學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精選修37題4練（B)1。(2018河北衡水中學(xué)十五模，37）請(qǐng)回答下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐方面的問題:(1）培養(yǎng)基配制的步驟為：計(jì)算-稱量---倒平板;為統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目,在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間后形成菌落,一般選擇菌落數(shù)在個(gè)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

(2）泡菜雖然好吃，但其中的亞硝酸鹽會(huì)危害人體健康.亞硝酸鹽在特定條件下會(huì)轉(zhuǎn)變成，這是一種致癌物,測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理是在條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)后，與N-1—萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

（3)腐乳制作的流程是:讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。配制鹵湯時(shí),要使鹵湯中酒的含量控制在左右。

（4)某同學(xué)釆用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)（規(guī)格為16×25,0.1mm3)，統(tǒng)計(jì)4個(gè)中方格中的細(xì)菌數(shù)，計(jì)算出每個(gè)小格所含細(xì)菌的平均數(shù)為2個(gè)，則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是（稀釋倍數(shù)為103)個(gè)。

(5)對(duì)于頻繁使用的菌種可將試管放入保藏.

2.（2018江西八所重點(diǎn)中學(xué)聯(lián)考,37）牛奶中富含蛋白質(zhì)，長(zhǎng)期飲用有助于增強(qiáng)體質(zhì)，但牛奶同時(shí)也是多種疾病的傳播載體.國家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細(xì)菌數(shù)小于30000個(gè)，以下是牛奶消毒及細(xì)菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn).(1）圖中步驟①稱為消毒法，步驟②是。

(2）進(jìn)行步驟③操作時(shí)，應(yīng)選用下列中的哪種工具?。為了避免雜菌污染,此步驟應(yīng)在附近進(jìn)行。

(3)將接種后的培養(yǎng)基和作為對(duì)照的同時(shí)放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)36小時(shí)。取出后統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù),結(jié)果如下表所示。應(yīng)該選擇其中稀釋倍數(shù)為的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),經(jīng)過消毒后的牛奶,細(xì)菌數(shù)（是/否)符合國家標(biāo)準(zhǔn)。該法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)一般比實(shí)際結(jié)果偏,原因是.

牛奶稀釋倍數(shù)102103104平板1菌落數(shù)87101平板2菌落數(shù)83121平板3菌落數(shù)851003。(2018山東、湖北重點(diǎn)中學(xué)沖刺五，37)從土壤中分離尿素分解菌和纖維素分解菌,具有下列類似的操作過程:（1)在過程④的選擇培養(yǎng)基是培養(yǎng)基，過程⑧的選擇培養(yǎng)基是培養(yǎng)基（填“固體”或“液體”）。④的具體措施是;⑧的選擇措施是。

(2)在過程③樣品梯度稀釋后,一般只將稀釋度為104~106倍的菌液分別接種到3個(gè)平板培養(yǎng)基上。接種的常用方法為.

（3）過程⑩采用的鑒別方法較簡(jiǎn)單。周圍出現(xiàn)透明圈但不能100%確定為纖維素分解菌的菌落,原因是:。

4.（2018河北衡水中學(xué)十七模，37)青蒿素是一種無色針狀晶體，易溶于有機(jī)溶劑,不溶于水，不易揮發(fā),60℃以上易分解，主要從黃花蒿中提取。近年來又發(fā)現(xiàn)青蒿素具有較強(qiáng)的抗腫瘤作用,某科研小組按如下步驟進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)：①從黃花蒿中提取青蒿素；②將等量癌細(xì)胞分別接種到4組培養(yǎng)瓶中，適宜條件下培養(yǎng)24h后除去上清液;③向4組培養(yǎng)瓶中分別加入等量含2、4、8、16μmol/L青蒿素的培養(yǎng)液,適宜條件下繼續(xù)培養(yǎng)；④72h后統(tǒng)計(jì)并計(jì)算各組的細(xì)胞增殖抑制率.回答下列問題:（1)提取青蒿素時(shí)不宜使用水蒸氣蒸餾法，原因是;根據(jù)青蒿素的特點(diǎn)，可采用有機(jī)溶劑萃取的方法,現(xiàn)有四氯化碳(沸點(diǎn)76。5℃)和乙醚（沸點(diǎn)34。5℃)兩種溶劑，應(yīng)選用作為萃取劑,不選用另外一種的理由是。

(2)萃取青蒿素的過程應(yīng)采用加熱；加熱時(shí)常在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置，目的是。

（3）科研小組進(jìn)行上述②~④步驟實(shí)驗(yàn)的目的是。步驟③中需要設(shè)罝對(duì)照組,對(duì)照組的處理方法為.

答案全解全析1。答案(1)溶化滅菌30~300（2)亞硝胺鹽酸酸化(3)12%(4）8×1094℃冰箱解析(1）制作培養(yǎng)基時(shí),首先按配方計(jì)算培養(yǎng)基中各種成分的用量，然后稱量→溶化→滅菌→倒平板；選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(2）亞硝酸鹽轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯醢?對(duì)人體有害。在鹽酸酸化條件下亞硝酸與對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)后,再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料；（3）在鹵湯中加酒,一般要控制在12％左右。(4)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)（規(guī)格為16×25,0.1mm3),每個(gè)小格所含細(xì)菌的平均數(shù)為2個(gè)，稀釋倍數(shù)為103,則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)為2×16×25÷0.1×1000×103=8×109（個(gè))。(5)對(duì)于頻繁使用的菌種,可以采用臨時(shí)保藏的方法，將裝有已長(zhǎng)成的菌落的試管放入4℃冰箱中保藏。2.答案(1)巴氏系列稀釋（或梯度稀釋）(2）B酒精燈火焰（3）一個(gè)未接種的培養(yǎng)基102是少當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí),平板上觀察到的是一個(gè)菌落解析（1）圖中步驟①利用80℃、15min對(duì)牛奶進(jìn)行消毒,此種方法稱為巴氏消毒法;步驟②是系列稀釋（或梯度稀釋）.(2）步驟③表示采用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行接種，因此操作時(shí)應(yīng)選用B選項(xiàng)所示的涂布器。為了避免雜菌污染,此步驟應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行.（3）將接種后的培養(yǎng)基和作為對(duì)照的一個(gè)未接種的培養(yǎng)基同時(shí)放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)36小時(shí)。用稀釋涂布平板法測(cè)定同一樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí),在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，確定對(duì)照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行記數(shù)，求其平均值。表格信息顯示：當(dāng)牛奶稀釋倍數(shù)為102時(shí)，三個(gè)平板的菌落數(shù)在80~90之間,其余的牛奶稀釋倍數(shù),三個(gè)平板的菌落數(shù)均小于或等于12?？梢?取出后統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù),應(yīng)選擇其中稀釋倍數(shù)為102的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，經(jīng)過消毒后的牛奶中,細(xì)菌數(shù)大約是=（87+83+85）÷3×102=8500（個(gè)/mL）,而國家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細(xì)菌數(shù)小于30000個(gè)，因此經(jīng)過消毒后的牛奶符合國家標(biāo)準(zhǔn)。因當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí),平板上觀察到的是一個(gè)菌落，所以該法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)一般比實(shí)際結(jié)果偏少.3.答案(1）固體液體以尿素為唯一氮源以纖維素為唯一碳源（2）稀釋涂布平板(或平板劃線)法（3）倒平板時(shí)加入剛果紅染液不分解纖維素（或分解剛果紅或淀粉)的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈解析(1）將微生物接種在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),才能形成菌落,可見，過程④的選擇培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基.進(jìn)行梯度稀釋并接種前要進(jìn)行過程⑧所示的選擇培養(yǎng),因此過程⑧的選擇培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基。④選擇培養(yǎng)的目的是篩選尿素分解菌,所以具體的措施是應(yīng)以尿素為唯一氮源;⑧選擇培養(yǎng)的目的是篩選纖維素分解菌,所以⑧的選擇措施是以纖維素為唯一碳源。（2）常采用稀釋涂布平板(或平板劃線)法,將稀釋度為104~106倍的菌液分別接種到3個(gè)平板培養(yǎng)基上。(3)剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生顏色反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶水解后,剛果紅—纖維素復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈?？梢?，過程⑩采用倒平板時(shí)加入剛果紅染液的鑒別方法較簡(jiǎn)單。由于不分解纖維素(或分解剛果紅或淀粉)的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈,所以周圍出現(xiàn)透明圈的菌落不能100％確定為纖維素分解菌。4.答案(1)青蒿素不易揮發(fā)，不能隨水蒸氣蒸餾出來（或水蒸氣蒸餾法適用于蒸餾揮發(fā)性物質(zhì)，而青蒿素不易揮發(fā)）易溶于有機(jī)溶劑乙醚青蒿素在60℃以上易分解,應(yīng)選擇低沸點(diǎn)的萃取劑(2)水浴防止有機(jī)溶劑揮發(fā)（3)探究青蒿素的濃度與細(xì)胞增殖抑制率的關(guān)系在另一培養(yǎng)瓶中加入等量的不含青蒿素的培養(yǎng)液，適宜條件下繼續(xù)培養(yǎng)解析(1)青蒿素不易揮發(fā),不能隨水蒸氣蒸餾出來,所以提取青蒿素時(shí)不宜使用水蒸氣蒸餾法；青蒿素易溶于有機(jī)溶劑,所以可采用有機(jī)溶劑萃取的方法;由于青蒿素在60℃以上易分解,因此應(yīng)選擇低沸點(diǎn)的乙醚作為萃取劑。（2）由于有機(jī)溶劑易燃,所以萃取青蒿素的過程應(yīng)采用水浴加熱；為防止有機(jī)溶劑揮發(fā),加熱時(shí)可在加熱瓶口安裝回流