實(shí)驗(yàn)十、醋酸纖維薄膜電泳－－

血清蛋白分析和

人體動(dòng)脈血壓的測(cè)定一、目的和要求

１、了解電泳的原理，掌握醋酸纖維薄膜電泳的操作２、學(xué)習(xí)動(dòng)脈血壓的原理，測(cè)定收縮壓與舒張壓二、實(shí)驗(yàn)原理

（一）電泳

在外界電場(chǎng)的作用下，生物大分子從電極一側(cè)向另一側(cè)移動(dòng)的現(xiàn)象1、蛋白質(zhì)

由氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成2、等電點(diǎn)(isoelectricpoint,pI)在一定的pH條件下，當(dāng)其正、負(fù)電荷數(shù)相等時(shí)，整體便失去了所有電荷，這時(shí)的pH稱為等電點(diǎn)（pI）。氨基酸在等電點(diǎn)時(shí)電泳移動(dòng)速度為零在堿性環(huán)境中，蛋白分子負(fù)電陽(yáng)極在酸性環(huán)境中，蛋白分子正電陰極3、醋酸纖維素薄膜(CelluloseAcetateMembranes)采用醋酸纖維素為支持物的電泳方法叫醋酸纖維薄膜電泳，具有很高的流速和熱穩(wěn)定性以及非常低的吸附，將其溶于丙酮等有機(jī)溶劑中，即可涂布成均一細(xì)密的微孔薄膜4、血清蛋白電泳

將抽取的血液置入不加抗凝劑的試管中，使血凝固后，析出的上清液就是血清。血清中主要含白蛋白、球蛋白。血清蛋白電泳是一種臨床化驗(yàn)檢查項(xiàng)目。由于蛋白的絕大部分均由肝臟合成，所以，各種蛋白質(zhì)的質(zhì)與量的變化，除與免疫性疾病等有關(guān)外，主要反映肝臟的生理、病理情況血清中各種蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)均低于pH7.0，在pH8.6的緩沖液中帶負(fù)電，向正極移動(dòng)，分子小且?guī)щ姾啥嗾?，則移動(dòng)速度較快pI%球蛋白6.86~7.312~20球蛋白5.126.5~122球蛋白5.064~91球蛋白5.062~5清蛋白4.6457~72（二）血壓測(cè)定1、血壓

是指血管內(nèi)的血液對(duì)于單位面積血管壁的側(cè)壓，目前采用千帕(KPa)為單位。以前采用mmHg表示。收縮壓：收縮期動(dòng)脈血壓的最高值(高壓)舒張壓：舒張期動(dòng)脈血壓的最低值(低壓)

2、血壓測(cè)定方法此次實(shí)驗(yàn)采用Korotkoff氏聽(tīng)診法正常的收縮壓/舒張壓(mmHg)收縮壓:<130mmHg舒張壓:<85mmHg無(wú)光澤面座位號(hào)1.50.5三、實(shí)驗(yàn)方法（一）電泳1、薄膜的使用

在毛（無(wú)光澤）面劃線，并寫上座位號(hào)（如右圖）2、浸潤(rùn)3、點(diǎn)樣

（毛細(xì)管，一根，放回）4、電泳

點(diǎn)樣面朝下點(diǎn)樣端置于負(fù)極5、染色

染色10min6、漂洗脫色各5min（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）最后，水洗（二）側(cè)血壓1、血壓計(jì)的構(gòu)造：減壓計(jì)、袖帶、氣球2、安靜時(shí)收縮壓/舒張壓（120/80mmHg）3、運(yùn)動(dòng)后的收縮壓/舒張壓四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、將電泳后