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土壤微生物的分離第1頁/共10頁3.1.1土壤樣品:按無菌操作要求有目的地取某一類型的土壤。3.1.2培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,高氏一號培養(yǎng)基,馬鈴薯培養(yǎng)基(上次實驗成果)3.1.3無菌生理鹽水。3.1.4其它物品:無菌培養(yǎng)皿,無菌吸管,洗耳球,無菌玻璃涂棒,無菌報紙,藥勺,10%酚溶液。3材料與方法3.1實驗器材第2頁/共10頁3.2方法(A.稀釋涂布平板法)各管4.5mL無菌水依次0.5mL,注意更換槍尖10-4、10-5、10-6;各平板0.1mL3.2.1制備土壤稀釋液振蕩20min三角燒瓶中為什么要加玻璃珠?取土壤過程中怎樣減少雜菌污染?第3頁/共10頁3.2.2倒平板將培養(yǎng)基加熱熔化,冷至55-60℃,(在高氏1號培養(yǎng)基中加入10%酚數(shù)滴),(在馬鈴薯培養(yǎng)基中加入鏈霉素溶液至終濃度為30ug/mL,)混勻后倒入平板。
(操作方法,教師示范)每平板12mL第4頁/共10頁3.2.3涂布標記濃度取菌液0.1mL玻璃涂棒滅菌涂布靜置5-10min第5頁/共10頁3.2.3培養(yǎng)細菌霉菌放線菌28℃培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)24-48h倒置培養(yǎng)3-5天3.2.4平板菌落計數(shù)選取平板上長有50-200個菌落的稀釋度計算每毫升的含菌量,同一稀釋度的三個重復平板上菌落數(shù)應(yīng)相差不大,且不同稀釋度計算的數(shù)據(jù)也不應(yīng)相差太大。第6頁/共10頁第7頁/共10頁3.2方法(B.稀釋倒平板法)取樣(0.1mL)倒平板(45℃,12mL,旋動)教師示范倒置培養(yǎng)第8頁/共10頁3.2方法(C.平板劃線分離法)倒平板劃線(教師
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