培養(yǎng)基適用性檢查方法的驗證驗證目的：確認(rèn)所采用的方法適合于供試品的無菌檢查。即確認(rèn)供試品在該檢驗量、該檢驗條件下無抑菌活性或其抑菌活性已被充分消除到可以忽略不計，以保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠及檢驗方法的完整性。KHCa23ypw驗證時機(jī)[4SP|AFz建立藥品的無菌檢查法時D3jPp4h修訂檢驗方法時人丫B:+-S4供試品的組分或原檢驗條件發(fā)生改變可能影響檢驗結(jié)果時9C~R=l[3.驗證要求=l[3.驗證要求17|Yl驗證時，按“供試品的無菌檢查”的規(guī)定要求進(jìn)行操作試驗。agi;@PI對每一試驗菌應(yīng)逐一進(jìn)行驗證。*AkczYifAK硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基—金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌。V20@m@+OD改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基-白色念珠菌、黑曲霉。WuQ}/BQ*驗證試驗所用的菌株傳代次數(shù)不得超過5代，并采用適宜的菌種保藏技術(shù)，以保證試驗菌株的生物學(xué)特性。3#~20I/驗證試驗可在供試品的無菌檢查之前或與供試品的無菌檢查同時進(jìn)行。當(dāng)同時進(jìn)行時，若驗證試驗失敗，則供試品的無菌檢查結(jié)果是不成立的。+9bN7=4.驗證程序=y5Q|v;驗證準(zhǔn)備：準(zhǔn)備驗證所需的供試品、培養(yǎng)基、試藥試劑、儀器設(shè)備和菌種。';2/Gh*N培養(yǎng)基gj$/B-_E<硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基；改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基；營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；血瓊脂培養(yǎng)基1~H/4A}備注：1c1W_XW培養(yǎng)基應(yīng)注明來源；如采用市售干粉培養(yǎng)基，應(yīng)按說明配制。q4X"U!9配制后的培養(yǎng)基應(yīng)按照中國藥典附錄“無菌檢查法”中“培養(yǎng)基的適用性檢查”項下檢驗無菌性和靈敏度。 q;kb.]k儀器設(shè)備4pi_凈化工作臺U:Z'At9Z2_生物潔凈安全柜2Z:7y0+m集菌儀=HwMH0j生化培養(yǎng)箱W&-B51wA霉菌培養(yǎng)箱y_\-*高溫試驗箱_t0a'YT9y臺式滅菌器OPlk%5=8~醫(yī)藥品冷藏柜A[ Qj:“微波爐&:3T備注：以上儀器設(shè)備需要驗證的均應(yīng)已按要求驗證過。,hA2d9wV菌種g4ELl"金黃色葡萄球菌〔CMCC（B）26003〕_#_RJcud枯草芽孢桿菌〔CMCC（B）63501〕ozh:tA&白色念珠菌〔CMCC（F）98001〕 9,Tzd*黑曲霉〔CMCC（F）98003〕.Q[A/ci銅綠假單胞菌〔CMCC（B）10104〕＜p-Wz8,!生孢梭菌〔CMCC（B）64941〕?ABi-.17[供試液制備：按照中國藥典附錄“無菌檢查法”中“批出廠產(chǎn)品最少檢驗數(shù)量”一表確定取樣量。供試品的稀釋按品種項下的規(guī)定確定稀釋液（可根據(jù)供試品特性調(diào)整稀釋液用量），如品種項下無規(guī)定，則按中國藥典附錄“無菌檢查法”中“稀釋液、沖洗液及其制備方法”項下的規(guī)定確定稀釋液。[Hi（C菌液制備].I8@}=C按中國藥典附錄“無菌檢查法”中“靈敏度檢查”項下的菌液制備。UVudX:Gm備注：65=qRd.Da對于同一份培養(yǎng)物，采用相同的測定方法，不同的試驗人員的測定結(jié)果可能有很大的誤差。所以在操作過程中，應(yīng)特別注意能造成誤差的各個環(huán)節(jié)。 s|og'U當(dāng)采用固體培養(yǎng)基上的培養(yǎng)物制備菌懸液時，應(yīng)盡量使菌苔成單個菌體分散于稀釋液中。T"FTFuN~為保證每次菌數(shù)測定能在預(yù)計的范圍內(nèi)，在對菌液做10倍系列稀釋時，要求稀釋每個濃度的菌液均應(yīng)換滅菌吸管。DdO&mdlt液體培養(yǎng)物直接稀釋法較比濁法造成誤差小，基本保證每次菌數(shù)能控制在要求的范圍內(nèi)。na>3o)\最終制得的菌懸液應(yīng)為小于100CFU/ml。F'5"N?gN金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌采用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；生孢梭菌采用血瓊脂培養(yǎng)基；白色念珠菌、黑曲霉采用改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基。#[{"FLp驗證方法'V(p8-k將規(guī)定量的供試品按薄膜過濾法過濾，用定量的沖洗液沖洗，在最后一次的沖洗液中加入小于100CFU的試驗菌，過濾。c0ZHA&g取出濾膜接種至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基或改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基中，或?qū)⑴囵B(yǎng)基加至濾筒內(nèi)。:.[lrOX9sN另取一裝有同體積培養(yǎng)基的容器，加入等量試驗菌，作為對照。按規(guī)定溫度培養(yǎng)3~5天。3p/]9wc結(jié)果判斷?Ei5<T;如含供試品各容器中的試驗菌均生長良好，供試品可照此檢查法和檢查條件進(jìn)行