長風破浪會有時，直掛云帆濟滄海。住在富人區(qū)的她2023年沖刺-生物技術期末復習-基因工程原理（生物技術）歷年高頻考試題庫答案（圖片大小可自由調(diào)整）全文為Word可編輯，若為PDF皆為盜版，請謹慎購買！卷I一.綜合考核題庫(共25題)1.什么是動物乳腺生物反應器？2.下列哪一項不是質粒作載體使用時必須具備的條件A、分子量小B、高拷貝數(shù)C、增強子D、MCS3.Southern印跡是用DNA探針檢測DNA片段，而Northern印跡則是A、用RNA探針檢測RNA片段B、用DNA探針檢測RNA片段C、用DNA探針檢測蛋白質片段D、用RNA探針檢測DNA片段4.用同一種酶切割載體和外源DNA得到黏性末端后，為防止它們自身環(huán)化，要用CIP將它們脫磷酸。5.X-gal顯色反應的基本原理是使載體上與受體互補的α肽失活。6.在利用LacZ失活的顯色反應篩選法中，IPTG的作用是A、誘導宿主的ω肽的合成B、作為酶的作用底物C、作為顯色反應的指示劑D、誘導宿主的α肽的合成7.基因克隆中低拷貝數(shù)的質粒載體是不起作用的。8.PCR反應中Taq酶常常沒有錯配堿基糾錯功能，因為它沒有A、5’－3’聚合酶活性B、5’－3’外切酶活性C、3’－5’外切酶活性D、3’－5’聚合酶活性9.下列是構建基因組文庫的常用載體，哪一種載體需要用的受體細胞和其余三種不一樣A、柯斯質粒B、YACC、BACD、噬菌體10._________的使用，使基因操作技術有了突破性的飛躍，成為2011年的Nature年度技術。11.用同一種酶切割載體和目的基因后進行連接，連接產(chǎn)物會含大量自身環(huán)化載體，采用下列哪種酶處理，可防止自身環(huán)化A、核酸外切酶B、核苷酸激酶C、末端轉移酶D、堿性磷酸酶12.在_________的作用下，含目的基因的DNA片斷與克隆載體連接成為重組DNA分子。13.下列哪種酶的發(fā)現(xiàn)對于PCR的應用有里程碑的意義A、PwoDNA聚合酶B、Taq聚合酶C、PfuDNA聚合酶D、VentDNA聚合酶14.請寫出基因工程的基本操作順序？15.既能在E．coli又能在S．cerevisiae中自我復制的載體DNA稱為_________。16.下列哪一種限制性核酸內(nèi)切酶是單功能酶A、I型B、II型C、III型D、IV型17.接合質粒18.單個細胞中所含有的質粒DNA分子數(shù)目即為質粒的_________。19.在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'含有一個6bp的Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶的識別序列，該位點的序列可能是什么？20.作為PUC系列載體抗性篩選標記的是A、卡那霉素B、四環(huán)素C、氨芐青霉素D、氯霉素21.miRNA的檢測方法A、Northern印跡雜交B、基因芯片C、qRT-PCR技D、原位雜交22.為什么大腸桿菌表達系統(tǒng)是目前使用最為廣泛的原核表達系統(tǒng)？23.第一個成功地用于基因工程的大腸桿菌質粒是pBR322質粒。24.作為載體需要具備哪些功能？25.II型限制酶識別位點一般長度為______個核苷酸對。卷II一.綜合考核題庫(共25題)1.說明SangerDNA測序法的原理。2.用EcoRI和HindⅢ分別切割同一來源的染色體DNA，并進行克隆，在前者的克隆中篩選到A基因，但在后者的克隆中未篩選到A基因，請說明原因。3.末端脫氧核苷酸轉移酶在基因工程的操作中主要是防止載體自連。4.Northern印跡雜交可用于檢測：A、目的基因在轉錄水平上的變化B、目的基因在翻譯水平上的變化C、染色體是否異常D、目的基因在復制水平上的變化5.人類基因組是指人體DNA分子所攜帶的全部遺傳信息。人類基因組計劃就是分析測定人類基因組的核苷酸序列。其主要內(nèi)容包括繪制人類基因的遺傳圖、物理圖、序列圖和轉錄圖?？茖W家應對多少染色體進行分析A、46條B、24條C、23條D、22條6.如果知道某一基因的功能及其相應的蛋白質的氨基酸序列組成，可以通過何種方法克隆該基因？7.YAC的最大容載能力是_______。8.影響連接反應的因素有A、DNA末端的形式B、DNA分子濃度的影響C、連接反應溫度與時間的影響D、連接緩沖液的影響E、酶濃度的影響9.AIDS是由哪種病毒引起的全身性傳染疾病A、AVB、AAVC、HIVD、HSV10._________是指利用基因工程原理和技術，將感興趣的基因在植物中表達并實現(xiàn)穩(wěn)定遺傳。11.什么是生物制藥？12.獲得DNA重組體后，還需進一步鑒定，可采用的方法有A、DNA序列測定B、PCR鑒定C、酶切鑒定D、表達產(chǎn)物的鑒定E、進行定點突變13.不是基因工程載體中的報告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori14.巴斯德畢赤酵母表達系統(tǒng)優(yōu)于釀酒酵母表達系統(tǒng)。15.根據(jù)外源DNA片段的來源不同，可將基因文庫分為：基因組DNA文庫和cDNA文庫。16.II型限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點是回文對稱結構。17.大腸桿菌作為外源基因表達系統(tǒng)的優(yōu)點是A、繁殖迅速B、操作方便C、基因克隆機表達系統(tǒng)成熟完善D、全基因組測序完成E、被美FDA批準為安全的基因工程受體生物18.下列各常用載體的裝載量排列順序，正確的是A、Cosmid;YAC;PlasmidB、YAC;Cosmid;PlasmidC、Plasmid;YAC;CosmidD、Cosmid;Plasmid;YAC19.大腸桿菌DNA聚合酶有幾種酶活性A、5種B、2種C、3種D、4種20.基因工程的三大基本元件是供體基因、受體細胞、_____________。21.PCR反應中常用的酶是______。22.基因重組只能通過人工進行。23.酵母表達系統(tǒng)是最常用的真核表達系統(tǒng)。24.核酸雜交探針就是帶有放射性標記的DNA分子。25.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_________切割DNA聚合酶I得到的分子量為76kDa的大片段。卷III一.綜合考核題庫(共25題)1._________讓外源DNA沿著花粉管經(jīng)過珠心進入尚未形成正常細胞壁的卵子、合子或早期胚胎細胞中，從而實現(xiàn)基因的轉移。。2.怎樣制備目的基因？3.重組乙肝疫苗是由下列哪種表達系統(tǒng)高效表達A、釀酒酵母表達系統(tǒng)B、絲狀真菌表達系統(tǒng)C、昆蟲表達系統(tǒng)D、巴斯德畢赤酵母表達系統(tǒng)4.“基因表達”是指該基因在大腸桿菌內(nèi)A、能進行自我復制B、能進行轉錄C、能控制合成生長抑制素釋放因子D、能合成人的生長激素5.如何提高克隆基因的表達水平？6.westernblot雜交時，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質D、染色體7.除了常規(guī)PCR外，還有一些特殊的PCR，常見的有反向PCR、反轉錄PCR、______________、多重PCR、巢式PCR。8.PCR循環(huán)時按什么方式擴增A、n2B、2nC、2n-1D、2n+19.進行體外重組時，外源片段和載體分子之間的物質的量比值一般為A、（1-5）:1B、（3-10）:1C、1：（3-10）D、1：（1-5）10.PCR特異性與引物濃度成反比。11.基因治療研究的基本程序不包括A、目的基因的選擇與制備B、靶細胞的選擇和培養(yǎng)C、基因的導入和表達D、大腸桿菌的培養(yǎng)12.列舉質粒載體必須具備的4個基本特性。13.T4DNA連接酶和E．coli連接酶都能催化平末端和黏性末端的連接。14.構建重組子時中不需要A、基因載體B、DNA連接酶C、核酶D、限制酶15._________是指轉錄因子用于識別靶DNA的蛋白結構域。16.作為基因工程所用的克隆載體必須具備以下條件A、復制原點B、有一個或多個用于篩選的選擇標記C、具備合適的限制性核酸內(nèi)切酶的單一識別位點D、有較高的拷貝數(shù)E、目的基因表達的調(diào)控序列17.原位雜交是指A、菌落雜交B、液相雜交C、直接對染色體或組織雜交D、轉膜雜交18.關于II類限制酶說法正確的是A、具內(nèi)切核酸酶和甲基化酶活性B、僅有內(nèi)切核酸酶活性C、識別序列為回文對稱結構D、II類限制酶反應條件只需要Mg2+E、II類限制酶反應需要Mg2+,ATP19.基因工程藥物的特點是高技術，短周期，高投入，高風險，高收益。20.原核表達系統(tǒng)中通常使用的可調(diào)控的啟動子Tac又叫A、乳糖啟動子B、乳糖和色氨酸的雜合啟動子C、噬菌體的左向啟動子D、色氨酸啟動子21.最早建立成功的轉基因哺乳動物是_________。22.在眾多的植物轉基因方法中，下列哪種方法應用最多、最廣泛A、農(nóng)桿菌介導法B、植物病毒DNA介導法C、基因槍法D、原生質體法23.基因操作的兩大關鍵技術是A、工具酶與載體B、轉化細胞和供體細胞C、基因克隆和基因重組D、克隆載體和表達載體24.外源DNA離開染色體是不能復制的，將外源DNA與____________連接，構建成重組DNA分子，外源DNA則可被復制。25.從EscherichiacoliK中分離的限制性內(nèi)切核酸酶命名為E.coK。卷IV一.綜合考核題庫(共25題)1.質粒作為載體使用時必須具備如下條件A、拷貝數(shù)較高B、分子量較小C、具有選擇標記D、具有較多的限制性酶切位點E、具有復制起始點2.基因工程的兩個基本特點是分子水平上的操作和_________。3.克隆基因目的蛋白的表達形式主要有哪些類型？4.分子雜交的化學原理是形成()A、疏水鍵B、配位鍵C、氫鍵D、共價鍵5.使外源基因在人體表達從而克服某一缺陷或疾病的技術稱為A、基因治療B、基因工程C、基因藥物D、免疫治療6.重組DNA的含義是什么？7.PCR的衍生技術包括A、反轉錄PCRB、實時熒光定量PCRC、反向PCRD、巢式PCRE、RACE-PCR8.能特異地降解單鏈DNA或RNA而對雙鏈不敏感的工具酶是A、堿性磷酸酶B、末端脫氧核苷酸轉移酶C、S1核酸酶D、逆轉錄酶9.PCR反應中DNA模板量一般為A、100-10000拷貝B、100-100000拷貝C、1000-10000拷貝D、10-100拷貝10.下面關于細菌人工染色體(BAC)的特征描述，不正確是（）。A、BAC載體在細菌中以環(huán)形超螺旋狀態(tài)存在，使分離操作起來相對容易B、BAC載體在大腸桿菌宿主保持高拷貝C、克隆到BAC載體上的外源片段可以直接進行測序以獲得末端序列

D、通過電激法將大質粒轉化到大腸桿菌比酵母的轉化率提高了10~100

倍11.DNA連接酶根據(jù)來源不同，可以分為三類，即_________和T4DNA連接酶及熱穩(wěn)定的DNA連接酶。12.在眾多的植物轉基因方法中，_________的方法應用最多。13.核酸操作的基本技術有哪些？14.擴增與已知DNA區(qū)段相連接的未知染色體DNA序列的PCR技術是A、常規(guī)PCRB、逆轉錄PCRC、反向PCRD、多重PCR15.PCR是利用___________的原則，經(jīng)過高溫變性、低溫復性、子鏈延伸的不斷循環(huán)，選擇性的特異擴增目的基因和目的DNA的一種方法。16.在分離DNA時，要戴手套操作，原因是手上常有________。17.如果PCR的每一次循環(huán)都把上一次循環(huán)中合成的DNA增加了1倍，那么10個循環(huán)就擴增了1000 倍，20個循環(huán)就擴增了100萬倍，30個循環(huán)就擴增了10億倍。18.下列含有內(nèi)含子的生物是A、青霉B、放線菌C、藍藻D、大腸桿菌19.基因工程的核心是______________。20.連接反應中，哪一種組分的作用是激活連接酶反應A、Tris-HCLB、MgCl2C、ATPD、DTT21.基因工程在食品工業(yè)上有何應用發(fā)展？22.利用DNA自動測序時通常進行標記的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP23.基因工程以_________為基本材料。24.反向PCR是以mRNA為模板進行的一類特殊PCR。25.個體之間DNA限制性片段長度的差異叫_________。卷I參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:能夠分泌乳汁的轉基因動物生產(chǎn)其他來源的基因產(chǎn)品，并通過乳腺分泌出來。2.正確答案:C3.正確答案:B4.正確答案:錯誤5.正確答案:正確6.正確答案:D7.正確答案:錯誤8.正確答案:C9.正確答案:B10.正確答案:ZFN技術11.正確答案:D12.正確答案:DNA連接酶13.正確答案:B14.正確答案:目的基因的制備；目的基因與載體連接；目的基因導入受體細胞；目的基因的表達與檢測。15.正確答案:穿梭載體16.正確答案:B17.正確答案:指含有nic/born基因，能自我轉移的質粒。18.正確答案:拷貝數(shù)19.正確答案:回文序列是：5'-CATATG-3'。20.正確答案:D21.正確答案:A,B,C,D22.正確答案:大腸桿菌基因組較小；表達系統(tǒng)成熟、完善，菌體繁殖迅速，培養(yǎng)簡單，操作方便，遺傳穩(wěn)定，已被FDA批準為安全的基因工程受體生物。23.正確答案:錯誤24.正確答案:為外源基因提供在受體細胞中的復制和整合能力；為外源基因提供進入受體細胞的轉移能力；為外源基因提供在受體細胞中的擴增和表達能力，外源基因的擴增依賴于載體分子在受體細胞中高拷貝自主復制的能力。25.正確答案:2018/4/6卷II參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:(1)核酸是依賴于模板在聚合酶的作用下由5'端向3'端聚合(DNA聚合酶參與了細菌修復DNA合成過程)；(2)可延伸的引物必須能提供游離的3'羥基末端，雙脫氧核苷酸由于缺少游離的3'羥基末端，因此會終止聚合反應的進行。如果分別用4種雙脫氧核苷酸終止反應，則會獲得4組長度不同的DNA片段。通過比較所有DNA片段的長度可以得知核苷酸的序列。2.正確答案:原因是：HindⅢ的切點在A基因內(nèi)。3.正確答案:錯誤4.正確答案:A5.正確答案:B6.正確答案:可以通過合成核苷酸探針或設計簡并PCR引物從cDNA文庫或基因組文庫中篩選?；蛘呃孟鄳目贵w從cDNA表達文庫中篩選相應的克隆。7.正確答案:1000kb8.正確答案:A,B,C,D,E9.正確答案:C10.正確答案:轉基因植物11.正確答案:指通過基因工程、抗體工程、細胞工程技術等制備生物藥品用于疾病診斷、預防和治療的行業(yè)，核心是通過重組DNA技術生產(chǎn)具有藥用功能的生物制品。12.正確答案:A,B,C,D13.正確答案:D14.正確答案:正確15.正確答案:正確16.正確答案:正確17.正確答案:A,B,C,D,E18.正確答案:B19.正確答案:C20.正確答案:載體21.正確答案:TaqDNA聚合酶22.正確答案:錯誤23.正確答案:正確24.正確答案:錯誤25.正確答案:枯草桿菌蛋白酶卷III參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:花粉管導入法2.正確答案:直接分離法、構建基因文庫分離法、PCR擴增法、人工合成法等。3.正確答案:D4.正確答案:C5.正確答案:（1）表達載體的優(yōu)化設計；（2）提高目標基因mRNA和目標基因產(chǎn)物的穩(wěn)定性；（3）密碼子偏愛性；（4）表達環(huán)境條件的優(yōu)化。6.正確答案:C7.正確答案:實時熒光定量PCR8.正確答案:B9.正確答案:B