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血型鑒定專題知識(shí)講座血型鑒定專題知識(shí)講座第1頁(yè)血型是人類血液以血型抗原為表現(xiàn)形式遺傳性狀,血型由血型基因決定,是血細(xì)胞主要特征之一。ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)是紅細(xì)胞2大血型抗原抗體系統(tǒng),在臨床輸血和血液遺傳學(xué)研究上有主要意義。血型判定和交叉配血是確保輸血安全主要辦法。血型鑒定專題知識(shí)講座第2頁(yè)A和B基因是顯性基因,O基因則是隱性基因。所以,表型為A個(gè)體其基因型可能是AA或AO,表型為B個(gè)體其基因型可能是BB或BO。A血型和B血型主要抗原成份分別由A、B基因調(diào)控。除ABO血型基因外,存在于ABO各型紅細(xì)胞膜上H抗原是形成A、B血型抗原結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),H抗原又稱H物質(zhì),受H基因調(diào)控,H基因遺傳與ABO基因無(wú)關(guān)。H物質(zhì)抗原性較弱,血清中普通測(cè)不出抗H抗體。血型鑒定專題知識(shí)講座第3頁(yè)ABO血型判定紅細(xì)胞膜上含有血型糖蛋白,作為抗原,也稱為凝集原;ABO血型就是依據(jù)紅細(xì)胞表面抗原來(lái)確定,依據(jù)紅細(xì)胞上有或無(wú)A抗原或/和B抗原,將血型分為A型、B型、AB型及O型四種。血清中含有對(duì)應(yīng)特異性抗體稱為凝集素。凝集原和對(duì)應(yīng)凝集素特異性結(jié)合,使紅細(xì)胞凝集成團(tuán),進(jìn)而引發(fā)紅細(xì)胞破裂,產(chǎn)生溶血。ABO血型判定原理是利用紅細(xì)胞凝集試驗(yàn),將待測(cè)血液分別與已知含A抗體和B抗體標(biāo)準(zhǔn)血清混合,觀察是否發(fā)生凝集現(xiàn)象,判斷待測(cè)血液紅細(xì)胞上有何種抗原,由此確定待測(cè)血液血型。血型鑒定專題知識(shí)講座第4頁(yè)【檢測(cè)原理】血型抗原與對(duì)應(yīng)抗體在反應(yīng)介質(zhì)中形成紅細(xì)胞和對(duì)應(yīng)血型抗體結(jié)合免疫復(fù)合物,出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)凝集現(xiàn)象。用已知特異性標(biāo)準(zhǔn)血清(standardserum)檢驗(yàn)紅細(xì)胞未知血型抗原稱為正向定型(directtyping),用已知血型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞(standardredbloodcells)檢驗(yàn)標(biāo)本中未知血型抗體稱為反向定型(indirecttyping)。血型鑒定專題知識(shí)講座第5頁(yè)ABO血型分類血型鑒定專題知識(shí)講座第6頁(yè)ABO血型正反定型結(jié)果血型鑒定專題知識(shí)講座第7頁(yè)1.鹽水凝集法ABO血型抗體以IgM為主,IgM為五聚體免疫球蛋白,其相對(duì)分子質(zhì)量大,是完全抗體。IgM抗體克服紅細(xì)胞表面排斥作用能力強(qiáng),在生理鹽水中與含有對(duì)應(yīng)ABO血型抗原紅細(xì)胞結(jié)合,出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)凝集現(xiàn)象。血型鑒定專題知識(shí)講座第8頁(yè)2.凝膠微柱法利用凝膠分子篩作用和親和效應(yīng),以凝膠微柱為反應(yīng)介質(zhì),在透明塑料卡上凝膠管凝膠介質(zhì)中紅細(xì)胞與對(duì)應(yīng)抗體結(jié)合,形成紅細(xì)胞凝塊,經(jīng)低速離心處理,凝集紅細(xì)胞懸浮凝膠中,未結(jié)合抗體紅細(xì)胞則沉于凝膠底部。本法用單克隆抗體,特異性高。依據(jù)不一樣需要可選取中性凝膠、特異凝膠或抗球蛋白凝膠作為反應(yīng)介質(zhì)。結(jié)果既可用肉眼觀察,也可用血型分析儀分析。血型鑒定專題知識(shí)講座第9頁(yè)2.血型判定方法標(biāo)識(shí)凹載玻片:左上角寫(xiě)A,右上角寫(xiě)B(tài)。分別吸收標(biāo)準(zhǔn)A血清和標(biāo)準(zhǔn)B血清各1滴滴于雙凹載玻片左端和右端。采血針刺破左手無(wú)名指尖,待血液出來(lái)后,用2支毛細(xì)滴管吸收血液,分別加入到玻片左、右兩側(cè)血清內(nèi),并用牙簽攪拌,使標(biāo)準(zhǔn)血清與血液混勻。(切勿混用毛細(xì)滴管和牙簽?。┭丸b定專題知識(shí)講座第10頁(yè)手持玻片轉(zhuǎn)動(dòng)數(shù)次,轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)玻片應(yīng)保持在一個(gè)水平面上,然后置室溫下5min后觀察結(jié)果。肉眼觀察:假如外觀略呈花邊狀或鋸齒狀,看上去有沉淀,則多為凝集;假如血滴呈均勻狀態(tài),邊緣整齊,則多為不凝集。深入在低倍鏡下觀察:在低倍鏡下,假如觀察到紅細(xì)胞凝集成團(tuán),或還有少數(shù)游離細(xì)胞,則為凝集現(xiàn)象;假如紅細(xì)胞均為游離狀態(tài),則為不凝集。依據(jù)鏡下所見(jiàn)有沒(méi)有凝集現(xiàn)象判定血型。血型鑒定專題知識(shí)講座第11頁(yè)取潔凈載玻片滴加定型劑消毒取血消毒取血消毒觀察統(tǒng)計(jì)結(jié)果試驗(yàn)步驟血型鑒定專題知識(shí)講座第12頁(yè)①②抗A抗B血型鑒定專題知識(shí)講座第13頁(yè)③用70-75%酒精消毒取血部位消毒取血部位血型鑒定專題知識(shí)講座第14頁(yè)用針扎一下消毒部位,使血冒出,馬上滴一滴血液在抗A或B上。④
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