實驗?zāi)?/p>

1、經(jīng)過對小白鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞活動觀察，加深了解細胞吞噬作用過程及其意義。2、掌握小鼠腹腔注射給藥和頸椎脫臼處死方法。觀察機體非特異性免疫現(xiàn)象。3．熟悉細胞吞噬作用基本過程小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第1頁實驗原理細胞吞噬作用原來是單細胞動物攝取營養(yǎng)物質(zhì)方式，也是原始防御作用。伴隨動物界進化，在高等動物中，則發(fā)展生成大小兩類吞噬細胞(即巨噬細胞和嗜中性粒細胞)，專司吞噬作用，成為非特異免疫功效主要組成部分。小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第2頁

巨噬細胞由骨髓干細胞分化生成，然后進入血液抵達各組織內(nèi)，并深入分化為各種巨噬細胞。當(dāng)病原微生物或其它異物侵入機體時，能招引巨噬細胞，而巨噬細胞又有趨化性，能響應(yīng)招引因子招引，產(chǎn)生活躍變形運動，主動向病原體和異物移行，在接觸到病原體或異物時，即‘伸出偽足，將之包圍并內(nèi)吞人胞質(zhì)，形成吞噬體，繼而細胞質(zhì)中初級溶酶體與吞噬泡發(fā)生融合，形成吞噬性溶酶體，經(jīng)過其中水解酶等作用下，將病原體殺死，消化分解，最終將不能消化殘渣排出細胞外。小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第3頁

在機體免疫過程中，巨噬細胞負擔(dān)著噬菌、殺菌、去除體內(nèi)被損傷和衰老細胞，以及傳遞抗原信息，巨噬細胞將捕捉抗原進行加工處理后，把降解抗原信息傳遞給T、B淋巴細胞。巨噬細胞又是天然殺傷細胞（NKCell)激活劑，而且對B淋巴細胞激活、增殖和分化含有調(diào)整作用。小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第4頁【試驗用具】1．材料：小白鼠、1%雞紅細胞懸液2．試劑：6%淀粉肉湯（含臺盼藍），0.9%生理鹽水3．儀器設(shè)備：顯微鏡、注射器、注射針頭、吸管、試管架、解剖刀、解剖鑷、載玻片、蓋玻片、記號筆小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第5頁

實驗方法

1、在試驗前一天，給小白鼠腹腔注射5％雞紅細胞lml/只。注射時，先用右手抓住鼠尾提起，放在試驗臺上，用左手拇指和食指抓住小鼠兩耳和頭頸皮膚，將鼠體置于左手心中，把后肢拉直，用左手無名指和小指按住尾巴與后肢，前肢可用中指固定，即可在腹部后l／2處一側(cè)注射。進針勿過深，不然易損害肝及血管等，造成出血致死。腹腔注射1％雞紅細胞懸液lml，輕按小白鼠腹部，使懸液分散。小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第6頁2、約20分鐘后，用頸椎脫臼法處死小鼠(右手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指與食指同時向下按住鼠頭，使脊髓與腦髓間斷開致鼠死亡)。

3、將小鼠置于解剖盤中，剪開腹部，把內(nèi)臟推向一側(cè)，用不裝針頭注射器或吸管吸收腹腔液。4、每人取一張潔凈載玻片，滴一滴腹腔液，蓋上蓋玻片，置顯微鏡下觀察。

小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第7頁5、吸收腹腔液與Hank’s液1：1混合，而且滴數(shù)滴于載玻片上，37OC溫育30分鐘。6、玻片取出，用生理鹽水沖洗，吹干，甲醇固定5分鐘。7、Gimasa染液染色，干燥后油鏡觀察。小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第8頁【試驗結(jié)果】在高倍鏡下可見有許多較大圓形和形狀不規(guī)則巨噬細胞，因未染色細胞核不易見到，其胞質(zhì)中含有數(shù)量不等蘭色圓形小顆粒（即吞入含臺盼蘭淀粉肉湯所形成）；還可見少許黃色橢圓形有顯著細胞核雞紅細胞，慢慢移動玻片標(biāo)本，仔細觀察視野中巨噬細胞表面，有紅細胞已部分被吞入；有巨噬細胞內(nèi)已吞入了一個或多個紅細胞形成吞噬泡。小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第9頁

巨噬細胞吞噬試驗示教照片

雞紅細胞巨噬細胞吞噬雞紅細胞后巨噬細胞

吞噬雞紅細胞后巨噬細胞

小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第10頁小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第11頁小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察專家講座第12頁【試