腸桿菌科的資料第1頁/共42頁2023/4/242教學(xué)大綱熟悉腸道桿菌的共同特征及分類致病性大腸埃希菌的種類和致病機制掌握大腸埃希菌的衛(wèi)生細菌學(xué)檢查及其意義了解大腸埃希菌的微生物學(xué)檢查法第2頁/共42頁2023/4/243問題?大腸埃希菌與人類健康的關(guān)系如何？腸道桿菌的共同特征？第3頁/共42頁2023/4/244，腸桿菌科(Enterobacteriaceae)一大群居住在人和動物腸道中生物學(xué)性狀近似的革蘭陰性桿菌。屬于腸桿菌科,至少有30個菌屬，120個以上的菌種。多數(shù)是腸道的正常菌群。少數(shù)為致病菌，是人類腸傳染病的最重要病原菌。第4頁/共42頁2023/4/245共同生物學(xué)特性形態(tài)與結(jié)構(gòu)：Ｇ-桿菌，無芽胞，多有菌毛、鞭毛培養(yǎng)：營養(yǎng)要求不高，常用培養(yǎng)基有ＥＭＢ、ＳＳ、中國藍培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基生化反應(yīng)：活潑，乳糖發(fā)酵試驗抵抗力：弱，如：氯消毒飲水變異：如耐藥性轉(zhuǎn)移、毒素產(chǎn)生、Ｈ－Ｏ變異、Ｓ－Ｒ變異等第5頁/共42頁2023/4/246KI培養(yǎng)基第6頁/共42頁2023/4/247抗原結(jié)構(gòu)菌體抗原（Ｏ抗原）:位于ＬＰＳ層，屬、種特異性，失去后產(chǎn)生Ｓ－Ｒ變異。刺激機體產(chǎn)生IgM抗體。鞭毛抗原（Ｈ抗原）:位于鞭毛蛋白，失去后運動消失，Ｏ外露（Ｈ－Ｏ變異）。刺激機體產(chǎn)生IgG抗體。莢膜抗原(Ｋ抗原):位于Ｏ抗原外圍，阻止Ｏ凝集。第7頁/共42頁腸桿菌科中與醫(yī)學(xué)有關(guān)的常見菌族和菌屬埃希菌族埃希菌屬大腸桿菌志賀菌屬痢疾志賀菌愛德華菌族愛德華菌屬遲鈍愛德華菌沙門菌族沙門菌屬傷寒沙門菌枸櫞酸菌屬佛勞第枸櫞酸菌克雷伯菌族克雷伯菌屬肺炎克氏菌腸桿菌屬產(chǎn)氣腸桿菌哈夫尼亞菌屬蜂窩哈夫尼亞菌沙雷菌屬粘質(zhì)沙雷菌變形桿菌族變形桿菌屬普通變形桿菌摩根菌屬摩氏摩根菌屬普羅威登斯菌屬雷氏普羅威登斯菌耶爾森菌族耶爾森菌屬鼠疫耶爾菌歐文菌族本歐文菌屬草原居民歐文菌菌族菌屬（菌種數(shù)）代表種第8頁/共42頁2023/4/249第一節(jié)埃希菌(Escherichia)是人類和動物腸道中的正常菌群；以大腸埃希氏菌（E.coli）最為重要；出生后數(shù)小時就進入腸道，并終生伴隨；條件致病菌，可導(dǎo)致腸外感染，某些血清型可導(dǎo)致腹瀉；常作為水源、飲水、食物糞便污染的指標；是基因工程中的主要工程菌。第9頁/共42頁2023/4/2410形態(tài)染色0.4-0.7μm1-3μm短桿菌革蘭染色陰性有鞭毛有菌毛第10頁/共42頁2023/4/2411第11頁/共42頁2023/4/2412培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)兼性厭氧營養(yǎng)要求不高生化反應(yīng)活潑，發(fā)酵多種糖類絕大多數(shù)發(fā)酵乳糖IMViC試驗結(jié)果為++--第12頁/共42頁2023/4/2413E.Coli在普通營養(yǎng)平板培養(yǎng)生長的菌落第13頁/共42頁2023/4/2414大腸埃希菌在EMB和SS培養(yǎng)基生長第14頁/共42頁2023/4/2415抗原結(jié)構(gòu)O抗原：菌體抗原H抗原：鞭毛抗原K抗原：莢膜抗原大腸桿菌血清型以

O：K：H表示

O111:K58:H2第15頁/共42頁2023/4/2416復(fù)雜的抗原構(gòu)造第16頁/共42頁2023/4/2417致病物質(zhì)黏附素菌毛、定居因子抗原Ⅰ、Ⅱ、ⅢK抗原與侵襲力有關(guān)抗吞噬與抗補體的溶菌外毒素腸毒素及溶血毒素內(nèi)毒素與感染特征和嚴重程度有關(guān)第17頁/共42頁2023/4/2418一、腸道外感染：

1.泌尿系感染：尿路致病性大腸埃希菌

uropathogenicE.coli，UPEC；

2.引起急性尿路感染的最常見病因，許多醫(yī)源性尿路膿血癥；

3.女性多于男性；

4.導(dǎo)管、內(nèi)鏡檢查應(yīng)嚴格無菌；

5.化膿性感染：新生兒腦膜炎；二、腹瀉：由某些血清型引起所致疾病第18頁/共42頁2023/4/2419引起腹瀉的大腸埃希菌腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌enterotoxigenicE.coliETEC腸侵襲型大腸埃希菌enteroinvasiveE.coliEIEC腸致病型大腸埃希菌enteropathogenicE.coliEPEC腸出血型大腸埃希菌enterohemorrhagicE.coliEHEC腸集聚型大腸埃希菌enteroaggregativeE.coliEAggEC第19頁/共42頁2023/4/2420第20頁/共42頁2023/4/2421(1)腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌

enterotoxigenicE.coli，ETEC嬰幼兒和旅游者腹瀉的主要病原菌癥狀從輕度腹瀉到嚴重霍亂樣腹瀉致病物質(zhì)：定植因子、腸毒素定植因子：１.具有高度專一性的菌毛粘附作用，失去定植因子的菌株不引起腹瀉。２.具有強免疫原性。第21頁/共42頁2023/4/2422腸毒素（LT、ST）不耐熱腸毒素(heatlabileenterotoxin,LT)，腸毒素LT-Ⅱ與人類致病無關(guān)，LT-Ⅰ結(jié)構(gòu)上與霍亂毒素相關(guān)，由1個A亞單位和5個B亞單位組成。對熱不穩(wěn)定，65℃，30min失活,Ａ亞單位是活性中心，Ｂ單位是與腸上皮細胞的結(jié)合單位。耐熱腸毒素(heatstableenterotoxin,ST)可分為STa和STb兩型，STb與人類疾病無關(guān)，STa為低分子量多肽，對熱穩(wěn)定，100℃，20min仍不失活。激活鳥苷酸環(huán)化酶，免疫原性差。第22頁/共42頁2023/4/2423腸毒素作用機制LT：B亞單位與GM1神經(jīng)節(jié)苷脂受體結(jié)合

A亞單位穿膜作用于AC腺苷酸環(huán)化酶

ATP轉(zhuǎn)化成cAMP，cAMP

水、電解質(zhì)過度分泌，腹瀉LT與霍亂腸毒素氨基酸同源性達75%ST的中間產(chǎn)物為cGMP第23頁/共42頁2023/4/2424第24頁/共42頁2023/4/2425第25頁/共42頁2023/4/2426第26頁/共42頁2023/4/2427第27頁/共42頁2023/4/2428(2)腸侵襲型大腸埃希菌

enteroinvasiveE.coli,EIEC致病物質(zhì)侵襲力：由編碼侵襲性pINV基因的質(zhì)粒編碼，該質(zhì)粒與志賀菌的類似質(zhì)粒高度同源。內(nèi)毒素：破壞細胞形成炎癥、潰瘍。所致疾病主要侵犯較大兒童和成人；腹瀉呈膿血便，有里急后重診斷；EIEC無動力，生化反應(yīng)、抗原結(jié)構(gòu)近似志賀菌第28頁/共42頁2023/4/2429

(3)腸致病型大腸埃希菌

enteropathogenicE.coli,EPEC

嬰幼兒腹瀉的主要病原菌不產(chǎn)生毒素，無侵襲力，通過粘附于微絨毛，破壞小腸刷狀緣，微絨毛萎縮而導(dǎo)致腹瀉。

Bfp介導(dǎo)的疏松粘附信號傳導(dǎo)緊密粘附素介導(dǎo)的緊密結(jié)合肌動蛋白重排，微絨毛破壞有局限性粘附和彌散性粘附第29頁/共42頁2023/4/2430(4)腸出血型大腸埃希菌

enterohemorrhagicE.coli,EHEC亦稱為vero毒素大腸埃希菌致病物質(zhì)菌毛：粘附作用毒素：vero毒素所致疾病出血性結(jié)腸炎溶血性尿毒綜合征第30頁/共42頁2023/4/2431重要血清型：O157：H7第31頁/共42頁2023/4/2432IntimateAdherenceofEHECtoEpithelialCells第32頁/共42頁2023/4/2433The“l(fā)ifecycle”ofE.coliO157:H75-10%prevalenceinanimals40%prevalenceinfarms第33頁/共42頁2023/4/2434

(5)

腸集聚型大腸埃希菌

enteroaggregativeE.coli,EAggEC致病物質(zhì)腸集聚耐熱毒素粘附素:凝聚性粘附菌毛所致疾病引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，脫水，偶有血便第34頁/共42頁2023/4/2435肺泡巨噬細胞吞噬大腸埃希菌第35頁/共42頁2023/4/2436

微生物學(xué)檢查法標本采集分離培養(yǎng)與鑒定：

1、腸外感染：涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)生化鑒定*尿路感染需計數(shù)中段尿細菌總數(shù)，＞10萬/ml2、腸內(nèi)感染：SS、麥康凱培養(yǎng)基。第36頁/共42頁2023/4/2437麥康凱培養(yǎng)基(含山梨醇，O157為蒼白菌落)第37頁/共42頁2023/4/2438第38頁/共42頁(二)衛(wèi)生細菌學(xué)檢查大腸菌群指數(shù)每1000(g)ml水中大腸菌群數(shù)大腸菌群細菌總數(shù)每1ml(g)樣品中細菌總數(shù)我國衛(wèi)生標準≤3個大腸菌群/1L飲水≤100個細菌總數(shù)/1ml飲水在環(huán)境和食品衛(wèi)生學(xué)上，常被用作糞便污染的檢測指標第39頁/共42頁