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文檔簡介

免疫學實驗T淋巴細胞亞群檢測1T淋巴細胞亞群分類方式？

檢測T淋巴細胞亞群的臨床意義？T淋巴細胞亞群的檢測方法？思考2淋巴細胞類別及其亞類3淋巴細胞類別及其亞類4

檢測T淋巴細胞亞群的臨床意義病毒感染腫瘤患者自身免疫性疾病免疫缺陷病5

T淋巴細胞亞群的檢測方法？免疫熒光法免疫酶標法PAP法

APAAP法

ABC法免疫金銀法SPA花環(huán)形成法6

用堿性磷酸酶代替HRP建立的堿性磷酸酶(AP)-抗堿性磷酶(AAP)法，簡稱APAAP法。+++底物二抗/Ab2Ag兔源APAAP復合物AgAgAgAg-Ab1-Ab2-APAAP復合物APAAP法檢測T淋巴細胞亞群7APAAP復合物+++底物二抗/Ab2Ag兔源APAAP復合物AgAgAgAg-Ab1-Ab2-APAAP復合物APAAP法檢測T淋巴細胞亞群2個鼠抗人AP抗體+3個AP=APAAP鼠抗人的AP抗體AP8

APAAP法原理：++底物二抗/Ab2兔源一抗/Ab1AgAgAgAg鼠抗人的CD3、CD4和CD8單克隆抗體

羊抗鼠IgG抗體底物9

方法：1制備血涂片，干燥過夜，圈出要檢測的視野范

圍，滴加固定液一滴，1～2min后，PBS沖洗3

次，最后一次干燥。2

滴加一抗10～15μL，放入濕盒20～30min，

PBS沖洗3次，最后一次干燥。3

滴加羊抗鼠二抗10～15μL，放入濕盒20～30minPBS沖洗3次，最后一次干燥。

停留1min倒掉10

方法：4

滴加APAAP復合物10～15μL，放入濕盒20

～30min，PBS沖洗3次，最后一次干燥。5

滴加底物液20～40μL，放入濕盒20～30minPBS沖洗3次，最后一次干燥。6

滴加蘇木素復染液一滴復染1～2min，自來水沖洗，干燥。7油鏡觀察。

11

實驗結果：觀察T淋巴細胞亞群檢測實驗結果，并繪圖陽性細胞，胞漿藍色胞膜紅色，陰性細胞胞漿藍色胞膜無色。陽性細胞陽性細胞12

實驗結果：正常值：CD3+T細胞70-90%CD4+T細胞40-60%CD8+T細胞20-35%CD4+T細胞/CD8+T細胞1.5～2

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