血漿蛋白質(zhì)的臨床檢測(cè)生理因素生活習(xí)性藥物影響一、患者的準(zhǔn)備情緒1、生理影響因素：年齡性別種族妊娠2、生活習(xí)性影響因素：飲食饑餓運(yùn)動(dòng)吸煙飲酒飲茶、咖啡蛋白、脂類、糖、K↑蛋白、脂類、糖↓AST、ALT、GGT↑激素↑，IgG↓Glu↑CK、K、Na、Ca、ALP、糖、白蛋白↑3、藥物的影響：所有藥物都會(huì)對(duì)病人的某些檢驗(yàn)項(xiàng)目的結(jié)果產(chǎn)生或大或小的影響，它是通過(guò)以下途徑發(fā)生的：

(1)藥理作用：首先是對(duì)生理病理過(guò)程產(chǎn)生影響。其次是藥物的毒副作用

(2)對(duì)測(cè)定方法產(chǎn)生影響：有些影響是物理性有的藥物參與化學(xué)反應(yīng)二、標(biāo)本采集標(biāo)本采集原則：l采樣時(shí)間的控制2采取具代表性的標(biāo)本3采取最合乎要求的標(biāo)本4唯一性標(biāo)志5采樣量抗凝劑防腐劑標(biāo)本的分離儲(chǔ)存和轉(zhuǎn)運(yùn)三、樣本處理醫(yī)生填寫(xiě)檢驗(yàn)申請(qǐng)單靜脈采血、標(biāo)本留取傳送標(biāo)本至檢驗(yàn)科樣品編號(hào)按檢驗(yàn)項(xiàng)目要求處理標(biāo)本自動(dòng)生化開(kāi)機(jī)前檢查質(zhì)控操作下達(dá)常規(guī)操作指令常規(guī)標(biāo)本實(shí)施急診登記及操作結(jié)果查詢及傳輸關(guān)機(jī)醫(yī)院檢驗(yàn)科常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目工作流程：四、體液蛋白質(zhì)檢測(cè)

生化檢驗(yàn)中測(cè)定蛋白質(zhì)的方法很多，主要利用蛋白質(zhì)的分子組成，結(jié)構(gòu)或性質(zhì)進(jìn)行。一、血清總蛋白測(cè)定及評(píng)價(jià)（一）凱氏定氮法：是測(cè)定蛋白質(zhì)的經(jīng)典方法，1883年Kjeldahl首創(chuàng)，精密度準(zhǔn)確度高，但操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)、技術(shù)性強(qiáng)，不適合臨床常規(guī)檢測(cè)，一般用于標(biāo)準(zhǔn)血清的標(biāo)定和校正。（二）雙縮脲法

【原理】蛋白質(zhì)分子中的肽鏈在堿性條件下能與二價(jià)銅離子作用生成紫紅色的絡(luò)合物，產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)與蛋白質(zhì)的含量成正比，但雙縮脲反應(yīng)并非蛋白質(zhì)特有的顏色反應(yīng)，分子中含二個(gè)以上肽鍵者均有此反應(yīng)。

【試劑】雙縮脲試劑未失結(jié)晶水的硫酸銅（CuSO4·5H2O）3.0g溶于500ml新鮮制備的蒸餾水或剛煮沸冷卻的去離子水中，加酒石酸鉀鈉（NaKC4O4H6·4H2O）9.0g，碘化鉀5.0g，待完全溶解后加入6mol/LNaOH溶液100ml，最后加蒸餾水至1L，置聚乙烯瓶?jī)?nèi)蓋緊保存。酒石酸鉀鈉的作用是絡(luò)合銅離子，維持銅離子在堿性溶液中的溶解度，碘化鉀防止兩價(jià)銅離子還原。

【參考范圍】60～80g/L

（一）血清總蛋白增高

1.血液濃縮嚴(yán)重腹瀉、嘔吐、高燒

2.合成增加主要見(jiàn)于球蛋白合成增加，多發(fā)性骨髓瘤。（二）血清總蛋白降低

1.血液稀釋靜脈滴注過(guò)多低滲溶液，各種原因所引起的水鈉潴留。

2.攝入不足和消耗增加營(yíng)養(yǎng)不良，慢性胃腸道疾病引起的消化吸收不良，消耗性疾病，結(jié)核病、甲亢、惡性腫瘤。

3.合成障礙主要見(jiàn)于肝臟疾患。

4.蛋白質(zhì)丟失嚴(yán)重?zé)齻?，大量血漿滲出，腎病綜合癥。二、血清白蛋白測(cè)定及評(píng)價(jià)（溴甲酚綠法）

【原理】溴甲酚綠（BCG）在pH4.2的環(huán)境中，在有非離子去垢劑（Brij-35）存在時(shí)，可與清蛋白結(jié)合形成藍(lán)綠色復(fù)合物，顏色的深淺在一不定范圍內(nèi)與清蛋白含量成正比。

BCG與清蛋白結(jié)合的特異性較低，它不僅與Alb結(jié)合呈色，還可與其他蛋白質(zhì)呈色，其中α1-球蛋白，TRF、Hp最明顯，但反應(yīng)速度不同，Alb可立即反應(yīng)（快反應(yīng)），其他蛋白質(zhì)反應(yīng)慢（慢反應(yīng)）。

【試劑】1.10mmol/LBCG貯存液BCG1.75g，溶于5ml1mol/LNaoH溶液中，加蒸餾水至250ml。

2.0.5mol/L琥珀酸緩沖貯存液（pH4.0）NaoH10g，琥珀酸56g，溶解于800ml蒸餾水中，用1mol/LNaoH溶液調(diào)pH至4.10±0.05加蒸餾水至1L。

3.疊氮鈉貯存液疊氮鈉40g溶于1000ml蒸餾水中。

4.Brij-35溶液Brij-3529g，加蒸餾水80ml，置80ml左右水溶使其溶解，然后加水至100ml。5.BCG試劑于IL容量瓶?jī)?nèi)加蒸餾水400ml，琥珀酸緩沖貯存液100ml，BCG貯存液8ml，疊氮鈉貯存液2.5ml，Brij-35溶液2.5ml，加蒸餾水至刻度，配好的BCG試劑的pH應(yīng)為4.15±0.05。

Brij-35可提高蛋白質(zhì)與染料的結(jié)合力及溶解度，提高呈色穩(wěn)定性，如無(wú)Brij-35可用吐溫-20代替，疊氮鈉有防腐作用?！緟⒖挤秶?5～55g/L?！九R床意義】三、血漿纖維蛋白原測(cè)定及評(píng)價(jià)

血漿纖維蛋白原（Fib）是一種參與血液凝固的糖蛋白，又稱凝血因子Ⅰ，分子量34萬(wàn)，在肝臟合成，電泳時(shí)位于β球蛋白區(qū)帶。血漿纖維蛋白原測(cè)定對(duì)于出血性疾病和肝臟損傷的診斷有重要意義。測(cè)定血漿纖維蛋白原的方法有多種，主要有：

1.復(fù)鈣雙縮脲法在稀釋血漿中加入鈣離子使纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為不溶性纖維蛋白凝塊，將凝塊分離后用雙縮脲法測(cè)定纖維蛋白含量。

2.鹽析雙縮脲法在血漿中加入12.5%的亞硫酸鈉使纖維蛋白原沉淀而與其他血漿蛋白質(zhì)分離，將纖維蛋白原用雙縮脲試劑顯色，求出其含量。

3.比濁法在pH7.0時(shí)，用13.3%的硫酸銨溶液沉淀纖維蛋白原，而血漿中其他蛋白質(zhì)保持溶解狀態(tài)，此時(shí)溶液的濁度完全由纖維蛋白原產(chǎn)生，通過(guò)比濁可求得其含量。

4.免疫化學(xué)法用人纖維蛋白原免疫動(dòng)物獲得抗人纖維蛋白原抗體，應(yīng)用免疫電泳法、免疫擴(kuò)散法和ELISA法測(cè)定纖維蛋白原含量。

【參考范圍】2.0～4.0g/L

【臨床意義】1.纖維蛋白原增加纖