物含有天然香料，如薄荷葉中含有薄荷油。現(xiàn)用薄荷葉提取薄荷油?；卮饐栴}：(1)薄荷油是揮發(fā)性物質(zhì)，提取薄荷油時應(yīng)選用________(鮮、干)薄荷葉作原料，其原因是_______________________。(2)用萃取法提取薄荷油時，采用的溶劑是______________，原理是__________________________。(3)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時，在油水混合物中加入氯化鈉的作用是_______。常用于分離油層和水層的器皿是_______。分離出的油層中加入無水硫酸鈉的作用是_______________，除去固體硫酸鈉的常用方法是_______________。第29頁/共59頁第二十九頁，共60頁?！窘忸}指南】1.知識儲備(1)提取薄荷油的選材要求和依據(jù)；(2)不同方法提取薄荷油的原理、過程。2.解題關(guān)鍵：理解萃取法和水蒸氣蒸餾法在提取薄荷油中的操作細節(jié)?！窘馕觥?1)薄荷油易揮發(fā)，干燥過程中會使薄荷油揮發(fā)掉，因此選擇鮮薄荷葉作為原料。(2)薄荷油易溶于有機溶劑，因此萃取時所選用的溶劑必須是有機溶劑，如酒精或石油醚、乙醚、戊烷等。第30頁/共59頁第三十頁，共60頁。(3)增加鹽的濃度，可使分層更明顯；分離油層和水層的器皿一般選用分液漏斗；無水硫酸鈉是干燥劑，可以用來吸收油層中的水分；除去固體硫酸鈉最簡單的方法是過濾。答案：(1)鮮薄荷油易揮發(fā)，干燥過程中會使薄荷油揮發(fā)掉(2)酒精或石油醚、乙醚、戊烷等薄荷油易溶于有機溶劑(3)增加鹽的濃度，使分層更明顯分液漏斗吸收油層中的水分過濾

第31頁/共59頁第三十一頁，共60頁。DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)1.DNA與蛋白質(zhì)在不同NaCl溶液中溶解度不同2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液溶解規(guī)律DNA溶解析出蛋白質(zhì)部分發(fā)生鹽析沉淀溶解NaCl溶液從2mol/L降低過程中，溶解度逐漸增大第32頁/共59頁第三十二頁，共60頁。2.比較細胞內(nèi)DNA復(fù)制與體外DNA擴增(PCR)項目DNA復(fù)制PCR擴增不同點場所能量酶是否有轉(zhuǎn)錄特點循環(huán)次數(shù)細胞內(nèi)細胞外ATP提供能量不需ATP提供能量解旋酶、DNA聚合酶耐高溫的TaqDNA聚合酶伴有轉(zhuǎn)錄,產(chǎn)生引物無轉(zhuǎn)錄,需加入兩種引物邊解旋邊復(fù)制,半保留復(fù)制體外迅速擴增受生物體自身控制30多次第33頁/共59頁第三十三頁，共60頁。項目DNA復(fù)制PCR擴增不同點緩沖液設(shè)備相同點原料復(fù)制原理模板引物不需要需要人為控制無嚴(yán)格控制溫度變化的溫控設(shè)備四種脫氧核苷酸嚴(yán)格遵循堿基互補配對原則DNA為模板都需要與模板相結(jié)合的引物第34頁/共59頁第三十四頁，共60頁。3.分離DNA、PCR技術(shù)、分離蛋白質(zhì)三者比較分離DNAPCR技術(shù)分離蛋白質(zhì)實驗原理DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精利用DNA熱變性原理體外擴增DNA依據(jù)相對分子質(zhì)量的大小不同來分離蛋白質(zhì)實驗過程選取材料→破碎細胞釋放DNA→除雜→DNA析出與鑒定變性→復(fù)性→延伸樣品處理→凝膠色譜操作實驗結(jié)果獲得較純凈的DNA獲得大量DNA相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離實驗意義為DNA研究打下基礎(chǔ)解決了DNA研究中材料不足的問題為蛋白質(zhì)的研究和利用提供了原材料第35頁/共59頁第三十五頁，共60頁。【高考警示鐘】比較瓊脂糖凝膠電泳和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(1)從載體上看，利用瓊脂糖凝膠作為載體的是瓊脂糖凝膠電泳，利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠作為載體的是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。(2)從依據(jù)上看，利用了分子帶電性質(zhì)差異和分子大小的是瓊脂糖凝膠電泳，僅利用了分子大小的是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。第36頁/共59頁第三十六頁，共60頁。(3)從優(yōu)點上看，瓊脂糖凝膠電泳操作簡單，電泳速度快，樣品不需處理，電泳圖譜清晰，分辨率高，重復(fù)性好；SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳消除了凈電荷對遷移率的影響，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。第37頁/共59頁第三十七頁，共60頁?！净犹骄俊?1)題(1)中變性、復(fù)性、延伸需要的溫度分別是多少？提示：95℃左右、55℃左右、72℃左右。分析：當(dāng)溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈，稱之為變性；當(dāng)溫度下降到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合；當(dāng)溫度上升到72℃左右時，溶液中的四種脫氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈，稱為延伸。第38頁/共59頁第三十八頁，共60頁。(2)PCR一般要經(jīng)過三十多次循環(huán)，從第二輪循環(huán)開始，上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng)，由引物A延伸而成的DNA單鏈作為模板時將如何延伸？提示：與引物B結(jié)合進行DNA子鏈的延伸。分析：當(dāng)引物A延伸而成的單鏈作模板時，此單鏈引物端為5′端，因此與它互補的子鏈應(yīng)從另一端開始合成，即由引物B結(jié)合延伸的子鏈。

第39頁/共59頁第三十九頁，共60頁。1.用多倍體育種的方法培育三倍體無子西瓜，每年都要制種，很麻煩。某活動小組的同學(xué)們想到了利用植物組織培養(yǎng)的方法來解決此難題。請回答與此實驗相關(guān)的問題。(1)此方法依據(jù)的原理是________。選取合適的外植體作為起始材料，并要對外植體進行_______(填“滅菌”或“消毒”)。(2)超凈工作臺是植物組織培養(yǎng)重要的設(shè)備，在使用前可以用________進行消毒，接種前還要用________擦拭工作臺。第40頁/共59頁第四十頁，共60頁。(3)離體的組織和細胞，對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對特殊，需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的一種培養(yǎng)基是________，其主要成分包括：________、________、________。還常常需要添加________。對培養(yǎng)基應(yīng)采用________方法滅菌。需要的環(huán)境條件有適宜的_____________________。(4)如果外植體選取的材料為莖段，插入培養(yǎng)基時應(yīng)注意____。培養(yǎng)一段時間后，會通過_________形成愈傷組織，愈傷組織細胞的特點是_____________。

第41頁/共59頁第四十一頁，共60頁。【解析】(1)根據(jù)題中信息，可以判斷出此方法為植物組織培養(yǎng)，因此依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。選取合適的外植體作為起始材料，并要對外植體進行消毒。(2)超凈工作臺在使用前可以用紫外線進行消毒，接種前還要用70%的酒精擦拭工作臺。(3)離體的組織和細胞培養(yǎng)時，常用的一種培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基，其主要成分包括大量元素、微量元素、有機物，還常常需要添加植物激素。對培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。需要的環(huán)境條件有適宜的溫度、pH、光照。第42頁/共59頁第四十二頁，共60頁。(4)如果外植體選取的材料為莖段，插入培養(yǎng)基時應(yīng)注意方向不能倒插。培養(yǎng)一段時間后，會通過細胞分裂形成愈傷組織，愈傷組織細胞的特點是排列疏松而無規(guī)則。答案：(1)植物細胞的全能性消毒(2)紫外線70%的酒精(3)MS培養(yǎng)基大量元素微量元素有機物植物激素高壓蒸汽滅菌溫度、pH、光照(4)方向不能倒插細胞分裂(脫分化或去分化)排列疏松而無規(guī)則(或高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞)第43頁/共59頁第四十三頁，共60頁。2.生物組織中存在多種有機物，不同的有機物其提取與鑒定方法不盡相同。根據(jù)所學(xué)知識，請回答下列問題：(1)在香料工業(yè)提取的“液體黃金”玫瑰油中，要求不含有任何添加劑或化學(xué)原料，其提取方法主要是________；玫瑰精油的提取需大量原料，通常采用________技術(shù)實現(xiàn)玫瑰的快速繁殖。(2)橘皮精油具有誘人的橘香味，是食品、化妝品和香水配料的優(yōu)質(zhì)原料，具有很高的經(jīng)濟價值，主要通過________法提取。第44頁/共59頁第四十四頁，共60頁。(3)用萃取法提取胡蘿卜素，萃取的效率主要取決于_______，同時還受原料顆粒的大小、含水量等條件的影響；在對新鮮胡蘿卜進行干燥時，要注意控制________，否則會引起胡蘿卜素的分解；提取的胡蘿卜素粗品可通過________法進行鑒定。(4)凝膠色譜法是根據(jù)________________分離蛋白質(zhì)的有效方法，電泳分離法是根據(jù)各種物質(zhì)分子的__________________的不同，使待分離樣品中各分子的遷移速度不同而實現(xiàn)分子分離的。第45頁/共59頁第四十五頁，共60頁?！窘馕觥勘绢}主要考查植物有效成分的提取方法。(1)根據(jù)玫瑰精油的特點，其提取方法一般采用水蒸氣蒸餾法，采用植物組織培養(yǎng)的方法可以達到快速繁殖的目的。(2)橘皮精油的提取一般采用壓榨法。(3)用萃取法提取胡蘿卜素時，萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量，同時受到原料顆粒大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間等條件的影響。在實驗操作中，對胡蘿卜進行干燥時要注意控制溫度和時間，溫度太高、時間太長，胡蘿卜素會分解。提取的胡蘿卜素粗品可通過紙層析法進行鑒定。(4)凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量大的經(jīng)過的路程短，先流出。第46頁/共59頁第四十六頁，共60頁。電泳分離法是根據(jù)各種物質(zhì)的帶電性質(zhì)的差異、分子的大小和形狀的不同，導(dǎo)致其在電場中的遷移速度不同而實現(xiàn)分子的分離。答案：(1)水蒸氣蒸餾法植物組織培養(yǎng)(2)壓榨(3)萃取劑的性質(zhì)和使用量溫度和時間紙層析(4)相對分子質(zhì)量的大小帶電性質(zhì)的差異、分子的大小和形狀第47頁/共59頁第四十七頁，共60頁。3.PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過程，請據(jù)圖分析回答：(1)A過程高溫使DNA變性解旋，對該過程的原理敘述，正確的是_________________。A.該過程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵B.該過程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵C.該過程不需要解旋酶的作用D.該過程與人體細胞的過程完全相同第48頁/共59頁第四十八頁，共60頁。(2)C過程要用到的酶是________。這種酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴增時可以________加入。PCR反應(yīng)除提供酶外，還需要滿足的基本條件有：____________________。(3)如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記，控制“95℃～55℃～72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占__________________。(4)如果模板DNA分子共有a個堿基對，其中含有胞嘧啶m個，則該DNA復(fù)制10次，需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸________個。

第49頁/共59頁第四十九頁，共60頁。(5)PCR中由堿基錯配引起的變異屬于_________。假設(shè)對一個DNA進行擴增，第一次循環(huán)時某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯配，則擴增若干次后檢測所用DNA的擴增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占_____________?！窘馕觥?1)高溫所起的作用類似于解旋酶，使雙鏈DNA變?yōu)閱捂湣?2)C過程為PCR技術(shù)的延伸階段，當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72℃左右時，溶液中的四種脫氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。TaqDNA聚合酶是耐熱的，高溫下不變性，所以一次性加入即可。PCR即為體外DNA復(fù)制，所需條件與體內(nèi)DNA復(fù)制基本相同，都需要模板、原料、能量、酶，只不過為了便第50頁/共59頁第五十頁，共60頁。于控制DNA復(fù)制過程通過設(shè)置高溫解旋代替了解旋酶的作用，省掉了解旋酶作用過程中所需能量的供應(yīng)，同時，加入了與模板鏈相結(jié)合的引物作為子鏈延伸的起點，省掉了切除引物的過程，使PCR過程更簡潔。(3)PCR技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點。經(jīng)過三次循環(huán)，共產(chǎn)生23個DNA分子，其中有2個DNA分子含有15N標(biāo)記。(4)在一個雙鏈DNA分子中，(C+T)占堿基總數(shù)的一半，故T的數(shù)目為a-m，復(fù)制10次，相當(dāng)于新增加了(210-1)個DNA分子，故需補充T的數(shù)目為(210-1)(a-m)。(5)基因中的堿基對改變屬于基因突變。對一個DNA進行擴增，第一次循環(huán)時某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯配，以后按正常配對方式進第51頁/共59頁第五十一頁，共60頁。行擴增，錯配鏈作模板擴增的都是錯誤的DNA分子，原正常鏈擴增得到的DNA分子都是正常的DNA分子，故若干次后檢測所用DNA的擴增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占75%。答案：(1)C(2)TaqDNA聚合酶一次DNA模板，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物，四種脫氧核苷酸，同時通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進行(3)25%(4)(210-1)(a-m)(5)基因突變75%第52頁/共59頁第五十二頁，