抗凝系統(tǒng)檢驗

纖溶活性檢驗廣醫(yī)二院王忠英止血血管壁血小板凝血凝血因子抗凝細胞、體液抗凝物質(zhì)纖溶纖溶酶原的活化與抑制物抗凝系統(tǒng)檢驗抗凝血酶（AT）蛋白C（PC）蛋白S（PS）組織因子途徑抑制物（TFPI）（自學）肝素、類肝素物質(zhì)血漿狼瘡抗凝物血漿凝血因子抑制物（自學）抗凝系統(tǒng)檢驗抗凝血酶（AT）蛋白C（PC）蛋白S（PS）組織因子途徑抑制物（TFPI）（自學）肝素、類肝素物質(zhì)血漿狼瘡抗凝物血漿凝血因子抑制物（自學）抗凝血酶檢測Antithrombinactivity,AT:A發(fā)色底物法Antithrombinantigen,AT:Ag免疫火箭電泳ELISA免疫比濁法AT活性檢測原理：發(fā)色底物法反應原理：InhibitorsTargetprotease(s)AntithrombinThrombin,IXa,Xa,othersa2-macroglobulinNon-specificTrypsininhibitorNeutrophil

elastase,Thrombin,othersHeparincofactorIIThrombin血漿中的凝血酶抑制物肝素輔因子II，凝血酶特異的絲氨酸蛋白酶抑制劑臨床意義AT降低：遺傳性AT缺陷:AD，易栓癥（thrombophilia)TypeⅠ,TypeⅡ，雜合子在40%-60%遺傳性AT缺乏的臨床特點：年輕（40-45）發(fā)生血栓?有靜脈血栓家族史?復發(fā)性靜脈血栓形成?少見部位的血栓形成?懷孕期間血栓形成?肝素抵抗臨床意義獲得性AT缺乏：合成減少（肝病，早產(chǎn)兒）丟失過多（腎病綜合征）消耗增加（DIC）藥物誘導（肝素、L-門冬酰胺酶）

AT升高：口服抗凝藥，急性出血期等

抗凝系統(tǒng)檢驗抗凝血酶（AT）蛋白C（PC）蛋白S（PS）組織因子途徑抑制物（TFPI）（自學）肝素、類肝素物質(zhì)血漿狼瘡抗凝物血漿凝血因子抑制物（自學）APCDomainstructureofthrombomodulin→TheproteinCanticoagulantpathway血漿蛋白C（PC）的檢測PC:activity,PC:A凝固法（APTT）發(fā)色底物法PC:antigen,PC:Ag免疫火箭電泳血漿蛋白C（PC）活性檢測凝固法-APTTchromogenicsubstrateassay血漿蛋白C（PC）檢測PC活性檢測方法評價凝固法影響因素多，如存在狼瘡抗凝物質(zhì)、FⅧ活性升高、FⅤ變異等。若存在APC抵抗時，血漿凝固時間假性縮短。可用乏PC的基質(zhì)血漿進行稀釋以糾正。確診遺傳性PC缺乏，活性測定應選發(fā)色底物法。血漿蛋白C（PC）抗原檢測ELISAClassificationofproteinCdeficiencytypeⅠ，typeⅡ純合子0-20%，雜合子<50%1.

HereditaryproteinCdeficiency2.Warfarin-inducedskinnecrosis（WISN)oralanticoagulanttherapywithvitaminK-antagonistssuchas

warfarin

transientbutseverehypercoagulablestate

microvascularthrombosis臨床意義3.AcquiredproteinCdeficiencyDICLiverdiseaseVitaminK-deficiencyMalignancyAdultrespiratorydistresssyndromeNeonatalperiod4.ElevatedPClevelsDiabetesNephroticsyndromeLatepregnancyOralcontraceptives臨床意義抗凝系統(tǒng)檢驗抗凝血酶（AT）蛋白C（PC）蛋白S（PS）組織因子途徑抑制物（TFPI）（自學）肝素、類肝素物質(zhì)血漿狼瘡抗凝物血漿凝血因子抑制物（自學）TheproteinCanticoagulantpathwayfreePS:activity,FPS:A凝固法：PTfreePS:antigen,FPS:Ag

膠乳凝集比濁法免疫火箭電泳血漿蛋白S（PS）檢測FreePSactivityassayPT＋PSPSPSPSPSPSPSPSPS＋PSPSPSPSPSPSPSPSFreePSactivityassay膠乳凝集比濁法C4bBPClassificationofproteinSdeficiencyTypeⅠ——insufficientquantityTypeⅡ——abnormalfunctionTypeⅢ——increasedclearanceoffreePS臨床意義1.Increasewithage2.AcquiredproteinSdeficiencyDecreasesduringpregnancy,inneonatesanduseoforalcontraceptivesDecreasesduringDIC,liverdiseaseDecreasesduringanti-vitaminKtherapy臨床意義3.Hereditary

proteinSdeficiencyTypeIIdeficiencyrareTypeIandTypeIIIdifferentphenotypicexpressionsofthesameproteinSgenotypeabout140differentmutationshavebeenreportedNomutationsfoundinabout40%ofthepatients抗凝系統(tǒng)檢驗抗凝血酶（AT）蛋白C（PC）蛋白S（PS）組織因子途徑抑制物（TFPI）（自學）肝素、類肝素物質(zhì)血漿狼瘡抗凝物血漿凝血因子抑制物（自學）血漿肝素及類肝素物質(zhì)的檢測檢測原理：1.甲苯胺藍糾正試驗——TT+甲苯胺藍2.血漿肝素定量——發(fā)色底物法，抗Ⅹa活性檢測UFH：抑制thrombin、FXaLMWH：抑制FXa臨床意義：1.肝素增多：抗凝治療、體外循環(huán)、血液透析等

肝素濃度監(jiān)測，0.2-0.4U/ml。2.類肝素物質(zhì)增多：嚴重肝病、SLE、DIC、某些惡性腫瘤、腎病綜合征等抗凝系統(tǒng)檢驗抗凝血酶（AT）蛋白C（PC）蛋白S（PS）組織因子途徑抑制物（TFPI）（自學）肝素、類肝素物質(zhì)血漿狼瘡抗凝物血漿凝血因子抑制物（自學）狼瘡抗凝物（Lupusanticoagulant，LA）狼瘡抗凝物是一種針對帶負電荷磷脂的自身抗體，是抗磷脂抗體的一種抗心磷脂抗體和抗β2糖蛋白1抗體在體外，可阻斷凝血酶原轉(zhuǎn)變成凝血酶，進而延長磷脂依賴性凝血試驗的凝固時間在體內(nèi)，促進血液凝固檢測原理RVVT

orAPTTLAC篩查試驗

延長加入正常血漿后，仍延長LAC確認試驗

加入過量磷脂中和LAC后，凝固時間縮短或恢復正常，確認血漿中存在LAC比值計算：SR、CR、NLR臨床意義LA陽性可見于：自身免疫性疾病、復發(fā)性流產(chǎn)、磷脂綜合征、易栓性疾病、動靜脈栓塞、惡性腫瘤纖溶活性的檢驗1.纖溶有關(guān)組分的檢測血漿纖溶酶原，PLG血漿組織型纖溶酶原活化劑血漿纖溶酶原活化抑制物血漿α2-抗纖溶酶血漿纖溶酶-抗纖溶酶復合物2.纖溶降解產(chǎn)物的檢測血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物，F(xiàn)DPsD-二聚體血漿魚精蛋白副凝固試驗，3P血漿纖維蛋白肽Bβ1-42與Bβ15-42血漿纖溶酶原（PLG）的檢測檢測原理：PLG:A發(fā)色底物法PLG:AgELISA臨床意義降低：纖溶活性增高合成減少：肝實質(zhì)損傷消耗增多：DIC、溶栓治療、原發(fā)性纖溶亢進等異常PLG血癥：活性降低，含量一般正常遺傳性PLG缺乏：極少見升高：纖溶活性降低血栓前狀態(tài)、血栓性疾病，某些惡性腫瘤、糖尿病方法評價：發(fā)色底物法簡便、快速，影響因素多，反映纖溶的靈敏度較低血漿組織型纖溶酶原活化劑（t-PA）檢測檢測原理：t-PA:A發(fā)色底物法t-PA:AgELISA臨床意義增高：纖溶活性增強原發(fā)性與繼發(fā)性纖溶亢進減低：纖溶活性減低

高凝狀態(tài)、血栓性疾病、手術(shù)、口服避孕藥溶栓治療監(jiān)測血漿纖溶酶原活化抑制劑（PAI）檢測檢測原理：PAI:A發(fā)色底物法PAI:CSDS利用t-PA-PAI形成1:1無活性復合物臨床意義增高：提示發(fā)生血栓的風險增加

減低：提示出血的風險增加PAI-1是急性時相反應蛋白，與t-PA聯(lián)合檢測

纖溶活性的檢驗1.纖溶有關(guān)組分的檢測血漿纖溶酶原，PLG血漿組織型纖溶酶原活化劑血漿纖溶酶原活化抑制物血漿α2-抗纖溶酶血漿纖溶酶-抗纖溶酶復合物2.纖溶降解產(chǎn)物的檢測血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物，F(xiàn)DPsD-二聚體血漿魚精蛋白副凝固試驗，3P血漿纖維蛋白肽Bβ1-42與Bβ15-42

凝血酶因子ⅩⅢa

非交聯(lián)交聯(lián)纖維蛋白原纖維蛋白纖維蛋白

纖溶酶纖溶酶纖溶酶

X、Y、D、E，Bβ1～42，A、B、C、HX’、Y’、D、E’，Bβ1～42，Bβ15～42，A、B、C、HX’、Y’、D、E’，D-二聚體DD/E、DY/YDYY/DXD等FPA,FPBFDPsD-二聚體Bβ1～42Bβ15～42臨床應用：升高：血栓前狀態(tài)與血栓性疾病，eg.DVT、DIC、肺栓塞、心梗、腦梗等，妊娠期原發(fā)性與繼發(fā)性纖溶鑒別：D-二聚體、Bβ15～42治療監(jiān)測：溶栓治療有效時，D-dimer先增高，后逐漸下降；含量持續(xù)升高或下降緩慢，提示藥物用量不足。

DIC抗凝治療中，高水平的D-dimer持續(xù)下降，間接說明凝血過程在減緩或中止，治療有效；而持續(xù)升高說明治療無效。D-dimer與FDPs組合分析FDPs（－）D-D（－）FDPs（－）D-D（＋）FDPs（＋）D-D（－）FDPs（＋）D-D（＋）纖溶活性正常原發(fā)性纖溶DIC,溶栓治療FDPs假陰性？血漿硫酸魚精蛋白副凝固試驗（3P）原理：繼發(fā)性纖溶時，形成可溶性FM-FDP復合物。魚精蛋白可使FM-FDP解離，F(xiàn)M-FM自行聚合沉淀，出現(xiàn)副凝固。臨床意義：陽性：DIC早、中期陰性：DIC晚期，原發(fā)性纖溶亢進原發(fā)性與繼發(fā)性纖溶鑒