實(shí)驗(yàn)三外周血單個(gè)核細(xì)胞分離_第1頁(yè)
實(shí)驗(yàn)三外周血單個(gè)核細(xì)胞分離_第2頁(yè)
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實(shí)驗(yàn)三外周血單個(gè)核細(xì)胞分離第1頁(yè)/共8頁(yè)實(shí)驗(yàn)三外周血單個(gè)核細(xì)胞分離第2頁(yè)/共8頁(yè)實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆胀庵苎獑蝹€(gè)核細(xì)胞分離的原理與操作掌握外周血單個(gè)核細(xì)胞的概念第3頁(yè)/共8頁(yè)實(shí)驗(yàn)原理人外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。第4頁(yè)/共8頁(yè)單個(gè)核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與外周血其他細(xì)胞不同。因此利用一種介于1.075-1.090之間的聚蔗糖-泛影葡胺(ficoll-hypaque)分離液作密度梯度離心,離心后不同比重的血細(xì)胞在分離液中呈梯度分布,從而分離出PBMC。第5頁(yè)/共8頁(yè)人血液中各種細(xì)胞的密度如下:紅細(xì)胞:1.093白細(xì)胞:1.092淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞:1.075-1.090血小板:1.030-1.035F/H=1.077±0.001第6頁(yè)/共8頁(yè)實(shí)驗(yàn)步驟1.用抗凝管抽取外周血2ml;2.將裝有2ml分離液的試管微微傾斜,用吸管將抽取的抗凝外周血緩緩加入到分離液上層,保持液面分層清晰;3.水平離心機(jī)中離心,2000rpm,20min;4.將離心好的試管輕輕拿出,用毛細(xì)吸管吸取PBMC層細(xì)胞涂片;5.將涂片進(jìn)行瑞氏染色。第7

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