學(xué)習(xí)單元9：溶組織內(nèi)阿米巴的檢驗(yàn)00原蟲概述原蟲（protozoon）是指體積微小而能獨(dú)立完成生命活動(dòng)的單細(xì)胞真核動(dòng)物。生活史簡單或復(fù)雜因種而異。發(fā)育不同階段的蟲體形態(tài)特征不同。1.概念原蟲體積?。悍植紡V泛，種類多：結(jié)構(gòu)簡單：2.特點(diǎn)單細(xì)胞，肉眼不可見，借助顯微鏡才能觀察到。65,000種細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核（1）細(xì)胞膜是寄生性原蟲與宿主細(xì)胞和其寄生環(huán)境直接接觸的部位。（2）細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的運(yùn)動(dòng)細(xì)胞器是原蟲分類的重要依據(jù)。原蟲葉足蟲綱鞭毛蟲綱孢子蟲綱纖毛蟲綱3.分類溶組織內(nèi)阿米巴陰道毛滴蟲、藍(lán)氏賈第鞭毛蟲瘧原蟲、剛地弓形蟲結(jié)腸小袋纖毛蟲原蟲滋養(yǎng)體（trophozoite）包囊（cyst）4.生活史是原蟲生活史中代謝旺盛的階段，具有運(yùn)動(dòng)和攝食功能，為原蟲的生長、發(fā)育和繁殖的階段。是滋養(yǎng)體遇到不良環(huán)境的階段，相對(duì)于滋養(yǎng)體，它是原蟲生活史中相對(duì)靜止?fàn)顟B(tài)，也是原蟲的感染階段。基本概念原蟲生活史只有一個(gè)階段生活史有二個(gè)階段生活史有世代交替現(xiàn)象4.生活史僅有一個(gè)滋養(yǎng)體階段，如陰道毛滴蟲。既有滋養(yǎng)體階段又有包囊階段，如溶組織阿米巴、藍(lán)氏賈第鞭毛蟲。類型既有有性生殖又有無性生殖階段，如弓形蟲、隱孢子蟲、瘧原蟲。原蟲增殖作用播散能力機(jī)會(huì)致病5.致病特點(diǎn)瘧原蟲機(jī)會(huì)致病原蟲（opportunisticpathogen）：寄生原蟲中的某些種群對(duì)健康宿主不表現(xiàn)明顯致病性，但對(duì)免疫功能受累的宿主則可引起急性感染或嚴(yán)重發(fā)作。弓形蟲弓形蟲、隱孢子蟲和藍(lán)氏賈第鞭毛蟲原蟲學(xué)習(xí)單元9：溶組織內(nèi)阿米巴的檢驗(yàn)?zāi)夸?Contents0102030405形態(tài)生活史致病性實(shí)驗(yàn)室診斷流行與防治檢驗(yàn)技師考試大綱——溶組織內(nèi)阿米巴0102030405形態(tài)生活史致病性實(shí)驗(yàn)室診斷流行與防治（熟練掌握）（掌握）（掌握）（掌握）（了解）案例患者，男性，36歲，主訴右上腹疼痛10天，疼痛向右肩背部放射，診斷為膽囊炎。服用多種抗生素治療無效而住院。肝穿刺有巧克力色膿液及壞死組織。實(shí)驗(yàn)室檢查：碘液染色查見可滋養(yǎng)體，確認(rèn)為阿米巴肝膿腫，經(jīng)用甲硝唑靜脈滴注，每天2次，共12天痊愈出院。本病是如何引起的？診斷依據(jù)是什么？如何進(jìn)行病原檢查？分析學(xué)習(xí)目標(biāo)1.該患者消化系統(tǒng)等體征的描述，你是否考慮到為寄生蟲感染引起？寄生蟲檢驗(yàn)

技術(shù)有關(guān)認(rèn)知（寄生蟲、宿主、生活史、致病蟲期、診斷蟲期、檢查方法）2.醫(yī)生開出溶組織內(nèi)阿米巴、藍(lán)氏賈第鞭毛等檢查申請(qǐng)單，送檢標(biāo)本到檢驗(yàn)科，

你將如何進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備、需要準(zhǔn)備哪些器材與試劑？3.你是否知道病原形態(tài)特征、診斷依據(jù)？檢出率最高方法項(xiàng)目是什么？4.你是否知道檢查中要注意的哪些問題？以提高檢出率；檢查后要注意的哪些問

題？以規(guī)避實(shí)驗(yàn)室污染，確保實(shí)驗(yàn)室生物生物安全。溶組織內(nèi)阿米巴，又叫痢疾阿米巴，主要寄生于結(jié)腸，引起阿米巴

痢疾和阿米巴病。該病全球分布，多見于熱帶與亞熱帶。我國據(jù)統(tǒng)計(jì)人群感染率大約在1—2%之間。每年全球有數(shù)萬人死于阿米巴病，其重要性僅次于瘧疾和血吸蟲病。01溶組織內(nèi)阿米巴的形態(tài)大滋養(yǎng)體小滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體未成熟包囊包囊成熟包囊阿米巴的形態(tài)比白細(xì)胞略大（10-40微米），活體時(shí)靠偽足作進(jìn)行性和定向阿米巴運(yùn)動(dòng)，有折光性。經(jīng)鐵蘇木素染色后其內(nèi)部結(jié)構(gòu)清晰泡狀核，可見核仁與核膜內(nèi)緣的染色質(zhì)粒，核仁與核膜間有時(shí)隱約可見網(wǎng)狀核纖絲大滋養(yǎng)體小滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體大滋養(yǎng)體（組織型滋養(yǎng)體）阿米巴的形態(tài)

大滋養(yǎng)體（鐵蘇木素染色）較豐富的外質(zhì)透明顆粒狀的內(nèi)質(zhì)吞噬的紅細(xì)胞典型的泡狀核內(nèi)外質(zhì)分明，外質(zhì)透明，內(nèi)質(zhì)顆粒狀，可見吞噬的紅細(xì)胞阿米巴的形態(tài)阿米巴的形態(tài)

大滋養(yǎng)體（鐵蘇木素染色）人工培養(yǎng)的滋養(yǎng)體顯微鏡下活體形態(tài)阿米巴的形態(tài)比大滋養(yǎng)體?。?0-20微米），內(nèi)質(zhì)沒有紅細(xì)胞。小滋養(yǎng)體大滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體小滋養(yǎng)體（腸腔型滋養(yǎng)體）阿米巴的形態(tài)外質(zhì)核內(nèi)質(zhì)活體鏡下觀鐵蘇木素染色片阿米巴的形態(tài)

小滋養(yǎng)體（鐵蘇木素染色）阿米巴的形態(tài)小滋養(yǎng)體（腸腔型滋養(yǎng)體）大滋養(yǎng)體（組織型滋養(yǎng)體）阿米巴的形態(tài)未成熟包囊包囊成熟包囊未成熟包囊四核/成熟包囊圓球形，直徑10-16微米，無色透明，囊壁有折光性。包囊核可以進(jìn)行二分裂增殖，未成熟包囊為1-3個(gè)核。核的結(jié)構(gòu)與滋養(yǎng)體的核相似，特征結(jié)構(gòu)為擬染色體，蘇木素染色為黑色棒狀，另可見糖原泡（空泡狀）。阿米巴的形態(tài)未成熟包囊包囊成熟包囊阿米巴的形態(tài)未成熟包囊包囊成熟包囊鐵蘇木素染色后，可見到棒狀、兩端鈍圓的擬染色體，具有蟲種鑒別的意義。此外，可見在染色過程中被溶解為空泡的糖原泡。

包囊（鐵蘇木素染色）未成熟包囊阿米巴的形態(tài)成熟包囊有4個(gè)核，為感染期包囊。糖原泡和擬染色體消失。成熟包囊包囊包囊阿米巴的形態(tài)

包囊（碘液染色）阿米巴的形態(tài)

包囊（碘液染色）a：成熟包囊看一看，想一想！下面圖片中，a、b、c、r分別是什么？b：單核包囊c：成熟包囊r：紅細(xì)胞02溶組織內(nèi)阿米巴的生活史

生活史經(jīng)歷2個(gè)發(fā)育階段阿米巴的生活史包囊滋養(yǎng)體阿米巴的生活史小/腸腔型滋養(yǎng)體生活史

四核包囊

小腸小滋養(yǎng)體結(jié)腸包囊感染階段阿米巴的生活史

四核包囊

小腸小滋養(yǎng)體結(jié)腸包囊大滋養(yǎng)體腸壁組織致病階段大/組織型滋養(yǎng)體生活史阿米巴的生活史阿米巴的生活史四核包囊小滋養(yǎng)體小滋養(yǎng)體大滋養(yǎng)體大滋養(yǎng)體包囊經(jīng)口感染在小腸下段脫囊(橫結(jié)腸)侵入組織二分裂增殖二分裂增殖隨糞便排出體外隨水樣便排出體外（死亡）隨膿血便排出體外（死亡）成熟包囊阿米巴的生活史生活史小結(jié)：1.人是唯一終宿主2.寄生部位：大腸（主要在結(jié)腸和盲腸）3.感染階段：四核包囊4.感染途徑：經(jīng)口5.感染方式：攝入污染有成熟包囊的食物或水而感染。6.繁殖方式：滋養(yǎng)體以二分裂方式繁殖7.診斷階段：包囊、滋養(yǎng)體阿米巴的生活史D致病蟲期A1-A5寄生部位診斷蟲期感染階段糞便痰液組織型滋養(yǎng)體四核包囊滋養(yǎng)體、包囊腸、肝、肺、腦等排蟲途徑自我測(cè)試一下吧！生活史圖解03溶組織內(nèi)阿米巴的致病性滋養(yǎng)體致病腸阿米巴病腸外阿米巴病阿米巴的致病性僅在糞檢時(shí)可查見包囊。溶組織內(nèi)阿米巴感染者只有極少數(shù)為無癥狀者90%以上為迪斯帕內(nèi)阿米巴感染1.無癥狀帶蟲者阿米巴的致病性阿米巴性結(jié)腸炎阿米巴痢疾2.腸阿米巴病輕度間歇性腹瀉腹痛、發(fā)熱、果醬樣黏液血便、里急后重、惡心嘔吐、厭食（腸壁形成口小底大燒瓶樣潰瘍）阿米巴的致病性正常腸黏膜腸阿米巴病燒瓶樣潰瘍阿米巴的致病性阿米巴性肝膿腫3.腸外阿米巴病發(fā)熱、寒戰(zhàn)、盜汗、厭食、肝區(qū)疼痛、體重減輕阿米巴性肺膿腫阿米巴性腦膿腫胸痛、發(fā)熱、咳嗽或咳巧克力色痰頭痛、眩暈、嘔吐、精神障礙，甚至發(fā)展為腦膜腦炎皮膚阿米巴病、尿道生殖系統(tǒng)阿米巴病阿米巴的致病性阿米巴性肝膿腫3.腸外阿米巴病阿米巴的致病性腸阿米巴病&腸外阿米巴病阿米巴的致病性腸阿米巴病多發(fā)生盲腸或闌尾，典型的病灶是燒瓶樣潰瘍（口小底大），潰瘍間的黏膜正?；蛏杂谐溲[。腸外阿米巴病以肝臟為多見，在肺、腹腔、心包、腦、生殖器官等均可形成膿腫，呈無菌性、液化性壞死。肝穿刺可見“巧克力醬”狀膿液，膿腫邊緣可檢出含有或不含紅細(xì)胞的滋養(yǎng)體。1.毒力：侵襲型與非侵襲型種群復(fù)合體，形態(tài)上不可分，但毒力明顯不同。2.共生菌群的協(xié)同作用：提供食物、厭氧等理化環(huán)境與合適的pH值；削弱宿主抵抗力，直接損傷腸粘膜，以利于阿米巴的侵入。證據(jù)為：吞食無菌包囊→帶蟲狀態(tài)；加服病人腸道菌即發(fā)生痢疾；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也有證明。3.宿主細(xì)胞協(xié)同作用：中性粒細(xì)胞被趨附→觸殺→放出有毒氧化物→破壞組織阿米巴的致病性影響致病的因素04溶組織內(nèi)阿米巴的實(shí)驗(yàn)室診斷病原學(xué)檢查免疫學(xué)檢查1.糞便檢查2.病灶組織檢查檢測(cè)抗體阿米巴的實(shí)驗(yàn)室診斷取材糞便、膿腫穿刺液、活組織阿米巴的實(shí)驗(yàn)室診斷1.糞便檢查：檢查方法生理鹽水直接涂片法碘液染色法病原學(xué)檢查查滋養(yǎng)體查包囊（1）生理鹽水直接涂片法適用于急性阿米巴痢疾和阿米巴結(jié)腸炎患者。在黏液膿血便中可以檢出活動(dòng)的滋養(yǎng)體。鏡檢可見黏液含有很多黏集成團(tuán)的紅細(xì)胞和較多的白細(xì)胞，有時(shí)可見菱形的夏科-萊登結(jié)晶和活動(dòng)的滋養(yǎng)體。病原學(xué)檢查（2）碘液染色法適用于慢性患者的稀便或帶蟲者的成形軟便。以碘液代替生理鹽水滴加于載玻片上，挑取糞便少許，調(diào)勻涂片，染色后包囊呈黃色，糖原泡為棕紅色，囊壁、核仁與擬染色體均不著色。病原學(xué)檢查材料涂片加碘液（2）碘液染色法病原學(xué)檢查（2）碘液染色法病原學(xué)檢查覆以蓋片鏡下觀察患者種類標(biāo)本診斷階段診斷方法注意事項(xiàng)急性痢疾患者膿血便活動(dòng)的滋養(yǎng)體直接涂片法標(biāo)本新鮮阿米巴腸炎稀便活動(dòng)的滋養(yǎng)體直接涂片法標(biāo)本新鮮慢性/遷延性患者成形便

包囊直接涂片法或濃集法（碘染色）多次送檢病原學(xué)檢查2.病灶組織檢查：檢查方法膿腫穿刺液檢查活組織檢查病原學(xué)檢查查滋養(yǎng)體查滋養(yǎng)體阿米巴肝膿腫穿刺盤中醬紅色的膿汁由壞死、液化的肝細(xì)胞形成，其中可以查到大滋養(yǎng)體。2.病灶組織檢查：病原學(xué)檢查即檢測(cè)特異性抗體的方法，常用于流行病學(xué)調(diào)查。檢查方法間接熒光抗體試驗(yàn)（IFA）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）免疫學(xué)檢查免疫學(xué)檢查免疫學(xué)檢查對(duì)于腸外阿米巴病，常需要其他檢查進(jìn)行診斷。檢查方法影像學(xué)檢查腹腔鏡檢查診斷性治療其他診斷方法其他診斷方法腸阿米巴病診斷標(biāo)準(zhǔn)05溶組織內(nèi)阿米巴的流行與防治世界性流行，熱帶與亞熱帶地區(qū)多見。發(fā)病率與經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平、公共衛(wèi)生條件、個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣、機(jī)體免疫力高度相關(guān)。阿米巴的流行與防治3.易感人群2.傳播途徑1.傳染源——旅游者、流動(dòng)人群、弱智低能人群、同

性戀群體流行環(huán)節(jié)流行阿米巴的流行與防治——糞便中帶包囊的患者和無癥狀的帶蟲者，

尤其是后者