試卷第=page11頁，共=sectionpages33頁試卷第=page11頁，共=sectionpages33頁山東省煙臺市萊州市一中2022-2023學(xué)年高二3月月考生物試題學(xué)校:___________姓名：___________班級：___________考號：___________一、單選題1．《詩經(jīng)》中“十月獲稻，為此春酒，以介眉壽”記錄了古人用新鮮稻米釀酒，以求延年益壽的習(xí)俗。米酒釀造主要包括蒸米、拌酒曲、發(fā)酵三步，酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌，霉菌主要起到糖化的作用（把米中的淀粉轉(zhuǎn)化成葡萄糖）。下列說法錯誤的是（）A．釀造米酒的過程中，酵母菌可進(jìn)行有氧呼吸和無氧呼吸B．蒸米后通常需要進(jìn)行冷卻，再加入酒曲，其目的是防止溫度過高殺死酒曲中的微生物C．米酒發(fā)酵初期，霉菌可以通過糖化作用，為酵母菌的呼吸作用提供底物D．腐乳發(fā)酵過程中，也是利用了毛霉等微生物的糖化作用【答案】D【分析】葡萄酒制作過程中，將裝配好的發(fā)酵瓶進(jìn)行發(fā)酵，當(dāng)發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)氣泡，表示發(fā)酵完畢。若發(fā)酵過程溫度高于30℃，則需及時采取降溫措施，主要為了防止影響酒的風(fēng)味。【詳解】A、參與果酒制作的微生物主要是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，所以米酒發(fā)酵過程中，酵母菌進(jìn)行細(xì)胞呼吸的類型是有氧呼吸和無氧呼吸，A正確；B、蒸米后，溫度較高，通常需要進(jìn)行冷卻，再加入酒曲，其目的是防止溫度過高殺死酒曲中的微生物，B正確；C、酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌，霉菌主要起到糖化的作用，能把米中的淀粉轉(zhuǎn)化成葡萄糖，葡萄糖能為醇母菌的呼吸作用提供底物，C正確；D、腐乳發(fā)酵過程中，起到主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸，毛霉不能起糖化作用，D錯誤。故選D。2．培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動物細(xì)胞（或組織）生長繁殖的，由不同物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。針對下表中的三組培養(yǎng)基，下列敘述錯誤的是（）組別培養(yǎng)基成分a蛋白胨、酵母提取物、甘露醇、水b葡萄糖、尿素、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖c礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、甘氨酸、水、瓊脂A．a(chǎn)組培養(yǎng)基可用于醋化醋桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，該培養(yǎng)過程需用到磁力攪拌器和搖床B．b組培養(yǎng)基可用于分離含脲酶的微生物，該實驗中需用全營養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對照C．c組培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)植物愈傷組織再分化，添加的植物生長調(diào)節(jié)劑需事先過濾滅菌D．上述培養(yǎng)基不僅要為相應(yīng)的細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境【答案】C【分析】1.培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽等。2.常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。3.常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。4.篩選目的微生物時應(yīng)該使用只有目的微生物能夠生存，而其他微生物不能生存的選擇培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。5.從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌的實驗流程：土壤取樣→樣品的稀釋→將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上→挑選能生長的菌落→鑒定。6.分解尿素的細(xì)菌的鑒定細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng).在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅?！驹斀狻緼、a組培養(yǎng)基可用于醋化醋桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，磁力攪拌器和搖床都是擴(kuò)大菌落與其所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，利于菌落的培養(yǎng)，A正確；B、b組培養(yǎng)基以尿素作為唯一氮源，含脲酶的微生物在該培養(yǎng)基上能生長，其它微生物在該培養(yǎng)基上因缺乏氮源而不能生長，可用于分離含脲酶的微生物，該實驗中需用全營養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對照，通過對照可以判斷選擇培養(yǎng)基的選擇作用，B正確；C、c組培養(yǎng)基可以用來誘導(dǎo)植物愈傷組織再分化，添加的植物生長調(diào)節(jié)劑不能過濾滅菌，易被分解，C錯誤；D、上述培養(yǎng)基不僅要為相應(yīng)的細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)，還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境，D正確。故選C。3．如圖所示，科研人員利用誘變方式選育可高產(chǎn)β－胡蘿卜素的三孢布拉霉負(fù)菌，未突變菌不能在含有β－紫羅酮的培養(yǎng)基上生長。隨β－胡蘿卜素含量增加，菌體顏色從黃色加深至橙紅色。圖甲表示選育菌種及獲得β－胡蘿卜素的流程，以下相關(guān)說法錯誤的是（

）A．經(jīng)過①紫外線照射后，可能有少數(shù)三孢布拉霉負(fù)菌能在含β－紫羅酮的培養(yǎng)基上生長B．進(jìn)行③操作時，應(yīng)選擇橙紅色區(qū)域較大的菌落中的菌株繼續(xù)接種培養(yǎng)C．要得到圖乙所示的菌落，可用稀釋涂布平板法進(jìn)行②操作接種后再培養(yǎng)D．能在添加了β－紫羅酮的乙上長成菌落的目的菌，其基因未發(fā)生改變【答案】D【分析】微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)制成平板、接種、劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斀狻緼、過程①紫外線照射的作用是利用物理因素誘導(dǎo)發(fā)生基因突變，由于突變的不定向性，被照射的三孢布拉霉負(fù)菌只有少數(shù)能在含β－紫羅酮的培養(yǎng)基上生長，A正確；B、橙紅色的菌體為高產(chǎn)菌，進(jìn)行③操作時，應(yīng)選擇較大的橙紅色菌落中的菌株繼續(xù)接種培養(yǎng)，B正確；C、圖乙中的菌落均勻分布于平板，說明接種方法是稀釋涂布平板法，C正確；D、能在添加了β－紫羅酮的乙上長成菌落的細(xì)菌是經(jīng)過紫外線照射后的高產(chǎn)菌，其遺傳物質(zhì)都發(fā)生了改變，D錯誤。故選D。4．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對其計數(shù)（如下圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列有關(guān)敘述錯誤的是（

）A．提供適宜的溫度，將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，有利于降解菌的生長繁殖B．利用該方法計數(shù)結(jié)果往往比顯微鏡直接計數(shù)法偏小C．配制以丙草胺為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，可以提高降解菌的濃度D．5號試管的結(jié)果表明每ml土壤中的菌株數(shù)為1.7×109個【答案】A【分析】1、微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。2、在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基?！驹斀狻緼、能有效降解乙草胺的菌株包括細(xì)菌、放線菌和真菌，不同微生物對培養(yǎng)基中的pH的要求不同，培養(yǎng)霉菌時需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或微堿性，A錯誤；B、圖示采用的計數(shù)方法是稀釋涂布平板法，由于兩個或多個細(xì)胞連在一起時，在平板上觀察到一個菌落，因此用該方法計數(shù)結(jié)果往往比顯微鏡直接計數(shù)法偏小，B正確；C、乙草胺可提供碳源、氮源，配制以乙草胺為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，可提高降解菌的濃度，C正確；D、由圖可知共稀釋了106倍，則5號試管的結(jié)果表明每ml土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3÷0.1×106=1.7×109個，D正確。故選A。5．微藻能合成很多獨特的對人體非常有益的生物活性物質(zhì)，如EPA和DHA等不飽和脂肪酸。科研人員將自養(yǎng)型綠色巴夫藻和既可自養(yǎng)又能異養(yǎng)的四鞭藻進(jìn)行融合，經(jīng)篩選獲得融合藻株。在自養(yǎng)培養(yǎng)條件下，測定它們的生長速率和EPA、DHA產(chǎn)率相對值，如下表所示。下列有關(guān)說法錯誤的是（

）藻體生長速率EPADHA綠色巴夫藻0.0580.2120.073四鞭藻0.1400.058無融合藻0.1410.0670.054A．細(xì)胞誘導(dǎo)融合完成后，培養(yǎng)體系中含有不止3種類型的細(xì)胞B．融合藻可具有兩種藻類的所有優(yōu)點，如生長迅速且能合成EPA和DHAC．需用酶解法去除藻類細(xì)胞的細(xì)胞壁，再誘導(dǎo)原生質(zhì)體進(jìn)行融合D．獲得的融合藻還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，以持續(xù)獲得EPA、DHA等物質(zhì)【答案】B【分析】根據(jù)表格信息可知，綠色巴夫藻能合成EPA和DHA，而四鞭藻不能合成DHA，融合藻可合成EPA和DHA。融合藻的生長速率與四鞭藻接近，但大于綠色巴夫藻?！驹斀狻緼、考慮未融合的細(xì)胞和兩兩融合的細(xì)胞，經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)融合完成后培養(yǎng)體系中應(yīng)有未融合的綠色巴夫藻細(xì)胞、四鞭藻細(xì)胞以及兩個綠色巴夫藻細(xì)胞融合體、兩個四鞭藻細(xì)胞融合體、一個四鞭藻細(xì)胞和一個綠色巴夫藻細(xì)胞融合體，共5種類型的細(xì)胞，故培養(yǎng)體系中含有不止3種類型的細(xì)胞，A正確；B、分析圖表數(shù)據(jù)可知，融合藻可生長迅速且能合成EPA和DHA，但由于基因間的互作效應(yīng)，融合藻不一定具有兩種藻類的所有優(yōu)點，B錯誤；C、植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性特點，需用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除藻類細(xì)胞的細(xì)胞壁，再誘導(dǎo)原生質(zhì)體進(jìn)行融合，C正確；D、獲得的融合藻還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，以獲得更多的融合藻，持續(xù)獲得EPA、DHA等物質(zhì)，D正確。故選B。6．細(xì)胞的融合技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用。下圖為細(xì)胞融合的簡略過程，下列有關(guān)敘述錯誤的是（

）A．若a、b表示配子，圖示可代表胚胎工程，將d形成的胚胎切割可獲得同卵雙胎或多胎B．若a、b表示兩種植物的原生質(zhì)體，產(chǎn)生c可采用電融合法、PEG融合法等進(jìn)行誘導(dǎo)C．若a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和免疫后的B細(xì)胞，c的種類有多種，d產(chǎn)生的抗體也有多種D．細(xì)胞融合技術(shù)可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，獲得符合人類需求的雜種細(xì)胞乃至個體【答案】C【分析】胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過處理后獲得的胚胎，還需移植到雌性動物體內(nèi)產(chǎn)生后代，以滿足人類的各種需求。理論基礎(chǔ)：哺乳動物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律?！驹斀狻緼、胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，因此若a、b表示配子，圖示可代表胚胎工程，將d形成的胚胎切割可獲得同卵雙胎或多胎，A正確；B、若a、b表示兩種植物的原生質(zhì)體，產(chǎn)生c可采用電融合法（物理）、PEG（化學(xué)）融合法等進(jìn)行誘導(dǎo)，B正確；C、若a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和免疫后的B細(xì)胞，由于從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞存在多種，且細(xì)胞融合是隨機(jī)的，因此c的種類有多種，由于圖示為細(xì)胞融合的簡略過程，因此d可能是經(jīng)過抗體檢測篩選的能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，因此d產(chǎn)生的抗體可能是一種，C錯誤；D、細(xì)胞融合技術(shù)可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，獲得符合人類需求的雜種細(xì)胞（如雜交瘤細(xì)胞）乃至個體（如植物體細(xì)胞雜交形成的雜種植株），D正確。故選C。7．HER-2（一種跨膜糖蛋白）高表達(dá)通常只出現(xiàn)于胎兒期，正常人體組織中其表達(dá)量極低，在乳腺細(xì)胞中高表達(dá)可加速細(xì)胞分裂，使其增殖、分化過程失衡，最終轉(zhuǎn)變?yōu)槿橄侔??？贵w-藥物偶聯(lián)物T-DMI由曲妥珠單抗和藥物DMI連接而成，對HER-2有很強(qiáng)的靶向性。下列相關(guān)分析錯誤的是（

）A．胎兒期HER-2高表達(dá)可能與胚胎發(fā)育有關(guān)，成人HER-2含量高可為乳腺癌診斷提供參考B．因為獲取的B淋巴細(xì)胞可能有多種，所以曲妥珠單抗的制備過程需進(jìn)行專一抗體陽性檢測C．DMI與HER-2特異性結(jié)合是T-DMI對癌細(xì)胞進(jìn)行選擇性殺傷的關(guān)鍵D．利用同位素標(biāo)記的曲妥珠單抗在乳腺組織中成像的技術(shù)可定位診斷腫瘤的位置【答案】C【分析】由題意可知，HER-2（一種跨膜糖蛋白）高表達(dá)通常只出現(xiàn)于胎兒期，正常人體組織中其表達(dá)量極低，在乳腺細(xì)胞中高表達(dá)可加速細(xì)胞分裂，使其增殖、分化過程失衡，最終轉(zhuǎn)變?yōu)槿橄侔??？贵w-藥物偶聯(lián)物T-DMI能與HER-2特異性結(jié)合?！驹斀狻緼、HER-2（一種跨膜糖蛋白）高表達(dá)通常只出現(xiàn)于胎兒期，可能與胚胎發(fā)育有關(guān)，正常人體組織中其表達(dá)量極低，在乳腺細(xì)胞中高表達(dá)可加速細(xì)胞分裂，使其增殖、分化過程失衡，最終轉(zhuǎn)變?yōu)槿橄侔?，所以成人HER-2含量高可為乳腺癌診斷提供參考，A正確；B、機(jī)體生活的環(huán)境存在多種抗原，所以獲取的B淋巴細(xì)胞可能有多種，故曲妥珠單抗的制備過程需進(jìn)行專一抗體陽性檢測，以保證能與HER-2特異性結(jié)合，B正確；C、DMI是藥物，不能與HER-2特異性結(jié)合，能與HER-2特異性結(jié)合的是曲妥珠單抗，C錯誤；D、曲妥珠單抗能與HER-2特異性結(jié)合，故利用同位素標(biāo)記的曲妥珠單抗在乳腺組織中成像的技術(shù)可定位診斷腫瘤的位置，D正確。故選C。8．核移植是將供體細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使后者不經(jīng)精子穿透等有性過程即可被激活、分裂并發(fā)育，讓核供體的基因得到完全復(fù)制，培養(yǎng)一段時間后，再把發(fā)育中的卵母細(xì)胞移植到動物體內(nèi)的方法。下列相關(guān)敘述，錯誤的是（

）A．核移植技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的克隆，以保持轉(zhuǎn)基因動物的性狀B．細(xì)胞核移植技術(shù)可培育轉(zhuǎn)基因克隆動物為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白C．通過細(xì)胞核移植可人工重新構(gòu)建胚胎，用于優(yōu)良種畜的培育D．核移植技術(shù)的成功率較高，因而在各方面有了較為廣泛的應(yīng)用【答案】D【分析】體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用：（1）畜牧業(yè)：可以加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。（2）保護(hù)瀕危物種：可望利用體細(xì)胞核移植技術(shù)增加瀕危動物的存活數(shù)量。（3）醫(yī)藥衛(wèi)生：轉(zhuǎn)基因克隆動物可作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)珍貴醫(yī)用蛋白；轉(zhuǎn)基因克隆動物細(xì)胞、組織和器官可作為異種移植的供體；人的核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)分化，形成相應(yīng)的組織、器官后，可用于組織器官的移植。（4）其他領(lǐng)域：研究克隆動物和克隆細(xì)胞可使人類深入了解胚胎發(fā)育及衰老過程，用克隆動物做疾病模型能使人們更好追蹤研究疾病的發(fā)展過程和治療疾病。【詳解】A、核移植技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的克隆，該技術(shù)屬于無性繁殖，以保持轉(zhuǎn)基因動物的性狀，A正確；B、利用體細(xì)胞核移植技術(shù)培育的轉(zhuǎn)基因克隆動物可以作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白，B正確；C、通過細(xì)胞核移植可人工重新構(gòu)建胚胎，用于優(yōu)良種畜的培育，C正確；D、盡管通過體細(xì)胞核移植技術(shù)已經(jīng)獲得了多種克隆動物，但該技術(shù)的成功率仍然非常低，各個技術(shù)環(huán)節(jié)也有待進(jìn)一步改進(jìn)，故并未實現(xiàn)各方面的廣泛應(yīng)用，D錯誤。故選D。9．在核移植獲得的重構(gòu)胚中，初級合子基因激活基因（minorZGA）不能正常表達(dá)，導(dǎo)致重構(gòu)胚難以發(fā)育。研究者發(fā)現(xiàn)，提前去除供體細(xì)胞核中的黏連蛋白可以顯著提高重構(gòu)胚發(fā)育為囊胚的成功率。下列分析正確的是（

）A．minorZGA只存在于重構(gòu)胚中且只在重構(gòu)胚中表達(dá)B．只將供體細(xì)胞核注入到去核卵母細(xì)胞中能克服重構(gòu)胚難以發(fā)育的情況C．黏連蛋白可能是導(dǎo)致重構(gòu)胚中minorZGA不能被激活的關(guān)鍵物質(zhì)D．若要提高雌性動物的產(chǎn)出率，可以切取原腸胚的外胚層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定【答案】C【分析】試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。動物核移植將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。核移植得到的動物稱克隆動物?！驹斀狻緼、minorZGA在重構(gòu)胚和供體細(xì)胞中都存在，A錯誤；B、不僅需將供體細(xì)胞核注入去核卵細(xì)胞，也需提前去除供體細(xì)胞核中的黏連蛋白，B錯誤；C、由題意可知，黏連蛋白可能是導(dǎo)致重構(gòu)胚中minorZGA不能被激活的關(guān)鍵物質(zhì)，C正確；D、外胚層細(xì)胞形成表皮和神經(jīng)組織，不能進(jìn)行性別鑒定，若要對早期胚胎進(jìn)行性別鑒定，可以取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析，D錯誤。故選C。10．科學(xué)家將Oct3/4．Sox2，c-Myc和Klf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，然后在培養(yǎng)ES細(xì)胞的培養(yǎng)基上培養(yǎng)這些細(xì)胞。2～3周后，這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細(xì)胞。這一研究成果有望為人類某些疾病的治療帶來福音。下列有關(guān)該實驗的分析不正確的是（）A．實驗中逆轉(zhuǎn)錄病毒作為外源基因的載體，需經(jīng)顯微注射才能轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞B．將小鼠成纖維細(xì)胞在培養(yǎng)基上培養(yǎng)作對照可排除iPS細(xì)胞產(chǎn)生是培養(yǎng)基作用的結(jié)果C．若將病人的皮膚成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞再進(jìn)行細(xì)胞移植不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)D．由于iPS細(xì)胞具有活躍的分裂能力，用它進(jìn)行人類某些疾病治療可能存在安全風(fēng)險【答案】A【分析】胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造?！驹斀狻緼、若用病毒作為基因的載體，則不需要進(jìn)行顯微注射導(dǎo)入受體細(xì)胞，A錯誤；B、對照組可以排除干擾因素，所以要排除iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由培養(yǎng)基作用的結(jié)果需將小鼠成纖維細(xì)胞直接在培養(yǎng)基上培養(yǎng)作為對照，B正確；C、由于用病人的皮膚成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞，其來源于病人，不屬于異物，不會引起免疫反應(yīng)，C正確；D、由于iPS細(xì)胞具有活躍的分裂能力，若不受控制可能轉(zhuǎn)化為癌細(xì)胞，所以用它進(jìn)行治療時可能存在安全風(fēng)險，D正確。故選A。【點睛】11．如圖為某種質(zhì)粒的簡圖，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，P為轉(zhuǎn)錄的啟動部位。已知目的基因的兩端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，受體細(xì)胞為無任何抗藥性的原核細(xì)胞。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切，在DNA連接酶作用下，生成由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有兩種B．DNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來形成重組質(zhì)粒，該過程形成兩個磷酸二酯鍵C．為了防止目的基因反向粘連和質(zhì)粒自身環(huán)化，酶切時可選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠD．能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長的受體細(xì)胞表明該目的基因已成功導(dǎo)入該細(xì)胞【答案】C【分析】基因工程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體選擇限制酶的種類時，要保證所選的限制酶能切割質(zhì)粒和獲取目的基因，又要保證使用DNA連接酶連接時，既能讓質(zhì)粒與目的基因相互連接形成重組質(zhì)粒，又能有效避免質(zhì)粒自身環(huán)化或目的基因自身環(huán)化；本題中若單獨使用EcoRⅠ或BamHⅠ處理，雖然都能保證質(zhì)粒與目的基因相互連接形成重組質(zhì)粒，但都不能有效避免質(zhì)粒自身環(huán)化或目的基因自身環(huán)化，因此要同時滿足上述兩個條件，應(yīng)同時使用EcoRⅠ和BamHⅠ處理?！驹斀狻緼、根據(jù)題意，目的基因的兩端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，將含有目的基因的DNA用EcoRⅠ酶切，會得到含目的基因的DNA片段和不含目的基因的DNA片段；根據(jù)質(zhì)粒的簡圖可知，將質(zhì)粒用EcoRⅠ酶切，會得到與質(zhì)粒周長等長的鏈狀DNA；因此將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切，在DNA連接酶作用下，可生成含目的基因的原DNA片段兩個之間進(jìn)行連接、由含目的基因的DNA片段與質(zhì)粒周長等長的鏈狀DNA相互連接形成的鏈狀DNA、二倍于原質(zhì)粒周長的環(huán)狀DNA三種類型，A錯誤；B、DNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來形成一個重組質(zhì)粒，該過程形成四個磷酸二酯鍵，B錯誤；C、EcoRⅠ和BamHⅠ的識別序列不同，獲取目的基因和切割質(zhì)粒時，同時選用EcoRⅠ和BamHⅠ切割，目的基因兩端形成的末端不同，切割開的質(zhì)粒兩端形成的末端不同，再用DNA連接酶連接，可以防止目的基因反向連接和質(zhì)粒自身環(huán)化，C正確；D、題圖顯示，在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中質(zhì)粒中的青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因都不會被破壞，因此能在含青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長的受體細(xì)胞不能表明目的基因已成功導(dǎo)入該細(xì)胞，D錯誤。故選C?！军c睛】本題結(jié)合圖形考查基因表達(dá)載體的構(gòu)建，要求考生理解構(gòu)建基因表達(dá)載體的方法，明確構(gòu)建的基因表達(dá)載體應(yīng)含有哪些部件及這些部件的功能，此題難度稍大。12．實時熒光定量PCR簡稱qPCR，靈敏度高特異性好，是目前檢測微小殘留病變的常用方法。將熒光標(biāo)記的Taqman探針與待測樣本DNA混合，當(dāng)探針完整時，不產(chǎn)生熒光。在PCR過程中，與目的基因結(jié)合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，R發(fā)出的熒光可被檢測到在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光（如圖所示），隨著循環(huán)次數(shù)的增加，熒光信號強(qiáng)度增加，通過實時檢測熒光信號強(qiáng)度，可得Ct值（該值與待測樣本中目的基因的個數(shù)呈負(fù)相關(guān)）。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．每個模板DNA分子含有4個游離的磷酸基團(tuán)B．在反應(yīng)過程中，需要ATP為新鏈的合成提供能量C．做qPCR之前，需要先根據(jù)目的基因的核苷酸序列合成引物和Taqman探針D．熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明含有的病變的概率越小【答案】C【分析】PCR技術(shù)：概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。原理：DNA復(fù)制。前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對引物。條件：模板DNA、四種dNTP（三磷酸脫氧核苷酸）、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。【詳解】A、DNA分子為兩條反向平行的兩條鏈，每條鏈都含有1個游離的磷酸基團(tuán)，則一個DNA分子含有2個游離的磷酸基團(tuán)，A錯誤；B、在反應(yīng)過程中，dNTP（三磷酸脫氧核苷酸）既是原料又為新鏈的合成提供能量，無需ATP，B錯誤；C、做qPCR之前，需要先根據(jù)目的基因的核苷酸序列合成1對引物和1種Taqman探針，C正確；D、若熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明擴(kuò)增次數(shù)少，說明更多的熒光探針與目的基因進(jìn)行了堿基互補(bǔ)配對，可推測獲得的核酸產(chǎn)物中含有病變的概率越大，D錯誤。故選C。13．限制性內(nèi)切核酸酶SalI和XhoI識別序列與切割位點如下圖1。用SalI切割目的基因兩側(cè)，用XhoⅠ切割載體質(zhì)粒，再用連接酶處理可形成重組質(zhì)粒。實驗者用2種酶單獨切割或同時切割普通質(zhì)粒和重組重粒，再將產(chǎn)物電泳分離，其結(jié)果如下圖2。下列敘述正確的是（

）A．SalI切割產(chǎn)生的黏性末端與XhoI切割產(chǎn)生的黏性末端不同B．根據(jù)重組質(zhì)粒的酶切結(jié)果可知有2個目的基因插入重組質(zhì)粒中C．重組質(zhì)粒上有1個限制酶SalI和1個限制酶XhoI的識別序列D．2種酶切后產(chǎn)生的2kb產(chǎn)物可作為探針篩選含目的基因的受體細(xì)胞【答案】C【分析】用SalI切割目的基因兩側(cè)，用XhoⅠ切割載體質(zhì)粒，再用連接酶處理可形成重組質(zhì)粒，連接位置序列無法再被這2種限制酶識別?！驹斀狻緼、SalI切割產(chǎn)生的黏性末端與XhoI切割產(chǎn)生的黏性末端都是3’-AGCT-5’，A錯誤；B、普通質(zhì)粒被切割后長度都是5kb，用一種酶切割重組質(zhì)粒得到的結(jié)果都是7kb，用兩種酶切割結(jié)果顯示為5kb和2kb兩個片段，如果重組質(zhì)粒上有1個限制酶SalI和1個限制酶XhoI的識別序列，則在目的基因中有1個限制酶XhoI識別序列。若兩個目的基因插入重組質(zhì)粒中，則兩個目的基因中含有兩個限制酶XhoI識別序列，重組質(zhì)粒被限制酶XhoI切割后會產(chǎn)生2個片段，與電泳結(jié)果不符，因此有1個目的基因插入重組質(zhì)粒中，B錯誤；C、由于用一種酶切割后只有一個片段，用兩種酶切割結(jié)果顯示為兩個片段，說明重組質(zhì)粒上有1個限制酶SalI和1個限制酶XhoI的識別序列，C正確；D、2種酶切后產(chǎn)生的2kb產(chǎn)物只含有目的基因的部分片段，且需要經(jīng)過標(biāo)記，然后解鏈成為單鏈DNA分子才可以作為探針篩選含目的基因的受體細(xì)胞，D錯誤。故選C。14．大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述不正確的是（

）A．提取DNA時可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解B．將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定C．電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理D．根據(jù)電泳結(jié)果，質(zhì)粒上一定沒有限制酶I和II的切割位點，而有限制酶III的切割位點【答案】D【分析】DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。【詳解】A、DNA在冷酒精中溶解度很低，提取DNA時加入酒精，是為了讓DNA析出，蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解，A正確；B、將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺試劑在沸水條件進(jìn)行鑒定，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色，B正確；C、DNA帶負(fù)電，電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理，C正確；D、因為質(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個切割位點，也可能沒有切割位點，D錯誤。故選D。15．下列有關(guān)基因工程和蛋白質(zhì)工程的敘述，不正確的是（

）A．將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用顯微注射法B．設(shè)計擴(kuò)增目的基因的引物時，不必考慮表達(dá)載體的序列C．蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新蛋白質(zhì)的技術(shù)D．蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)【答案】B【分析】基因工程一般是將自然界已有的基因?qū)肓硪环N生物的體內(nèi)，定向改造生物性狀，實現(xiàn)跨越物種的基因交流過程，但其生產(chǎn)的蛋白質(zhì)都是自然界中已有的蛋白質(zhì)，并不一定符合人們的需求，而蛋白質(zhì)工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)的技術(shù)，可以產(chǎn)生自然界中沒有的蛋白質(zhì)，它是在基因工程上發(fā)展出來的第二代基因工程技術(shù)。【詳解】A、將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用顯微注射法，A正確；B、設(shè)計的引物應(yīng)能與表達(dá)載體兩端的序列互補(bǔ)配對，B錯誤；C、蛋白質(zhì)工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)的技術(shù)，C正確；D、通過蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)，D正確。故選B。二、多選題16．野生型大腸桿菌能夠在基本培養(yǎng)基中生長，突變菌株A和突變菌株B由于不能自己合成某些營養(yǎng)素，而不能在基本培養(yǎng)基上生長?？茖W(xué)工作中利用菌株A和菌株B進(jìn)行了如下兩個實驗。實驗一：將菌株A和菌株B混合后，涂布于基本培養(yǎng)基上，結(jié)果如圖1；實驗二：將菌株A和菌株B分別置于U型管的兩端，中間由過濾器隔開，加壓力或吸力后，培養(yǎng)液可以自由流通，但細(xì)菌細(xì)胞不能通過。經(jīng)幾小時培養(yǎng)后，將菌液A、B分別涂布于基本培養(yǎng)基上，結(jié)果如圖2．下列推測正確的是（

）A．菌株A和菌株B含有相同的突變基因菌株B．不同菌株間接觸后才可能交換遺傳物質(zhì)C．菌株之間可能發(fā)生類似有性雜交的現(xiàn)象D．混合培養(yǎng)的菌株都能在基本培養(yǎng)基上生長【答案】BC【分析】由圖可知，單獨培養(yǎng)不產(chǎn)生菌落，混合培養(yǎng)可產(chǎn)生菌落，說明含有不同的突變基因。圖2說明不同菌株間不接觸不能交換遺傳物質(zhì)，圖1中不同菌株間接觸后培養(yǎng)基上出現(xiàn)了菌落，說明不同菌株間接觸后才可能交換遺傳物質(zhì)，導(dǎo)致產(chǎn)生變異。【詳解】A、若菌株A和菌株B含有相同的突變基因，則兩者不可能產(chǎn)生可在基本培養(yǎng)基上生長的菌株，A錯誤；B、：由圖2看出，將菌株A和菌株B分別置于U型管的兩端，中間由過濾器隔開，使細(xì)菌細(xì)胞不能通過，結(jié)果培養(yǎng)基上無菌落產(chǎn)生，說明不同菌株間不接觸不能交換遺傳物質(zhì)，而圖1中不同菌株間接觸后培養(yǎng)基上出現(xiàn)了菌落，說明不同菌株間接觸后才可能交換遺傳物質(zhì)，導(dǎo)致產(chǎn)生變異，B正確；C、圖1培養(yǎng)基上的菌落的產(chǎn)生不可能是菌株A、B互相提供營養(yǎng)素產(chǎn)生的，有可能是A和B混合后產(chǎn)生了新的菌株類型，推測菌株之間可能發(fā)生類似有性雜交的現(xiàn)象，C正確；D、據(jù)圖可知，混合培養(yǎng)液中有可在基本培養(yǎng)基上生長的菌株，但不能說明混合培養(yǎng)的菌株都能在基本培養(yǎng)基上生長，D錯誤。故選BC17．甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀，但屬于胞質(zhì)雄性不育品種。通過體細(xì)胞雜交，成功將乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因引入甲品種中。下列相關(guān)敘述錯誤的是（

）A．獲得的融合原生質(zhì)體需放在無菌水中以防雜菌污染B．流程中A處理可使用纖維素酶和果膠酶，B處理可使用聚乙二醇C．培養(yǎng)形成的愈傷組織可繼續(xù)在原培養(yǎng)基中分化形成植株D．雜種植株含有控制甲品種青花菜優(yōu)良性狀的基因，并能通過父本進(jìn)行傳遞【答案】AC【分析】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等．化學(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑?！驹斀狻緼、獲得的融合原生質(zhì)體需放在等滲的無菌溶液中，不能放在無菌水中，否則會吸水漲破，A錯誤；B、流程中A為去除細(xì)胞壁，可使用纖維素酶和果膠酶分解細(xì)胞壁，B過程為誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，需要用聚乙二醇進(jìn)行誘導(dǎo)，B正確；C、形成愈傷組織的脫分化培養(yǎng)基和再分化形成植株的再分化培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長素比例不同，C錯誤；D、甲品種控制多種優(yōu)良性狀的基因，為核基因，雜種植物細(xì)胞核內(nèi)含有控制甲青花菜優(yōu)良性狀的基因，精子中具有一半核基因，能通過父本（精子）進(jìn)行傳遞，D正確。故選AC。18．2N/4N嵌合體胚胎是指用四倍體（4N）胚胎與二倍體（2N）胚胎或胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）進(jìn)行聚合，形成由二倍體和四倍體細(xì)胞組成的嵌合體。嵌合體胚胎構(gòu)建的常用方法如下圖。通過檢測發(fā)現(xiàn)用ES細(xì)胞經(jīng)2N/4N嵌合體方法獲得的克隆鼠體內(nèi)均為2N細(xì)胞來源。下列敘述正確的是（

）A．圖中受精卵是將發(fā)育到減數(shù)第一次分裂中期的卵母細(xì)胞和獲能的精子體外受精而形成B．利用顯微注射法將2N的ES細(xì)胞注射至A的囊胚內(nèi)完成2N/4N嵌合體胚胎B的構(gòu)建C．嵌合體胚胎C發(fā)育到原腸胚期可植入代孕母鼠，移植前通常對代孕母鼠做同期發(fā)情處理D．推測2N/4N嵌合體胚胎發(fā)育時2N和4N這兩種細(xì)胞類型表現(xiàn)出非隨機(jī)性分布的特點【答案】BD【解析】1、胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù)，實際是在體外條件下，對動物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作。2、嵌合體-遺傳學(xué)上用以指不同遺傳性狀嵌合或混雜表現(xiàn)的個體?！驹斀狻緼、圖中為體外受精，受精卵是將發(fā)育到減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞和獲能的精子體外受精而形成的，A錯誤；B、顯微注射法是構(gòu)建嵌合體胚胎常用的方法，為了提高成功率，待胚胎A發(fā)育到囊胚期時，利用顯微注射法將2N的ES細(xì)胞注射至A的囊胚內(nèi)完成2N/4N嵌合體胚胎B的構(gòu)建，B正確；C、待嵌合體胚胎C發(fā)育到桑椹胚或囊胚期可植入代孕母鼠體內(nèi)，移植前通常對代孕母鼠做同期發(fā)情處理使其達(dá)到受孕的狀態(tài)，C錯誤；D、2N/4N嵌合體方法獲得的克隆鼠體內(nèi)均為2N細(xì)胞來源由圖可知只有胎盤由4N細(xì)胞發(fā)育而成，由此推測，2N/4N嵌合體胚胎在發(fā)育過程中，2N和4N這兩種細(xì)胞類型表現(xiàn)出非隨機(jī)性分布的特點，D正確。故選BD。三、單選題19．受傷的雙子葉植物產(chǎn)生的酚類化合物可誘導(dǎo)毒力效應(yīng)蛋白（Vir）基因表達(dá)產(chǎn)生Vir蛋白，其中VirD1/D2蛋白復(fù)合體可將Ti質(zhì)粒上的一段T-DNA單鏈（T鏈）切下并形成VirD2-T鏈復(fù)合物。轉(zhuǎn)移至植物細(xì)胞中的VirD2-T鏈復(fù)合物結(jié)合VirE2等蛋白形成T復(fù)合體進(jìn)入細(xì)胞核，將T鏈隨機(jī)整合到植物染色體上。相關(guān)敘述錯誤的是（）A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胨炯?xì)胞，可用酚類化合物處理提高轉(zhuǎn)化效率B．VirD2-T鏈復(fù)合物結(jié)合VirE2等蛋白形成T復(fù)合體可避免T-DNA的胞內(nèi)降解C．T-DNA的整合具有隨機(jī)性，需經(jīng)過篩選（抗性、熒光等）獲得符合要求的轉(zhuǎn)化苗D．T-DNA整合至植物細(xì)胞染色體上的過程不需要DNA聚合酶和DNA連接酶【答案】D【分析】將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其依據(jù)主要是：當(dāng)植物受到損傷時，傷口處的細(xì)胞會分泌大量的酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞，這時農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上?！驹斀狻緼、農(nóng)桿菌容易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力，因為多數(shù)單子葉植物不能合成酚類化合物，可以通過在傷口施加相關(guān)酚類化合物而使單子葉植物成分農(nóng)桿菌易感染的植物，從而提高轉(zhuǎn)化效率，A正確；B、VirD2-T鏈復(fù)合物結(jié)合VirE2等蛋白形成T復(fù)合體進(jìn)入細(xì)胞核，將T鏈隨機(jī)整合到植物染色體上，可避免T-DNA在細(xì)胞內(nèi)被降解，B正確；C、經(jīng)過轉(zhuǎn)化的植物不一定都得到目的表現(xiàn)型，因為T-DNA的整合是隨機(jī)的，還需經(jīng)過篩選（抗性、熒光等）才能獲得符合要求的轉(zhuǎn)化苗，C正確；D、Ti質(zhì)粒上的Vir基因區(qū)段在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)物能誘導(dǎo)Ti質(zhì)粒產(chǎn)生一條新的T-DNA單鏈分子，而合成新的T-DNA單鏈不需要限制酶，需要的是DNA聚合酶和DNA連接酶，D錯誤。故選D。四、多選題20．人體內(nèi)的t—PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，但給心?；颊咦⑸浯髣┝炕蚬こ蘴—PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血。研究證實，將t—PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低其出血副作用。對天然t—PA基因進(jìn)行改造，并使其在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，可制造出改良t—PA蛋白。如圖表示相關(guān)的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質(zhì)粒，新霉素為抗生素。有關(guān)敘述正確的是（

）A．制造出性能優(yōu)異的改良t—PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程B．用XmaⅠ和BglⅡ切開pCLY11，才能使其與t—PA改良基因高效連接C．選擇有新霉素抗性的大腸桿菌作為受體細(xì)胞進(jìn)行重組質(zhì)粒的篩選和鑒定D．區(qū)分重組質(zhì)粒和原有質(zhì)粒的一個標(biāo)志是可以觀察mlacZ基因的表達(dá)情況【答案】ABD【分析】蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或者制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)生活需求。【詳解】A、根據(jù)題干“對天然t—PA基因進(jìn)行改造，并使其在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，可制造出改良t—PA蛋白”可知，制造出性能優(yōu)異的改良t—PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程，A正確；B、目的基因的黏性末端圖中已經(jīng)給出，觀察各限制酶的識別序列可知所使用的限制酶為XmaI和BglⅡ，要想把目的基因與載體pCLY11拼接起來需要得到相同的黏性末端，因此運載體pCLY11也需要XmaⅠ和BglⅡ切割，B正確；C、由于標(biāo)記基因存在于原有質(zhì)粒上，若未連接目的基因的質(zhì)粒導(dǎo)入到大腸桿菌中，這些大腸桿菌也可以獲得新霉素的抗性，因此選擇有新霉素抗性的大腸桿菌作為受體細(xì)胞不能進(jìn)行重組質(zhì)粒的篩選和鑒定，C錯誤；D、區(qū)分重組質(zhì)粒和原有質(zhì)粒的一個標(biāo)志可以觀察mlacZ基因的表達(dá)情況，由于重組質(zhì)粒拼接了目的基因，破壞了mlacZ基因，因此在重組質(zhì)粒中該基因不表達(dá)，菌落呈現(xiàn)白色，而原有基因由于該基因保存完整，可以表達(dá)，所以菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確。故選ABD。五、綜合題21．苯酚是含酚工業(yè)廢水的主要成分，具有致癌、致畸和致突變作用。苯酚降解菌能分解工業(yè)廢水中的苯酚。回答下列問題。（1）MP培養(yǎng)基的成分為KH2PO42．25g/L，K2HPO42．75g/L，（NH4）2SO41．0g/L，MgCl20．2g/L，NaCl0．1g/L，F(xiàn)eCl30．02g/L，CaCl20．01g/L。在制作苯酚降解菌的富集培養(yǎng)基和平板分離培養(yǎng)基時，應(yīng)在MP培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，前者添加________成分，后者添加________成分，然后對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌的方法為___________。（2）將等量的污泥樣液均分兩份，分別接種在相同體積的MP培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基中，搖床振蕩培養(yǎng)，振蕩培養(yǎng)的目的是________。兩種培養(yǎng)中，苯酚降解菌菌體密度較低的培養(yǎng)基是_________，原因是_________。將富集培養(yǎng)基中的菌液稀釋并涂布在平板上，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)，在平板上長出一些形態(tài)、大小和顏色不完全相同的菌落，這說明________________________。（3）對分離得到的某株苯酚降解菌進(jìn)行菌株生長及苯酚降解實驗，結(jié)果如下圖。實驗結(jié)果表明此菌株適于降解的苯酚濃度為________，判斷依據(jù)是________________?！敬鸢浮?/p>

苯酚

苯酚和瓊脂

高壓蒸汽滅菌

使菌體與培養(yǎng)液、空氣充分接觸，利于菌體獲得更多營養(yǎng)和生長

MP培養(yǎng)基

MP培養(yǎng)基中缺少苯酚降解菌生長所需的碳源

能降解苯酚的菌有多種

1．0g/L

此苯酚濃度下菌體繁殖快（菌體數(shù)量最多），苯酚的降解率高（為100%）【分析】微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求?！驹斀狻浚?）MP培養(yǎng)基的成分為KH2PO42．25g/L，K2HPO42．75g/L，（NH4）2SO41．0g/L，MgCl20．2g/L，NaCl0．1g/L，F(xiàn)eCl30．02g/L，CaCl20．01g/L。在制作苯酚降解菌的富集培養(yǎng)基和平板分離培養(yǎng)基時，應(yīng)在MP培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，前者添加苯酚成分，后者添加苯酚和瓊脂成分，然后對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌的方法為高壓蒸汽滅菌。（2）將等量的污泥樣液均分兩份，分別接種在相同體積的MP培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基中，搖床振蕩培養(yǎng)，振蕩培養(yǎng)的目的是使菌體與培養(yǎng)液、空氣充分接觸，利于菌體獲得更多營養(yǎng)和生長。兩種培養(yǎng)中，苯酚降解菌菌體密度較低的培養(yǎng)基是MP培養(yǎng)基，原因是MP培養(yǎng)基中缺少苯酚降解菌生長所需的碳源。將富集培養(yǎng)基中的菌液稀釋并涂布在平板上，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)，在平板上長出一些形態(tài)、大小和顏色不完全相同的菌落，這說明能降解苯酚的菌有多種.（3）對分離得到的某株苯酚降解菌進(jìn)行菌株生長及苯酚降解實驗，結(jié)果如下圖。實驗結(jié)果表明此菌株適于降解的苯酚濃度為1．0g/L，判斷依據(jù)是此苯酚濃度下菌體繁殖快（菌體數(shù)量最多），苯酚的降解率高（為100%）?！军c睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)等相關(guān)知識，要求考生識記無菌技術(shù)及實例；識記培養(yǎng)基的配制，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。22．白葉枯病是水稻嚴(yán)重的病害之一，疣粒野生稻對其具有高度抗性。研究人員利用體細(xì)胞雜交技術(shù)，試圖將疣粒野生稻的抗白葉枯病特性轉(zhuǎn)移到栽培稻中。（1）將兩種水稻外植體分別接種在含____________等植物激素的MS培養(yǎng)基上，經(jīng)____________過程形成愈傷組織后用____________酶處理獲得游離的原生質(zhì)體。（2）“不對稱體細(xì)胞雜交”法可以將一個親本的部分染色體或染色體。上某些片段轉(zhuǎn)移到另一個親本體細(xì)胞內(nèi)，獲得不對稱雜種植株。大劑量的X射線能隨機(jī)破壞染色體結(jié)構(gòu)，使其發(fā)生斷裂、易位、染色體消除等，細(xì)胞不再持續(xù)分裂。碘乙酰胺（IOA）使細(xì)胞質(zhì)中某些酶失活，抑制細(xì)胞分裂。為了達(dá)到轉(zhuǎn)移抗白葉枯病特性的目的，融合前要用X射線照射____________的原生質(zhì)體，用IOA處理另一親本的原生質(zhì)體。經(jīng)誘導(dǎo)融合后，只有異源融合后的原生質(zhì)體可持續(xù)分裂形成再生細(xì)胞團(tuán)，原因是_____________。（3）觀察再生植株細(xì)胞中的染色體，發(fā)現(xiàn)數(shù)目____________，說明成功獲得了不對稱雜種。有些雜種植株染色體數(shù)目與栽培稻相同，性狀明顯偏向栽培稻，但也表現(xiàn)出野生稻的一些特性，推測這些雜種植株無多余染色體但具有野生稻特性的原因是_____________。（4）用致病性強(qiáng)的兩種水稻白葉枯病菌株接種，檢測72株雜種植株的抗性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)共有40株表現(xiàn)抗性，其中17株對兩個菌株都表現(xiàn)抗病性。綜合染色體數(shù)目及抗性檢測，應(yīng)優(yōu)先選擇_____________的雜種植株進(jìn)行繁育。（5）與轉(zhuǎn)基因技術(shù)相比，在向目標(biāo)生物轉(zhuǎn)移外源基因方面，不對稱體細(xì)胞雜交技術(shù)有哪些優(yōu)、缺點？______【答案】

細(xì)胞分裂素和生長素

脫分化

纖維素酶和果膠

疣粒野生稻

雜種細(xì)胞由于融合，補(bǔ)充了細(xì)胞質(zhì)中失活的酶（生理互補(bǔ)），細(xì)胞能正常分裂

均少于兩親本染色體數(shù)目之和

來自野生稻的某些基因通過染色體易位整合到栽培稻細(xì)胞中

染色體數(shù)目和栽培稻相同、且對兩個菌株均表現(xiàn)出抗性

優(yōu)點：可轉(zhuǎn)移控制優(yōu)良性狀的多基因甚至是未知基因缺點：只能在植物之間進(jìn)行/變異不定向，需大量篩選【分析】疣粒野生稻對水稻白葉枯病具有高度的抗病性，為轉(zhuǎn)移這種抗病性，進(jìn)行了栽培稻+疣粒野生稻不對稱體細(xì)胞雜交。以軟X射線處理過的疣粒野生稻原生質(zhì)體作供體，來源于栽培稻品種02428的原生質(zhì)體經(jīng)碘乙酰胺(IOA)失活后作受體，采用PEG法誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合。由于代謝功能互補(bǔ)融合物經(jīng)培養(yǎng)后得到623塊愈傷組織，最終分化出72株再生植株.這些融合植株形態(tài)上與栽培稻接近,采用微衛(wèi)星分子標(biāo)記進(jìn)行了雜種鑒定。細(xì)胞學(xué)分析表明,融合雜種根尖細(xì)胞染色體數(shù)目在27N38條之間變化。在成株期對融合植株進(jìn)行了白葉枯病接種鑒定，結(jié)果顯示疣粒野生稻對水稻白葉枯病的抗性成功地轉(zhuǎn)移到栽培稻中?！驹斀狻浚?）將兩種水稻外植體分別接種在含細(xì)胞分裂素和生長素等植物激素的MS培養(yǎng)基上，經(jīng)脫分化過程形成愈傷組織后用纖維素酶和果膠酶處理獲得游離的原生質(zhì)體。（2）“不對稱體細(xì)胞雜交”法可以將一個親本的部分染色體或染色體。上某些片段轉(zhuǎn)移到另一個親本體細(xì)胞內(nèi)，獲得不對稱雜種植株。大劑量的X射線能隨機(jī)破壞染色體結(jié)構(gòu)，使其發(fā)生斷裂、易位、染色體消除等，細(xì)胞不再持續(xù)分裂。碘乙酰胺（IOA）使細(xì)胞質(zhì)中某些酶失活，抑制細(xì)胞分裂。為了達(dá)到轉(zhuǎn)移抗白葉枯病特性的目的，融合前要用X射線照射疣粒野生稻的原生質(zhì)體，用IOA處理另一親本的原生質(zhì)體。經(jīng)誘導(dǎo)融合后，只有異源融合后的原生質(zhì)體可持續(xù)分裂形成再生細(xì)胞團(tuán)，原因是雜種細(xì)胞由于融合，補(bǔ)充了細(xì)胞質(zhì)中失活的酶（生理互補(bǔ)），細(xì)胞能正常分裂。（3）觀察再生植株細(xì)胞中的染色體，發(fā)現(xiàn)數(shù)目均少于兩親本染色體數(shù)目之和，說明成功獲得了不對稱雜種。有些雜種植株染色體數(shù)目與栽培稻相同，性狀明顯偏向栽培稻，但也表現(xiàn)出野生稻的一些特性，推測這些雜種植株無多余染色體但具有野生稻特性的原因是來自野生稻的某些基因通過染色體易位整合到栽培稻細(xì)胞中。（4）用致病性強(qiáng)的兩種水稻白葉枯病菌株接種，檢測72株雜種植株的抗性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)共有40株表現(xiàn)抗性，其中17株對兩個菌株都表現(xiàn)抗病性。綜合染色體數(shù)目及抗性檢測，應(yīng)優(yōu)先選擇染色體數(shù)目和栽培稻相同、且對兩個菌株均表現(xiàn)出抗性。（5）與轉(zhuǎn)基因技術(shù)相比，在向目標(biāo)生物轉(zhuǎn)移外源基因方面，不對稱體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點：可轉(zhuǎn)移控制優(yōu)良性狀的多基因甚至是未知基因。缺點：只能在植物之間進(jìn)行/變異不定向，需大量篩選。【點睛】本題主要考查植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，其中準(zhǔn)確理解植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的原理和步驟，是解題的關(guān)鍵。23．M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?，F(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示。回答下列問題：(1)在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是______。(2)常用的去核方法：______；選擇卵母細(xì)胞的原因是______。（至少答2點）(3)鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的______細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。單克隆抗體在臨床應(yīng)用中的優(yōu)勢______。（至少答2點）(4)簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路______?！敬鸢浮?1)清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害(2)

顯微操作

卵母細(xì)胞體積大，易于操作；可為重組細(xì)胞早期發(fā)育提供較充足的營養(yǎng)；卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在激發(fā)動物體細(xì)胞的細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)(3)

B淋巴細(xì)胞

借助抗體的導(dǎo)向作用，能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在的位置，在原位殺死癌細(xì)胞；單克隆抗體可大量制備(4)取動物A和克隆動物A的肝組織細(xì)胞，分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原-抗體雜交【分析】核移植是指將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。核移植得到的動物稱克隆動物，克隆動物的核基因完全來自供體動物，而細(xì)胞質(zhì)基因來自受體細(xì)胞。核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植，其中體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，因為體細(xì)胞的全能性低于胚胎細(xì)胞。【詳解】（1）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時，為清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害，所以需要定期更換培養(yǎng)液。（2）目前常用的去核方法是顯微操作去核法。將卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因是卵母細(xì)胞體積大，易于操作；可為重組細(xì)胞早期發(fā)育提供較充足的營養(yǎng)；卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在激發(fā)動物體細(xì)胞的細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。（3）鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合常用的化學(xué)方法是PEG誘導(dǎo)。單克隆抗體在臨床應(yīng)用中的優(yōu)勢有借助抗體的導(dǎo)向作用，能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在的位置，在原位殺死癌細(xì)胞；單克隆抗體可大量制備.（4）可利用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測克隆動物A中M基因是否失活。實驗思路是：用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測篩選出的雜交瘤細(xì)胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，如果不能產(chǎn)生，說明M基因在克隆動物A中已失活，如果能產(chǎn)生，說明M基因在克隆動物A中沒有失活。24．請根據(jù)下列兩個資料回答相關(guān)問題：資料1：用化學(xué)方法激活小鼠成熟的卵母細(xì)胞得到phESC（孤雌單倍體干細(xì)胞），然后通過基因編輯技術(shù)使phESC中的3個基因沉默，phESC的細(xì)胞核狀態(tài)便可接近精子細(xì)胞核的狀態(tài)，如圖1。資料2：用化學(xué)方法激活小鼠的精子得到ahESC（孤雄單倍體干細(xì)胞），然后對ahESC中的8個基因進(jìn)行編輯，ahESC的細(xì)胞核便具有卵細(xì)胞核的特點，如圖2。（1）體內(nèi)受精時，在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，_______會迅速產(chǎn)生生理反應(yīng)阻止后來的精子進(jìn)入；精子入卵后卵子發(fā)生的變化有____________________________。（2）用激素對雌性小鼠進(jìn)行_______處理可得到大量卵母細(xì)胞，這些卵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化為phESC的過程相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中的_______過程。（3）ahESC與精子和去核卵母細(xì)胞融合后，得到的融合細(xì)胞的性染色體組成可能是_______。融合細(xì)胞一般需要進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)至_______期才能進(jìn)行移植。（4）據(jù)圖分析只依賴雄性小鼠_______（填“能”或“不能"）得到孤雄小鼠，請寫出兩個理由支持你的判斷。理由1：_________________；理由2：_________________。【答案】

透明帶

完成減數(shù)分裂Ⅱ、排出第二極體、形成雌原核

超數(shù)排卵

脫分化

XX、XY或YY

桑葚胚或囊胚

不能

需要將ahESC和另一個精子一起注入到一個去核卵細(xì)胞中

重構(gòu)發(fā)育成的胚胎必須移植到雌性小鼠的體內(nèi)才能發(fā)育為個體【分析】1.受精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。2.胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的