作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/張偉彬/2014.03教學(xué)單元7

作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境教學(xué)單元子單元2

微生物生態(tài)子單元3

微生物在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用單元小結(jié)子單元1認(rèn)識(shí)農(nóng)業(yè)微生物實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)教學(xué)單元7

主要內(nèi)容技能訓(xùn)練7-2土壤微生物的分離和培養(yǎng)自然界中各個(gè)種類的微生物是混雜在一起存在的，人類要想研究利用微生物，必須先得到純種且數(shù)量巨大的某種微生物，這個(gè)過(guò)程稱作微生物的分離培養(yǎng)。被分離出的單種微生物稱作純培養(yǎng)物。通常情況下，純培養(yǎng)物可以被較好地研究利用和重復(fù)結(jié)果。因此，把需要的某種微生物從自然界中分離、培養(yǎng)是進(jìn)行微生物研究應(yīng)用的基礎(chǔ)。微生物分離過(guò)程中需要微生物接種，即將微生物培養(yǎng)物移植到新鮮培養(yǎng)基的過(guò)程。接種技術(shù)是微生物研究及應(yīng)用中最基本的技能。而無(wú)菌操作時(shí)微生物接種的關(guān)鍵技術(shù)。作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境技能實(shí)訓(xùn)2/土壤微生物的分離和培養(yǎng)技能訓(xùn)練7-2土壤微生物的分離和培養(yǎng)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境技能實(shí)訓(xùn)2/土壤微生物的分離和培養(yǎng)一、目的要求1、掌握幾種常用的微生物純種分離的操作技術(shù)。2、熟練掌握微生物無(wú)菌操作技術(shù)。二、基本原理

微生物純種分離技術(shù)要求在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下進(jìn)行，常用的微生物分離方法有平皿劃線法、傾注分離法、涂布分離法和稀釋分離法等。根據(jù)不同的材料采取不同的分離方法，再輔以合適的培養(yǎng)條件（營(yíng)養(yǎng)、PH、氧），或加入抑制劑，目的是要在培養(yǎng)基上能出現(xiàn)待分離的微生物的單菌落，淘汰掉不要的菌，必要時(shí)還要對(duì)單菌落進(jìn)一步純化培養(yǎng)。技能訓(xùn)練7-2土壤微生物的分離和培養(yǎng)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境技能實(shí)訓(xùn)2/土壤微生物的分離和培養(yǎng)三、器材：

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，高氏I號(hào)培養(yǎng)基，查氏培養(yǎng)基，9ml無(wú)菌水試管，90ml無(wú)菌水帶玻璃球三角燒瓶，1ml無(wú)菌吸管，斜面，平板，無(wú)菌涂棒，土樣。四、操作步驟

稀釋涂布平板法

1．倒平板牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，高氏I號(hào)培養(yǎng)基，查氏培養(yǎng)基冷卻至55-60℃時(shí)，混勻后倒平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒4皿，高氏I號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基各倒3皿。

技能訓(xùn)練7-2土壤微生物的分離和培養(yǎng)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境技能實(shí)訓(xùn)2/土壤微生物的分離和培養(yǎng)

四、操作步驟

2．制備土壤稀釋液：稱取土樣10克，放入90ml無(wú)菌水中，于三角瓶中震蕩20分鐘，取1ml懸液于9ml無(wú)菌水中，吹吸三次，使其充分混勻。再取1ml于下一9ml無(wú)菌水中，以此類推，制成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6制成不同稀釋度的土壤稀釋液。土壤中分離微生物的操作過(guò)程技能訓(xùn)練7-2土壤微生物的分離和培養(yǎng)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境技能實(shí)訓(xùn)2/土壤微生物的分離和培養(yǎng)

四、操作步驟土壤中分離微生物的操作過(guò)程技能訓(xùn)練7-2土壤微生物的分離和培養(yǎng)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境技能實(shí)訓(xùn)2/土壤微生物的分離和培養(yǎng)

四、操作步驟

3．涂布：將上述每種培養(yǎng)基平板底面標(biāo)記稀釋度，然后用無(wú)菌吸管從最后三種稀釋度，即10-4、10-5和10-6的試管中吸取0.1ml對(duì)號(hào)放入平板上，用玻棒涂布。4．培養(yǎng)：高氏I號(hào)和查氏倒置培養(yǎng)于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3-5d日，牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基在37℃倒置培養(yǎng)1-2日。5．挑菌落：將培養(yǎng)后長(zhǎng)出的單個(gè)菌落挑取接種到斜面上，37℃培養(yǎng)。待長(zhǎng)出菌苔后，檢查是否單純一致，若有雜菌要進(jìn)行再分離。技能訓(xùn)練7-2土壤微生物的分離和培養(yǎng)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境技能實(shí)訓(xùn)2/土壤微生物的分離和培養(yǎng)

四、操作步驟

平板劃線法：

1、倒平板，標(biāo)記培養(yǎng)基名稱，編號(hào)和實(shí)驗(yàn)日期。

2、劃線方法3、于恒溫箱倒置培養(yǎng)技能訓(xùn)練7-2土壤微生物的分離和培養(yǎng)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境技能實(shí)訓(xùn)2/土壤微生物的分離和培養(yǎng)

四、操作步驟

傾注平板法：

1、先加菌

2、倒平板時(shí)注意培養(yǎng)基溫度

3、混合均勻技能訓(xùn)練7-2土壤微生物的分離和培養(yǎng)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境技能實(shí)訓(xùn)2/土壤微生物的分離和培養(yǎng)

四、操作步驟

微生物培養(yǎng)技術(shù)：

1、斜面接種2、液體培養(yǎng)基接種3、穿刺接種4、將已接種的斜面、半固體和液體培養(yǎng)基放置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。5、將生長(zhǎng)好的菌種用牛皮紙包好，置4℃冰箱中保存。技能訓(xùn)練7-2土壤微生物的分離和培養(yǎng)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)作物生長(zhǎng)環(huán)境課程/作物生長(zhǎng)的微生物環(huán)境技能實(shí)訓(xùn)2/土壤微生物的分離和培養(yǎng)五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1．結(jié)果：檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否徹