如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第1頁(yè)

臨床微生物檢驗(yàn)是對(duì)人體各種物質(zhì)進(jìn)行微生物學(xué)檢驗(yàn)，整個(gè)檢驗(yàn)過(guò)程包含病人樣品采集、運(yùn)輸、處理，樣品中致病微生物分離、培養(yǎng)、判定，藥品敏感試驗(yàn)，出具檢驗(yàn)匯報(bào)。臨床微生物檢驗(yàn)，在感染性疾病及相關(guān)病患診療治療預(yù)防及研究工作中起著越來(lái)越主要作用，為了保障檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性和可靠性，日常工作中要注意開(kāi)展質(zhì)量控制。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第2頁(yè)臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)控工作特點(diǎn)步驟多包括知識(shí)面廣復(fù)雜性高、需要超強(qiáng)責(zé)任心如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第3頁(yè)臨床微生物質(zhì)控內(nèi)容檢驗(yàn)前階段:指從臨床醫(yī)生開(kāi)醫(yī)囑開(kāi)始，到分析檢驗(yàn)程序開(kāi)啟時(shí)終止步驟，包含：檢驗(yàn)申請(qǐng)；標(biāo)本采集與運(yùn)輸檢驗(yàn)中階段:標(biāo)本分析檢驗(yàn)后階段:危急值匯報(bào),匯報(bào)產(chǎn)生,匯報(bào)修正,匯報(bào)判讀。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第4頁(yè)全部檢驗(yàn)流程產(chǎn)生檢驗(yàn)錯(cuò)誤有資料表明檢驗(yàn)前階段:46-68.2%檢驗(yàn)中階段:4-15%檢驗(yàn)后階段:18.5-47%如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第5頁(yè)標(biāo)本采集有意義匯報(bào)來(lái)自于質(zhì)量好標(biāo)本。要想取得敏感性與特異性微生物檢驗(yàn)匯報(bào),是始于病人并非來(lái)自微生物試驗(yàn)室門(mén)口。微生物試驗(yàn)室與標(biāo)本搜集者應(yīng)及時(shí)溝通并制訂標(biāo)本質(zhì)量采集手冊(cè)。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第6頁(yè)標(biāo)本采集標(biāo)本質(zhì)量采集手冊(cè)，包含：患者準(zhǔn)備不一樣部位標(biāo)本采集方法標(biāo)本運(yùn)輸要求（時(shí)間、溫度等）延遲運(yùn)輸時(shí)標(biāo)本貯藏方法安全運(yùn)輸標(biāo)本方法（密閉容器等符合生物安全要求）標(biāo)本標(biāo)識(shí)標(biāo)本采集指南應(yīng)方便標(biāo)本采集、運(yùn)輸者取閱！如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第7頁(yè)微生物標(biāo)本搜集質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本搜集應(yīng)盡可能靠近感染部位，并將污染可能降至最低。必須于適當(dāng)初機(jī)搜集標(biāo)本，以發(fā)覺(jué)感染相關(guān)病原體。執(zhí)行醫(yī)囑檢驗(yàn)項(xiàng)目，必須取得足量標(biāo)本。使用適當(dāng)搜集標(biāo)本容器，以確定能得到全部病原體。在使用抗生素前搜集全部微生物檢驗(yàn)標(biāo)本。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第8頁(yè)微生物標(biāo)本搜集質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本容器運(yùn)輸時(shí)必須有適當(dāng)標(biāo)示與密封。運(yùn)輸期間會(huì)造成個(gè)別病原體降低故應(yīng)盡可能縮短標(biāo)本運(yùn)輸時(shí)間，盡可能使用運(yùn)輸培養(yǎng)基。對(duì)于不適當(dāng)搜集標(biāo)本及不恰當(dāng)檢驗(yàn)醫(yī)囑應(yīng)作退件處理。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第9頁(yè)血液呼吸道分泌物膿液及無(wú)菌體液糞便尿液微生物標(biāo)本起源如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第10頁(yè)血液標(biāo)本采集臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其它血流感染患者，需做血液細(xì)菌培養(yǎng)以明確病原。及時(shí)、準(zhǔn)確地從患者血液中分離出病原菌，才能正確實(shí)施有效地抗菌治療，從而有利于提升治愈率和降低醫(yī)療費(fèi)。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第11頁(yè)時(shí)機(jī)應(yīng)在用抗菌素治療前,最好在患者發(fā)冷發(fā)燒前半小時(shí)采血為宜。次數(shù)與間隔發(fā)燒原因不明患者

24-48h后可再采血2次,間隔不少于60分鐘。采血急性感染患者

從兩臂分別采2份血樣。感染性心內(nèi)膜炎患者

24h內(nèi)采血3次,每次間隔不少于30分鐘。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第12頁(yè)膿液標(biāo)本采集

要盡可能防止病灶表面細(xì)菌污染。開(kāi)放性膿腫，采樣前無(wú)菌鹽水沖洗傷口，拭去表面污染膿液，挑取病灶深部膿液；封閉性膿液，嚴(yán)格對(duì)病灶皮膚或黏膜表面消毒后用無(wú)菌干燥注射器穿刺抽取，置無(wú)菌容器內(nèi)送檢,同時(shí)應(yīng)注意對(duì)厭氧菌培養(yǎng)，切開(kāi)排膿時(shí)用無(wú)菌拭子采集深部膿液。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第13頁(yè)呼吸道標(biāo)本采集

標(biāo)本留取質(zhì)量好壞直接影響到對(duì)下呼吸道病原學(xué)診療標(biāo)本采集要盡可能降低上呼吸道正常菌群干擾應(yīng)在用藥前或停藥1天后留取標(biāo)本。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第14頁(yè)泌尿道標(biāo)本采集應(yīng)在用藥前或停藥5天后留取標(biāo)本,并使尿液在膀胱內(nèi)停留6-8h以上。盡可能防止或降低尿道口正常菌群干擾。采集中段尿液。尿量不宜太多，容器蓋子與尿液不應(yīng)直接接觸留取導(dǎo)尿管尿要排空導(dǎo)尿管內(nèi)陳舊尿液，若留置尿管超出三天應(yīng)防止采取。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第15頁(yè)糞便標(biāo)本采集

應(yīng)在發(fā)病早期而且盡可能在用抗生素治療前采集，稀便不少于1ml，固體便不少于1克，無(wú)便患者可用直腸拭子采集標(biāo)本。要盡可能挑取含膿、黏液、血等病理改變或水樣糞便送檢。直腸拭子采樣量要足夠，拭子上肉眼應(yīng)可見(jiàn)糞便。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第16頁(yè)檢驗(yàn)過(guò)程試劑

設(shè)備人員培養(yǎng)基

檢驗(yàn)中質(zhì)量確保

如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第17頁(yè)人員一、人員資質(zhì) 工作人員要有醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)背景，接收微生物學(xué)基礎(chǔ)理論和基礎(chǔ)技能培訓(xùn)。二、人員比對(duì)為了規(guī)范試驗(yàn)室人員結(jié)果判讀統(tǒng)一性需進(jìn)行人員間各種比對(duì)常有：各種涂片結(jié)果識(shí)別K-B法抑菌環(huán)直徑測(cè)量各種生化反應(yīng)結(jié)果判讀各種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)菌落區(qū)分等如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第18頁(yè)試劑質(zhì)控臨床微生物試驗(yàn)室常見(jiàn)試劑包含染色液、診療血清以及各種生化反應(yīng)試劑等。天天對(duì)氧化酶、觸酶，每七天需對(duì)各種染色液，需要時(shí)對(duì)診療因子進(jìn)行質(zhì)控。

應(yīng)每3個(gè)月對(duì)診療血清進(jìn)行一次質(zhì)控。不使用過(guò)期血清。常見(jiàn)生化試劑應(yīng)注意試劑在貯存時(shí)避光、冷藏等要求，確保試劑穩(wěn)定性。不使用過(guò)期試劑。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第19頁(yè)培養(yǎng)基明確標(biāo)識(shí)： 能夠取得生產(chǎn)日期、保質(zhì)期、質(zhì)量控制、貯存條件等信息。自制培養(yǎng)基： 檢測(cè)每批號(hào)對(duì)應(yīng)性能，如無(wú)菌試驗(yàn)、生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)等。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第20頁(yè)１、普通性狀外觀(guān)透明、清亮、無(wú)混濁、無(wú)沉淀，顏色符合要求，表面濕潤(rùn)但無(wú)水汽、平整、光潔無(wú)凹坑和氣泡。整塊平板厚薄均勻。厚度

普通厚度在3mm，但MH平板厚度不得小于4mm。斜面長(zhǎng)度不得超出試管長(zhǎng)度2/3。pH

是細(xì)菌生長(zhǎng)主要條件之一，合格培養(yǎng)基pH應(yīng)在要求值上下0.2范圍內(nèi)。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第21頁(yè)2、無(wú)菌試驗(yàn)

新制備培養(yǎng)基要隨機(jī)抽取一定數(shù)量樣品作無(wú)菌試驗(yàn)。對(duì)于壓力蒸氣滅菌后傾注固體培養(yǎng)基，抽樣后放35℃±1℃溫箱培養(yǎng)24h；滅菌后經(jīng)無(wú)菌操作分裝液體培養(yǎng)基要全部放入35℃±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h；對(duì)有些無(wú)需高壓滅菌只需煮沸消毒選擇性培養(yǎng)基要取個(gè)別瓊脂，放入無(wú)菌肉湯管培養(yǎng)24h。上述試驗(yàn)證實(shí)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)才算合格。若有細(xì)菌生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基制備過(guò)程中已受雜菌污染，除了尋找原因外，不應(yīng)再使用。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第22頁(yè)3、細(xì)菌生長(zhǎng)試驗(yàn)

全部培養(yǎng)基在使用前除了做無(wú)菌試驗(yàn)外還必須用已知標(biāo)準(zhǔn)菌株做細(xì)菌生長(zhǎng)試驗(yàn)以測(cè)定培養(yǎng)基性能是否符合要求。標(biāo)準(zhǔn)菌株分2種：一個(gè)是已知可在某種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)并產(chǎn)生經(jīng)典生物學(xué)性狀，對(duì)培養(yǎng)基中某種物質(zhì)產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)菌株；另一個(gè)是用已知不能在某種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)或?qū)ε囵B(yǎng)基中某種物質(zhì)產(chǎn)生陰性生化反應(yīng)菌株。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第23頁(yè)蘇州大學(xué)從屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科

細(xì)菌室培養(yǎng)基質(zhì)控及儲(chǔ)存細(xì)則編號(hào)XJ-SOP-051表02如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第24頁(yè)蘇州大學(xué)從屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科

細(xì)菌室生化判定管質(zhì)控及儲(chǔ)存細(xì)則編號(hào)XJ-SOP-051表03如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第25頁(yè)紙片藥敏試驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控基礎(chǔ)質(zhì)控：連續(xù)做30天，如失控超出3次還需繼續(xù)，如失控低于3次可改為每七天1次。糾控：每七天質(zhì)控中發(fā)生失控應(yīng)糾控，方法：連續(xù)5天，天天1次，每次重復(fù)5個(gè)紙片，如找到明確失控原因，可馬上改為每七天1次，不然繼續(xù)。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第26頁(yè)設(shè)備制訂并執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作程序定時(shí)實(shí)施維護(hù)、保養(yǎng)、監(jiān)測(cè)，并統(tǒng)計(jì)。新設(shè)備或經(jīng)搬運(yùn)、維修后設(shè)備：性能評(píng)定及功效驗(yàn)證，確保試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。溫度依賴(lài)檢測(cè)設(shè)備：定時(shí)監(jiān)測(cè)溫度，使用過(guò)程中注意溫度改變。定時(shí)監(jiān)測(cè)特殊設(shè)備性能：CO2孵育箱內(nèi)CO2濃度；生物安全柜內(nèi)氣流；壓力滅菌器滅菌效果等。專(zhuān)用設(shè)備使用、維護(hù)、保養(yǎng)、監(jiān)測(cè)等需遵照制造商提議。

如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第27頁(yè)性能評(píng)定及功效驗(yàn)證全自動(dòng)血培養(yǎng)儀用10-20株質(zhì)控菌株（包含肺炎鏈球菌嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌）制備不一樣濃度菌液培養(yǎng)，統(tǒng)計(jì)報(bào)陽(yáng)時(shí)間及檢出情況。全自動(dòng)細(xì)菌判定儀用ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株檢測(cè)其判定及藥敏正確性。每一次室間質(zhì)評(píng)也能夠?qū)x器進(jìn)行驗(yàn)證。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第28頁(yè)檢驗(yàn)質(zhì)量不停完善以我科糞培養(yǎng)為例統(tǒng)計(jì)表明糞便中致病菌檢出總例數(shù)沙門(mén)菌屬所占百分比志賀菌屬所占百分比2900%620.7%4100%614.6%46510.9%510.9%551221.8%59.1%411946.3%614.6%糞便培養(yǎng)致病菌檢出率統(tǒng)計(jì)結(jié)果-用S.S培養(yǎng)基。用XLD培養(yǎng)基替換S.S培養(yǎng)基。以來(lái)用SBG替換NG增菌液。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第29頁(yè)不完全溶血金葡菌不完全溶血金葡菌正常β溶血金葡菌如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第30頁(yè)不完全溶血金葡菌咱們對(duì)當(dāng)前本市醫(yī)院常見(jiàn)三個(gè)品牌（梅里埃、安圖、科瑪嘉）成品及我室自配哥倫比亞血平板進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)，同時(shí)用十株不完全溶血金葡菌分別接種于上述血平板上，結(jié)果在24h均未得到透明β溶血環(huán)，48h后只有梅里埃生產(chǎn)血平板產(chǎn)生了β溶血環(huán)。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第31頁(yè)不完全溶血金葡菌咱們對(duì)9月份檢出全部金葡菌統(tǒng)計(jì)發(fā)覺(jué)有27.8%(15/54)出現(xiàn)該現(xiàn)象。全部不完全溶血金葡菌均為MRSA株,占全部MRSA48.4%。是平板質(zhì)量?細(xì)菌生物學(xué)特征改變?如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第32頁(yè)關(guān)于自動(dòng)化判定儀

任何一個(gè)微生物判定儀對(duì)微生物判定都不是100%正確，咱們常從下面幾個(gè)方面來(lái)防止錯(cuò)誤產(chǎn)生：規(guī)范操作流程，盡可能統(tǒng)一試驗(yàn)室內(nèi)每個(gè)工作人員對(duì)細(xì)菌菌落等描述。注意藥敏結(jié)果與所判定細(xì)菌是否匹配。與標(biāo)本起源,臨床表現(xiàn)是否相符合等。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第33頁(yè)匯報(bào)單審核

1.藥敏結(jié)果與細(xì)菌判定結(jié)果是否協(xié)調(diào)；熟悉細(xì)菌天然耐藥情況。弗勞地枸櫞酸桿菌、陰溝腸桿菌對(duì)一代頭孢、氨基青霉素、氨基青霉素/β-內(nèi)酰胺酶復(fù)合抑制劑、頭孢西丁、頭孢替坦、頭孢呋辛天然耐藥。變形桿菌屬對(duì)多粘菌素、四環(huán)素、呋喃妥因天然耐藥，普通變形桿菌同時(shí)對(duì)氨芐西林耐藥。銅綠假單胞菌對(duì)四環(huán)素、一代頭孢、二代頭孢、氨基青霉素、氨基青霉素/β-內(nèi)酰胺酶復(fù)合抑制劑、厄他培南、頭孢唑肟、頭孢噻肟、頭孢曲松、氯霉素、甲氧芐啶、復(fù)方新諾明、卡那霉素天然耐藥。如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第34頁(yè)匯報(bào)單審核2.某個(gè)藥結(jié)果是否符合它在本類(lèi)藥中活性等級(jí)。對(duì)第三代頭孢菌素耐藥腸桿菌科細(xì)菌，一樣對(duì)第一代和第二代頭孢菌素（除了頭霉素類(lèi)）耐藥，因?yàn)樗鼈兛赡芎杏行eta-內(nèi)酰胺酶對(duì)氨基青霉素/beta內(nèi)酰胺抑制劑復(fù)合抗生素耐藥腸桿菌科細(xì)菌，一樣對(duì)對(duì)應(yīng)beta內(nèi)酰胺抗生素單獨(dú)耐藥。

如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第35頁(yè)匯報(bào)單審核3.一些菌對(duì)某種藥是否尚無(wú)或極少有耐藥匯報(bào)。腸桿菌科（任何種）碳青霉烯類(lèi)—I或R。嗜麥芽窄食單胞菌碳青霉烯類(lèi)—S。任何細(xì)菌對(duì)全部常規(guī)試驗(yàn)中抗生素都R。腸球菌屬萬(wàn)古霉素—R、利奈唑胺—R。糞腸球菌氨芐西林或青霉素—R、奎奴普汀-達(dá)福普汀—S。金黃色葡萄球菌利奈唑胺—NS、奎奴普汀-達(dá)福普汀—I或R、萬(wàn)古霉素—I或R如何做好臨床微生物的質(zhì)量控制第36頁(yè)了解各種耐藥規(guī)則金黃色葡萄球菌對(duì)苯唑西林耐藥，則不應(yīng)使用青霉素、β-內(nèi)酰胺/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物、頭孢菌素（含有抗MRSA活性頭孢菌素類(lèi)抗生素除外）和碳青霉烯類(lèi)藥品治療。腸球菌不應(yīng)采取頭孢菌素、氨基糖甙類(lèi)、克林霉素和復(fù)方新諾明進(jìn)行治療，因其臨床無(wú)效。D試驗(yàn)陽(yáng)性：大環(huán)內(nèi)酯耐藥葡萄球菌如對(duì)克林霉素敏感和中介，則有可能含有對(duì)克林霉素誘