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關(guān)于基因表達載體的構(gòu)建第1頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月先用同一種限制酶分別切割目的基因和質(zhì)粒,再用DNA連接酶將二者連接,形成重組DNA分子。第2頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(轉(zhuǎn)化)常用的受體細(xì)胞:有大腸桿菌、枯草桿菌、酵母菌和動植物細(xì)胞等。第3頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月1、受體細(xì)胞是植物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法:主要侵染雙子葉植物(傷口分泌酚類化合物吸引農(nóng)桿菌)基因槍法花粉管通道法第4頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月1)土壤農(nóng)桿菌法第5頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月2)基因槍法第6頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月3)花粉管通道法第7頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月2、受體細(xì)胞是動物細(xì)胞顯微注射法注入動物受精卵第8頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月1982年,世界上第一例體型比普通小鼠大1.8倍的轉(zhuǎn)基因超級小鼠誕生第9頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月3、受體細(xì)胞是微生物將目的基因?qū)朐松锏暮锰幨鞘裁矗糠敝晨?、多為單?xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少要想使重組DNA順利進入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),最大的難題是什么?一般用CaCl2處理,改變細(xì)胞膜的通透性,使得重組DNA能夠進入細(xì)胞。第10頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月四、目的基因的檢測與鑒定檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入目的基因檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)檢測性狀分子水平個體水平第11頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月1、檢測目的基因DNA分子雜交技術(shù)提取轉(zhuǎn)基因生物的DNA制作分子探針(目的基因的一段單鏈序列)進行分子雜交第12頁,課件共14頁,創(chuàng)作于2023年2月2、檢測mRNA分子雜交技術(shù)第13頁,課件共14
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