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PCR培訓(xùn)班考試試題及答案選擇題正確答案(共20題,每題2分)1、PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件是正確答案(A)①目的基因②引物③四種脫氧核苷酸@DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖體①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、鎂離子在DNA或RNA體外擴(kuò)增反應(yīng)的濃度一般為正確答案(D)A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物對為正確答案(D)A、一對引物B、半對引物C、兩對引物D、多對引物4、PCR是在引物、模板和4種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng),其特異性決定因素為正確答案(B)A、模板B、引物C、dNTPD、鎂離子5、在PCR反應(yīng)中,下列哪項可以引起非靶序列的擴(kuò)增的擴(kuò)增正確答案(C)A、TaqDNA聚合酶加量過多B、引物加量過多C、A、B都可D、緩沖液中鎂離子含量過高PCR技術(shù)的發(fā)明人是正確答案(A)MullisB、史蒂文.沙夫C、蘭德爾.才木PCR產(chǎn)物短期存放可在正確答案(A)保存。A、4°CB、常溫C、-80°CD、高溫PCR產(chǎn)物長期儲存最好置于正確答案(D)。A、4CB、常溫C、16CD、-20CPCR的基本反應(yīng)過程包括正確答案(A)變性、退火、延伸B、變性、延伸C、變性、退火在實際工作中,基因擴(kuò)增實驗室污染類型包括正確答案(D)擴(kuò)增產(chǎn)物的污染B、天然基因組DNA的污染C、試劑污染和標(biāo)本間交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技術(shù)于哪一年發(fā)明正確答案(A)A、1983B、1971C、1987D、1993TaqDNA聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為正確答案(C)A、37°CB、50-55CC、70-75CD、80-85C以下哪種物質(zhì)在PCR反應(yīng)中不需要正確答案(D)TaqDNA聚合酶B、dNTPsC、鎂離子D、RNA酶PCR檢測中,經(jīng)過n個循環(huán)的擴(kuò)增,拷貝數(shù)將增加正確答案(C)nB、2nC、2nD、n2PCR基因擴(kuò)增儀最關(guān)鍵的部分是正確答案(A)溫度控制系統(tǒng)B、熒光檢測系統(tǒng)C、軟件系統(tǒng)D、熱蓋以下哪項不是臨床PCR實驗室設(shè)計的一般原則正確答案(A)各區(qū)合并B、注意風(fēng)向C、因地制宜D、方便工作PCR實驗室一般包括正確答案(D)試劑準(zhǔn)備區(qū)B、標(biāo)本制備區(qū)C、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)D、A、B、C都含PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來了便利,而且改進(jìn)了檢測細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測一個人是否感染了艾滋病病毒,你認(rèn)為可以用PCR擴(kuò)增血液中的正確答案(D)。白細(xì)胞DNAB、病毒蛋白質(zhì)C、血漿抗體D、病毒核酸如果反應(yīng)體系中加入模板DNA分子1個,則經(jīng)過30個循環(huán)后,DNA分子的數(shù)量將達(dá)到正確答案(D)個。A、1x30B、1x30x2C、1x302D、1x23。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析方法主要有正確答案(D)A、凝膠電泳分析法B、點(diǎn)雜交法C、熒光探針定量PCR法D、A、B、C都是二、判斷題正確答案(共20題,每題2分)1、PCR引物設(shè)計的目的是在擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率間間取得平衡。正確答案(J)2、在PCR反應(yīng)中,dATP在DNA擴(kuò)增中可以提供能量,同時作為DNA合成的原料。正確答案(/)3、DNA擴(kuò)增過程未加解旋酶,可以通過先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵,使模板DNA解旋。正確答案(J)4、PCR反應(yīng)中,復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成。正確答案(J)5、PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高。正確答案(J)6、PCR技術(shù)可用于基因診斷,判斷親緣關(guān)系等。正確答案(J)7、PCR技術(shù)需在體內(nèi)進(jìn)行。正確答案(x)8、PCR反應(yīng)體系中的緩沖液相當(dāng)于細(xì)胞中的體液。正確答案(J)9、核酸的復(fù)制是由5,>3,方向進(jìn)行的。正確答案(J)10、配對的堿基總是A與T和G與C。正確答案(J)11、HBsAg轉(zhuǎn)陰性后一段時間才出現(xiàn)可檢測的HBsAb,此段間隔期稱之為“窗期”。正確答案(J)12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團(tuán)Q基團(tuán)和報告基團(tuán)R基團(tuán)來標(biāo)記熒光定量PCR的探針。正確答案(J)13、PCR反應(yīng)體系中Mg2+的作用是促進(jìn)TaqDNA聚合酶活性。正確答案(J)14、若標(biāo)本中含有蛋白變性劑正確答案伽甲醛),PH、離子強(qiáng)度、Mg2+等有較大改變都會影響Taq酶活性。正確答案(J)每個子代DNA分子中均保留一條親代DNA鏈和一條新合成的DNA鏈,這種復(fù)制方式稱之為半保留復(fù)制。正確答案(J)發(fā)生溶血的標(biāo)本對PCR結(jié)果沒影響。正確答案(x)“平臺效應(yīng)”是描述PCR后期循環(huán)產(chǎn)物對數(shù)累積趨于飽和。正確答案(J)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)正確答案(reversetranscription-PCR,RT-PCR)就是在應(yīng)用PCR方法檢測RNA病毒時,以RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成cDNA鏈,然后以cDNA為模板進(jìn)行正常的PCR循環(huán)擴(kuò)增。正確答案(J)在定量PCR中,72C這一步對熒光探針的結(jié)合有影響,故去除,實際上55C仍可充分延伸,完成擴(kuò)增復(fù)制。正確答案(J)PCR可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測三大方面正確答案(J)簡答正確答案(共兩題,每題10分)PCR技術(shù)答:PCR技術(shù)是用一對寡聚核苷酸作為引物正確答案(要點(diǎn)1:2分),通過高溫變性、低溫退火、中溫延
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