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植物細(xì)胞質(zhì)膜透性的測(cè)定一、原理植物細(xì)胞質(zhì)膜:是指植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)外方與細(xì)胞壁緊密相接的一層薄膜。這層膜主要由磷脂和蛋白質(zhì)組成,具有選著透過(guò)性。但是,在各種不良的外環(huán)境下,比如極端溫度、干旱、重金屬離子、大氣污染物質(zhì)等都會(huì)作用于這層膜,使膜受到不同程度的損傷。這種損傷一般表現(xiàn)在膜的透性變大,使細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)外滲,引起外液的電導(dǎo)率增大。所以可以通過(guò)測(cè)定電導(dǎo)率的大小,推斷外條件作用下膜透性變化的大小,間接反映植物細(xì)胞膜的受傷程度。如果植物的抗性強(qiáng),那么其在外條件作用下細(xì)胞膜的受傷害程度就小,膜的透性變化就越小,泡內(nèi)電介質(zhì)外滲就越少,外液的電導(dǎo)率就越小,反之越大。生物膜:除了細(xì)胞質(zhì)膜,還包括核膜、葉綠體膜、線粒體膜等細(xì)胞器的膜,統(tǒng)稱為生物膜。細(xì)胞質(zhì)膜的作用:細(xì)胞質(zhì)膜不僅僅是一種物理界線,還起著屏障作用,維持穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境,有選著地使物質(zhì)進(jìn)入或排除細(xì)胞質(zhì)。胞飲作用,即通過(guò)質(zhì)膜向細(xì)胞內(nèi)凹陷,而吞噬液體的過(guò)程。吞噬作用,即通過(guò)質(zhì)膜向細(xì)胞內(nèi)凹陷,而吞噬固體小顆粒的過(guò)程。擴(kuò)散作用:是指物質(zhì)從高濃度向低濃度自發(fā)移動(dòng)的現(xiàn)象。滲透作用:是指水分子通過(guò)選擇透過(guò)性膜的擴(kuò)散作用。菲克第一定律擴(kuò)散速度與距離為?x的兩點(diǎn)之間不同物質(zhì)的濃度差?JJs:擴(kuò)散速度,也叫轉(zhuǎn)運(yùn)速度、流量密度單位為molDs注意:負(fù)號(hào)表示運(yùn)動(dòng)方向順著濃度梯度方向進(jìn)行的。電導(dǎo)指電阻的倒數(shù),可以用來(lái)表示導(dǎo)體的導(dǎo)電能力。公式如下:G=單位為Ω電阻率是指用來(lái)表示各種物質(zhì)電阻特性的物理量。某種材料制成的長(zhǎng)1米、橫截面積是1平方米(m2)的導(dǎo)線在常溫下(20℃時(shí))的電阻,叫做這種材料的電阻率。公式為:R其中,R:電阻;ρ:電阻率;l:導(dǎo)線的長(zhǎng)度;s:導(dǎo)線的橫截面積電阻率的單位是歐姆·米(Ω?s電導(dǎo)率指電阻率的倒數(shù)。即當(dāng)導(dǎo)線的面積為1m2、長(zhǎng)度為1m時(shí)具有的電導(dǎo)。公式為:κκ:電導(dǎo)率;G:電導(dǎo)摩爾電導(dǎo)率在相距為1m的兩個(gè)平行電極之間,放置含有1mol電解質(zhì)的溶液,這時(shí)溶液所具有的電導(dǎo)稱為摩爾電導(dǎo)率。公式為:ΛΛ:摩爾電導(dǎo)率;κ:電導(dǎo)率;n:電解質(zhì)的物質(zhì)的量;c:溶液中電解質(zhì)的濃度(mol?V:電解質(zhì)溶液的體積(m3)影響電阻率的因素電解質(zhì)溶液的電導(dǎo)率的大小主要取決于兩方面:離子的多少(mol)離子的運(yùn)動(dòng)速度(V)注:溫度:通過(guò)影響離子的運(yùn)動(dòng)速率V來(lái)影響電導(dǎo)率:溫度越大,離子速度V越大,電導(dǎo)率越大。溶液的粘性:粘性大,速度V越小,電導(dǎo)率越小。水化離子半徑:半徑越大,運(yùn)動(dòng)受到的阻力越大,運(yùn)動(dòng)速度越小,電導(dǎo)率越小。離子價(jià)數(shù):離子價(jià)數(shù)越大,運(yùn)動(dòng)速度V越大,電導(dǎo)率越大。電導(dǎo)率與濃度的關(guān)系強(qiáng)電解質(zhì)強(qiáng)電解質(zhì)溶液的電導(dǎo)率隨著濃度的增加,首先是增加,達(dá)到一極大值,然后隨著濃度的增加反而下降。這是因?yàn)殚_始濃度增加時(shí)電解質(zhì)的離子數(shù)數(shù)目增多引起電導(dǎo)率增加,當(dāng)濃度增加到一定程度后,離子間的相互作用增強(qiáng),使離子運(yùn)動(dòng)的速度降低,其電導(dǎo)率反而下降。弱電解質(zhì)弱電解質(zhì)溶液的電導(dǎo)率隨著濃度變化不明顯,因?yàn)闈舛仍黾訒r(shí)弱電解質(zhì)的電離度減少,溶液中起導(dǎo)電作用的粒子數(shù)目變化不大。中性鹽中性鹽由于受飽和溶解度的限制,濃度不能太高。二、儀器電導(dǎo)儀、電子電平、真空泵、干燥器、恒溫培養(yǎng)箱、電子爐、剪刀、燒杯、小鑷子等三、步驟1、清洗所有要用到的玻璃用具,先用洗衣液或是洗衣粉清洗干凈,然后用蒸餾水沖洗3次,干燥后再用。2、如果做的是對(duì)比實(shí)驗(yàn),則采樣時(shí),應(yīng)該采葉齡一樣的、大小一樣的、顏色一樣的、健康不感蟲的葉片。3、采集的樣本葉片要及時(shí)清除掉表面的臟污物,具體操作是:先用自來(lái)水清洗干凈,清洗時(shí)要小心,最好不要刮爛葉片;接著用蒸餾水沖洗3次;最后常溫晾干。4、去除葉片的大葉脈,這是因?yàn)槿~脈是死細(xì)胞,細(xì)胞中已經(jīng)沒(méi)有電解質(zhì);假如用含有葉脈的葉片來(lái)做試驗(yàn),如果做實(shí)驗(yàn)用的處理間的葉片含有的葉脈量一樣,那么試驗(yàn)的結(jié)果還是可靠的、也可比的,但萬(wàn)一處理間的葉片含有的葉脈量不一樣,那么試驗(yàn)的結(jié)果就是不可靠的、不可比的;所以為了可靠性和可比性,最好是不用帶有葉脈的葉片做實(shí)驗(yàn)。5、把葉片剪碎成1m2的碎片,混勻碎片。6、每種處理稱取1-4g放入燒杯中,燒杯要大于50ml但也不要太大,不然不易電導(dǎo)率的測(cè)定,燒杯標(biāo)簽要和處理對(duì)應(yīng)上,不要弄混。7、向燒杯中加入50ml蒸餾水。8、把燒杯放入真空泵中抽氣15-30min,然后緩慢放入空氣。9、取出燒杯,直接測(cè)定電導(dǎo)率。注意:空白對(duì)照必須做,具體操作:在燒杯中加入50ml蒸餾水,但不加入樣品,接著進(jìn)行第8、9步操作。2、如果要計(jì)算相對(duì)于植物細(xì)胞全部電解質(zhì)外滲時(shí)的電導(dǎo)率的相對(duì)值,則要對(duì)相應(yīng)的處理做煮沸處理,具體操作是:稱取同樣重量的樣品,放入燒杯中,加入50ml蒸餾水,稱量此時(shí)的燒杯重量,然后把燒杯置于電爐上加熱至沸騰,沸騰10-15min后停止加熱,待冷卻后,稱量燒杯的重量并用蒸餾水補(bǔ)加到原來(lái)的重量,接著進(jìn)行第8、9步的操作。3、處理對(duì)照,即如果要計(jì)算樣品的不同處理(比如感病植株葉片、轉(zhuǎn)基因植株葉片)相對(duì)于樣品的正常處理(比如健康植株葉片)的相對(duì)電導(dǎo)率,則這里的處理對(duì)照就是正常植株葉片,具體操作:按照上面的1至9步驟進(jìn)行。四、數(shù)據(jù)處理這里包括數(shù)據(jù)的記錄,以及數(shù)據(jù)的一些簡(jiǎn)單計(jì)算處理。數(shù)據(jù)記錄表處理觀測(cè)電導(dǎo)率實(shí)際電導(dǎo)率相對(duì)外滲率(%)空白對(duì)照處理1處理2處理3…………煮沸對(duì)照處理對(duì)照(健康、正常植株)計(jì)算公式實(shí)際電導(dǎo)率實(shí)際電導(dǎo)率=處理的觀測(cè)電導(dǎo)率-空白對(duì)照的觀測(cè)電導(dǎo)率相對(duì)于植物細(xì)胞全部電解質(zhì)外滲時(shí)的電導(dǎo)率的相對(duì)外滲率相對(duì)樣品的不同處理(比如感病植株葉片、轉(zhuǎn)基因植株葉片)相對(duì)于樣品的正常處理(比如健康植株葉片)的相對(duì)外滲率相對(duì)內(nèi)容總結(jié)
(1)植物細(xì)胞質(zhì)膜透性的測(cè)定
一、原理
植物細(xì)胞質(zhì)膜:是指植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)外方與細(xì)胞壁緊密相接的一層薄膜
(2)公式如下:
Js=-Ds?cs?x
Js:
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