藥品生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控體系全國醫(yī)藥技術(shù)市場協(xié)會（杭州）

201203內(nèi)容潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測1，潔凈區(qū)級別標準2，潔凈區(qū)的驗證和監(jiān)測3，潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測方案4，環(huán)境監(jiān)測儀器、設備、培養(yǎng)基趨勢分析和質(zhì)量回顧1，警戒限和糾偏限的設定2，趨勢分析3，質(zhì)量回顧口服藥品環(huán)境監(jiān)測環(huán)境監(jiān)測結(jié)果超標案例分析常見問題探討2潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測3級別b浮游菌CFU/m3沉降碟（90mm）CFU/4小時c接觸碟（55mm）CFU/碟5指手套CFU/手套A1111B10555C1005025－D20010050－51，潔凈級別及標準微生物控制動態(tài)標準2，潔凈區(qū)驗證和監(jiān)測懸浮粒子的要求：附錄1<無菌藥品>第九、十條1、A級區(qū)確認時的采樣量不少于1m32、潔凈區(qū)的動態(tài)監(jiān)測懸浮粒子的動態(tài)監(jiān)測關(guān)鍵操作的全過程，對A級區(qū)進行粒子監(jiān)測A級區(qū)的監(jiān)測頻率、取樣量，及時發(fā)現(xiàn)人為干預、偶發(fā)事件及任何系統(tǒng)的破壞B級區(qū)：類似于A級區(qū)，采樣頻率、采樣量可以調(diào)整C級區(qū)：質(zhì)量風險管理原則確定D級區(qū)：一般不作要求，（法規(guī)：必要時）對于C/D級區(qū)的自凈時間應達到規(guī)定要求62，潔凈區(qū)驗證和監(jiān)測取樣量和取樣點ISO14644-1B.4.2節(jié)有明確的采樣量的計算公式：采樣量（升）=(20/級別中最大粒子限度）×1000，顯然對于A級，采樣量為(20/20)×1000=1米3

從上式中可見，級別要求越低，取樣量就越小取樣點數(shù)由B.1.1公式：取樣點數(shù),

A為潔凈區(qū)面積，例如10米×5米的區(qū)域，取樣點應為8（取整數(shù)）取樣點均勻分布，位于工作面高度注意：這里僅指在潔區(qū)劃分時加以采用7微生物的要求：附錄1<無菌藥品>第十一條監(jiān)測方法有：1，空氣浮游菌監(jiān)測沉降菌法--被動法定量空氣浮游菌采樣法--主動法2，環(huán)境表面監(jiān)測表面取樣法（如棉簽擦拭法和接觸碟法）3，人員監(jiān)測表面取樣法（接觸碟法）2，潔凈區(qū)的驗證和監(jiān)測91，空氣浮游菌監(jiān)測沉降菌法--被動法沉降碟在空氣中的暴露時間<4小時監(jiān)控整個灌裝過程只能給出定性和半定量的數(shù)據(jù)應結(jié)合空氣浮游菌的數(shù)據(jù)，對沉降碟的結(jié)果進行評價定量空氣浮游菌采樣法--主動法撞擊式，離心式和膜過濾（明膠）取樣儀應取一定體積的空氣（取樣體積應有代表性）儀器應經(jīng)過校驗2，潔凈區(qū)的驗證和監(jiān)測102，環(huán)境表面監(jiān)測：表面取樣法應對接觸產(chǎn)品表面、設備、地面、墻面等定期監(jiān)測接觸蝶法：適用于平整表面

取樣面積25cm2

培養(yǎng)基略有凸起，高于碟子邊緣，便于取樣

培養(yǎng)基中應含有中和劑/保護劑棉簽擦拭法：適用于不規(guī)則表面

取樣面積~25cm2

定性或定量表面樣應在無菌操作結(jié)束時取

以最大限度地降低無菌制造過程中關(guān)鍵表面污染的風險2，潔凈區(qū)的驗證和監(jiān)測112，潔凈區(qū)驗證和監(jiān)測每個手套(5只手指)胸口處衣帽結(jié)合處帽兜額頭處靴子與工作褲接口處

前臂無菌區(qū)人員更衣確認和監(jiān)測13其它事項每個受訓者必須經(jīng)過3次更衣試驗確認合格后才能進入無菌操作區(qū)。資格確認合格的操作員工每年需重復一次更衣試驗。

當有已確認合格的人員有違反更衣程序趨向時，須重復l～3次更衣試驗。連續(xù)3次監(jiān)測不合格人員，取消相關(guān)資質(zhì)，需重新培訓和進行更衣驗證。在連續(xù)10次監(jiān)測中，如有4次不合格的人員，取消相關(guān)資質(zhì)，需重新培訓和進行更衣驗證。采樣點參考標準（CFU·皿）采樣點參考標準（CFU·皿）手套≤3口罩≤10胸口≤5前額≤5前臂≤5靴子—褲子接合處≤5無菌區(qū)人員監(jiān)測合格標準2，潔凈區(qū)驗證和監(jiān)測143，環(huán)境監(jiān)測方案潔凈區(qū)應制定系統(tǒng)的環(huán)境監(jiān)測方案，包括動態(tài)監(jiān)測和靜態(tài)監(jiān)測。關(guān)鍵項目：懸浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物。取樣計劃的影響因素：產(chǎn)品類型、生產(chǎn)過程、設施/工藝設計、生產(chǎn)密度、人為干擾、環(huán)境監(jiān)測歷史數(shù)據(jù)等。取樣點的選擇主要取決于潔凈室的設計和生產(chǎn)要求。環(huán)境監(jiān)測計劃案例。環(huán)境監(jiān)測動態(tài)標準。15潔凈區(qū)年度級別確認測試項目空氣潔凈度測試靜壓差測試

風速或風量測試換氣次數(shù)溫度相對濕度照度噪聲17取樣區(qū)域取樣頻率百級或更嚴Class100orbetterroomdesignations1次/班毗鄰百級區(qū)如萬級SupportingareasimmediatelyadjacenttoClass100(e.g.，Class10，000)1次/班其它輔助區(qū)域－10萬級Othersupportareas2次/周可能與產(chǎn)品/容器接觸區(qū)域

Potentialproduct/containercontactareas2次/周10萬級或以下orlowerOthersupportareastoasepticprocessingareasbutnon-productcontact1次/周參考：USP34－1116從表中可以看出，美國藥典中沒有明確B級，但有100級、1萬級、10萬級甚至更低級別，劃分比較靈活，按需要而定。美國藥典微生物監(jiān)測頻率環(huán)境監(jiān)測方案18環(huán)境監(jiān)測案例監(jiān)控區(qū)（潔凈度級別）監(jiān)控頻率監(jiān)控項目最終滅菌產(chǎn)品

生產(chǎn)區(qū)域稱量配料、配液

（C級區(qū)）每周一次空氣懸浮粒子[1]空氣浮游菌空氣沉降菌[1]表面微生物灌封間

（C/A級區(qū)）每周兩次空氣懸浮粒子[1]空氣浮游菌空氣沉降菌[1]表面微生物操作者手套表面微生物軋蓋間、洗塞間

（C/A級區(qū)）每周一次空氣懸浮粒子[1]空氣浮游菌空氣沉降菌[1]表面微生物操作者手套表面微生物容器精洗區(qū)

（D級區(qū)）兩周一次空氣懸浮粒子[1]空氣浮游菌空氣沉降菌[1]表面微生物[1].每月一次19環(huán)境監(jiān)測案例監(jiān)控區(qū)（潔凈度級別）監(jiān)控頻率監(jiān)控項目取樣間

(C/A級區(qū))每周一次

每次取樣空氣懸浮粒子[1]空氣浮游菌空氣沉降菌表面微生物微生物實驗室無菌實驗室

(B/A級區(qū))每次實驗空氣懸浮粒子[1]空氣浮游菌空氣沉降菌表面微生物操作者手套表面微生物限度檢查實驗室

（C/A級區(qū)）每次實驗空氣懸浮粒子[1]空氣浮游菌空氣沉降菌[1]表面微生物操作者手套表面微生物抗生素效價測定室

（D級區(qū)）每周一次空氣懸浮粒子[1]空氣浮游菌空氣沉降菌表面微生物[1].每月一次21潔凈區(qū)監(jiān)測的位置取樣位置選擇時考慮因素：哪些部位的微生物污染最可能對產(chǎn)品質(zhì)量造成不良影響？在生產(chǎn)過程中，什么地點最容易長菌？哪些地方是清潔、消毒或滅菌時最難覆蓋/接觸或最難奏效的部位？什么活動會導致污染的擴散？在某一部位的取樣操作，足以導致測試數(shù)據(jù)的差錯或污染產(chǎn)品？取樣只應在生產(chǎn)結(jié)尾換班時進行嗎？22潔凈區(qū)監(jiān)測的位置應符合“GB16292-2010”~“GB16294-2010”的要求基于風險的設計監(jiān)測點設置在潛在風險最大的位置藥品容器連接處人流和物流經(jīng)過的地方監(jiān)測點靠近“工作高度”注：GB16292—16294，分別是潔凈區(qū)懸浮微粒子、浮游菌、沉降菌的監(jiān)測。23潔凈區(qū)監(jiān)測的位置示例：無菌灌裝線取樣點應在產(chǎn)品或組件暴露的區(qū)域周圍取樣，如：在灌裝針頭處將產(chǎn)品裝載入凍干腔室處膠塞供料桶無菌部件進行連接操作的部位操作人員頻繁活動處（不影響生產(chǎn)過程）注意：靠近產(chǎn)品，但不接觸產(chǎn)品的位置25粒子在線監(jiān)測布置圖例26潔凈區(qū)表面微生物取樣點C級區(qū)取樣點：一般為地面、墻面及操作人員十指手套。對C級下的局部A級區(qū)取樣宜在生產(chǎn)結(jié)束后進行，避免造成污染。地面取樣墻面取樣灌裝機（A級）產(chǎn)品轉(zhuǎn)移（A級）29潔凈區(qū)表面微生物取樣點B級區(qū)接觸碟取樣位置應能及時發(fā)現(xiàn)潛在污染風險，在受污染可能性較高的位置布點。無菌分裝設備門進出B級區(qū)門把手儀器、設備操作鍵、觸摸屏等傳遞窗門把手30-31-文件記錄中應包括：監(jiān)測時間和日期測試方法的參考依據(jù)測試點的活動情況設備標識位置衛(wèi)生級別標有取樣點的區(qū)域圖取樣點測試結(jié)果評估人員結(jié)果讀取日期警戒/糾偏限度培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間文件和記錄31-32-文件記錄中應包括:培養(yǎng)基有關(guān)信息污染菌鑒別結(jié)果復核人數(shù)據(jù)報告歷史數(shù)據(jù)回顧變更控制系統(tǒng)設備校驗日期各限度的確定原理與具體分析調(diào)查/糾偏措施的文件記錄文件和記錄324，環(huán)境監(jiān)測常用儀器/設備/培養(yǎng)基沉降菌/浮游菌直徑：90mm浮游菌監(jiān)測AirIDEAL3P100升/分懸浮粒子監(jiān)測PMSLasairⅡ28.3升/分表面微生物監(jiān)測直徑：55mm332500模塊化控制器ModbusTCP/IP真空泵Airnet5104-20MA信號HUB6180XIO歐陸顯示器工作站粒子在線監(jiān)測儀可以增加浮游菌采樣34空氣懸浮粒子連續(xù)監(jiān)測系統(tǒng)的要求：歐盟GMP附錄1、中國GMP（2010）附錄1在確認級別時，應使用采樣管較短的便攜式塵埃粒子計數(shù)器，避免≥5.0μm懸浮粒子在遠程采樣系統(tǒng)的長采樣管中沉降。在單向流系統(tǒng)中，應當采用等動力學取樣頭。歐盟GMP附錄1使用遠程采樣系統(tǒng)時，必須根據(jù)粒子在管路中的損失來考慮管長和管子的彎曲半徑

PIC/SPI032-2-強調(diào)≥5.0μm懸浮粒子在遠程采樣系統(tǒng)的長采樣管中沉降效應粒子在線監(jiān)測注意點35適用于圓弧表面取樣外蓋帶鎖扣表面帶有鎖扣，可以避免因取樣結(jié)束后平皿意外跌落等麻煩具有一定的韌性，可以進行適當彎曲，適合不規(guī)則表面或圓弧取樣預制培養(yǎng)基特殊預制平板36 使用前 擦拭后預制培養(yǎng)基無菌擦拭棒SCD培養(yǎng)基頸部保護套拭子使用方法：1、拔除下端保護套，取出拭子用

無菌液體潤濕

2、擦拭取樣表面（一般為25cm2）

3、取樣結(jié)束后將拭子放回保護套

4、將擦拭棒頸部掰斷，上端SCD培養(yǎng)基流入保護套中并浸沒拭子5、將整個擦拭棒放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)SCD培養(yǎng)基37無菌試驗預制培養(yǎng)基

一般TGC配制后會有氧化層，中國藥典規(guī)定在無菌試驗前其氧化層高度不得高于培養(yǎng)基高度的1/5，培養(yǎng)結(jié)束后其氧化層高度不得高于培養(yǎng)基高度的1/3。圖中TGC培養(yǎng)基瓶中充入保護性氣體（抗氧化），有利于試驗結(jié)果的判斷。預制培養(yǎng)基38預制培養(yǎng)平板包裝無菌區(qū)使用預制平板：一般采用三層包裝形式：55mm接觸平板90mm預制平板39預制平板進入潔凈區(qū)預制平板進入無菌區(qū)，須避免對監(jiān)控區(qū)域的污染。去除最外層包裝

放入傳遞窗開啟紫外燈消毒或用酒精噴灑外表面消毒處理40預制平板脫包裝經(jīng)傳遞窗進入潔凈區(qū)的預制培養(yǎng)平板繼續(xù)脫去外面兩層包裝就可以使用。脫出第二層包裝脫出第三層包裝脫包裝后單個平板41自制平板傳輸包裝形式不銹鋼密保容器外套密封塑料袋傳輸消毒脫除外袋容器消毒后輸入42預制平板使用示意圖接觸碟表面取樣示意圖：1，取樣點采樣2，取樣位置消毒

3，用無塵布清潔4，標明取樣點編號5，平板入無菌保管袋6，保管袋密封待培養(yǎng)43預制平板使用示意圖浮游菌監(jiān)測示意圖：使用前噴酒精進行消毒，開啟至少5分鐘消毒完成，放入90mm平板裝上無菌采樣托盤設置采樣量，啟動采樣采樣完成取出平板（有明顯凹坑）蓋上培養(yǎng)皿蓋，裝入無菌保管袋待培養(yǎng)未經(jīng)采樣空白平板44趨勢分析和質(zhì)量回顧 1，警戒限和糾偏限的設定 2，趨勢分析 3，質(zhì)量回顧451，警戒限和糾偏限的設定應設定在法定標準值以下。警戒限

根據(jù)驗證數(shù)據(jù)

根據(jù)歷史監(jiān)測數(shù)據(jù)并進行趨勢分析后制定糾偏限

參考GMP和藥典等法規(guī)要求

根據(jù)歷史監(jiān)測數(shù)據(jù)并進行趨勢分析后制定46警戒限和糾偏限的設定設定的基準值不只是用來判定合格與否，而是用于過程控制的設定值。若監(jiān)測結(jié)果顯示超過基準值，根據(jù)各個基準值的定義采取相應的處理措施。關(guān)鍵項目應年度趨勢分析，根據(jù)趨勢分析的結(jié)果制定警戒限和糾偏限。GMP第一百零一條應當按照操作規(guī)程對純化水、注射用水管道進行清洗消毒，并有相關(guān)記錄。發(fā)現(xiàn)制藥用水微生物污染達到警戒限度、糾偏限度時應當按照操作規(guī)程處理。47法定標準運行設定標準運行通常值管理設計目標糾偏限ActionLevel糾偏限ActionLevel警戒限AlertLevel警戒限AlertLevel警戒限和糾偏限的設定48設定示例潔凈度級別塵埃粒子數(shù)（≦0.5m）浮游菌警戒限(m3)糾偏限(m3

)警告限(cfu/m3

)糾偏限(cfu/m3

)A1,7603,520－<1B1,7603,5205≦10C176,000352,00050≦100藥典標準警戒限糾偏限PW≦100cfu/ml>30cfu/ml>50cfu/mlWFI≦10cfu/100ml>5cfu/100ml>8cfu/100ml49設定示例潔凈度級別表面微生物設備/器具地面警戒限(cfu/25cm2)糾偏限(cfu/25cm2)警戒限(cfu/25cm2)糾偏限(cfu/25cm2)A

-<13≦5B3≦55≦10C13≦2515≦30502，趨勢分析GMP要求

第二百二十一條質(zhì)量控制實驗室的文件應當符合第八章的原則，并符合下列要求：…（三）宜采用便于趨勢分析的方法保存某些數(shù)據(jù)（如檢驗數(shù)據(jù)、環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)、制藥用水的微生物監(jiān)測數(shù)據(jù)）；

…ICH-Q10、EUGMP、PIC/S也有類似要求數(shù)據(jù)處理----趨勢分析確定分析目標用警戒/糾偏值來確定監(jiān)測數(shù)據(jù)確認現(xiàn)行的警戒/糾偏限度及標準是否恰當采取的“糾偏措施”定期報告來更新管理。年度報告中包括數(shù)據(jù)的總結(jié)和對糾偏限度的回顧513，質(zhì)量回顧GMP要求，第十章<質(zhì)量控制和質(zhì)量保證>第八節(jié)產(chǎn)品質(zhì)量回顧分析

第二百六十六條應當按照操作規(guī)程，每年對所有生產(chǎn)的藥品按品種進行產(chǎn)品質(zhì)量回顧分析，以確認工藝穩(wěn)定可靠，以及原輔料、成品現(xiàn)行質(zhì)量標準的適用性，及時發(fā)現(xiàn)不良趨勢，確定產(chǎn)品及工藝改進的方向。應當考慮以往回顧分析的歷史數(shù)據(jù)，還應當對產(chǎn)品質(zhì)量回顧分析的有效性進行自檢?！?.

企業(yè)至少應當對下列情形進行回顧分析：

（十一）相關(guān)設備和設施，如空調(diào)凈化系統(tǒng)、水系統(tǒng)、壓縮空氣等的確認狀態(tài)；52質(zhì)量回顧示例PW系統(tǒng)

電導率、不揮發(fā)物、微生物限度WFI系統(tǒng) pH值、電導率、總有機碳、不揮發(fā)物、微生物限度53注射用水----微生物

注射用水微生物限度的質(zhì)量標準為≤10CFU/100ml，日常監(jiān)控結(jié)果均小于5CFU/100ml，低于警戒限，平均值為0.1CFU/100ml，遠低于標準限度，并且趨勢較平穩(wěn)。糾偏限警戒限質(zhì)量回顧示例54注射用水---總有機碳

，WFI系統(tǒng)年度質(zhì)量回顧報告

WFI總有機碳的質(zhì)量標準為≤0.50mg/l，日常監(jiān)控結(jié)果均小于0.20mg/l，在通常值管理范圍內(nèi)，平均值為0.04mg/l，遠低于標準限度，并且趨勢平穩(wěn)。

結(jié)論：通過對WFI系統(tǒng)的多項質(zhì)量指標回顧分析，系統(tǒng)運行穩(wěn)定，設定的管理標準合理。質(zhì)量回顧示例通常值55三、針對口服制劑的環(huán)境監(jiān)測法規(guī)要求：第四十八條

口服液體和固體制劑、腔道用藥（含直腸用藥）、表皮外用藥品等非無菌制劑生產(chǎn)的暴露工序區(qū)域及其直接接觸藥品的包裝材料最終處理的暴露工序區(qū)域，應當參照“無菌藥品”附錄中D級潔凈區(qū)的要求設置，企業(yè)可根據(jù)產(chǎn)品的標準和特性對該區(qū)域采取適當?shù)奈⑸锉O(jiān)控措施。因此，口服制劑的環(huán)境監(jiān)測項目和標準可以參考無菌藥品的D級區(qū)56針對口服制劑的環(huán)境監(jiān)測生產(chǎn)口服制劑，生產(chǎn)車間潔凈度為D級，微生物檢驗室為萬級，局部百級。

1、2010版GMP要求口服固體制劑潔凈級別參照無菌制劑D級，那么沉降菌按照動態(tài)檢測的沉降時間就得是4個小時；但是在GB/T16294-2010中也明確了靜態(tài)測試可以30分鐘，到底D級區(qū)依照哪個為準，因為沉降時間的不同，合格標準也不一樣。

2、2010版GMP要求潔凈度為A級的浮游菌、塵埃粒子采樣量必須1立方米，但是在GB/T16293-2010中明確規(guī)定了最小采樣量。那么我們公司為D級，采樣量是否也是1立方米？

3、D級潔凈區(qū)浮游菌和沉降菌是否也必須是動態(tài)測試？如果做了浮游菌，沉降菌是否可以不做？

4、如果動態(tài)測試，在口服固體制劑總混車間，也就是產(chǎn)塵量大的房間，塵埃粒子測試肯定超標，又如何解釋GMP條款？

5、D級潔凈區(qū)有很多房間，比如總混、干壓、制粒、配料、中間品、中間站、潔具清洗間、更衣室、緩沖室、走廊、物料暫存間一二十個房間，是否每次必須都得做沉降菌和浮游菌、塵埃粒子檢查，有沒有國家硬性的標準？因為如果一個月檢查一次，勢必會造成很大的工作量，對于醫(yī)藥企業(yè)增加了很大成本啊。有的人說檢測頻率需要驗證保證公司環(huán)境符合要求可以適當降低頻率，在驗證之前有沒有最低檢測頻率？主要操作間和走廊、緩沖間等檢測頻率可以不一樣嗎？以上檢測項目的檢測頻率在新版GMP是否有一個明確的最低檢測頻率可供參考？57四，環(huán)境監(jiān)測結(jié)