第五章血細胞分析儀及其臨床應(yīng)用永州職業(yè)技術(shù)學(xué)院1.自動化程度越來越高2.提供參數(shù)越來越多3.精密度越來越高4.速度越來越快5.越來越注重環(huán)保6.質(zhì)控功能得到加強7.智能化程度越來越高一、血細胞分析儀的原理（一）細胞計數(shù)及體積測定原理1.電阻抗檢測原理

血細胞是相對不良導(dǎo)體，當血細胞通過小孔電阻增加，出現(xiàn)一個脈沖信號。脈沖大小和振幅高低反應(yīng)細胞大小，又叫庫爾特（Coulter）原理脈沖信號傳遞步驟：①放大②閾值調(diào)節(jié)③甄別④整形⑤計數(shù)細胞直方圖：“Y”軸：相對數(shù)“X”軸：體積以飛升（fl）為單位。2.流式細胞術(shù)加光學(xué)檢測原理如圖激光折射，散射，衍射檢測細胞（二）白細胞分類原理1.電阻抗法

標本單個白細胞按體積大小分類溶血素稀釋液電阻抗法淋巴細胞單個核細胞中性粒細胞三群第一群為小細胞區(qū)，35～90fl，淋巴細胞；第二群為中間細胞區(qū)，90～160fl，包括幼稚細胞、單核細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細胞；第三群為大細胞區(qū)，160fl以上，中性粒細胞2.容量、電導(dǎo)、光散射（VCS）白細胞分類法V:體積電阻抗原理測定

C:電導(dǎo)性高頻電磁探針測定內(nèi)部結(jié)構(gòu)

S：光散射激光掃描測定顆粒構(gòu)型和質(zhì)量單個細胞3.阻抗與射頻技術(shù)聯(lián)合白細胞分類法（1）嗜酸性粒細胞檢測系統(tǒng)經(jīng)特殊溶血劑嗜酸性粒細胞通過小孔產(chǎn)生脈沖被計數(shù)。（2）嗜堿性粒細胞檢測系統(tǒng)原理同嗜酸性粒細胞（3）淋巴、單核、粒細胞（中性、嗜堿性、嗜酸性）檢測系統(tǒng)采用電阻抗與射頻聯(lián)合檢測檢測細胞大?。―C）和核及顆粒的密度（RF）（4）幼稚細胞檢測系統(tǒng)幼稚細胞形態(tài)不受破壞，可通過電阻抗法檢測4.光散射與細胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合白細胞分類計數(shù)聯(lián)合利用激光散射和過氧化物酶染色技術(shù)進行血細胞分類計數(shù)5.多角度偏振光散射白細胞分類技術(shù)自然態(tài)白細胞多角度光散射分類（三）紅細胞測試原理1.紅細胞（RBC）和血細胞比容（HCT）電阻抗法形成脈沖脈沖的多少：紅細胞數(shù)目脈沖高度：單個紅細胞體積脈沖高度疊加：血細胞的比容2.血紅蛋白測定（Hb）

血液釋放Hb540nm比色3.各項紅細胞指數(shù)檢測原理

MCV、MCH、MCHC、RDW根據(jù)RBC、HCT和Hb換算溶血劑（四）血小板分析原理與紅細胞一起在一個系統(tǒng)進行檢測，2～30fl內(nèi)檢測（五）全自動血細胞計數(shù)儀配置網(wǎng)織紅細胞檢測原理

網(wǎng)織紅細胞胞質(zhì)中尚殘留RNA，可與特殊染料結(jié)合，應(yīng)用流式細胞儀（FCM）測量時發(fā)出特定顏色熒光，進行RNA定量檢測網(wǎng)織紅二、血細胞分析儀的類型（一）半自動二分群血細胞分析儀（二）全自動三分群血細胞分析儀（三）全自動五分類血細胞分析儀（四）全自動五分類連接網(wǎng)織紅細胞分析儀（二）紅細胞體積分布寬度RDW概念

外周血紅細胞體積大小異質(zhì)性，用變異系數(shù)來表示（CV）參考值

11.6%～14.0%臨床意義：（1）缺鐵性貧血（IDA）早期診斷和療效觀察95%以上的IDA和RDW均異常（2）鑒別IDA和輕型β-地中海貧血均為小細胞低色素貧血，前者RDW增高；后者RDW基本正常。（3）MCV/RDW貧血分類法有助于貧血的形態(tài)學(xué)分類4）用于貧血病因?qū)W鑒別診斷：腎性貧血RDW正常；肝性貧血RDW增高根據(jù)MCV、RDW進行貧血形態(tài)學(xué)分類

（三）血小板參數(shù)

1.血小板平均體積（MPV）血液中血小板的平均體積，用飛升（fl）表示。參考值6.8～13.6fl臨床意義結(jié)合血小板數(shù)的變化。（1）MPV增大：①PLT破壞增多，骨髓代償生成增加時，使MPV增大。②作為骨髓造血功能恢復(fù)的較早指標，MPV常先于血小板升高。③其他（2）MPV減少：①骨髓造血功能損傷MPV隨PLT同時持續(xù)下降②嚴重感染伴有敗血癥等MPV減少。（四）血細胞體積直方圖的應(yīng)用正常情況下：紅細胞直方圖：呈正態(tài)分布血小板直方圖：呈非正態(tài)分布白細胞直方圖：根據(jù)細胞形態(tài)大小及儀器型號不同呈現(xiàn)不同的曲線，一般是2～3個峰態(tài)曲線五、血細胞分析儀質(zhì)量控制（一）分析前質(zhì)量控制1.操作技術(shù)人員要求2.儀器安裝條件溫度應(yīng)在15～25℃，相對濕度應(yīng)＜80%3.儀器的驗收4.儀器的校準變異應(yīng)＜3%，攜帶污染率＜2%，重復(fù)性＜3%，線性范圍較寬5.標本的采集和運送EDTA-K2抗凝血6h內(nèi)測定6.校準物和質(zhì)控物

（二）分析中質(zhì)量控制

1.每天開機時的檢查2.試劑3.標本要求4.嚴格執(zhí)行操作規(guī)程5.受檢者生理狀態(tài)對實驗結(jié)果的影響6.注意儀器的報警、提示7