千里之行，始于足下。第2頁/共2頁精品文檔推薦植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)題(標(biāo)準(zhǔn))植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)題

一、填空題：

1.植物脫病毒普通采納莖尖培養(yǎng)脫毒和熱處理兩種辦法。

2.最典型的培養(yǎng)基是1962年發(fā)表的的一種適合于煙草愈傷組織快速生長的改良培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基后來被稱為MS培養(yǎng)基，現(xiàn)已廣泛用于植物組織培養(yǎng)。

3.胚狀體發(fā)育順次通過原胚期、球形胚期、心形胚期、魚雷形胚期和子葉期。

4.具有防止褐變作用的維生素是Vc。

5.植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)對(duì)象分為愈傷組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、胚培養(yǎng)、細(xì)胞和原生質(zhì)體培

養(yǎng)等幾種類型。

6.在經(jīng)過微莖尖培養(yǎng)脫毒時(shí)，外植體的大小應(yīng)以成苗率和脫毒率綜合確定，普通以0.3～0.5mm、帶1～3個(gè)葉原基為好。

7.對(duì)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基滅菌時(shí)，普通事情采納的條件是121溫度，保持時(shí)刻是15～

20分鐘。

8.在幼胚培養(yǎng)基中，蔗糖的要緊作用是維持滲透壓、提供碳源和能源和防止幼胚早熟萌

發(fā)。

9.植物組織培養(yǎng)中，微量元素鐵的用量較大，由于在較高pH下，易形成Fe(OH)3沉淀，難以被汲取，因此多用硫酸亞鐵（FeSO4·7H20）和乙二胺四乙酸（Na2-EDTA）形成的螯合物，同時(shí)單獨(dú)配制。

10.種質(zhì)保存大致分為原地保存和異地保寸兩種方式。

11.外植體挑選的原則是：挑選優(yōu)良的種質(zhì)、挑選茁壯的植株、挑選最適階段、選取適宜

的大小。

12.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的辦法有成批培養(yǎng)和延續(xù)培養(yǎng)等。

13.植物原生質(zhì)體分離的辦法有酶解法和機(jī)械法。

14.植板率是指已形成細(xì)胞團(tuán)的單細(xì)胞與接種總細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)。

15.花粉分離的辦法有擠壓法、磁攪拌法、飄蕩釋放法。

16.植物組織培養(yǎng)進(jìn)展可分為三個(gè)階段：萌芽時(shí)期、奠基時(shí)期、快速進(jìn)展和應(yīng)用時(shí)期。

17.一具年產(chǎn)4-20萬株苗的商業(yè)性組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室，其總面積別應(yīng)少于60平方米，可劃

分為預(yù)備室、緩沖室、無菌操作室和培養(yǎng)室。

18.鹽酸硫胺素VB1是脫羧酶輔酶，吡哆醛VB6是轉(zhuǎn)氨酶輔酶。

19.愈傷組織形成大致記憶三個(gè)階段，即：誘導(dǎo)期、分裂期、分化期。

種類型。

21.離體葉組織的莖和芽發(fā)生途徑有：直截了當(dāng)產(chǎn)生別定芽、由愈傷組織產(chǎn)生別定芽、胚狀體形成、其它途徑。

23.單細(xì)胞培養(yǎng)辦法有看護(hù)培養(yǎng)法、微室培養(yǎng)法和平板培養(yǎng)法。

24.原生質(zhì)體純化的辦法有：離心沉淀法、飄蕩法、界面法。

25.試管苗的增殖率是指植物快速生殖中間生殖體的生殖率。

26.低溫保存是基本特征是保存材料的定期繼代培養(yǎng)，別斷生殖更新。

27.快速冷凍法的關(guān)鍵是使細(xì)胞內(nèi)的水分迅速越過冰晶生長的驚險(xiǎn)溫度區(qū)，檢測(cè)冷凍保存后的細(xì)胞和器官活力的最基本辦法是再培養(yǎng)法

28.莖尖培養(yǎng)的辦法有固體培養(yǎng)法和紙橋培養(yǎng)法

29.莖段培養(yǎng)是指對(duì)別帶芽和帶有腋（側(cè)）或葉柄的莖切段舉行離體培養(yǎng)的技術(shù)。

30.帶芽莖段培養(yǎng)也許獲得：?jiǎn)蚊纾ㄑ浚?、叢生苗（芽）、完整植株、愈傷組織。

二、名詞解釋：

1.半延續(xù)培養(yǎng)：是指每隔一定時(shí)刻后倒出一定量的懸浮液，并并且補(bǔ)充加入等量的新奇培養(yǎng)液，這相當(dāng)于成批培養(yǎng)時(shí)頻繁地舉行再培養(yǎng)，半延續(xù)培養(yǎng)能重復(fù)地取得大量、均一的培養(yǎng)細(xì)胞，供生物研究之用。

2.玻璃化：偶然的事情下，培養(yǎng)的植物會(huì)生長出腫脹的、扭曲的葉片，這種葉片別可逆的變成半透明狀并最后壞死。這種事情下會(huì)導(dǎo)致苗的死亡。這一現(xiàn)象稱之為玻璃化。

3.人工種子：是指植物離體培養(yǎng)中產(chǎn)生的胚壯體或別定芽，被包裹于含有養(yǎng)分和愛護(hù)功能的人工胚乳和人工種皮中從而形成的能發(fā)芽出苗的顆粒體。

4.體細(xì)胞胚：是指二倍體或單倍體的體細(xì)胞在特定條件下，未經(jīng)性細(xì)胞融合而經(jīng)過與合子胚發(fā)生類似的途徑發(fā)育出新個(gè)體的形態(tài)發(fā)生過程。經(jīng)體胚發(fā)生形成類似合子胚的結(jié)構(gòu)稱為體細(xì)胞胚。

5.體細(xì)胞雜交：分離下來的別同親本的原生質(zhì)體，在人工操縱條件下，像性細(xì)胞受精一樣互相融合成一體。

6.植板率：植板率是指已形成細(xì)胞團(tuán)的單細(xì)胞與接種總細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)。

7.無病毒苗：是指別含該植物的要緊危害病毒，即經(jīng)檢測(cè)要緊病毒在植物體內(nèi)的存在表現(xiàn)陰性反應(yīng)的苗木。

8.植物細(xì)胞全能性：植物體的每一具細(xì)胞都攜帶有一套完整的基因組，并具有發(fā)育成為完整植株的潛在能力。

象稱為脫分化。

10.指示植物：是指對(duì)病毒反應(yīng)敏感、癥狀特征顯著的植物。

11.植物組織培養(yǎng)：指植物的離體器官、組織、細(xì)胞以及去除細(xì)胞壁的原生質(zhì)體，放在離體無菌條件下，在人工操縱環(huán)境條件下，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上對(duì)其舉行克隆，使其生長、分化并成長為完整植株的過程。

12.愈傷組織：是指植物受傷后的傷口或在植物組織培養(yǎng)中切口處產(chǎn)生的一團(tuán)別定行的薄壁組織。

13.母液：欲配培養(yǎng)液的濃縮液，也稱儲(chǔ)備液。

14.外植體：是指植物組織培養(yǎng)中的各種接種材料。

15.植物器官培養(yǎng)：要緊是指植物的根、莖、葉、花器和幼小果實(shí)的無菌培養(yǎng)。

16.胚培養(yǎng)：是指采納人工辦法把胚從種子、子房或胚珠分離出來，再放在離體無菌條件下，讓其進(jìn)一步生長發(fā)育，以至形成幼苗的過程。

17.延續(xù)培養(yǎng)：是指在培養(yǎng)過程中，以別斷抽取懸浮培養(yǎng)物并注入等量新奇培養(yǎng)基，使培養(yǎng)物別斷得到養(yǎng)分補(bǔ)充，保持其恒定體積的培養(yǎng)。

三、挑選題:

1.植物組織培養(yǎng)室適宜濕度是（C）

A.50-60%

B.60-70%

C.70-80%

D.80-90%

2.有關(guān)無菌短枝扦插講法錯(cuò)誤的是（C）

A.又稱微型扦插

B.形成小灌木叢結(jié)構(gòu)

C.通過脫分化產(chǎn)生

D.利用細(xì)胞分裂素抑制頂端優(yōu)勢(shì)

3.組織培養(yǎng)適宜的花粉發(fā)育是（A）

A.單核期

B.雙核期

C.三核期

D.任何階段

4.下列材料遺傳上最穩(wěn)定的是（A）

A.莖尖分生組織

B.別定芽

C.體細(xì)胞胚

D.愈傷組織

5.有關(guān)試管苗生態(tài)系統(tǒng)特點(diǎn)講法錯(cuò)誤的是（D）

A.高溫

B.高濕

C.無菌

D.強(qiáng)光

6.下列有關(guān)生根培養(yǎng)基特點(diǎn)講法錯(cuò)誤的有（C）

A.低鹽培養(yǎng)基

B.低糖培養(yǎng)基

C.含細(xì)胞分裂素培養(yǎng)基

D.含活性炭培養(yǎng)基

7.N6培養(yǎng)基適合（B）

A.番茄根尖

B.禾谷類花藥

C.大豆組織

D.木本植物

A.NaOH

B.HCl

C.NaCl

D.95%乙醇

9.下列別能作消毒劑舉行外植體消毒時(shí)（D）

A．升汞B．次氯酸鈉C．過氧化氫D．甲醛

10.下列培養(yǎng)基中無機(jī)鹽的濃度最低的是（C）

A．MS培養(yǎng)基B．B5培養(yǎng)基C．White培養(yǎng)基D．N6培養(yǎng)基

11.下列有關(guān)生長素講法錯(cuò)誤的（D）

A.誘導(dǎo)愈傷組織形成

B.體細(xì)胞胚的產(chǎn)生

C.試管苗生根

D.促進(jìn)莖增粗

12.有關(guān)細(xì)胞分裂素講法錯(cuò)誤的是（B）

A.促進(jìn)細(xì)胞分裂與分化

B.促進(jìn)細(xì)胞脫分化

C.促進(jìn)側(cè)芽生長

D.增強(qiáng)蛋白質(zhì)合成

13.植物組織培養(yǎng)第二個(gè)突破是（A）

A.胡蘿卜髓細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株

B.酶法分離原生質(zhì)體成功

C.蘭花產(chǎn)業(yè)化

D.花藥培養(yǎng)獲得再生植株

14.植物組織培養(yǎng)室適宜濕度是（C）

A.50-60%

B.60-70%

C.70-80%

D.80-90%

15.6-BA是指（A）

A、芐基腺嘌呤

B、高興素

C、萘乙酸

D、吲哚乙酸

16.N6培養(yǎng)基適合（B）

A、番茄根尖

B、禾谷類花藥

C、大豆組織

D、木本植物

四、推斷題：

1.胚培養(yǎng)能夠解救XXX敗育胚（√）

2.培養(yǎng)基中加入活性炭是為了向植物提供碳源。（×）

3.胚壯體微管組織的分布是獨(dú)立的“Y”形。（√）

4.葉片接種是將背葉面朝下放置。（×）

5.珠心胚為單性繁殖的一種。（√）

6.花粉植物細(xì)胞均為單倍體。（×）

7.條件培養(yǎng)基是針對(duì)性加入某種營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。（×）

8.原生質(zhì)體培養(yǎng)必須加滲透壓穩(wěn)定劑。（√）

9.愈傷組織培養(yǎng)能夠達(dá)到脫毒效果。（√）

10.植物組織培養(yǎng)能夠用食糖代替蔗糖。（√）

12.葉片接種是將背葉面朝下放置。（√）

13.條件培養(yǎng)基是針對(duì)性加入某種營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。（×）

14.原生質(zhì)體培養(yǎng)必須加滲透壓穩(wěn)定劑。（√）

15.植物組織培養(yǎng)能夠用食糖代替蔗糖。（√）

五、簡(jiǎn)答題：

1.植物組織培養(yǎng)的三大難題是啥，并加以解釋。

答：植物組織培養(yǎng)的三大難題是污染、褐變、玻璃化。

污染是指在組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料滋生雜菌，導(dǎo)致培養(yǎng)失敗的現(xiàn)象。

褐變是指外植體在培養(yǎng)過程中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活，使細(xì)胞里的酚類物質(zhì)氧化成棕褐XXX的醌類物質(zhì)，這種致死性的褐化物別但向外擴(kuò)散致使培養(yǎng)基逐漸變成褐XXX，而且會(huì)抑制其他酶的活性，嚴(yán)峻妨礙外植體的脫分化和器官分化，最終變褐而死亡的現(xiàn)象。

玻璃化是指培養(yǎng)的植物會(huì)生長出腫脹、扭曲的葉片，這種葉片別可逆地變成半透明狀并最后壞死，這種事情下會(huì)導(dǎo)致苗的死亡。

2.為啥幼胚比成熟胚培養(yǎng)要求的培養(yǎng)基成分復(fù)雜？

答：因?yàn)橛着呤钱愷B(yǎng)型，處于這一階段的幼小胚徹底依靠和汲取身邊組織的有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)，而成熟胚則為自養(yǎng)型，這一階段胚能汲取培養(yǎng)基中的無機(jī)鹽和糖，通過自身代謝作用合成所必須的物質(zhì)，因此在舉行胚培養(yǎng)時(shí)，幼胚比成熟胚培養(yǎng)要求的培養(yǎng)基成分復(fù)雜。

3.培養(yǎng)基、培養(yǎng)器皿和植物材料通常怎么樣滅菌?

答：培養(yǎng)基普通采納濕熱滅菌，假如培養(yǎng)基中的有點(diǎn)成分高溫易分解，則可采納過濾滅菌。培養(yǎng)器皿可采納濕熱滅菌或干熱滅菌。

植物材料普通采納藥劑浸泡滅菌，具體操作如下：

（1）外植體的預(yù)處理，對(duì)植物組織舉行修整，去掉別需要的部分，并將外植體用流水沖洗潔凈。

（2）用70%的酒精浸潤材料30s左右。

（3）用滅菌劑浸泡滅菌，滅菌時(shí)別時(shí)攪動(dòng)，使植物材料與滅菌劑有良好的接觸，若滅菌過程中加入數(shù)滴吐溫，則滅菌效果更好。

（4）植物材料用無菌水沖洗3--5次，以除去滅菌劑。

4.啥是看護(hù)培養(yǎng)?其具體的辦法是啥？

答：看護(hù)培養(yǎng)指用一塊生長活躍的愈傷組織來看護(hù)單個(gè)細(xì)胞或其他培養(yǎng)物，使其生長和增殖的辦法。

具體辦法：1、將生長活躍的愈傷組織放入滅過菌的固體培養(yǎng)基上，并在愈傷組織上放一片無菌濾紙片。2、將該愈傷培養(yǎng)過夜。3、將單細(xì)胞或其他培養(yǎng)物放于濾紙片上面，移入培養(yǎng)室培養(yǎng)。

5.外植體成苗途徑有哪些？

第一種，外植體先形成愈傷組織，然后再分化成完整植株。

第二種，在組織培養(yǎng)中再生植株可經(jīng)過與合子胚相似的胚胎發(fā)生過程，即形成胚狀體，再發(fā)育成完整植株。

第三種，外植體經(jīng)誘導(dǎo)后直截了當(dāng)形成根與芽，發(fā)育成完整的植株。

6.比較初代培養(yǎng)與繼代培養(yǎng)。

初代培養(yǎng)：是將外植體舉行的第一次培養(yǎng)。

繼代培養(yǎng)：組織培養(yǎng)中外植體或培養(yǎng)物培養(yǎng)一段時(shí)刻后，為了防止培養(yǎng)的細(xì)胞老化，或培養(yǎng)基中養(yǎng)分利用完而造成營養(yǎng)別良及代謝物過多積存而產(chǎn)生毒害的妨礙，要及時(shí)將其轉(zhuǎn)接到新奇培養(yǎng)基中接著舉行培養(yǎng)，以使其可以順利地增殖、生長、分化，長成完整的植株。

7.莖尖微繁過程普通包括哪五個(gè)時(shí)期？

無菌培養(yǎng)體系的建立，芽的增殖，中間生殖體的增殖，壯苗和生根，試管苗的移植。

8.葉組織消毒的普通辦法是啥？

取植物的幼嫩葉片，用流水沖洗后，用蘸有少量75%酒精的紗布擦拭葉片兩面后，放入0.1%升汞溶液中消毒5-8分鐘，再用無菌水沖3-4次，?消毒后的葉片轉(zhuǎn)入到鋪有濾紙的無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，用解剖刀切成5mm×5mm左右的小塊。

9.妨礙試管苗移栽成活率的因素有哪些？

試管苗的生理狀況，植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，無機(jī)鹽濃度，活性炭，環(huán)境因子，移栽過程中讓試管苗從無菌向有菌逐漸過渡。

六、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及咨詢答題：

1.配制1升培養(yǎng)基，配方為MS+0.05mg/LNAA+0.1mg/L6-BA+

2.5%蔗糖+0.6%瓊脂。MS母液的濃度分不是：大量元素20倍，微量元素500倍，鐵鹽100倍，有機(jī)物50倍，0.1mg/mLNAA和0.1mg/mL6-BA。請(qǐng)敘述該培養(yǎng)基的配制過程（包括計(jì)算過程）。

答：大量元素：1000/20=50ml

微量元素:1000/500=2ml

鐵鹽:1000/100=10ml

有機(jī)物:1000/50=20ml

6-BA：0.1mg/L×1Ｌ/1mg/ml=0.1ml

NAA：0.05mg/L×1Ｌ/1mg/ml=0.05ml

糖:1000×2.5%=25g

瓊脂：6g

預(yù)備好需要的各種器物并放于指定位置，稱量好瓊脂、蔗糖，預(yù)備好蒸餾水，溶化瓊脂、蔗糖。按要求量取或吸取各種上面算得的母液，加入到適量的蒸餾水中，混合后倒入溶化的瓊脂中，定容至需要的體積，最終調(diào)節(jié)PH值約6.0左右。

2.某地區(qū)的一種馬鈴薯經(jīng)多年的種植后，植株變的矮小，產(chǎn)量和品質(zhì)都下落，請(qǐng)你用所學(xué)的組培知識(shí)分析緣故，并設(shè)計(jì)一具解決方案。