physiology

MiR-33ContributestotheRegulationofCholesterolHomeostasis

18JUNE2010VOL328SCIENCE現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一目錄膽固醇對(duì)miR-33的影響miR-33對(duì)ABCA1/G1/NPC1等的影響3'UTR證明ABCA1/G1/NPC1與miR-33關(guān)系miR-33與Apo1/HDL的關(guān)系現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一心血管疾病現(xiàn)況8年內(nèi)增高40.4％，近10余年來(lái)仍在繼續(xù)攀升每年我國(guó)有350萬(wàn)人死于心腦血管疾病，占全部死亡原因的40%左右現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一膽固醇升高是主要原因危險(xiǎn)因素吸煙高血糖高血壓飲酒肥胖高血脂心血管疾病現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一SREBFtranscriptionfactors固醇響應(yīng)元素綁定因子(SREBF)——是一種轉(zhuǎn)錄因子是膽固醇合成和轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控者miRNA-33是位于SREBF-2上的某片段現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一ABCA1/ABCG1是一種轉(zhuǎn)錄因子，促進(jìn)游離膽固醇和磷脂結(jié)合到載脂蛋白A1、G1上影響膽固醇合成和轉(zhuǎn)錄miR-33通過(guò)抑制ABCA1的表達(dá)，減少膽固醇向載脂蛋白A1流出。相反的，抑制miR-33可增加ABCA1和HDL表達(dá)現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一MicroRNAs(miRNAs)非編碼的雙鏈RNA與mRNA的3‘非編碼區(qū)互補(bǔ)結(jié)合，降解或抑制蛋白質(zhì)翻譯調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝及炎癥表達(dá)現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一目錄膽固醇對(duì)miR-33的影響miR-33對(duì)ABCA1/G1/NPC1等的影響3'UTR證明ABCA1/G1/NPC1與miR-33關(guān)系miR-33與Apo1/HDL的關(guān)系現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一miR-33是一種microRNA是存在于SREBF-2上的某個(gè)片段現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一

Fig1-A圖片顯示miR-33在各個(gè)物種上的表達(dá)人和老鼠的表達(dá)最豐富現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig1-B如何證明miR-33存在于SREBF-2？膽固醇對(duì)miR-33是否有影響？結(jié)果顯示：1.miR-33與SREBF共轉(zhuǎn)錄2.miR-33與膽固醇水平和ABCA1負(fù)相關(guān)現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig1-C,D正常生理?xiàng)l件下，結(jié)果是否一樣？結(jié)果顯示：miR-33表達(dá)與膽固醇水平相關(guān)，與體外培養(yǎng)結(jié)果一致現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig1-E各個(gè)組織miR-33的表達(dá)結(jié)果顯示：鼠類肝、腦含量最高，沒(méi)有組織特異性現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一目錄膽固醇對(duì)miR-33的影響miR-33對(duì)ABCA1/G1/NPC1等的影響3'UTR證明ABCA1/G1/NPC1與miR-33關(guān)系miR-33與Apo1/HDL的關(guān)系現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig2-A改變miR-33的條件，ABCA1是否發(fā)生變化？結(jié)果顯示：在鼠類巨噬細(xì)胞，miR-33與ABCA1、G1有關(guān)現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig2-BmiR-33梯度變化，ABCA1/G1是否發(fā)生改變？結(jié)果顯示：不同濃度的miR-33，使ABCA1/G1發(fā)生不同程度的改變現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig2-C抑制miR-33對(duì)ABCA1/G1/NPC1的影響是什么？結(jié)果顯示：抑制miR-33后ABCA1/G1含量增加現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig2-D在人類巨噬細(xì)胞和肝細(xì)胞，miR-33對(duì)ABCA1/G1/NPC1的影響結(jié)果顯示：1.在人類細(xì)胞中，miR-33對(duì)ABCA1/G1影響與鼠類一致，但表達(dá)不明顯2.miR-33對(duì)人類NPC1有影響，對(duì)鼠類影響不明顯現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig2-E結(jié)果顯示：靜默miR-33使ABCA1/G1表達(dá)增多（結(jié)果在人類和鼠類是一致的）現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一目錄膽固醇對(duì)miR-33的影響miR-33對(duì)ABCA1/G1/NPC1等的影響3'UTR證明ABCA1/G1/NPC1與miR-33關(guān)系miR-33與Apo1/HDL的關(guān)系現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig3-A通過(guò)測(cè)量3’UTR，證明miR-33的過(guò)度表達(dá)對(duì)ABCA1/G1的影響結(jié)果顯示：隨著miR-33表達(dá)增多，這些基因的3‘UTR活動(dòng)度降低現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig3-B,C,D結(jié)果顯示：ABCA1/G1/NPC13’UTP點(diǎn)突變程度越大，miR-33表達(dá)量越大點(diǎn)突變ABCA1/G1/NPC1的3‘UTP對(duì)miR-33有無(wú)影響？現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一目錄膽固醇對(duì)miR-33的影響miR-33對(duì)ABCA1/G1/NPC1等的影響3'UTR證明ABCA1/G1/NPC1與miR-33關(guān)系miR-33與Apo1/HDL的關(guān)系現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig.4.A/B

miR-33與載脂蛋白A1/HDL的關(guān)系是什么？結(jié)果表明：在人類和鼠類的巨噬細(xì)胞或肝細(xì)胞中，miR-33可降低膽固醇向載脂蛋白A1的流出，對(duì)高密度脂蛋白無(wú)影響現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig.4.C結(jié)果顯示：靜默miR-33后，載脂蛋白A1流出效率增加現(xiàn)在是25頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig.4.D在老鼠體內(nèi)導(dǎo)入編碼miR-33的基因后相關(guān)因子有無(wú)改變？結(jié)果顯示：肝細(xì)胞中ABCA1表達(dá)量顯著下降，ABCG1/NPC1雖有所下降，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，靜默miR-33后結(jié)果相同現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一Fig.4E/F在處理6天后的HDL改變是什么？結(jié)果顯示：處理6天后，血漿HDL濃度下降了22%。相反地，導(dǎo)入靜默miR-33的基因后，肝細(xì)胞ABCA1蛋白水平升高50%，而HDL升高25%現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期一總結(jié)總體來(lái)說(shuō)，研究表明Micro