天然藥物化學(xué)課程項(xiàng)目五黃酮類成分提取分離任務(wù)2理化性質(zhì)-顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（四）堿性試劑的顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)（一）還原反應(yīng)1．鎂粉（或鋅粉）反應(yīng)是鑒定黃酮類化合物最常用的顏色反應(yīng)。在樣品的甲醇或乙醇液中，加入少許鎂粉（或鋅粉）振搖，滴加幾滴濃鹽酸，1～2分鐘（必要時(shí)微熱）即可顯色。多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯橙紅～紫紅色，少數(shù)顯紫～藍(lán)色，B環(huán)上有-OH或-OCH3取代時(shí)，顏色隨之加深。但查耳酮、異黃酮多不顯色?；ㄉ卦跐恹}酸作用下也會(huì)變紅色，出現(xiàn)假陽性，故需作空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)，排除干擾。（一）還原反應(yīng)2．四氫硼鈉反應(yīng)為二氫黃酮、二氫黃酮醇類專屬性較高的一種還原反應(yīng)。在樣品的甲醇或乙醇液中，加入等量的2%NaBH4的甲醇溶液，1分鐘后滴加濃鹽酸或濃硫酸數(shù)滴，二氫黃酮、二氫黃酮醇類化合物與之反應(yīng)顯紅～紫紅色，其它黃酮類不顯色，可進(jìn)行區(qū)別。（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)黃酮類化合物分子中常含有下列結(jié)構(gòu)單元，故可與鋁鹽、鋯鹽、鎂鹽、鉛鹽等試劑反應(yīng)生成有色絡(luò)合物。（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)1．三氯化鋁反應(yīng)加1%三氯化鋁或硝酸鋁的甲醇液，生成鋁絡(luò)合物顯黃色，置紫外燈下顯黃綠色熒光，可用于定性及定量分析。（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)2．鋯鹽-枸櫞酸顯色反應(yīng)此反應(yīng)常用于區(qū)別C3-羥基黃酮和C5-羥基黃酮。在樣品的甲醇溶液中加入2%二氯氧鋯（ZrOCl2）的甲醇溶液時(shí)，C3-羥基、C5-羥基黃酮類化合物均能與之生成絡(luò)合物而顯鮮黃色。當(dāng)再加入2%的檸檬酸甲醇溶液時(shí)，C3-羥基仍為鮮黃色不褪；C5-羥基黃酮鮮黃色顯著減褪。這是因?yàn)镃5-羥基、C4-羰基與鋯鹽生成的絡(luò)合物沒有C3-羥基、C4-羰基與鋯鹽生成的絡(luò)合物穩(wěn)定，借此可區(qū)別二者。（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)3．醋酸鎂反應(yīng)該反應(yīng)可區(qū)別二氫黃酮（醇）類化合物與其它類黃酮。在濾紙上滴加樣品乙醇溶液，噴以1％醋酸鎂的甲醇液，加熱干燥，在紫外燈下觀察。二氫黃酮、二氫黃酮醇類化合物可顯天藍(lán)色熒光，而黃酮、黃酮醇及異黃酮類化合物等則顯黃色、橙黃色或褐色。（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)4．鉛鹽反應(yīng)常用1％醋酸鉛及堿式醋酸鉛水溶液，可生成黃～紅色沉淀。醋酸鉛只能與分子中具有鄰二酚羥基或兼有3-羥基、4-酮基或5-羥基、4-酮基結(jié)構(gòu)的化合物反應(yīng)生成沉淀。而堿式醋酸鉛的沉淀能力要強(qiáng)得多，一般含酚羥基的化合物均可與之發(fā)生沉淀。（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)5．三氯化鐵三氯化鐵水溶液或醇溶液為常用的酚類顯色劑。多數(shù)黃酮類化合物因分子中含有酚羥基，故可產(chǎn)生陽性反應(yīng)，但一般僅在含有氫鍵締合的酚羥基時(shí)，才呈現(xiàn)明顯反應(yīng)。（三）硼酸顯色反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)5-羥基黃酮及2＇-羥基查耳酮類結(jié)構(gòu)在酸性條件下，可與硼酸反應(yīng)，生成物亮黃色，故可與其他類型的黃酮相區(qū)別。一般5-羥基黃酮及2＇-羥基查耳酮類結(jié)構(gòu)在草酸存在下顯黃色并具有綠色熒光，但在枸櫞酸丙酮存在的條件下，則只顯黃色而無熒光。（四）堿性試劑的顯色反應(yīng)（四）堿性試劑的顯色反應(yīng)在日光及紫外光下，將黃酮類化合物溶液滴于濾紙上，觀察樣品用氨蒸氣和其他堿性試劑處理后的斑點(diǎn)顏色變化的情況。二氫黃酮類在堿性試劑中可轉(zhuǎn)變?yōu)椴槎惢衔?，顯橙色～黃色。（四）堿性試劑的顯色反應(yīng)黃酮醇類在堿液中先呈黃色，通入空氣后變?yōu)樽厣?，?jù)此可與其它黃酮類區(qū)別。黃酮類化合物當(dāng)分子中有