醫(yī)院核酸實(shí)驗(yàn)(PCR)消毒規(guī)范PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)核心問(wèn)題PCR驗(yàn)污染來(lái)源實(shí)驗(yàn)施PCR驗(yàn)室空流向管理與境消毒實(shí)環(huán)實(shí)驗(yàn)即臨床因擴(kuò)增驗(yàn)，是門(mén)用來(lái)驗(yàn)艾滋擴(kuò)的法測(cè)一病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。新冠病毒核酸檢測(cè)來(lái)說(shuō)目前使用最廣泛和準(zhǔn)確的篩選和確認(rèn)方法，大規(guī)模核酸檢測(cè)，必然會(huì)引起相機(jī)構(gòu)單位著力建設(shè)規(guī)范的臨床PCR實(shí)驗(yàn)室其就在設(shè)個(gè)臺(tái)考的僅是醫(yī)機(jī)驗(yàn)力也著個(gè)的體。PCR驗(yàn)室設(shè)計(jì)核心問(wèn)題都是同個(gè)心題行—免染，級(jí)的院在設(shè)實(shí)，標(biāo)本環(huán)節(jié)質(zhì)量及驗(yàn)室的生物安全。1設(shè)驗(yàn)室的建設(shè)需要標(biāo)準(zhǔn)四”：試準(zhǔn)備區(qū)、本制備PCR增檢測(cè)區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)。個(gè)實(shí)設(shè)區(qū)各通氣調(diào)個(gè)實(shí)驗(yàn)降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境染。求驗(yàn)室經(jīng)過(guò)從基礎(chǔ)理論、實(shí)驗(yàn)獲取崗證。風(fēng)測(cè)過(guò)程，樣本的蓋，核酸取的蕩、離心都有可產(chǎn)生氣溶膠，有感的風(fēng)險(xiǎn)。護(hù)要求。必須按照生物安三級(jí)實(shí)驗(yàn)室的個(gè)人防要求進(jìn)。、驗(yàn)污染來(lái)源本間交叉污染收集樣本的容器污染或樣本密?chē)?yán)致不樣移忘更未用槍；等驗(yàn)具材及菌不同開(kāi)本烈蕩復(fù)吸膠成，相互交叉污染。驗(yàn)污在分試劑加樣過(guò)程中于移液器、容器、陰對(duì)照及其它試劑被核酸板或陽(yáng)性照污染。加樣過(guò)程中因?yàn)镻CR試劑溫十感需通過(guò)浴使試劑和板處于但這個(gè)過(guò)程充滿污染風(fēng)險(xiǎn)。增產(chǎn)物污染拷貝的物泄漏擴(kuò)增后的應(yīng)管外蓋這反應(yīng)中主、常的染物貝大遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于檢數(shù)個(gè)拷貝的限，所以極微量的產(chǎn)物污染，就可成假陽(yáng)性。隆質(zhì)粒污染：作為陽(yáng)性質(zhì)控品的克隆質(zhì)粒外溢。三驗(yàn)污染預(yù)防措施于低流地區(qū)，PCR測(cè)人員經(jīng)嚴(yán)格培訓(xùn)上后，酸污染的險(xiǎn)相對(duì)較小但在疫區(qū)超荷工作時(shí)，可能遇到核污染的題，可通以下措降低污染會(huì)：確手未緊密貼拇指和中指，進(jìn)行開(kāi)蓋操作時(shí)容易發(fā)生交叉污染。確使用生物安柜：簡(jiǎn)單、整潔避免通風(fēng)口堵前后紫線射劑隨手及缸里積的含氯消液并及清廢缸保廢不過(guò)液缸體積的酸提取儀去污：每天多批次檢時(shí)，在每一批檢測(cè)完以后必須用75%的乙醇和核酸去除劑對(duì)儀器進(jìn)行去染。視通風(fēng)：不定對(duì)房間進(jìn)行通風(fēng)每次至少持續(xù)30min。增驗(yàn)室隨手可及的消毒。四驗(yàn)室空氣流管理與環(huán)境毒實(shí)驗(yàn)可分為劑準(zhǔn)備、標(biāo)本備區(qū)、增區(qū)和檢區(qū)域這個(gè)在理須全使中應(yīng)始處完全的分隔狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。劑準(zhǔn)區(qū)制區(qū)一物，時(shí)防擴(kuò)增順氣上順區(qū)空氣力減方進(jìn)，可過(guò)裝風(fēng)、壓風(fēng)裝或其他可行方式實(shí)現(xiàn)。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室境清潔消的求的驗(yàn)其自具止叉污?；緞t潔區(qū)向染區(qū)進(jìn)行不叉。潔消毒方向：準(zhǔn)備區(qū)一標(biāo)本制備一擴(kuò)增區(qū)一產(chǎn)物檢測(cè)區(qū)潔范作區(qū)域的物表含桌，可用氯劑拭毒空和作可用外照消毒，也可使空間消毒器進(jìn)行全節(jié)消毒?？墒褂米贤饩€毒器及化學(xué)消毒進(jìn)行人狀態(tài)下的毒。的、殺DNA。氣30-60，6lg/nP70-90%245%20-40%o4內(nèi)壁周以玻璃內(nèi)側(cè)燈部位毒劑應(yīng)選擇能殺死生物安全柜可能發(fā)生的任微生（醇、含氯毒劑）。使用漂白劑腐蝕消毒劑后，還應(yīng)用無(wú)菌水再次進(jìn)行擦拭。用生物安全柜前，運(yùn)行凈化內(nèi)部空氣。末消毒需要進(jìn)終末消毒時(shí)機(jī)：物安全六好廢液及廢處理；驗(yàn)室空間消毒：在室，度條件下，使過(guò)氧酸熏Zg/n?,過(guò)夜使用溶膠噴霧8g/4含氯毒，用配24七慮到PCR驗(yàn)室屬于感染高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)其進(jìn)行日常的護(hù)進(jìn)，保作來(lái)便那前有些的毒?實(shí)有的前市場(chǎng)上經(jīng)能看到一些間消毒機(jī)器人PCR醫(yī)院新冠檢測(cè)實(shí)驗(yàn)操作(202*)新型冠病感肺炎最初需要床癥結(jié)學(xué)檢測(cè)果臨診斷轉(zhuǎn)換當(dāng)前型冠核酸測(cè)速型染供障酸測(cè)諸題需范據(jù)生康世衛(wèi)生織（WHO）、美制心前國(guó)臨制新冠病核檢臨實(shí)室作范議僅供臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)時(shí)參考。一、本采與轉(zhuǎn)集對(duì)于高度疑似新冠狀病毒感染患早期或與確診患者密觸者采鼻采標(biāo)咽子采樣，樣鍵：、轉(zhuǎn)要要深距離耳部鼻度一半要轉(zhuǎn)10?約轉(zhuǎn)約4?要取細(xì)鼻咽的細(xì)胞，圖lo若鼻咽拭子法采集標(biāo)時(shí)，考慮口咽拭子采。拭采時(shí)取關(guān)點(diǎn)用子拭側(cè)扁及壁3~5毒存可使用滲鹽溶液培養(yǎng)液或磷酸鹽緩沖液）管中，尾部棄去，旋緊管蓋精或有氯毒灑袋外部后立即送。提檢陽(yáng)性率同時(shí)采用鼻咽拭口咽拭子采樣采放同細(xì)胞存或毒存中要時(shí)可采集痰液標(biāo)本，痰液標(biāo)本應(yīng)該取患者深咳的痰液。()重癥集、肺檢。集液本入測(cè)型病核的類(lèi)中液采集時(shí)EDTA凝采集離血漿或血單個(gè)核細(xì)進(jìn)檢，可接全測(cè)臨可確者，類(lèi)者可慮集膜分泌物和大便等。本采集室溫放置不超過(guò)?8C不超過(guò)時(shí)該在保存轉(zhuǎn)運(yùn)。采集的本運(yùn)輸時(shí)需放專移箱中運(yùn)輸時(shí)帶精或含有效消毒液，便發(fā)生意外時(shí)能及時(shí)處理。二、型冠毒核檢測(cè)份數(shù)份數(shù)分的作員定避人在同間動(dòng)應(yīng)行流水工用講等式絡(luò)人工分4環(huán)節(jié)（1樣本接收錄入實(shí)室信息統(tǒng)（laboratoryinformationsystem,1.IS系統(tǒng)；）毒酸提取；聚合鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerasechainreaction,PCR）擴(kuò)增試劑配制，上機(jī)審核發(fā)放報(bào)告；（4報(bào)告結(jié)果解讀。驗(yàn)室用滅預(yù)處理采集的標(biāo)本再進(jìn)行酸檢測(cè)，究表對(duì)新型冠病毒核檢測(cè)結(jié)果影響1因此，建議對(duì)采的樣本，恒溫箱或水浴30?45min,溫浴前緊管蓋時(shí)可用口膜密閉管，溫浴后靜止至室溫再開(kāi)提取核酸。新病標(biāo)活測(cè)結(jié)果影響酸熒光量測(cè)值度

前

后低910.68904.12725.42.8陰3

0Ct摸索適當(dāng)至口50Ulo五存果及剩余保存70°C避免三、結(jié)果告判讀與釋前分開(kāi)讀框openreadingframelab,ORFlab因蛋白基因段和膜蛋基因段三個(gè)基因片段或開(kāi)放性閱讀框中的特異性片段核殼蛋白基因段二個(gè)基片由型狀毒核檢試有性和性照因檢結(jié)讀必慎次測(cè)中性照為性陰應(yīng)陰則失據(jù)中國(guó)家生健康推薦和武大學(xué)人醫(yī)院檢測(cè)據(jù)綜分析，將結(jié)果判讀解釋如下。開(kāi)放性閱讀框中的特異性段和核蛋白因N片段二個(gè)基因片段的檢測(cè)劑盒檢測(cè)結(jié)果解讀如（1和基時(shí)陽(yáng)性，判（2或因中之一檢結(jié)果陽(yáng)性，需重采復(fù)查后或因?yàn)殛?yáng)性時(shí)為ORFlab或基重新采復(fù)查果仍為灰區(qū)時(shí)曲線有明顯起峰樣本判斷為陽(yáng)性否則為陰性。二個(gè)基因片測(cè)劑盒判讀意圖因因+++可疑

判讀陽(yáng)性重新樣復(fù)+或可疑

重新樣復(fù)可

可

重新樣復(fù)

陰ORFlab示放讀框釋開(kāi)放性閱讀框中的特異性段殼蛋白因片段包膜蛋白因段三個(gè)基因片段測(cè)試劑盒檢測(cè)結(jié)果解下3：（）ORFlab基因二個(gè)三陽(yáng)性，判為陽(yáng)2）若僅一基因片測(cè)結(jié)果性時(shí)采樣復(fù)查仍陽(yáng)性陽(yáng)）單一基因片段檢結(jié)果處于灰（即可疑），需樣本為陽(yáng)則為陰性有其他可能情況，個(gè)因段性個(gè)因段疑，及結(jié)果判讀（））三個(gè)基因片測(cè)劑盒判讀示圖NE+++

判陽(yáng)性+

性++

陽(yáng)性+++可疑—+可疑—+或可疑

陽(yáng)性重新樣復(fù)重新樣復(fù)重新樣復(fù)陰注：ORFlab示開(kāi)放閱框lab四生物安全防護(hù)護(hù)1.作前防要求：樣本采集時(shí)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前必采用三級(jí)物安全防護(hù)方進(jìn)，穿次防服護(hù)鏡面、雙及口、子防靴。如順序子罩層手套護(hù)服，穿防鞋套，外層手套護(hù)目鏡或面屏。2.作后防要求：測(cè)作束，實(shí)驗(yàn)室緩沖間，應(yīng)先用酒（）防服，后標(biāo)流依次個(gè)安防備，染切內(nèi)衣可照如順序摘護(hù)目鏡面屏解開(kāi)防護(hù)上的封膠條，脫，護(hù)脫靴摘，脫。工作離實(shí)室須手手毒護(hù)鏡入毒中消毒后用清水沖洗可再次使用。3.注事：禁止穿戴防護(hù)裝備離開(kāi)生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室。毒1.驗(yàn)室空消毒：實(shí)驗(yàn)室每次檢測(cè)完畢后進(jìn)行外消毒或間宜用紫外消毒機(jī)消毒必要時(shí)可采用核酸清除劑如PCRCleaner等試劑除實(shí)驗(yàn)室殘留的核酸。2.作面毒：每天驗(yàn)后用