蛋白質(zhì)藥物生產(chǎn)工藝驗(yàn)證第一頁(yè)，共45頁(yè)。工藝驗(yàn)證工藝驗(yàn)證應(yīng)當(dāng)證明一個(gè)生產(chǎn)工藝按照規(guī)定的工藝參數(shù)能夠持續(xù)生產(chǎn)出符合預(yù)定用途和注冊(cè)要求的產(chǎn)品。（中國(guó)2010版GMP）收集并評(píng)估從工藝設(shè)計(jì)階段一直到商業(yè)化生產(chǎn)的數(shù)據(jù)，用這些數(shù)據(jù)確立科學(xué)證據(jù)，證明該工藝能夠始終如一的生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。（FDA2011工藝驗(yàn)證指南）書面話的證據(jù)。證明工藝在所建立的參數(shù)范圍內(nèi)能有效和重復(fù)生產(chǎn)出符合預(yù)期標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量屬性的醫(yī)藥產(chǎn)品。（EU2001GMP）記錄在案的證據(jù)，證明工藝流程在確定的參數(shù)范圍內(nèi)運(yùn)行，按照預(yù)先確定的規(guī)范和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，可有效地、重復(fù)地生產(chǎn)中間體或原料藥。（蛋白質(zhì)生產(chǎn)的工藝驗(yàn)證）第二頁(yè)，共45頁(yè)。相關(guān)定義工藝驗(yàn)證的先決條件工藝驗(yàn)證驗(yàn)證后工作文件材料第三頁(yè)，共45頁(yè)。相關(guān)定義AcceptanceCriteria:驗(yàn)收準(zhǔn)則為了使檢測(cè)結(jié)果被接受而制定的數(shù)值范圍。在隨后的驗(yàn)證過程中，一個(gè)關(guān)鍵工藝參數(shù)超過了接受范圍都可能引起產(chǎn)品質(zhì)量的質(zhì)疑，導(dǎo)致研究調(diào)查的啟動(dòng)。CharacterizationStudy:表征研究一個(gè)后期研究，評(píng)估工藝過程來增加工藝知識(shí)，檢測(cè)推薦的操作范圍及他們單獨(dú)作用和/或聯(lián)合作用的對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)質(zhì)量的影響。（評(píng)價(jià)研究，工藝合理性研究）第四頁(yè)，共45頁(yè)。ConformanceLots:一致性批量一個(gè)預(yù)先確定的生產(chǎn)批量，通常是三批，不僅代表被許可的工藝，也可評(píng)估產(chǎn)品的一致性。DrugSubstance/ActivePharmaceuticalIngredient（API）原料藥有效活性成分，與賦形劑（輔料）一起被制備成藥物產(chǎn)品。其組成成分為預(yù)期產(chǎn)品，產(chǎn)品相關(guān)物質(zhì)，產(chǎn)品和工藝相關(guān)雜質(zhì)。相關(guān)定義第五頁(yè)，共45頁(yè)。Contaminant:污染物任何不期望成為工藝的一部的，偶然或外部引入的材料（化學(xué)，生化的或是微生物）。一種不希望有的化學(xué)或微生物性質(zhì)的雜質(zhì)，在工業(yè)生產(chǎn)中被引入到原料，中間體或原料藥中的物質(zhì)。Impurity:雜質(zhì)原料藥或產(chǎn)品中不屬于目標(biāo)產(chǎn)品、產(chǎn)品相關(guān)物質(zhì)或輔料的任何組分。相關(guān)定義第六頁(yè)，共45頁(yè)。Parameters:參數(shù)OperationalParameter:操作參數(shù)一個(gè)輸入變量或制造工藝的某種條件，可以在工藝過程中直接被控制。典型地，物理或化學(xué)參數(shù)（溫度，處理時(shí)間、流速、沖洗體積、試劑濃度、緩沖液pH）CriticalOperationalParameter:關(guān)鍵操作參數(shù)Non-CriticalOperationalParameter:非關(guān)鍵操作參數(shù)KeyOperationalParameter:主要工藝參數(shù)Non-KeyOperationalParameter:非主要工藝參數(shù)PerformanceParameter:性能參數(shù)一種結(jié)果，不能夠被直接控制的，但可以作為一種指示，表明工藝流程按預(yù)期設(shè)定的方式進(jìn)行。相關(guān)定義第七頁(yè)，共45頁(yè)。OperationalParameter:操作參數(shù)CriticalOperationalParameter:關(guān)鍵操作參數(shù)要求控制在特定的、較窄的操作范圍以保證產(chǎn)品的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)（說明書）。CriticalProcessParameter(“CPP”)Non-CriticalOperationalParameter:非關(guān)鍵操作參數(shù)超出關(guān)鍵操作參數(shù)定義范圍的所有工藝參數(shù)。非關(guān)鍵操作參數(shù)可分為主要工藝參數(shù)和非主要工藝參數(shù)。相關(guān)定義第八頁(yè)，共45頁(yè)。OperationalParameter:操作參數(shù)KeyOperationalParameter:主要工藝參數(shù)需要小心的控制在很小的范圍內(nèi)，是保證工藝性能必不可少的參數(shù)。主要工藝參數(shù)不影響產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵屬性。如果超過可接受范圍可能會(huì)影響工藝流程（產(chǎn)量、持續(xù)時(shí)間），但不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量。Non-KeyOperationalParameter:非主要工藝參數(shù)證明可以容易控制或具有很寬的可接受范圍的工藝參數(shù)。如果超過可接受范圍，非主要工藝參數(shù)可能一項(xiàng)藥品的質(zhì)量或工藝性能。相關(guān)定義第九頁(yè)，共45頁(yè)。PerformanceParameter:性能參數(shù)性能參數(shù)或?qū)傩詤?shù)是產(chǎn)品質(zhì)量和工藝性能的內(nèi)指標(biāo)。在這里指輸出性能，特別是指目標(biāo)蛋白質(zhì)的質(zhì)量、品質(zhì)。相關(guān)定義第十頁(yè)，共45頁(yè)。Documantation文件材料DevemlopmentReports研發(fā)報(bào)告ProcessCharacterrizationReport工藝特征報(bào)告ProcessValidationMasterPlan工藝驗(yàn)證總體規(guī)劃ProcessValidationProtocol工藝驗(yàn)證草案ProcessValidationProtocol工藝驗(yàn)證報(bào)告相關(guān)定義第十一頁(yè)，共45頁(yè)。DevemlopmentReports研發(fā)報(bào)告記錄和描述工藝開發(fā)早期階段所做的工作。這些文件可以在差異性調(diào)查過程中最為一種參考，也可在特定的驗(yàn)證和特性研究的設(shè)計(jì)過程中作為一種參考。ProcessCharacterrizationReport工藝特征報(bào)告一份包括工藝特性研究中單元操作，和/或所有操作的性能特征的研究結(jié)果的報(bào)告。該報(bào)告描述特性，操作參數(shù)（關(guān)鍵參數(shù)、主要和非主要參數(shù)）和參數(shù)的可接受范圍，驗(yàn)證的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。相關(guān)定義第十二頁(yè)，共45頁(yè)。ProcessValidationMasterPlan工藝驗(yàn)證總體規(guī)劃定義工藝驗(yàn)證范圍和原理的文件，包括工藝驗(yàn)證研究的執(zhí)行列表。ProcessValidationProtocol工藝驗(yàn)證草案質(zhì)量部門預(yù)先寫好的書面計(jì)劃，工藝驗(yàn)證草案陳述驗(yàn)證的管理方式，抽樣鑒別，化驗(yàn)，特殊的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，生產(chǎn)設(shè)備和操作范圍。草案中表述的每一項(xiàng)研究取得的結(jié)果，應(yīng)在相關(guān)的工藝驗(yàn)證報(bào)告中進(jìn)行評(píng)估。ProcessValidationProtocol工藝驗(yàn)證報(bào)告質(zhì)量單位通過總結(jié)特定的測(cè)試，對(duì)比實(shí)驗(yàn)結(jié)果與草案驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)表研究過程中出現(xiàn)的差異，給出的審核報(bào)告。相關(guān)定義第十三頁(yè)，共45頁(yè)。InstallationQualification(IQ):安裝確認(rèn)遵守經(jīng)過檢驗(yàn)的設(shè)計(jì)、制造商推薦、和/或客戶要求來完成設(shè)備、系統(tǒng)的安裝或改進(jìn)的文件確認(rèn)。OperationalQualification(OQ):運(yùn)行確認(rèn)設(shè)備和系統(tǒng)的安裝或改進(jìn)，在預(yù)期的操作范圍內(nèi)運(yùn)行的文件確認(rèn)。PerformanceQualification(PQ):性能確認(rèn)確認(rèn)文件，證明設(shè)備和配套輔助系統(tǒng)，安裝連接后，可以在批準(zhǔn)的工藝方法和規(guī)范的基礎(chǔ)上有效的、再現(xiàn)的運(yùn)行。相關(guān)定義第十四頁(yè)，共45頁(yè)。工藝驗(yàn)證確保生產(chǎn)過程具有一致性、可控性、可重復(fù)性操作數(shù)據(jù)和生產(chǎn)結(jié)果可控（質(zhì)量、收率），且在規(guī)定范圍內(nèi)保證產(chǎn)品質(zhì)量生產(chǎn)的工藝、設(shè)備生產(chǎn)工藝已經(jīng)確定。且已形成了文件確定接受標(biāo)準(zhǔn)、限度范圍第十五頁(yè)，共45頁(yè)。驗(yàn)證的條件工藝開發(fā)工藝開發(fā)基本過程工藝說明工藝特性鑒定細(xì)胞株和表達(dá)構(gòu)建特性鑒定產(chǎn)品包材表面提取風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估設(shè)備和儀器第十六頁(yè)，共45頁(yè)。工藝驗(yàn)證的條件工藝開發(fā)基本過程分子選擇宿主細(xì)胞選擇細(xì)胞培養(yǎng)/發(fā)酵工藝開發(fā)捕獲工藝開發(fā)純化工藝開發(fā)過濾系統(tǒng)的鑒別和開發(fā)制劑工藝研究和產(chǎn)品介紹分析方法開發(fā)藥代動(dòng)力學(xué)/毒理學(xué)研究工藝放大工藝特性第十七頁(yè)，共45頁(yè)。工藝說明工藝說明記錄生產(chǎn)工藝流程，是主控文件的一部分。它詳細(xì)記錄了工藝的每一個(gè)步驟，列舉工藝操作和與每一步相關(guān)的參數(shù)指標(biāo)。清晰的闡明每一個(gè)步驟（例如：表達(dá)，DNA降解、或緩沖液更換）的目的，所以可以準(zhǔn)確的評(píng)估該步驟的性能。工藝驗(yàn)證的條件第十八頁(yè)，共45頁(yè)。工藝特性工藝特性由一系列記錄在案的實(shí)驗(yàn)室研究組成，在實(shí)驗(yàn)室研究中操作參數(shù)被有目的的改變，以確定其對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量屬性和工藝性能的影響。操作參數(shù)是可以直接控制的工藝輸入。性能參數(shù)是被監(jiān)控以確?；蜃C實(shí)可接受的工藝性能的工藝輸出。在工藝特性研究的初始階段，要確定每一步操作的關(guān)鍵和主要工藝參數(shù)。在工藝特征報(bào)告中，要列舉關(guān)鍵和主要工藝參數(shù)，以及確定他們的基礎(chǔ)：可接受范圍，確定該范圍的依據(jù)；其他從研究中得到的相關(guān)信息。工藝驗(yàn)證的條件第十九頁(yè)，共45頁(yè)。第二十頁(yè)，共45頁(yè)。決定該參數(shù)被定義為關(guān)鍵/主要或非主要工藝參數(shù)的是操作范圍相關(guān)的可接受限度。操作范圍非常接近可接受限度，當(dāng)發(fā)生非常小的波動(dòng)時(shí)，產(chǎn)品質(zhì)量和工藝將會(huì)出現(xiàn)問題。可接受限制相對(duì)于操作范圍是非常寬的。第二十一頁(yè)，共45頁(yè)。細(xì)胞系和表達(dá)載體的構(gòu)建生物技術(shù)藥物大多是來源于細(xì)胞的，而細(xì)胞具有影響工藝生產(chǎn)一致性和產(chǎn)品質(zhì)量的潛能。一旦細(xì)胞系或遺傳結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，可能導(dǎo)致雜質(zhì)的變化（宿主蛋白、核酸）。對(duì)起始細(xì)胞株的充分研究，是理解和控制工藝生產(chǎn)的結(jié)果的必要前提。工藝驗(yàn)證的條件第二十二頁(yè)，共45頁(yè)。產(chǎn)品接觸表面溶出物生產(chǎn)過程中，與產(chǎn)品接觸到表面可能能會(huì)有溶出物到產(chǎn)品當(dāng)中影響產(chǎn)品質(zhì)量?，F(xiàn)在所使用的都是一些低溶出的材料,但是也要考慮到有溶出的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于這些，可以根據(jù)與產(chǎn)品接觸表面積、接觸時(shí)間、溫度、產(chǎn)品與材料的親和性等，進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，來確定所用材料的安全性?；瘜W(xué)兼容性也需要進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。工藝驗(yàn)證的條件第二十三頁(yè)，共45頁(yè)。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估可以確認(rèn)工藝的有效性，可以確認(rèn)工藝參數(shù)，并將其分類。產(chǎn)品質(zhì)量的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估要檢驗(yàn)?zāi)切?duì)藥物的安全性、質(zhì)量純度有影響的單元操作病毒去除

溶劑處理，病毒過濾生物負(fù)載和內(nèi)毒素過濾糖基化分布細(xì)胞構(gòu)建和發(fā)酵條件產(chǎn)品純度層析純化、過濾產(chǎn)品接觸材料的兼容性和溶出產(chǎn)品的同質(zhì)性混合工藝驗(yàn)證的條件第二十四頁(yè)，共45頁(yè)。儀器和設(shè)備設(shè)備、設(shè)施要在工藝驗(yàn)證之前進(jìn)行確認(rèn)。包括安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)、性能確認(rèn)。設(shè)備確認(rèn)——確定設(shè)備的功能和設(shè)計(jì)要求設(shè)備確認(rèn)材料——說明書、工廠驗(yàn)收測(cè)試和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)執(zhí)行方案的一部分。審查設(shè)備操控能力、生產(chǎn)力和安全性。評(píng)估組件的兼容性、耐久性。在工藝驗(yàn)證的同時(shí)要進(jìn)行清潔驗(yàn)證，要求在工藝驗(yàn)證之前要確定清潔產(chǎn)品接觸面和工藝加工助劑（填料）表面的清潔試劑。建立定期檢修、儀器校準(zhǔn)、變更控制的相關(guān)程序工藝驗(yàn)證的條件第二十五頁(yè)，共45頁(yè)。工藝驗(yàn)證工藝驗(yàn)證選擇性工藝驗(yàn)證研究第二十六頁(yè)，共45頁(yè)。工藝驗(yàn)證工藝驗(yàn)證的選擇性前瞻性工藝驗(yàn)證：指新產(chǎn)品獲得許可之前、或采用變更后的生產(chǎn)工藝（可影響產(chǎn)品質(zhì)量的工藝變更）生產(chǎn)許可產(chǎn)品之前完成的驗(yàn)證。前瞻性驗(yàn)證是生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)最常用的驗(yàn)證方法。并行性工藝驗(yàn)證：與產(chǎn)品生產(chǎn)同時(shí)進(jìn)行的驗(yàn)證活動(dòng)，主要是收集、整理在線生產(chǎn)數(shù)據(jù)?；仡櫺怨に囼?yàn)證：通過審查相關(guān)歷史和生產(chǎn)記錄檢測(cè)的數(shù)據(jù)，驗(yàn)證已經(jīng)獲得批準(zhǔn)的生產(chǎn)工藝具有足夠的穩(wěn)定性。第二十七頁(yè)，共45頁(yè)。工藝驗(yàn)證研究工藝驗(yàn)證中要求的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目包括：病毒清除雜質(zhì)清除工藝一致性工藝中間體穩(wěn)定性工藝溶液穩(wěn)定性藥物活性成分灌封、凍干、解凍、保存混合（產(chǎn)品和工藝溶液）層析介質(zhì)和再生過濾膜使用周期驗(yàn)證工藝驗(yàn)證第二十八頁(yè)，共45頁(yè)。病毒清除：蛋白質(zhì)藥物的原料都是生物制品，可能會(huì)帶入不同的病毒，導(dǎo)致污染。做法參考ICHQ5AViralSafetyEvaluationofBiotechnologyProductsDerivedfromCellLinesofHumanorAnimalOrigin在一期臨床試驗(yàn)之前要完成病毒清除驗(yàn)證工藝驗(yàn)證第二十九頁(yè)，共45頁(yè)。雜質(zhì)清除：雜質(zhì)清除的評(píng)估在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模，檢驗(yàn)一致性批次的產(chǎn)品，對(duì)那些影響產(chǎn)品安全性和預(yù)期生物活性的雜質(zhì)的去除，要有一致性文件證明。工藝相關(guān)雜質(zhì)：細(xì)胞底物衍生雜質(zhì)HCP、DNA、細(xì)胞培養(yǎng)衍生雜質(zhì)誘導(dǎo)劑、培養(yǎng)基下游產(chǎn)物衍生雜質(zhì)酶、無機(jī)鹽、溶劑產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)：截短型

修飾型異構(gòu)體、氧化產(chǎn)物、糖基化

聚集物工藝驗(yàn)證第三十頁(yè)，共45頁(yè)。污染物的清除也要進(jìn)行評(píng)估：包括內(nèi)毒素、生物負(fù)荷、病毒。雜質(zhì)清除結(jié)果的評(píng)估包括雜質(zhì)水平與設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)比和清除過程的一致性。盡管蛋白質(zhì)藥物生產(chǎn)過程不一定是無菌的，微生物（真菌、細(xì)菌）的控制驗(yàn)證也同樣需要。工藝驗(yàn)證第三十一頁(yè)，共45頁(yè)。工藝一致性工藝的一致性是一種證明、證明工藝的性能和控制符合預(yù)期的發(fā)展，證明生產(chǎn)設(shè)備、儀器、程序重復(fù)地生產(chǎn)出符合說明書和產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的原料藥。一致性的性能參數(shù)：質(zhì)量、產(chǎn)量一致性批量：連續(xù)不斷的三批如果不是工藝本身的原因?qū)е鹿に嚥荒苓B續(xù)生產(chǎn)，在驗(yàn)證報(bào)告中要說明并討論。工藝驗(yàn)證第三十二頁(yè)，共45頁(yè)。工藝中間體穩(wěn)定性中間體的生化穩(wěn)定性，可以通過生產(chǎn)規(guī)模、實(shí)驗(yàn)室規(guī)模或兩者相結(jié)合的方式來驗(yàn)證。生產(chǎn)規(guī)模方法與生產(chǎn)進(jìn)度相沖突實(shí)驗(yàn)室規(guī)模研究確定中間體的holdingtimes中間體的生物負(fù)荷和內(nèi)毒素要確認(rèn)，過高的生物負(fù)荷可影響產(chǎn)品的質(zhì)量或引入未知的污染工藝驗(yàn)證第三十三頁(yè)，共45頁(yè)。工藝溶液穩(wěn)定性

細(xì)胞培養(yǎng)基、稀釋緩沖液、病毒失活溶液、色譜緩沖液生物負(fù)荷、內(nèi)毒素、化學(xué)穩(wěn)定性參數(shù)：生物負(fù)荷、內(nèi)毒素、pH、電導(dǎo)、holdingtime前瞻性驗(yàn)證：每種溶液分三處保存同步驗(yàn)證無菌保存：容器的無菌確認(rèn)、溶液穩(wěn)定性工藝驗(yàn)證第三十四頁(yè)，共45頁(yè)。藥物活性成分的灌封、凍結(jié)、解凍、保存產(chǎn)品保存過程中要控制的關(guān)鍵參數(shù)：產(chǎn)品濃度緩沖液濃度無菌濾器的泄露（即使沒有要求無菌）冷藏溫度（冷藏）冷凍速度（冷藏）解凍溫度（冷藏）解凍速度（冷藏）容器/封蓋系統(tǒng)型號(hào)和尺寸工藝驗(yàn)證第三十五頁(yè)，共45頁(yè)。混合研究對(duì)產(chǎn)品的影響的因素：混合時(shí)間（最小15min最大時(shí)間—氧化、降解）設(shè)備的轉(zhuǎn)速（10-14rpm）溫度（20-27℃）混合研究要求一定的時(shí)間間隔取樣、檢測(cè)，繪制相對(duì)混合時(shí)間的結(jié)果圖。參數(shù)：密度、電導(dǎo)、透明度不同濃度的溶液混合，要混合器在不同的位置進(jìn)行取樣。工藝驗(yàn)證第三十六頁(yè)，共45頁(yè)。層析介質(zhì)和可重復(fù)使用薄膜壽命驗(yàn)證驗(yàn)證方法：小規(guī)模驗(yàn)證、全面驗(yàn)證、前瞻性驗(yàn)證、并行性驗(yàn)證小規(guī)模特性研究評(píng)估、確定操作參數(shù)和性能屬性清潔