器材準(zhǔn)備半固體培養(yǎng)物4支，藥敏試驗培養(yǎng)物4個，微量發(fā)酵管培養(yǎng)物1套。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第1頁醫(yī)學(xué)微生物學(xué)試驗

綜合性試驗一膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌檢測（六）藥敏試驗結(jié)果分析糖發(fā)酵、動力試驗結(jié)果分析玻片凝集試驗高壓蒸汽滅菌細菌綜合性試驗總結(jié)試驗匯報撰寫細菌感染檢驗方法和防治標(biāo)準(zhǔn)（錄像）洗刷膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第2頁膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第3頁慣用藥敏試驗紙片判斷標(biāo)準(zhǔn)P21抗菌藥品紙片含藥量抑菌圈直徑(mm)耐藥中度敏感敏感青霉素G(葡萄球菌)

10單位≤28-≥29鏈霉素10微克≤1112～14≥15慶大霉素10微克≤1213～14≥15四環(huán)素30微克≤1415～18≥19氯霉素30微克≤1213～17≥18磺胺300微克≤1213～16≥17膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第4頁藥敏試驗結(jié)果分析青霉素鏈霉素慶大霉素黃色細菌白色細菌紫黑細菌粉紅細菌

注：耐藥－，中度敏感±，敏感＋。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第5頁抗菌素藥敏試驗紙片法結(jié)果G+球菌對青霉素和鏈霉素敏感。G-桿菌對青霉素耐藥，對鏈霉素敏感。G+球菌和G-桿菌對廣譜抗菌素慶大霉素都敏感。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第6頁糖發(fā)酵、動力試驗結(jié)果判斷反應(yīng)現(xiàn)象結(jié)果描述符號培養(yǎng)基變色無氣泡分解×糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣＋培養(yǎng)基變色有氣泡分解×糖產(chǎn)酸又產(chǎn)氣⊕培養(yǎng)基不變色不分解×糖－細菌擴散生長,培基混濁細菌有鞭毛＋沿接種線生長,培基清澈透明細菌無鞭毛－膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第7頁腸道桿菌科各菌屬生化反應(yīng)判別表

葡萄糖乳糖麥芽糖甘露醇蔗糖半固體埃希菌屬⊕⊕⊕⊕√+志賀菌屬+√√+/--/+-沙門菌屬⊕/+-⊕⊕-+霍亂弧菌+-++++變形桿菌屬⊕-√-√+注：+產(chǎn)酸或陽性，⊕產(chǎn)酸產(chǎn)氣，-陰性，+/-多數(shù)陽性，-/+多數(shù)陰性√不確定。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第8頁常見腸道感染細菌主要生化反應(yīng)特征

葡萄糖乳糖半固體（動力）大腸埃希菌⊕⊕+福氏志賀菌+--傷寒沙門菌+-+霍亂弧菌+★-+幽門螺桿菌不分解糖類+變形桿菌⊕-+★產(chǎn)酸能快速殺死該菌。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第9頁細菌生化反應(yīng)結(jié)果分析甲、乙→紫黑丙、丁→粉紅↓↓組號①葡萄糖②乳糖半固體③葡萄糖④乳糖半固體1⊕2345678910結(jié)果⊕膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第10頁實結(jié)果錯誤可能性純培養(yǎng)時，菌落挑錯了。無菌操作不嚴格，污染雜菌。接種時未協(xié)調(diào)好，接種錯誤。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第11頁玻片凝集試驗

SlideAgglutinationTest在適量電解質(zhì)存在情況下，顆粒性抗原(細菌)與特異性抗體混合，假如百分比適當(dāng)，則出現(xiàn)肉眼可見凝集塊，稱為凝集反應(yīng)。用于細菌抗原分析、判定及分型，也可應(yīng)用已知細菌檢驗未知血清抗體。診療血清與待檢測細菌混合→細菌凝集→陽性→匯報：檢出××細菌。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第12頁玻片凝集試驗原理凝集反應(yīng)機制是因為抗原與其對應(yīng)抗體間存在著相對應(yīng)極性基。極性基相互吸附，使抗原外周水化膜除去，由親水溶膠變成憎水溶膠。電解質(zhì)含有降低電位作用，使抗原顆粒間排斥力消除，從而產(chǎn)生了凝集現(xiàn)象。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第13頁玻片凝集反應(yīng)試驗步驟取潔凈載片一張，設(shè)試驗與對照區(qū)。滴加福氏志賀菌診療血清15ul，置于試驗區(qū)中心，滴加生理鹽水15ul，置于對照區(qū)中心。用接種環(huán)取粉紅色菌苔（2個菌落菌量），分別研磨于鹽水或血清內(nèi)，混合均勻。將玻片重復(fù)旋轉(zhuǎn)或傾側(cè)、菌液充分混勻，凝集速度更加快、結(jié)果更清楚。觀察是否有凝集塊出現(xiàn)，如有則記為陽性，沒有則記為陰性。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第14頁載玻片1張福痢血清，生理鹽水各15ul粉紅色菌苔與鹽水混勻粉紅色菌苔與血清混勻膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第15頁玻片凝集結(jié)果玻片往返傾側(cè)數(shù)次，肉眼觀察；2～3分鐘內(nèi)仍不出現(xiàn)凝集者,可認為陰性(－)。……;菌液混濁，少許絮狀,25%凝集,陽性(＋)。……;菌液輕度混濁,絮狀凝集塊較小,陽性(＋＋)?！?菌液澄清,有顯著絮片,75%凝集,陽性(＋＋＋)。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第16頁生物安全警告此次試驗操作，可產(chǎn)生幾十個微生物氣溶膠顆粒。氣溶膠粒徑＞100um沉降很快,＜50um在0.4s內(nèi)擴散開,＜5um經(jīng)過呼吸道直接抵達肺泡。Pike博士對試驗室感染統(tǒng)計分析結(jié)果發(fā)覺，不明原因感染高達82%，大多數(shù)是氣溶膠在空氣中擴散引發(fā)。試驗時應(yīng)坐著，在火焰周圍10～20厘米內(nèi)操作，保持平靜、有序，盡可能少說話、少走動，以免感染病原菌。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第17頁膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第18頁滅菌藥敏試驗平板、動力試驗半固體瓊脂、微量糖發(fā)酵管→高壓蒸汽滅菌!膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第19頁綜合性試驗一試驗總結(jié)

采取平板劃線分離法，從濃汁標(biāo)本中分離出黃色和白色兩種菌落。顯微鏡下，這兩株細菌均為G+球菌，排列不規(guī)則，呈葡萄串狀，是經(jīng)典葡萄球菌；結(jié)合菌落顏色，這兩株葡萄球菌分別是金黃色葡萄球菌和白色葡萄球菌。經(jīng)過血漿凝固酶試驗判別，金黃色葡萄球菌是致病菌。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第20頁用伊紅美藍平板，從糞便標(biāo)本分離出紫黑色含有金屬光澤菌落和粉紅色半透明菌落。紫黑色菌落是能分解乳糖大腸埃希菌。粉紅色菌落是不能分解乳糖致病菌。顯微鏡下，它們都是G-桿菌，散在排列，從形態(tài)上不能判別是什么細菌。經(jīng)糖發(fā)酵試驗，半固體動力試驗，血清學(xué)試驗結(jié)果判定，它們分別是大腸埃希菌和福氏志賀菌。這四株細菌都做了藥敏試驗，G+球菌對青霉素敏感，G-桿菌對青霉素耐藥，慶大霉素對G+和G-菌都敏感。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第21頁膿汁和糞便標(biāo)本細菌檢測結(jié)果分析標(biāo)本菌落形態(tài)血漿凝固酶葡乳半福痢血清青鏈慶結(jié)論黃色G+球++++金黃色葡萄球菌膿汁白色G+球-+++白色葡萄球菌紫黑G－桿⊕⊕+-++大腸埃希菌糞便粉紅G－桿+--+-++福氏志賀菌膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第22頁細菌判定標(biāo)準(zhǔn)及基本方法必須用純細菌培養(yǎng)物作判定。因為不一樣細菌生化反應(yīng)結(jié)果相差較大，而反應(yīng)結(jié)果是以陽性或陰性表示，一旦用混合菌做生化反應(yīng)，結(jié)果不可分析。判定試驗選擇：測定細菌試驗方法很多，依據(jù)判定目標(biāo)選擇適當(dāng)試驗項目，既能完成判定，項目又盡可能少。普通考慮以下幾個問題。選擇有價值試驗：判別兩種細菌選擇試驗應(yīng)該其一為陽性，另一為陰性，且陽性和陰性概率大于90%。不然，試驗無判別價值。選擇快速簡便試驗。因為是常規(guī)試驗室，選擇方法應(yīng)快速方便，如鞭毛染色、氧化酶、凝固酶等應(yīng)為首選方法。判定一個細菌假如有幾個特異方法,只選一兩種,多項選擇無價值。測定細菌一個生物特征可能有幾個不一樣方法。應(yīng)該了解所用方法敏感性，不然會造成錯誤判定。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第23頁思索題假如細菌生化反應(yīng)結(jié)果不佳，原因何在?匯報紙片法藥敏試驗結(jié)果，是否符合你所判定細菌藥敏特征?玻片凝集試驗觀察完成，應(yīng)將載玻片馬上放入消毒缸內(nèi)，為何?怎么設(shè)計一個試驗，對傷寒沙門菌進行分離和判定?

膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第24頁常見病原性球菌檢驗程序P47：直接涂片、革蘭染色、鏡檢膿汁、痰、咽部分泌物觀察菌落性狀、溶血性、色素血瓊脂平板培養(yǎng)涂片染色鏡檢挑取可疑菌落生化反應(yīng)↑純培養(yǎng)動物試驗藥敏試驗血液、穿刺液→肉湯增菌培養(yǎng)→培養(yǎng)液涂片染色境檢常見腸道致病菌檢驗程序P48：糞便→SS瓊脂、伊紅美藍平板培養(yǎng)→挑取可疑菌落↑↓血清學(xué)判定血、骨髓→增菌培養(yǎng)雙糖鐵培養(yǎng)基染色鏡檢生化反應(yīng)

膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第25頁試驗匯報《膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌檢測》年級專業(yè)學(xué)號姓名試驗?zāi)繕?biāo)試驗器材方法與步驟結(jié)果與討論。試驗匯報以小組試驗結(jié)果為基礎(chǔ)。主要是從2種標(biāo)本取得4種菌試驗結(jié)果。討論是對試驗結(jié)果分析，應(yīng)客觀、嚴謹，圍繞主題，突出重點。結(jié)論應(yīng)該明確，膿汁標(biāo)本檢測到什么病原菌？糞便標(biāo)本檢測到什么病原菌？結(jié)果不正確也要分析原因。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第26頁怎樣撰寫科研論文P57不論人們是否完全贊成“要么發(fā)表、要么銷毀”格言，但毫無疑問，科學(xué)研究目標(biāo)就是要把研究結(jié)果發(fā)表出來。普通來說，評價科學(xué)工作者工作，主要不是看他們在試驗室內(nèi)靈巧操作，也不是看他們在遼闊或狹窄科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)掌握知識多少，也不是看他們智能或魅力，而主要是依據(jù)他們所發(fā)表文章來估量。他們可能由此而成名，或依然默默無聞。所以，寫出能充分展示自己工作、引發(fā)同行注意論文是一個科研工作者必備素質(zhì)。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第27頁一項科學(xué)試驗，不論它結(jié)果多么驚人，只有到它發(fā)表出來時才算完成。所以對科學(xué)工作者來說，他不但必須“研究”科學(xué)，而且必須把科研結(jié)果“寫”出來。要寫好一篇科學(xué)論文，作者必須準(zhǔn)確地知道他要寫是什么以及為何要這么寫。科學(xué)論文是敘述原始研究結(jié)果而寫成并發(fā)表匯報。詳細地說，一篇公認原始科學(xué)論文，必須是首次公布，它應(yīng)提供足夠資料，以使同行們能夠：(1)評價觀察到結(jié)果；(2)重復(fù)試驗；(3)評價推理過程，而且原始科學(xué)論文還必須能為人們所接收，基本上可供科學(xué)界永久地、不受限制地利用，要有嚴密思維特征、邏輯性、清楚性和準(zhǔn)確性。

膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第28頁科研論文內(nèi)容P57標(biāo)題摘要引言材料與方法結(jié)果討論參考文件膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測主題宣教第29頁醫(yī)學(xué)微生物學(xué)試驗

綜合性試驗一膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌檢測（六）藥敏試驗結(jié)果分析糖發(fā)酵、動力試驗結(jié)果分析玻片凝集試驗滅菌細菌綜合性試驗總