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例如枯草例如枯草芽孢桿(一)配制培養(yǎng)基的4個(gè)原1.目的明一、選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的原則和方第四節(jié)培養(yǎng)基第四節(jié)培養(yǎng)基培養(yǎng)基(medium,復(fù)數(shù)media;或culturemedium)大大碳源、氮源培養(yǎng)培養(yǎng)不同的微生物必須采用不同的培培養(yǎng)目的不同,原料的選擇和配比不 2.營(yíng)養(yǎng)協(xié)1(1)(1)細(xì)菌:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或簡(jiǎn)稱普通肉湯培養(yǎng)基霉菌:查氏合成培養(yǎng)基微生物細(xì)胞內(nèi)各種成分間有一較細(xì)菌:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或簡(jiǎn)稱普通肉湯培養(yǎng)基霉菌:查氏合成培養(yǎng)基;要素:H2O>C源+能源>N源>P、S>K、Mg>生長(zhǎng)因子含量:(~10-1)(~10- (~10-3)(~10-4)(~10-5)(~10-6;(2)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及(2)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比

NHNH3>CO(NH2)2>NH4NO3>(NH4)2CO3>含氮量(82%)(46%) (29.2%)真菌真菌需C/N比較高的培養(yǎng)基;(素食細(xì)菌(動(dòng)物病原菌)需C/N比較低的培養(yǎng)基;(葷食3.3.(1)霉菌:pH霉菌:pHpHpH嗜極菌初始pH放線菌:pH酵母菌:pH通常培養(yǎng)條件pH的外pH的內(nèi)滲透滲透壓(osmoticpressure)是某水溶液中一個(gè)可用它表示兩種濃度不同的溶液間被一個(gè)半透性薄膜隔開時(shí),稀溶液中的水分子會(huì)因水勢(shì)(wterpotentiality)滲透壓值。(2)滲透壓和水活高滲溶液會(huì)使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離3水活度即水活度即 (3)氧化還原電勢(shì)(redox厭氧性微生物:低于+0.1伏條件下生兼性厭氧微生物:+0.1伏以上時(shí)進(jìn)行好氧呼吸厭氧性微生物:低于+0.1伏條件下生兼性厭氧微生物:+0.1伏以上時(shí)進(jìn)行好氧呼吸+0.1伏以下時(shí)進(jìn)行(Vc,0.)、硫化氫(0.05%)(<0.0%))降低E不同類型微生物生長(zhǎng)對(duì)氧化還原電位的要求在無(wú)氧條件下呈無(wú)色(Eh=-40mV); 青測(cè)定氧化還原電勢(shì)除用電位計(jì)外,還可在培養(yǎng) 中 中 將料(4)567用玉米芯來(lái)培養(yǎng)脈孢菌(Neurosporaspp.)(二)4 2.參閱文各項(xiàng)因素的比較或反復(fù)優(yōu)選法正交試驗(yàn)設(shè)工作量很設(shè)計(jì)、試驗(yàn)新配3.精心設(shè)設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)—生態(tài)模參閱文試驗(yàn)比4.試驗(yàn)比然后作搖瓶培養(yǎng)(shakeculture)試驗(yàn),再進(jìn)行臺(tái)式發(fā)酵罐培養(yǎng)試最后才擴(kuò)大到試驗(yàn)型發(fā)酵罐和生產(chǎn)型發(fā)酵罐5子細(xì)胞,需要使子細(xì)胞,需要使 培養(yǎng)(四)發(fā)酵工廠的培養(yǎng)組合培養(yǎng)液體液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基脫水培養(yǎng)基(二)按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)作分擇性培養(yǎng)基(三)按培養(yǎng)基對(duì)微生物的功能作分如果產(chǎn)物分子中氮元素較多,氮源也要相應(yīng)增加2.發(fā)酵培養(yǎng)有細(xì)胞構(gòu)造的微生物營(yíng)有細(xì)胞構(gòu)造的微生物營(yíng)養(yǎng)方式都是滲透營(yíng)養(yǎng)單純擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主 和基團(tuán)移3.微生物的營(yíng)養(yǎng)的方擺斜三、培養(yǎng)基的配配配溶溶滅滅調(diào)調(diào)包包過(guò)過(guò)分本本章小營(yíng) 生命活動(dòng)所需物質(zhì)之微微生物6大類營(yíng)養(yǎng)碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、能源、生長(zhǎng)因子、水>碳源>氮源水>碳源>氮源2.微2.微生物的營(yíng)養(yǎng)類光能自養(yǎng)微碳氮比(C/N比4.碳氮比(C/N比4.設(shè)計(jì)和配臵444碳氮碳氮比(C/N)①pH的內(nèi)源調(diào)內(nèi)源調(diào)內(nèi)源調(diào)節(jié)主要有以下兩種方法第一種是采用磷酸緩沖液進(jìn)行調(diào)節(jié) =1時(shí),溶液的pH穩(wěn)定在6.8w該溶液的百分相對(duì)濕度(ERH,equilibriumrelative水活度定量涵義為:在同溫同壓下各種各種微生物生長(zhǎng)繁殖范圍的w值在0.998~0.61.天然培養(yǎng)(complexmedia,undefined9(chemicaldefined(chemicaldefined2.組合培養(yǎng)3.半3.半組合培養(yǎng)基(semi-defined又稱半合成培養(yǎng)基(semi-syntheticmedia),指嚴(yán)格地講,凡含有特殊處理的瓊脂的任何組1.液體1.液體培養(yǎng)基(liquid2.固體培養(yǎng)基(solid根據(jù)根據(jù)固體的性質(zhì)又可把它分為4種類型非可逆 3.半3.半固體培養(yǎng)基(semi-solid例如,“稀瓊脂”(sloppyagar),它在小型容 4.脫水培養(yǎng)基(dehydrated4.脫水培養(yǎng)基(dehydratedculture又稱脫水商品培養(yǎng)基(dehydratedcommercialmedia)或預(yù)制干燥培養(yǎng)基(pre-fabricateddriedculturemedia),指含 培養(yǎng)基(solidified 凝固凝固劑必須具有的特點(diǎn)不 常用的凝固劑海藻酸鈉(alginate)脫乙酰吉蘭糖膠(Gelrite)多聚醇F127(pluronicpolyolF127) (2)非可逆 (2)非可逆 培養(yǎng)基或無(wú)機(jī)硅膠(silicagel) 行培養(yǎng),待長(zhǎng)出菌,可計(jì)算出單位水樣中的實(shí)際含1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimum2.加2.加富培養(yǎng)基(enrichedEg(Bordelapertussis)需要 3.增殖培養(yǎng)基(complete3.增殖培養(yǎng)基(completeEg.要分離出能利用石蠟油進(jìn)行發(fā)酵的酵母菌,只需在4.選擇性培養(yǎng)基(selected選擇性培養(yǎng)基是19世紀(jì)荷蘭的MWBeijerinck和的S.N.Vinogradsky發(fā)明的。(1)營(yíng)養(yǎng)物種加富性選擇培養(yǎng)基(enrcdselectedmedia),采用了這類“投其所好”的篩選對(duì)象很快在數(shù)量上接近或超過(guò)原試樣中其他 (2)利用該分離對(duì)象對(duì)某種抑菌物質(zhì)所特有的培養(yǎng)的目的。這種培養(yǎng)基稱為抑制性選擇培(inhibitedselectedmedia) pHpH5.鑒別性培養(yǎng)基(differential即EMB(EosinMethyleneBlue)培養(yǎng)基。它在飲用水、牛奶的大腸菌群(coliforms)數(shù)等細(xì)學(xué)檢查和在Ecoli的遺傳學(xué)研究工作中有著重要的用2.2.溶3.3.調(diào)煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97煮沸,瓊脂的熔解溫度95~975.4.過(guò)5.4.過(guò)(1)若作靜臵培養(yǎng),則

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