新穿心蓮內(nèi)酯在體內(nèi)外抗炎活性研究選自：TheAmericanJournalofChineseMedicineSCI影響因子0.710Abstract新穿心蓮內(nèi)酯，是一個(gè)來自穿心蓮植物的一種提取物。本文主要研究新穿心蓮內(nèi)酯在體內(nèi)和體外的抗炎作用及機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)口服新穿心蓮內(nèi)酯（150毫克/千克）顯著抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹。口服新穿心蓮內(nèi)酯（100–150毫克/千克）也能減少醋酸致小鼠血管通透性增加。在體外進(jìn)行研究，利用巨噬細(xì)胞系RAW264.7探討新穿心蓮內(nèi)酯抑制phorbol-12-myristate-13-acetate刺激呼吸系統(tǒng)和脂多糖誘導(dǎo)產(chǎn)生一氧化氮、腫瘤壞死因子（腫瘤壞死因子-α）。通過光學(xué)測量，結(jié)果顯示新穿心蓮內(nèi)酯抑制有刺激因子刺激呼吸系統(tǒng)產(chǎn)生炎癥因子，新穿心蓮內(nèi)酯抑制LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一氧化氮和腫瘤壞死因子-α，促進(jìn)抗炎活性的作用。這些結(jié)果表明，新穿心蓮內(nèi)酯具有顯著的抗炎作用。關(guān)鍵詞：新穿心蓮內(nèi)酯；耳水腫；血管通透性；一氧化氮；腫瘤壞死因子-α；巨噬細(xì)胞炎癥。其他化學(xué)試劑：醋酸豆寇酯、內(nèi)毒素（脂多糖），青霉素，鏈球菌霉素，魯米諾（苯巴比妥），三乙胺和其他生化試劑等。醋酸豆寇酯溶解在DMSO中，脂多糖（50μ克/毫升）不是加入的磷酸緩沖溶液。都存放到-20oC的環(huán)境中。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小白鼠（28±2克）抗炎活性的新穿心蓮內(nèi)酯化學(xué)結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)一：二甲苯引起的小鼠耳腫脹局部應(yīng)用二甲苯50微升，涂于老鼠的左耳，右耳為對(duì)照。新穿心蓮內(nèi)酯分為三個(gè)不同的劑量（50，100和150毫克/千克）一小時(shí)前讓小白鼠口服，再加一組地塞米松（20毫克/公斤）作為陽性對(duì)照實(shí)驗(yàn)三：新穿心蓮內(nèi)酯對(duì)LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中一氧化氮生產(chǎn)的影響新穿心蓮內(nèi)酯并沒有顯著影響基底原料264.7巨噬細(xì)胞。然而，新穿心蓮內(nèi)酯在沒有生產(chǎn)的巨噬細(xì)胞治療內(nèi)毒素的情況下是劑量依賴性地抑制內(nèi)毒素（圖4），在濃度從30到150μm。結(jié)果的基礎(chǔ)上的微量細(xì)胞活力檢測，新穿心蓮內(nèi)酯無毒性從30到90μm（細(xì)胞存活超過95%與對(duì)照組相比）。只有在最高劑量（150μm），一些細(xì)胞（細(xì)胞存活率明顯低于65%與對(duì)照組相比）。實(shí)驗(yàn)四：在LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞下新穿心蓮內(nèi)酯對(duì)腫瘤壞死因子-α生產(chǎn)的影響。腫瘤壞死因子-α是一個(gè)重要的炎癥介質(zhì)分泌的脂多糖，誘導(dǎo)264.7巨噬細(xì)胞系巨噬細(xì)胞。圖5顯示，新穿心蓮內(nèi)酯從30到150μm，腫瘤壞死因子-α濃度在LPS處理組劑量依賴性減少，相比于對(duì)照組在無脂多糖誘導(dǎo)下。Result實(shí)驗(yàn)一：新穿心蓮內(nèi)酯顯著（<0.05）的二甲基苯致耳毒水腫在150毫克/千克劑量后二甲基苯應(yīng)用（表1）。地塞米松也有顯著抑制水腫。新穿心蓮內(nèi)酯對(duì)在不同時(shí)間段由醋酸刺激小鼠所引起的內(nèi)臟絞痛誘導(dǎo)模型，而使其血管統(tǒng)透性增加有一定的抑制和調(diào)解作用?；瘜W(xué)誘導(dǎo)的血管通透性（如乙酸）會(huì)立即持續(xù)反應(yīng)?？诜?00～150毫克/公斤新穿心蓮內(nèi)酯誘發(fā)一個(gè)明顯的劑量相關(guān)的抑制醋酸致小鼠血管通透性增加（表2）。抑制表明，新穿心蓮內(nèi)酯可有效地抑制急性炎癥的滲出期。實(shí)驗(yàn)二：新穿心蓮內(nèi)酯隨著劑量的增加能顯著增加血管的通透性。實(shí)驗(yàn)三：新穿心蓮內(nèi)酯對(duì)LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中一氧化氮的生產(chǎn)具有明顯的抑制作用實(shí)驗(yàn)四：在LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞新穿心蓮內(nèi)酯對(duì)腫瘤壞死因子-α生產(chǎn)有明顯的抑制作用。從本報(bào)告數(shù)據(jù)表明，新穿心蓮內(nèi)酯引起劑量依賴性抑制一氧化氮和腫瘤壞死因子-α產(chǎn)生在LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中。新穿心蓮內(nèi)酯，對(duì)加脂多糖誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥介質(zhì)產(chǎn)生有抑制作用但沒有細(xì)胞毒作用。這表明，新穿心蓮內(nèi)酯并不是由于細(xì)胞死亡從而減少和減輕炎癥介質(zhì)的釋放和作用。低濃度新穿心蓮內(nèi)酯有輕度刺激免疫反應(yīng)的作用對(duì)在體內(nèi)沒有生產(chǎn)免疫因子的時(shí)候。這可能意味著，新穿心蓮內(nèi)酯，在低濃度時(shí)，可作為免疫刺激劑?？梢赃M(jìn)一步的研究其機(jī)制和構(gòu)